pmid: "33066137"
title: ""
authors: "Ahmad N, Teh BP, Halim SZ, Zolkifli NA, Ramli N, Muhammad H"
journal: "Nutrients"
pubdate: "2020 Oct 13"
doi: "10.3390/nu12103125"
source: "PMC Full Text"
Autores
Ahmad N, Teh BP, Halim SZ, Zolkifli NA, Ramli N, Muhammad H
Periodico
Nutrients (2020 Oct 13)
Conteudo
Café Infundido com Eurycoma longifolia — Um Estudo de Toxicidade Oral
O café infundido com o aditivo Eurycoma longifolia, também conhecida como Tongkat ali (TA), tornou-se amplamente disponível no mercado malaio. Avaliações de segurança para o consumo desses produtos foram solicitadas devido à adição do fitoterápico. Este estudo investiga os efeitos agudos, subagudos e crônicos de um café comercial com TA em ratos Sprague Dawley quando administrado em dose única, repetida e prolongada. As doses de 0,005, 0,05, 0,30 e 2 g/kg de peso corporal (PC) foram utilizadas no estudo agudo, e 0,14, 0,29 e 1 g/kg de PC foram utilizadas nos estudos de doses repetidas. Os parâmetros in vivo medidos foram consumo de ração e água, peso corporal e observações clínicas. O sangue foi coletado para análises hematológicas e de bioquímica clínica. Todos os animais foram submetidos a necropsias completas. Foram observadas alterações não relacionadas à toxicidade nos parâmetros de consumo de ração e água. O peso corporal apresentou incrementos normais e nenhum dos animais apresentou sinais clínicos de toxicidade. Os tecidos orgânicos avaliados microscopicamente não revelaram anormalidades. Houve diminuição significativa na contagem de plaquetas em todos os grupos de machos tratados no estudo crônico. Foi observada elevação significativa dos parâmetros do perfil renal em ambos os grupos de gênero que receberam 0,29 g/kg de PC, juntamente com elevação do perfil hepático e lipídico em alguns grupos de fêmeas do estudo crônico. Nenhuma relação dose-dependente foi aparente na faixa de dosagem testada, embora essas alterações possam sugerir uma indicação inicial de segurança para o café com TA. O estudo conclui que o nível de efeito adverso não observado (NOAEL) para este café comercial com TA foi de 1 g/kg de PC.
- Introdução
Eurycoma longifolia, também conhecida como Tongkat ali (TA), é uma planta nativa das florestas tropicais do Sudeste Asiático. Acredita-se que as raízes promovam o bem-estar, além de possuírem propriedades afrodisíacas, antimaláricas e outras propriedades terapêuticas, como anti-inflamatórias e anti-osteoporose. A TA tem recebido considerável atenção entre os consumidores malaios e é tradicionalmente processada como bebida, embora os fabricantes de café também a promovam como um aditivo saudável em bebidas de café. Informações de segurança, como o nível de efeito adverso não observado (NOAEL) para E. longifolia na forma de extrato aquoso, foram relatadas anteriormente como sendo superiores a 3 g/kg em camundongos e superiores a 1 g/kg e 5 g/kg em ratos em dois estudos separados, enquanto a forma em pó da raiz apresentou uma dose limite aguda superior a 6 g/kg. Embora esses estudos tenham relatado uma alta tolerância à dose mais alta utilizada, eles também relataram histologia hepática hidrópica indicando hepatotoxicidade e alterações hematológicas e bioquímicas clínicas menores, porém significativas. Além disso, as informações sobre o consumo prolongado do extrato de TA são limitadas e seu uso como aditivo fitoterápico em produtos alimentícios nunca foi avaliado, o que justifica investigações adicionais.
Em todo o mundo, a legislação referente a bebidas com aditivos fitoterápicos varia entre os países, enquanto atualmente na Malásia, os testes de segurança para produtos alimentícios dessa categoria não estão contemplados na Lei de Alimentos (1983), Ministério da Saúde da Malásia, e no Regulamento de Alimentos (1985), Ministério da Saúde da Malásia. Embora não haja relatos de problemas de saúde e a legislação vigente na Malásia não exija testes de segurança para o uso de extratos de E. longifolia em café, a Organização Mundial da Saúde (2004) recomenda que os ingredientes medicinais fitoterápicos em produtos sejam avaliados quanto à sua segurança. Além disso, a adição de ingredientes tradicionais com alegações terapêuticas tem obscurecido as definições entre as regulamentações de alimentos e medicamentos. Muitas vezes, não está claro quais padrões de teste são exigidos e quais conjuntos de regulamentações devem ser seguidos para os aditivos fitoterápicos em produtos alimentícios. Consequentemente, sem testes de segurança, a comercialização desse café fora da Malásia é restrita devido a rigorosas regulamentações de importação com diversos níveis de exigência de evidências.
Os testes de segurança agregam valor ao produto, elevam as informações de segurança do produto, melhoram a confiança do consumidor e podem prevenir incidentes potenciais, como a interação entre medicamentos farmacêuticos e produtos alimentícios incorporados com fitoterápicos, cuja ocorrência pode ter passado despercebida. O objetivo deste artigo é investigar a segurança de um café TA comercial, com referência às diretrizes de teste 420, 407 e 452 da Organização para a Cooperação e Desenvolvimento Econômico (OCDE). O café TA foi administrado a ratos Sprague Dawley em um estudo agudo de dose única por 14 dias e como dose diária repetida por 28 dias e 6 meses nos estudos de toxicidade subaguda e crônica, respectivamente.
- Materiais e Métodos
2.1. Preparação do Item de Teste e de Referência
O café comercial GTHerb Gold Coffee misturado com E. longifolia foi fornecido pela GTHerb Industries Sdn. Bhd. A análise do conteúdo foi realizada pela Als Technician and Technology Park Malaysia, Biotech Sdn. Bhd. (Kuala Lumpur, Malásia). O café TA (item de teste) apresentava-se fisicamente na forma de pó e de cor marrom-escura. Antes da preparação diária, o item de teste era mantido em temperaturas entre 25 e 28 °C. O item de teste preparado foi calculado com base no peso corporal individual do rato e de acordo com a dosagem necessária. Para ratos com peso inferior a 100 g, o item de teste foi dissolvido em 1 mL de água destilada quente, enquanto para ratos com peso igual ou superior a 200 g, foram utilizados 2 mL de água destilada quente. O item de referência (água destilada) foi administrado da mesma forma. A quantidade administrada do item de teste foi ajustada semanalmente para corresponder à variação semanal dos pesos corporais.
2.2. Cuidados e Manejo dos Animais Experimentais
Os três estudos de toxicidade oral utilizaram um total de 208 ratos Sprague Dawley adquiridos da BioLASCO Taiwan Co. Ltd. (Cidade de Taipei, Taiwan). Os ratos, doravante denominados sistema de teste (TS), chegaram com quatro semanas de idade e foram colocados em quarentena por duas semanas sob os cuidados do veterinário. Após a quarentena, os TS foram alojados individualmente em gaiolas ventiladas individuais (IVC) e aclimatados ao ambiente experimental por sete dias. A sala tinha um ciclo de 12 h de luz e escuro, com as luzes acesas das 7h às 19h; a temperatura foi mantida a 22 ± 3 °C e a umidade relativa a 57,5 ± 7,5%. As gaiolas e a maravalha foram trocadas a cada duas semanas. Ração (200 g) foi colocada em cada gaiola semanalmente e reabastecida se insuficiente. A quantidade de ração restante semanalmente foi medida e usada para calcular o consumo alimentar da semana. Água de osmose reversa foi fornecida ad libitum e a ingestão de água também foi medida de forma semelhante. Este estudo seguiu o Princípio e Guia para o Uso Ético de Animais de Laboratório elaborado pelo Ministério da Saúde da Malásia (2000). A aprovação do Comitê de Cuidado e Uso de Animais (ACUC) do Instituto de Pesquisa Médica da Malásia foi obtida; número ACUC/KKM/02(5/2008).
2.3. Estudo de Toxicidade Oral Aguda de Dose Única
A toxicidade oral aguda foi realizada seguindo a Diretriz OECD No. 420, onde o estudo de observação foi feito usando doses únicas de 0,005, 0,05, 0,30 e 2 g/kg PC do item de teste, administradas por via oral a TS fêmeas. Primeiro, um dos TS recebeu a dose mais baixa por via oral e foi observado quanto a sinais de toxicidade aguda 24 h após a administração. Como o primeiro TS não apresentou sinais de toxicidade, um segundo TS recebeu a segunda dose mais baixa (0,05 g/kg PC) e foi observado da mesma forma. Este procedimento foi repetido até que a dose mais alta (2 g/kg PC) fosse administrada. A dose mais alta não desencadeou efeitos agudos; portanto, 2 g/kg PC foi usada no estudo principal. Quatro novos TS receberam 2 g/kg PC do item de teste e foram monitorados por 14 dias. Os TS foram monitorados quanto a sinais de toxicidade aguda, incluindo morbidade e mortalidade, 0,5, 1, 2 e 4 h após o tratamento, e depois duas vezes ao dia até o dia 14. O PC, o consumo de ração e de água foram medidos semanalmente. Os TS foram sacrificados após o período de observação de 14 dias e as observações macroscópicas de todos os órgãos foram registradas.
2.4. Estudos de Toxicidade Oral Subaguda de 28 Dias e Crônica de 6 Meses
2.4.1. Delineamento Experimental Subagudo de 28 Dias
O estudo de toxicidade oral subaguda baseou-se na Diretriz nº 407 da OCDE, com modificações. TS machos e fêmeas foram divididos em quatro grupos de cinco TS, sendo que cada grupo recebeu doses de 0,14, 0,29 e 1 g/kg de peso corporal do item de teste, administradas por via oral em volumes de 2 mL. O grupo controle recebeu água destilada. Os TS foram observados duas vezes ao dia quanto a quaisquer sinais clínicos, morbidade e mortalidade. A dosagem individual dos TS foi corrigida semanalmente para corresponder ao peso corporal do TS. Foram realizadas observações clínicas detalhadas e medições da ingestão alimentar, enquanto a água foi fornecida ad libitum. Os TS foram anestesiados e amostras de sangue foram coletadas por punção cardíaca. As amostras de sangue foram enviadas para análise hematológica (2,5 mL) em tubos com EDTA. Em seguida, os TS foram sacrificados com uma superdose de éter dietílico e as necropsias foram realizadas. Na necropsia, foi conduzida a patologia macroscópica e os órgãos internos; pulmão, coração, fígado, rins, adrenais, ovários, testículos, baço, estômago e trato intestinal foram coletados. Todos os órgãos foram limpos do excesso de gordura e os pesos absolutos foram registrados imediatamente. Os órgãos foram então colocados em formalina a 10% para avaliações histopatológicas.
2.4.2. Delineamento Experimental Crônico de 6 Meses
O estudo de toxicidade oral crônica de 6 meses foi conduzido de acordo com a Diretriz nº 452 da OCDE, com modificações, utilizando 20 ratos por grupo por sexo nos mesmos grupos de dose (0,14 g/kg de peso corporal, 0,29 g/kg de peso corporal, 1 g/kg de peso corporal e Controle) do estudo subagudo. O item de teste (2 mL) foi administrado por via oral diariamente. Durante a fase in vivo, os TS foram observados diariamente quanto à mortalidade, morbidade e observações clínicas. A ingestão de alimento e água foi monitorada semanalmente, enquanto observações clínicas detalhadas pelo veterinário responsável foram realizadas mensalmente. Na necropsia, foi realizada observação macroscópica e o sangue foi coletado para análises hematológicas e de bioquímica clínica sérica. Os pesos absolutos dos órgãos internos foram registrados e, em seguida, tratados com formalina a 10% para investigação histopatológica. A lista de órgãos foi a mesma do estudo subagudo.
2.4.3. Análise Hematológica
O sangue foi analisado utilizando o Analisador Veterinário Medonic CA620 (Boule Diagnostics AB, Estocolmo, Suécia) para leucócitos (WBC), eritrócitos (RBC), hemoglobina (HGB), hematócrito (HCT), concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM) e plaquetas (PLT) no estudo subagudo. No estudo crônico, foram determinados os níveis de RBC, HGB, HCT e PLT.
2.4.4. Análise de Bioquímica Clínica
O soro no estudo crônico foi analisado utilizando o analisador bioquímico (Vitalab Selectra E-series, Vital Scientific N.V., Spankeren/Dieren, Países Baixos). Foram determinados: perfil de função hepática — proteína total, albumina, enzimas; fosfatase alcalina (ALP), alanina aminotransferase (ALT) e aspartato aminotransferase (AST), lactato desidrogenase (LDH), creatina quinase (CK); perfil renal — creatinina, ureia e ácido úrico; perfil lipídico — colesterol e triglicerídeos; e glicose e cálcio.
2.4.5. Peso Relativo dos Órgãos
O peso dos órgãos relativo a 100 g de PC dos TS foi calculado com base nos pesos corporais dos TS registrados antes da necropsia e seus pesos absolutos dos órgãos internos.
2.4.6. Exame Histopatológico
Todos os órgãos coletados (pulmão, coração, fígado, rins, adrenais, ovários, testículos, baço, estômago e trato intestinal) foram fixados em formalina a 10%, seccionados e corados com hematoxilina e eosina (H&E) antes da observação microscópica para quaisquer anormalidades patológicas.
2.5. Análise Estatística
Os dados de pesos corporais e de órgãos, consumo de ração e água, bem como os resultados de hematologia e bioquímica clínica, foram verificados quanto à normalidade por meio dos testes de Kolmogorov-Smirnov e Shapiro-Wilk. Os dados com distribuição normal foram analisados utilizando a análise de variância de uma via (ANOVA), enquanto nos casos de distribuição não normal, foi utilizado o teste de Kruskal-Wallis. Nos casos em que foram observadas diferenças estatisticamente significativas, testes post-hoc foram utilizados para elucidar as diferenças entre os grupos controle e tratados. Os dados de machos e fêmeas foram analisados separadamente. Quando houve alguma morte durante o período do estudo, os dados de peso corporal, ingestão de ração e ingestão de água foram incluídos até o último registro semanal e, em seguida, excluídos. Consequentemente, os dados de hematologia, bioquímica clínica e peso dos órgãos foram excluídos para os animais que morreram no grupo. O tamanho real da amostra está indicado nas figuras e tabelas de resultados. As análises estatísticas foram realizadas utilizando o software estatístico SPSS 18.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, EUA) e o software GraphPad Prism 7.0 (GraphPad Software, La Jolla, CA, EUA). Diferenças estatisticamente significativas foram consideradas quando p < 0,05.
3. Resultados
3.1. Estudo de Toxicidade Oral Aguda de Dose Única
Nenhuma mortalidade foi registrada durante o período de observação de 14 dias e os TS não apresentaram sinais de toxicidade. Nenhum achado relevante foi detectado nos parâmetros de peso corporal e ingestão de ração dos TS (Tabela A1). O exame interno e externo dos TS e dos órgãos não revelou anormalidades. Concluiu-se que o item de teste não exerceu toxicidade aguda nos TS.
3.2. Estudos de Toxicidade Oral Subaguda de 28 Dias e Crônica de 6 Meses
3.2.1. Sinais Clínicos e Mortalidade
Os TS não apresentaram mortalidade ou sinais clínicos relacionados à toxicologia devido ao consumo do item de teste em nenhum dos estudos. No entanto, no estudo subagudo, uma fêmea TS do grupo de dosagem média morreu no dia 18 devido a um acidente de gavagem. Enquanto no estudo crônico, cinco fêmeas que receberam 0 g/kg de PC (dia 56), 0,14 g/kg de PC (dia 121), 0,29 g/kg de PC (dois TS; dia 44 e dia 126) e 1 g/kg de PC (dia 158) e 2 machos que receberam 0 g/kg de PC (dia 158) e 1 g/kg de PC (dia 76) morreram também devido a acidentes de gavagem. A autópsia não revelou alterações relacionadas ao tratamento nos TS mortos.
3.2.2. Pesos Corporais, Ingestão de Ração e Água
O estudo subagudo mostrou que os pesos corporais médios de machos e fêmeas não apresentaram diferença significativa entre o grupo controle e os grupos tratados. O peso corporal médio semanal também aumentou gradualmente ao longo do período de administração (Figura 1a,b). O consumo alimentar (Tabela A2) foi considerado normal para TS em crescimento e não foi evidente aumento ou diminuição significativa.
No estudo crônico de 6 meses, ratas que receberam a dosagem de 1 g/kg de peso corporal do item de teste tiveram um aumento significativo (p < 0,05) no peso corporal a cada semana (Figura 1a,b). No entanto, não houve diferença significativa no ganho percentual de peso corporal ao longo do estudo em TS que receberam 1 g/kg de peso corporal em comparação com o grupo controle em ambos os sexos (Figura 1c). No geral, foram observadas tendências de aumento no peso corporal semanalmente. Em relação ao consumo alimentar (Figura 2a) em machos, foi observado um aumento significativo nas semanas 15, 21 e 22 no grupo de dosagem de 0,29 g/kg de peso corporal quando comparado ao grupo controle. Um aumento significativo na ingestão alimentar foi observado em fêmeas (Figura 2b) que receberam a dosagem de 1 g/kg de peso corporal nas semanas 11 e 15 em comparação com o grupo controle. Na semana 17, foi registrado um aumento significativo na ingestão alimentar em todos os grupos tratados. As fêmeas TS que receberam 1 g/kg de peso corporal apresentaram uma diminuição significativa no consumo alimentar na semana 3.
A tendência de consumo de água (Figura 2c) em machos TS mostrou que os TS que receberam 1 g/kg de peso corporal consumiram menos água nas semanas 7, 8, 12 e 13, enquanto aqueles que receberam 0,29 g/kg de peso corporal apresentaram diminuição apenas na semana 8. As fêmeas TS que receberam altas doses do item de teste (dosagem de 1 g/kg de peso corporal) tiveram um aumento significativo na ingestão de água nas semanas 1, 8–10 e 18 (Figura 2d). Um aumento significativo na ingestão de água das ratas que receberam dosagens baixa e média do item de teste ocorreu na semana 8 e na semana 22, respectivamente.
3.2.3. Análise Hematológica
Não foram detectados níveis anormais na análise hematológica das amostras de sangue do estudo subagudo (Tabela 1). Após a exposição prolongada de 6 meses, o perfil hematológico (Tabela 2) mostrou uma diminuição na contagem de plaquetas (PLT) em todos os grupos de dosagem de machos tratados, enquanto os outros parâmetros não apresentaram diferença significativa. As fêmeas que receberam 1 g/kg apresentaram um aumento significativo nos níveis de HGB quando comparadas ao grupo controle.
3.2.4. Análise Bioquímica Clínica
Os parâmetros hepáticos e enzimáticos mostraram níveis reduzidos de albumina, fosfatase alcalina (FA), alanina aminotransferase (ALT) e triglicerídeos em machos que receberam 0,14 g/kg de PC (Tabela 3). Foram observados níveis significativamente elevados de proteína total, creatinina e ureia em machos que receberam 0,29 g/kg de PC. Houve também um aumento significativo no nível de creatina quinase em machos que receberam a dose de 1,0 g/kg de PC. Nos grupos experimentais de fêmeas, foram observados níveis elevados de albumina, ALT, aspartato aminotransferase (AST), creatinina, ureia, colesterol e cálcio no grupo de 0,29 g/kg de PC. O grupo de 1 g/kg de PC apresentou aumento significativo nos níveis de lactato desidrogenase (LDH), colesterol e cálcio, enquanto houve diminuição significativa no nível de triglicerídeos.
3.2.5. Pesos dos Órgãos
No estudo subagudo, não houve diferença significativa nos pesos relativos dos órgãos (PRO) de nenhum órgão em machos. Alguns PRO em fêmeas foram significativamente reduzidos, incluindo os estômagos no grupo de 0,14 g/kg de PC e os baços nos grupos de 0,14 e 0,29 g/kg de PC (Tabela 4). No estudo crônico de 6 meses, não foram observadas diferenças significativas nos PRO em nenhum dos órgãos coletados para todos os grupos testados (Tabela 5).
3.2.6. Exame de Necropsia Macroscópica e Histopatologia
Nenhuma anormalidade foi detectada visualmente quando o exame patológico macroscópico foi realizado post mortem. A histopatologia microscópica não revelou anormalidades.
4. Discussão
Bebidas com infusão de ervas foram introduzidas no mercado onde inúmeras outras bebidas são comercializadas. Com a vantagem adicional de incorporar misturas de ervas, os aditivos herbais em bebidas ganharam popularidade e são amplamente consumidos na Malásia. Um modelo com ratos foi utilizado para investigar o consumo agudo e repetido prolongado desse produto, a fim de estabelecer seu perfil de segurança e inferir seus efeitos na dose de exposição esperada em humanos.
O item de teste não exerceu toxicidade aguda e nenhuma mortalidade foi observada em nenhuma das doses testadas. Tanto nos estudos subagudo quanto crônico, não houve sinais clínicos significativos de toxicidade, as alterações no peso corporal foram normais e as investigações macroscópicas e histopatológicas não revelaram nenhum efeito tóxico significativo. Houve um total de sete mortes incidentais nos estudos de doses repetidas devido a erro técnico do pessoal. O erro na gavagem pode ter levado a refluxo assistido por gavagem no TS, causando essas mortes. Relatamos os seguintes achados: flutuações nas medições de consumo de comida e água, os pesos relativos dos órgãos (PRO) em dois órgãos no estudo subagudo e alterações plaquetárias observadas no estudo crônico, com algumas modificações nos parâmetros bioquímicos clínicos.
A redução estatisticamente significativa no consumo de alimento, que ocorreu apenas no grupo feminino de dose alta na semana 3 do estudo crônico, e o aumento da ingestão de água em alguns grupos femininos tratados podem indicar alterações fisiológicas naturais. Foi relatado que as fêmeas TS consomem menos alimento e tornam-se ativas durante o ciclo estral, o que pode gerar respostas manifestadas na quantidade de alimento e água consumidos, conforme observado neste estudo. Por outro lado, os machos nos estudos crônicos consumiram significativamente menos água, sendo que o próprio consumo de café pode ter levado os TS a beber menos água. Apesar da flutuação na ingestão de alimento e água, as medições de peso corporal apresentaram tendências de aumento, indicando desenvolvimento normal dos TS. Tendências semelhantes de peso corporal também foram relatadas por outros autores. Portanto, conclui-se que as flutuações observadas na ingestão de alimento e água não causaram quaisquer efeitos relacionados ao tratamento nos TS.
No grupo feminino subagudo, houve redução no peso relativo do órgão (ROW) do estômago (grupo de 0,14 g/kg de peso corporal) e do baço nos grupos de dosagem de 0,14 e 0,29 g/kg de peso corporal. Não houve uma clara relação dose-resposta na redução do ROW, uma vez que o grupo de dose mais alta não produziu alterações. O exame microscópico adicional desses dois órgãos não mostrou qualquer correlação com a diminuição do tamanho. Como as alterações foram observadas apenas no grupo feminino subagudo e a exposição prolongada de seis meses não revelou efeito em nenhum dos órgãos inspecionados em ambos os sexos, essas duas observações não são consideradas relacionadas ao tratamento.
Não foram observadas diferenças significativas no perfil hematológico do estudo de 28 dias dos grupos tratados em comparação com o grupo controle. Os achados dos parâmetros hematológicos para os estudos subagudo e crônico foram semelhantes aos dados de controle publicados, exceto para as contagens de leucócitos (WBC), hemoglobina (HGB), CHCM (MCHC) e plaquetas (PLT), onde foram encontradas pequenas diferenças entre os dois intervalos de referência. Após exposição prolongada ao item de teste durante uma parte substancial da vida dos TS, algumas alterações nas investigações sanguíneas foram observadas, nas quais o número de plaquetas dos machos de todos os grupos tratados diminuiu significativamente. Uma queda na leitura de plaquetas pode ser motivo de preocupação, pois elas estão envolvidas principalmente na coagulação sanguínea e hemostasia. O café por si só demonstrou reduzir a ativação plaquetária, resultando em menor agregação plaquetária, embora a formação de agregados plaquetários não tenha sido avaliada no presente estudo. Os níveis reduzidos de plaquetas registrados foram inferiores aos níveis médios de plaquetas em machos quando comparados ao intervalo de referência de He et al. (2017), mas foram comparáveis aos valores de referência de Delwatta et al. (2018). No entanto, a diminuição não foi dependente da dose, uma vez que a dose mais alta não reduziu ainda mais a leitura de plaquetas em comparação com a dose mais baixa.
Os níveis de creatinina, ureia, colesterol, triglicerídeos e glicose foram semelhantes aos dados de controle publicados. Observou-se que houve grandes diferenças na faixa de dados de controle publicados. Portanto, os dados do grupo controle deste estudo foram utilizados para todas as análises estatísticas, uma vez que os animais do grupo controle foram submetidos ao mesmo ambiente que os grupos tratados. A elevação do perfil renal (creatinina e ureia), proteína total e creatina quinase nos grupos tratados de machos (doses de 0,29 e 1 g/kg de peso corporal) e a elevação dos perfis hepático, renal e lipídico nos grupos tratados de fêmeas (doses de 0,29 e 1 g/kg de peso corporal) podem indicar uma resposta inicial dos animais ao item de teste. Um estudo recente de Riza & Andina Putri et al. (2019) também encontrou aumento nos níveis de creatinina em ratos que receberam café. No entanto, em nosso estudo atual, não foram observadas correlações adicionais na histopatologia hepática ou renal. Nenhuma conclusão dose-dependente pode ser tirada das alterações observadas no grupo de 0,29 g/kg de peso corporal, uma vez que a dose mais alta não exacerbou os parâmetros medidos. Ao contrário, o consumo de café tem sido relatado como redutor de enzimas hepáticas associadas a danos no fígado e demonstrou efeitos protetores atribuídos ao seu conteúdo de polifenóis. Houve reduções significativas favoráveis nas enzimas hepáticas (FAL e ALT) e no indicador do perfil lipídico (triglicerídeos) no grupo de machos de dose baixa, mas nenhuma tendência foi evidente nos grupos de doses mais altas, exceto no nível de triglicerídeos das fêmeas quando receberam a dose alta.
As interações entre os diferentes componentes presentes tanto no café quanto no TA e, adicionalmente, com os alimentos podem ter exercido seus efeitos sobre os parâmetros medidos neste estudo. Tanto o café quanto o TA são compostos por vários fitoquímicos, como cafeína e polifenóis, encontrados no café, e euricomanona, um composto majoritário encontrado no TA. A cafeína tem sido bem estudada e é relatada como tendo uma dose de alta tolerância de 400 mg/dia em humanos. Embora a euricomanona tenha sido relatada como tendo baixa biodisponibilidade em ratos, seu comportamento farmacocinético pode ser modificado quando incorporada ao café. Um estudo recente relatou o potencial do café de alterar o perfil farmacocinético do medicamento paracetamol quando consumidos juntos. Devido a essa natureza multicomponente e às interações, a avaliação da segurança de produtos alimentícios incorporados com ervas é crucial.
Neste estudo, a toxicidade foi avaliada em um modelo de roedor mamífero, enquanto as submissões regulatórias podem exigir que os testes de segurança sejam conduzidos em mais de uma espécie, tipicamente em ratos, camundongos ou coelhos e em cães para comparar o efeito e a taxa de gravidade da toxicidade. Apesar dessa limitação, o estudo foi conduzido por três durações diferentes que cobrem a resposta aguda ao produto administrado, bem como a exposição repetida. Os estudos cobriram uma duração substancial da vida dos roedores. Portanto, as conclusões tiradas deste estudo são exaustivas.
Considerando um consumo médio de 2 xícaras (2,5 g do item de teste por xícara) por pessoa por dia, um adulto médio (70 kg de peso corporal) ingere, em média, 0,07 g/kg de peso corporal do item de teste diariamente. A dose equivalente humana (DEH) calculada para 1 g/kg de peso corporal em ratos é de 0,16 g/kg de peso corporal em humanos. Como a DEH calculada é o dobro da dosagem média diária de consumo prevista, o presente estudo sugere que a dose mais alta testada no estudo de toxicidade prolongada (1 g/kg de peso corporal por dia) do café infundido com E. longifolia pode ser bem tolerada para consumo humano.
- Conclusões
Em conclusão, a administração da dose única mais alta de café TA (2 g/kg de peso corporal) não demonstrou toxicidade oral aguda em ratos Sprague Dawley no presente estudo. O estudo de toxicidade subaguda de 28 dias não relatou alterações tóxicas em nenhum dos parâmetros observados. Não foram atribuídas alterações dependentes da dose nem morfológicas ao consumo de café TA no estudo de toxicidade crônica de 6 meses, e o consumo de café TA na dose de 1 g/kg/dia em ratos machos e fêmeas foi identificado como o nível sem efeito adverso observado (NOAEL).
Contribuições dos Autores
Conceitualização, N.A., B.P.T. e H.M.; Metodologia, S.Z.H., N.A.Z. e N.R.; Software, N.A., S.Z.H. e N.R.; Validação, N.A., B.P.T. e S.Z.H.; Análise Formal, N.A., B.P.T. e S.Z.H.; Investigação, S.Z.H., N.A.Z. e N.R.; Recursos, N.A. e H.M.; Curadoria de Dados, N.A. e S.Z.H.; Redação—Preparação do Rascunho Original, N.A. e B.P.T.; Redação—Revisão e Edição, N.A., B.P.T. e H.M.; Visualização, N.A., B.P.T. e H.M.; Supervisão, H.M.; Administração do Projeto, N.A. e H.M.; Aquisição de Financiamento, N.A. e H.M. Todos os autores leram e concordaram com a versão publicada do manuscrito.
Financiamento
Esta pesquisa foi financiada pelo Ministério da Agricultura da Malásia, por meio da bolsa ScienceFund (05-03-20-SF1001), e pelo Ministério da Saúde da Malásia.
Conflitos de Interesse
Os autores declaram não haver conflito de interesses.
Apêndice A
Resumo dos achados do estudo agudo de 14 dias.
| Sistema de Teste | Dosagem (g/kg PC) | Mortalidade | Sinais Clínicos de Toxicidade | Peso Corporal (g) | Ganho de Peso Corporal (%) | Consumo Alimentar (g) | Achados Macroscópicos de Patologia de Órgãos |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Inicial | Semana 1 | Semana 2 | Semana 1 | Semana 2 | |||
| 1 | 0,005 | 0/1 | NAD | 219,87 | 234,52 | 246,07 | 10,60 |
| 2 | 0,050 | 0/1 | NAD | 216,90 | 254,89 | 292,81 | 25,90 |
| 3 | 0,300 | 0/1 | NAD | 216,94 | 246,34 | 278,95 | 22,20 |
| 4 | 2,000 | 0/1 | NAD | 234,14 | 260,60 | 274,50 | 14,70 |
| 5 | 2,000 | 0/1 | NAD | 243,15 | 275,31 | 291,17 | 16,50 |
| 6 | 2,000 | 0/1 | NAD | 202,05 | 219,19 | 222,79 | 9,31 |
| 7 | 2,000 | 0/1 | NAD | 211,36 | 244,51 | 250,01 | 15,50 |
| 8 | 2,000 | 0/1 | NAD | 218,59 | 268,09 | 253,17 | 13,70 |
| 221,90 ± 16,71 | 253,50 ± 22,34 | 258,30 ± 25,98 | 13,92 ± 2,78 | 114,10 ± 15,92 | |||
| Os valores de peso corporal, consumo alimentar e porcentagem de ganho de peso corporal são expressos como média ± DP de 5 sistemas de teste que receberam a dose de 2 g/kg no estudo agudo. Nenhuma comparação estatística foi realizada, pois o método utilizado foi o procedimento de dose fixa com ênfase na resposta clínica aguda e não foi observada morte aguda. PC = peso corporal, NAD = nenhuma anormalidade detectada. |
Consumo alimentar dos sistemas de teste machos e fêmeas no estudo subagudo de 28 dias.
Consumo Alimentar Semanal Dose Machos (g/kg PC) Dose Fêmeas (g/kg PC) 0(n = 5) 0,14(n = 5) 0,29(n = 5) 1,00(n = 5) 0(n = 5) 0,14(n = 5) 0,29(n = 4) 1,00(n = 5) Semana 1 117,00 ± 11,51 123,00 ± 17,89 109,00 ± 12,94 117,00 ± 16,43 85,00 ± 7,91 91,00 ± 15,17 108,00 ± 28,64 84,00 ± 11,94 Semana 2 134,00 ± 17,10 116,40 ± 14,74 130,00 ± 9,35 135,00 ± 12,75 91,00 ± 6,52 99,00 ± 8,94 109,00 ± 38,63 81,00 ± 14,32 Semana 3 160,00 ± 20,92 160,00 ± 12,75 145,00 ± 14,14 157,00 ± 17,18 98,00 ± 13,51 116,00 ± 39,91 111,25 ± 49,56 108,00 ± 33,28 Semana 4 173,00 ± 8,37 136,00 ± 30,50 148,00 ± 22,80 162,00 ± 13,04 128,00 ± 21,68 166,00 ± 28,81 147,50 ± 22,17 126,00 ± 27,02
Valores expressos como média ± DP (n = 5 para todos os grupos, exceto n = 4 para o grupo fêmea 0,29 g/kg PC). PC = peso corporal. Não foram encontradas alterações significativas (p > 0,05).
Referências
Revisão sobre uma medicina herbal tradicional, Eurycoma longifolia Jack (Tongkat Ali): Seus usos tradicionais, química, farmacologia baseada em evidências e toxicologia
Eficácia do Tongkat Ali (Eurycoma longifolia) na melhora da função erétil: Revisão sistemática e meta-análise de ensaios clínicos randomizados
Tongkat Ali como um potencial suplemento herbal para idosos fisicamente ativos de ambos os sexos — Um estudo piloto
Efeitos in vivo do extrato de Eurycoma longifolia Jack (Tongkat Ali) sobre as funções reprodutivas em ratos
Efeitos combinados de Eurycoma longifolia e testosterona na osteoporose por deficiência androgênica em um modelo de rato macho
Eurycoma longifolia regula positivamente a expressão do gene da osteoprotegerina em modelo de rato com osteoporose por deficiência androgênica
Efeitos físico-químicos dos principais quassinoides em um extrato padronizado de Eurycoma longifolia (Fr 2) sobre a biodisponibilidade e propriedades farmacocinéticas, e suas implicações para a atividade antimalárica oral
Efeito do extrato de Eurycoma longifolia sobre o nível de glutationa em eritrócitos infectados por Plasmodium falciparum in vitro
Atividade toxicológica e antimalárica de extratos de Eurycoma longifolia Jack em camundongos
Toxicidade aguda, subaguda e subcrônica de 90 dias do extrato aquoso de Eurycoma longifolia (Physta) em ratos Wistar
Estudos de toxicidade aguda e subaguda de Eurycoma longifolia em ratos machos
Avaliação da toxicidade subcrônica aguda de 13 semanas e genotoxicidade da raiz em pó de Tongkat Ali (Eurycoma longifolia jack)
Perspectivas internacionais sobre a comprovação da eficácia de suplementos dietéticos à base de plantas e medicamentos fitoterápicos por meio de evidências de uso tradicional
Precisamos de suplementos alimentares à base de plantas? Uma análise crítica da qualidade, segurança, eficácia e necessidade de um novo marco regulatório
Alimentos ou medicamentos? Percepção dos consumidores sobre produtos limítrofes relacionados à saúde
Interações adversas entre alimentos e medicamentos
Regulamentação europeia de medicamentos fitoterápicos na área de fronteira com o setor de alimentos
Avaliação de medicamentos fitoterápicos: Desafios e oportunidades para ampliar a base de conhecimento para a avaliação de segurança
Refluxo relacionado à gavagem em ratos: Identificação, patogênese e implicações toxicológicas
Comer
Beber
O efeito do café coado e solúvel na reprodução e teratogênese em ratos
Banco de dados de referência de parâmetros hematológicos para ratos em crescimento e envelhecimento
Intervalos de referência específicos por sexo de analitos hematológicos e bioquímicos em ratos Sprague-Dawley usando o método de percentil de classificação não paramétrico
Valores de referência para ratos Sprague-Dawley jovens normais: Ganho de peso, hematologia e química clínica
Dados históricos de química clínica e hematologia em ratos Sprague-Dawley controle de estudos de toxicidade pré-clínica
Características das plaquetas de ratos e contribuições relativas das plaquetas e da coagulação sanguínea para a hemostasia
Efeitos do café, bebidas energéticas e seus componentes na hemostasia: Os mecanismos hipotéticos de sua ação
Valores de referência para parâmetros hematológicos, bioquímicos e fisiológicos selecionados de ratos Sprague-Dawley no biotério da Faculdade de Medicina da Universidade de Colombo, Sri Lanka
O efeito comparativo de bebidas energéticas e café no nível de creatinina em ratos
Efeito modulador in vivo do café (Coffea canephora var. Robusta) nos níveis de expressão do microRNA-124-3p murino associado às defesas antioxidantes
Efeitos do café na saúde: Mecanismo desvendado?
Uma revisão sistemática e meta-análise dose-resposta da dose de café e doença hepática gordurosa não alcoólica
Investigação do efeito do café no peso corporal, glicose sérica, ácido úrico e perfil lipídico em ratos Wistar albinos machos alimentados com dieta rica em frutose
Administração subcrônica de café coado no comportamento e cognição de ratos e modelo de estresse oxidativo da doença de Alzheimer
Análise da potencial carcinogenicidade do café e seus compostos relacionados em um bioensaio hepático de médio prazo em ratos
A ingestão crônica voluntária de cafeína em ratos Wistar machos revela diferenças individuais no comportamento semelhante à dependência
Revisão sistemática dos potenciais efeitos adversos do consumo de cafeína em adultos saudáveis, gestantes, adolescentes e crianças
A dose letal aguda 50 (DL50) da cafeína em ratos albinos
Biodisponibilidade da euricomanona em sua forma pura e em um extrato aquoso padronizado de Eurycoma longifolia
Estudos de biodisponibilidade e farmacocinética da euricomanona de Eurycoma longifolia
O café modifica a farmacocinética do paracetamol
Capítulo 13 — Métodos de testes toxicológicos
Parâmetros in vivo monitorados nos sistemas-teste machos e fêmeas: (a) Peso corporal (PC) médio dos sistemas-teste machos no estudo de toxicidade subaguda de 28 dias (linha vermelha) e no estudo de toxicidade crônica de 6 meses (linha azul pontilhada). (b) Peso corporal médio dos sistemas-teste fêmeas no estudo de toxicidade subaguda de 28 dias (linha vermelha) e no estudo de toxicidade crônica de 6 meses (linha azul pontilhada). (c) Nenhuma diferença no ganho de peso corporal (PC) nos sistemas-teste machos e fêmeas do estudo de toxicidade crônica de 6 meses. (Grupo 0,29 g/kg PC fêmea (S): n = 5, semana 1–2; n = 4, semana 3–4. Grupo 0 g/kg PC macho (C): n = 20, semana 1–22; n = 19, semana 23–24. Grupo 1 g/kg PC macho (C): n = 20, semana 1–11; n = 19, semana 12–24. Grupo 0 g/kg PC fêmea (C): n = 20, semana 1–8; n = 19, semana 9–24. Grupo 0,14 g/kg PC fêmea (C): n = 20, semana 1–17; n = 19, semana 18–24. Grupo 0,29 g/kg PC fêmea (C): n = 20, semana 1–6; n = 19, semana 7–18; n = 18, semana 19–24. Grupo 1 g/kg PC fêmea (C): n = 20, semana 1–22; n = 19, semana 23–24). S = subagudo, C = crônico.
Parâmetros in vivo monitorados nos sistemas-teste machos e fêmeas: (a) Consumo alimentar médio dos sistemas-teste machos no estudo de toxicidade crônica de 6 meses. (b) Consumo alimentar médio dos sistemas-teste fêmeas no estudo de toxicidade crônica de 6 meses. (c) Ingestão hídrica média dos sistemas-teste machos no estudo de toxicidade crônica de 6 meses. (d) Ingestão hídrica média dos sistemas-teste fêmeas no estudo de toxicidade crônica de 6 meses. Cada gráfico é expresso como média ± DP (Grupo 0 g/kg PC macho: n = 20, semana 1–22; n = 19, semana 23–24. Grupo 1 g/kg PC macho: n = 20, semana 1–11; n = 19, semana 12–24. Grupo 0 g/kg PC fêmea: n = 20, semana 1–8; n = 19, semana 9–24. Grupo 0,14 g/kg PC fêmea: n = 20, semana 1–17; n = 19, semana 18–24. Grupo 0,29 g/kg PC fêmea: n = 20, semana 1–6; n = 19, semana 7–18; n = 18, semana 19–24. Grupo 1 g/kg PC fêmea: n = 20, semana 1–22; n = 19, semana 23–24).
Valores hematológicos dos sistemas-teste machos e fêmeas no estudo subagudo de 28 dias.
Sexo Dosagem(g/kg PC) WBC(10³/µL) RBC(10⁶/µL) HGB(g/dL) HCT(%) MCHC(g/dL) PLT(10⁵/µL)
Macho 0,00 5,18 ± 2,01 8,05 ± 0,48 16,40 ± 0,82 49,10 ± 2,53 33,40 ± 0,39 11,17 ± 1,97
0,14 4,06 ± 2,52 8,44 ± 0,31 16,70 ± 0,74 50,74 ± 2,40 32,92 ± 0,40 10,64 ± 0,90
0,29 5,40 ± 1,66 8,09 ± 0,55 16,34 ± 0,84 48,62 ± 2,92 33,64 ± 0,53 11,77 ± 1,57
1,00 4,22 ± 1,43 8,03 ± 0,63 16,36 ± 0,82 48,22 ± 2,91 33,94 ± 0,48 11,48 ± 1,04
Fêmea 0,00 6,52 ± 3,29 6,92 ± 0,19 14,42 ± 0,54 40,46 ± 1,42 35,64 ± 0,46 10,82 ± 0,91
0,14 4,66 ± 2,84 6,63 ± 0,79 13,50 ± 1,90 38,56 ± 5,04 34,98 ± 0,87 10,21 ± 3,30
0,29 5,30 ± 1,48 6,76 ± 0,36 14,13 ± 0,34 39,38 ± 1,79 35,90 ± 1,23 9,16 ± 4,68
1,00 3,00 ± 1,78 6,88 ± 0,57 14,34 ± 0,72 40,38 ± 2,17 35,50 ± 0,32 12,51 ± 1,44
Valores expressos como média ± DP (n = 5 para todos os grupos, exceto n = 4 para o grupo 0,29 g/kg PC fêmea). Não foram encontradas alterações significativas (p > 0,05). Peso corporal, PC; leucócitos, WBC; eritrócitos, RBC; hemoglobina, HGB; hematócrito, HCT; concentração de hemoglobina corpuscular média, MCHC; plaquetas, PLT.
Valores hematológicos dos sistemas de teste machos e fêmeas no estudo crônico de 6 meses.
| Sexo | Dosagem (g/kg PC) | Hemácias (10^6/µL) | Hemoglobina (g/dL) | Hematócrito (%) | Plaquetas (10^5/µL) |
|---|---|---|---|---|---|
| Macho | 0,00 (n = 19) | 8,41 ± 0,57 | 72,99 ± 3,76 | 44,92 ± 2,96 | 6,87 ± 1,42 |
| 0,14 (n = 20) | 8,03 ± 0,92 | 71,99 ± 8,0 | 43,39 ± 5,27 | 5,51 ± 1,12 * | |
| 0,29 (n = 20) | 8,10 ± 0,39 | 73,25 ± 3,03 | 44,78 ± 2,07 | 5,57 ± 0,95 * | |
| 1,00 (n = 19) | 8,06 ± 0,52 | 72,99 ± 3,49 | 44,66 ± 3,26 | 5,35 ± 0,74 * | |
| Fêmea | 0,00 (n = 19) | 7,11 ± 0,77 | 65,02 ± 6,58 | 39,38 ± 4,25 | 7,81 ± 1,39 |
| 0,14 (n = 19) | 6,92 ± 1,43 | 63,49 ± 14,44 | 37,81 ± 7,81 | 8,70 ± 2,44 | |
| 0,29 (n = 18) | 7,21 ± 0,35 | 66,68 ± 2,45 | 39,76 ± 1,65 | 7,88 ± 1,06 | |
| 1,00 (n = 19) | 7,67 ± 0,61 | 71,41 ± 5,46* | 42,79 ± 4,06 | 7,38 ± 0,93 |
Valores expressos como média ± DP. PC = peso corporal. * Significativamente diferente do grupo controle com p < 0,05.
Valores de bioquímica clínica dos sistemas de teste machos e fêmeas no estudo crônico de 6 meses.
| Parâmetros | Dosagem Macho (g/kg PC) | Dosagem Fêmea (g/kg PC) | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 0 (n = 19) | 0,14 (n = 20) | 0,29 (n = 20) | 1,00 (n = 19) | 0 (n = 19) | 0,14 (n = 19) | 0,29 (n = 18) | 1,00 (n = 19) | |
| ------------ | ------------ | --------------- | --------------- | --------------- | ------------ | --------------- | --------------- | --------------- |
| Perfil de Função Hepática | ||||||||
| Proteína total (g/L) | 49,66 ± 12,42 | 43,80 ± 17,07 | 60,49 ± 10,67 * | 56,97 ± 7,49 | 63,42 ± 16,47 | 58,49 ± 5,64 | 66,94 ± 8,18 | 72,30 ± 6,11 |
| Albumina (g/L) | 34,19 ± 10,72 | 24,97 ± 9,61 * | 37,25 ± 7,25 | 32,45 ± 5,08 | 39,72 ± 10,60 | 43,39 ± 5,17 | 53,53 ± 5,94 * | 40,46 ± 2,57 |
| Enzimas | ||||||||
| Fosfatase alcalina (U/L) | 123,32 ± 115,61 | 46,18 ± 26,25 * | 118,39 ± 42,71 | 88,95 ± 38,77 | 25,79 ± 32,79 | 24,34 ± 43,78 | 33,07 ± 22,50 | 18,44 ± 42,67 |
| Alanina aminotransferase (U/L) | 63,69 ± 31,90 | 34,03 ± 21,37 * | 65,75 ± 25,36 | 50,49 ± 14,19 | 54,29 ± 15,50 | 50,29 ± 10,10 | 68,96 ± 17,57 * | 57,94 ± 12,06 |
| Aspartato aminotransferase (U/L) | 155,73 ± 54,04 | 137,55 ± 68,31 | 194,22 ± 54,69 | 171,56 ± 36,13 | 195,82 ± 75,82 | 205,78 ± 59,05 | 270,29 ± 50,25* | 229,72 ± 47,78 |
| Lactato desidrogenase (U/L) | 1993,46 ± 904,07 | 1671,46 ± 772,76 | 1430 ± 726,58 | 1690 ± 819,68 | 2053,36 ± 793,69 | 2363,14 ± 721,41 | 2367,04 ± 763,32 | 2615,74 ± 491,17 * |
| Creatina quinase (U/L) | 408,07 ± 253,91 | 392,64 ± 174,86 | 562,87 ± 342,05 | 701,64 ± 292,43 * | 653,74 ± 422,37 | 537,59 ± 372,26 | 682,9 ± 277,82 | 756,82 ± 443,50 |
| Perfil Renal | ||||||||
| Creatinina (µmol/L) | 47,08 ± 13,48 | 44,27 ± 22,79 | 61,77 ± 11,69 * | 54,83 ± 6,76 | 55,31 ± 12,92 | 56,18 ± 6,51 | 66,91 ± 8,90 * | 59,86 ± 6,85 |
| Ureia (mmol/L) | 5,88 ± 1,33 | 5,02 ± 2,18 | 7,11 ± 1,12 * | 7,00 ± 1,15 | 7,02 ± 1,61 | 7,10 ± 0,81 | 8,65 ± 1,91 * | 8,17 ± 0,87 |
| Ácido úrico (µmol/L) | 283,07 ± 140,43 | 247,44 ± 137,08 | 286,70 ± 129,19 | 334,95 ± 131,69 | 379,23 ± 125,43 | 328,01 ± 142,28 | 449,77 ± 161,52 | 382,73 ± 142,01 |
| Perfil Lipídico | ||||||||
| Colesterol (mmol/L) | 1,59 ± 0,52 | 3,73 ± 11,12 | 1,52 ± 0,36 | 1,2 ± 0,40 | 1,72 ± 0,50 | 1,94 ± 0,46 | 2,28 ± 0,44 * | 2,21 ± 0,31 * |
| Triglicerídeos (mmol/L) | 1,29 ± 0,64 | 0,58 ± 0,37* | 1,06 ± 0,59 | 0,92 ± 0,36 | 0,89 ± 0,55 | 0,69 ± 0,45 | 0,92 ± 0,55 | 0,46 ± 0,32 * |
| Glicose (mmol/L) | 5,33 ± 4,38 | 3,83 ± 2,88 | 6,12 ± 4,22 | 6,81 ± 5,45 | 5,27 ± 4,59 | 3,34 ± 3,43 | 5,29 ± 5,98 | 5,60 ± 4,24 |
| Cálcio (mmol/L) | 1,91 ± 0,62 | 1,60 ± 0,60 | 2,12 ± 0,39 | 1,64 ± 0,25 | 1,93 ± 0,57 | 2,22 ± 0,24 | 2,62 ± 0,32 * | 2,36 ± 0,29 * |
| Valores expressos como média. PC = peso corporal. * Significativamente diferente do grupo controle com p < 0,05. Fosfatase alcalina, ALP; alanina aminotransferase, ALT; aspartato aminotransferase, AST; lactato desidrogenase, LDH; creatina quinase, CK. | ||||||||
| Pesos relativos dos órgãos dos sistemas de teste masculino e feminino no estudo subagudo de 28 dias. | ||||||||
| Parâmetros Dosagem Masculina (g/kg PC) Dosagem Feminina (g/kg PC) 0 (n = 5) 0,14 (n = 5) 0,29 (n = 5) 1,00 (n = 5) 0 (n = 5) 0,14 (n = 5) 0,29 (n = 4) 1,00 (n = 5) PC a 295,00 ± 11,73 285,00 ± 17,68 292,00 ± 27,06 314,00 ± 24,08 200,00 ± 16,20 215,00 ± 21,21 203,75 ± 24,62 199,00 ± 24,08 Pulmão b 0,41 ± 0,04 0,43 ± 0,06 0,45 ± 0,02 0,43 ± 0,04 0,57 ± 0,11 0,51 ± 0,08 0,57 ± 0,08 0,55 ± 0,12 Coração b 0,35 ± 0,02 0,35 ± 0,02 0,33 ± 0,03 0,32 ± 0,04 0,36 ± 0,05 0,35 ± 0,03 0,34 ± 0,01 0,37 ± 0,05 Baço b 0,18 ± 0,03 0,15 ± 0,03 0,16 ± 0,02 0,15 ± 0,01 0,23 ± 0,02 0,19 ± 0,02 * 0,19 ± 0,01 * 0,21 ± 0,03 Estômago b 0,47 ± 0,05 0,46 ± 0,04 0,53 ± 0,02 0,51 ± 0,07 0,64 ± 0,03 0,56 ± 0,05 * 0,66 ± 0,02 0,65 ± 0,05 Trato intestinal b 0,49 ± 0,08 0,41 ± 0,05 0,52 ± 0,12 0,47 ± 0,09 0,48 ± 0,20 0,65 ± 0,21 0,57 ± 0,10 0,69 ± 0,10 Fígado b 3,09 ± 0,24 3,21 ± 0,41 2,91 ± 0,21 2,89 ± 0,15 3,23 ± 0,14 3,29 ± 0,36 3,25 ± 0,30 3,21 ± 0,46 Rim D b 0,39 ± 0,02 0,41 ± 0,03 0,37 ± 0,03 0,38 ± 0,03 0,38 ± 0,02 0,36 ± 0,05 0,38 ± 0,04 0,39 ± 0,02 Rim E b 0,39 ± 0,02 0,40 ± 0,03 0,37 ± 0,02 0,38 ± 0,04 0,38 ± 0,03 0,35 ± 0,04 0,37 ± 0,03 0,38 ± 0,02 Adrenal D b 0,01 ± 0,00 0,01 ± 0,00 0,01 ± 0,01 0,01 ± 0,01 0,01 ± 0,01 0,01 ± 0,00 0,02 ± 0,01 0,01 ± 0,01 Adrenal E b 0,01 ± 0,00 0,01 ± 0,01 0,01 ± 0,00 0,01 ± 0,00 0,02 ± 0,00 0,01 ± 0,00 0,02 ± 0,01 0,01 ± 0,00 Testículo D b 0,51 ± 0,05 0,51 ± 0,03 0,49 ± 0,06 0,46 ± 0,05 Testículo E b 0,50 ± 0,09 0,50 ± 0,03 0,48 ± 0,04 0,48 ± 0,04 Ovário D b 0,03 ± 0,01 0,03 ± 0,01 0,03 ± 0,01 0,04 ± 0,02 Ovário E b 0,04 ± 0,01 0,04 ± 0,01 0,03 ± 0,00 0,04 ± 0,01 | ||||||||
| Valores expressos como média ± DP (n = 5 para todos os grupos, exceto n = 4 para o grupo feminino de 0,29 g/kg PC). PC = peso corporal, D = direito, E = esquerdo, a Unidade: g; b Unidade: % do peso corporal. * Significativamente diferente do grupo controle com p < 0,05. | ||||||||
| Pesos relativos dos órgãos dos sistemas de teste masculino e feminino no estudo crônico de 6 meses. | ||||||||
| Parâmetros Dose Macho (g/kg PC) Dose Fêmea (g/kg PC) 0 (n = 19) 0,14 (n = 20) 0,29 (n = 20) 1,00 (n = 19) 0 (n = 19) 0,14 (n = 19) 0,29 (n = 18) 1,00 (n = 19) PC a 578,95 ± 57,82 568,00 ± 50,22 557,75 ± 51,75 543,42 ± 100,90 286,32 ± 41,36 291,84 ± 30,70 281,94 ± 19,56 314,17 ± 26,91 Pulmão b 0,36 ± 0,09 0,37 ± 0,11 0,38 ± 0,07 0,39 ± 0,15 0,53 ± 0,12 0,51 ± 0,12 0,57 ± 0,08 0,48 ± 0,14 Coração b 0,26 ± 0,02 0,25 ± 0,02 0,25 ± 0,02 0,25 ± 0,05 0,30 ± 0,03 0,30 ± 0,04 0,31 ± 0,03 0,30 ± 0,03 Baço b 0,13 ± 0,02 0,13 ± 0,03 0,13 ± 0,02 0,14 ± 0,05 0,16 ± 0,02 0,17 ± 0,02 0,18 ± 0,04 0,17 ± 0,02 Estômago b 0,50 ± 0,06 0,46 ± 0,04 0,44 + 0,05 0,49 ± 0,17 0,70 ± 0,09 0,71 ± 0,11 0,74 ± 0,08 0,67 ± 0,09 Trato intestinal b 0,40 ± 0,08 0,36 ± 0,08 0,36 + 0,08 0,41 ± 0,10 0,51 ± 0,17 0,49 ± 0,15 0,51 ± 0,10 0,50 ± 0,12 Fígado b 2,77 ± 0,39 2,63 ± 0,29 2,80 ± 0,28 2,70 ± 0,29 3,01 ± 0,26 2,94 ± 0,25 3,01 ± 0,28 2,85 ± 0,24 Rim D b 0,28 ± 0,02 0,27 ± 0,02 0,27 ± 0,02 0,28 ± 0,04 0,31 ± 0,07 0,31 ± 0,06 0,33 ± 0,05 0,32 ± 0,02 Rim E b 0,28 ± 0,02 0,27 ± 0,02 0,27 ± 0,03 0,28 ± 0,04 0,32 ± 0,03 0,32 ± 0,04 0,33 ± 0,03 0,32 ± 0,03 Adrenal D b 0,004 ± 0,002 0,004 ± 0,002 0,004 ± 0,002 0,005 ± 0,002 0,009 ± 0,005 0,014 ± 0,015 0,011 ± 0,007 0,015 ± 0,022 Adrenal E b 0,004 ± 0,001 0,005 ± 0,002 0,003 ± 0,001 0,005 ± 0,002 0,010 ± 0,005 0,011 ± 0,006 0,011 ± 0,005 0,011 ± 0,004 Testículo D b 0,31 ± 0,04 0,31 ± 0,05 0,33 ± 0,03 0,32 ± 0,07 Testículo E b 0,34 ± 0,06 0,32 ± 0,03 0,33 ± 0,03 0,33 ± 0,09 Ovário D b 0,02 ± 0,01 0,02 ± 0,01 0,03 ± 0,01 0,02 ± 0,01 Ovário E b 0,03 ± 0,01 0,03 ± 0,01 0,03 ± 0,01 0,02 ± 0,01 | ||||||||
| Valores expressos como média ± DP. PC = peso corporal, D = direito, E = esquerdo, a Unidade: g; b Unidade: % do peso corporal. Não foram encontradas alterações significativas (p > 0,05). |