pmid: "34950034"
title: ""
authors: "Iltaf J, Noreen S, Rehman MFU, Ghumman SA, Batool F, Mehdi M, Hasan S, Ijaz B, Akram MS, Butt H"
journal: "Frontiers in pharmacology"
pubdate: "2021"
doi: "10.3389/fphar.2021.774583"
source: "PMC Full Text"
Autores
Iltaf J, Noreen S, Rehman MFU, Ghumman SA, Batool F, Mehdi M, Hasan S, Ijaz B, Akram MS, Butt H
Periodico
Frontiers in pharmacology (2021)
Conteudo
Ficus benghalensis como Potencial Inibidor da 5α-Redutase para Promoção do Crescimento Capilar: Avaliação In Vitro, In Silico e In Vivo
A triagem de folículos capilares, células da papila dérmica e queratinócitos por meio de estudos in vitro, in vivo e histologia já foi relatada anteriormente para combater a alopecia. A Ficus benghalensis tem sido usada convencionalmente para tratar distúrbios de pele e cabelo, embora seu efeito sobre a 5α-redutase II ainda seja desconhecido. Atualmente, objetivamos analisar o impacto fitoterapêutico dos extratos das folhas de F. benghalensis (FBLEs) na promoção do crescimento capilar em coelhos, juntamente com a inibição in vitro da isoenzima esteroide 5α-redutase II. A inibição da 5α-redutase II pelos FBLEs foi avaliada por RP-HPLC, utilizando o cofator NADPH como iniciador da reação e Minoxin (5%) como controle positivo. Estudos in silico foram realizados usando o AutoDock Vina para visualizar a interação entre a 5α-redutase II e os fitoconstituintes relatados presentes nos FBLEs. O crescimento capilar em coelhas albinas foi investigado aplicando-se uma dose oral da formulação de FBLE e do fármaco controle na pele uma vez ao dia. Os tecidos cutâneos foram examinados por histologia para visualizar os folículos capilares. Além disso, foram realizados FAAS, FTIR e antioxidantes para verificar os elementos-traço e metabólitos secundários nos FBLEs. Os resultados da RP-HPLC e as energias de ligação mostraram que os FBLEs reduziram a atividade catalítica da 5α-redutase II e melhoraram a proliferação celular em coelhos. A análise estatística (p < 0,05 ou 0,01) e a porcentagem de inibição (>70%) sugeriram que o FBLE hidroalcoólico tem maior potencial em aumentar o crescimento capilar ao prolongar a fase anágena do folículo capilar. Os experimentos de FAAS, FTIR e antioxidantes revelaram concentrações suficientes de Zn, Cu, K e Fe, juntamente com a presença de polifenóis e atividade sequestradora no FBLE. Globalmente, descobrimos que os FBLEs são potentes em estimular a maturação do folículo capilar ao reduzir a ação da 5α-redutase II, portanto, podem servir como uma escolha principal no desenho de novos fármacos para tratar a queda de cabelo.
Destaques
- Estudo do potencial das folhas de Ficus benghalensis para o recrescimento capilar por meio de estudos in vitro, in silico e in vivo.
- Os constituintes do extrato bruto inibem a atividade da enzima esteroide 5α-redutase II ligando-se ao seu sítio ativo.
- Analépticos capilares foram preparados em vez da aplicação direta dos extratos brutos para evitar qualquer infecção fúngica.
- Fotomicrografias de biópsias cutâneas mostram um ciclo de crescimento capilar, por exemplo, anágeno e telógeno.
1 Introdução
O termo alopecia androgênica (AGA) refere-se à perda padronizada de cabelo no couro cabeludo em homens e mulheres devido a fatores hereditários e hormonais. O cabelo é uma estrutura indispensável do corpo que protege o couro cabeludo, embeleza a personalidade humana e desempenha múltiplas funções como isolamento, atração e tangibilidade. O ciclo do folículo piloso (FP) passa por telógeno (fase de repouso), catágeno (fase de regressão) e anágeno (fase de crescimento), onde ocorrem a pigmentação e a síntese do eixo capilar. Os fatores que causam AGA são desequilíbrio hormonal androgênico, estresse, distúrbios genéticos, desnutrição, quimioterapia, hiperatividade da 5α-redutase II (SRD5AII), disfunção tireoidiana, dependência química, envelhecimento e malignidade.
O tratamento da AGA tem sido um debate aberto na dermatologia clínica por muitos anos. Os alelos de risco associados à AGA estão localizados no cromossomo 20p11.22. A “Tricoscopia” foi introduzida como o primeiro método para diagnosticar AGA em mulheres. Muitas terapias estão agora disponíveis para combater a calvície, como transplante capilar por bioengenharia, regeneração do FP por rearranjo de células-tronco, plasma rico em plaquetas (PRP) e medicamentos sintéticos minoxidil e finasterida. No entanto, os piores efeitos dermatológicos dos medicamentos foram observados, como descamação, coceira e dermatite. Um estudo recente afirma que microagulhas integradas com nanoenzimas de céria podem remodelar o microambiente perifolicular ao reduzir o estresse oxidativo e regenerar o cabelo no local da calvície. Observou-se uma correlação entre micronutrientes plasmáticos, deficiência de vitaminas e densidade capilar em pacientes não genéticos com AGA por meio de testes colorimétricos diretos e espectrofotometria de absorção atômica com chama (FAAS).
A 5α-redutase humana (SDR5A) possui três tipos de enzimas funcionais codificadas pelo gene SRD5A. Entre estas, a isozima esteroide SDR5AII (pH ótimo; 5,0–5,5) desempenha um papel fundamental na produção de AGA ao catalisar a conversão da testosterona em di-hidrotestosterona (DHT) mais ativa. A enzima é encontrada suficientemente na próstata, epidídimo, pele genital e vesículas seminais, enquanto o cérebro e o fígado contêm quantidades menores. Além disso, a superexpressão de DHT também causa acne, câncer de próstata e hiperplasia prostática benigna. Estudos histológicos em camundongos tratados com DHT mostram retardo no crescimento capilar e encurtamento do anágeno. Estudos computacionais e de mutagênese explicaram a interação de ligação do SRD5AII à finasterida, demonstrando como o medicamento inibe essa enzima de membrana integral.
Para curar a alopecia, as ervas podem fornecer nutrição, melhorar a circulação sanguínea do couro cabeludo e cessar a resposta do DHT e da SRD5A. O uso de Trigonella foenum-graecum e Eclipta alba promoveu o crescimento capilar em ratos de forma mais eficiente do que o fármaco. A extração assistida por micro-ondas com solvente e a GC-MS revelam compostos orgânicos em F. benghalensis que apresentam uma resposta anti-inflamatória e vasodilatadora. Sob estresse crônico, um nível elevado de corticosterona alonga a fase telógena devido à expressão supressiva de Gas6. Curiosamente, o efeito neuromodulador do extrato metanólico da casca de F. benghalensis melhorou a memória e o comportamento de aprendizado e reduziu o estresse em ratos.
Aqui, objetivamos elucidar o efeito dos FBLEs na estimulação da proliferação celular para promover o crescimento capilar (HC) em coelhos e inibir a atividade da SRD5AII sem deixar efeitos secundários indesejados.
2 Materiais e Métodos
2.1 Preparação do Extrato
Folhas frescas de F. benghalensis (5 kg) foram coletadas em Chakwal, Paquistão. A planta foi autenticada por um taxonomista do Departamento de Botânica da Universidade de Sargodha (UOS), Paquistão. As folhas foram lavadas e secas ao ar, seguidas pela produção de pó grosseiro utilizando um moinho mecânico. Folhas em pó (20 g) foram embebidas em 200 ml de cada solvente—éter de petróleo (EP), acetato de etila (AcOEt) e etanol aquoso 70% v/v (EtOH aq.), rotulados como FBLE1-3. As suspensões foram colocadas em um agitador orbital por 5 dias. Posteriormente, as misturas foram filtradas, submetidas à evaporação, concentradas usando papel alumínio poroso e, finalmente, mantidas a 4°C até uso posterior.
2.2 Estudo In Vitro da 5α-Redutase II para o Crescimento Capilar
A inibição da atividade catalítica da SRD5AII foi estudada inicialmente picando 4 g da glândula prostática de um bode macho e triturando-a sob nitrogênio líquido. O tecido foi ainda homogeneizado usando um homogeneizador manual em 20 ml de tampão fosfato de sódio (TFS) (pH 6,5, 50 mM) contendo 1 mM de EDTA (200 µl), 100 mM de sacarose (64 ml), 1 mM de azida sódica (200 µl) e um comprimido inibidor de protease (Roche Pharma, Mannheim, Alemanha). O homogeneizado foi centrifugado a 15.000 rpm por 20 min a 4°C, separando o sobrenadante para uso posterior como fonte de enzima bruta. A proteína solúvel foi testada pelo ensaio de Bradford.
Para a cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa (CLAE-FR; Shimadzu, Japão), a ampola de Testoviron (enantato de testosterona, 250 mg/ml; Bayer Pharma, Leverkusen, Alemanha) foi utilizada como padrão. Seis misturas de reação (MRs) foram preparadas como controle positivo (CP), controle de reação (padrão), reação completa (padrão interno, PI) e outras com FBLEs (1–3) (Tabela 1). As MRs foram incubadas a 37°C por 30 min, e a reação foi interrompida pela adição de 2 ml de EtOAc, seguida pela adição de 150 µl de prednisolona 250 µg/ml em etanol como PI. As MRs foram misturadas por 1 min e centrifugadas a 5.000 rpm (10 min, 4°C). Em seguida, a fase aquosa foi congelada a −80°C, e a camada orgânica foi decantada e evaporada. O resíduo concentrado (1,5 ml) foi posteriormente diluído em 3 ml de metanol. Finalmente, as MRs foram filtradas em seringa (0,2 µm) antes da corrida de CLAE para evitar contaminação.
Composição das MRs para o ensaio de atividade enzimática in vitro.
Nº Reagentes Padrão (µL) PI (µL) CP (µL) 1–3 (µL) 1 FBLEs 200 2 SPB 3 10% alc. testoviron 150 150 4 Enzima bruta 5 NADPH 200 200 200 6 Enantato de testosterona 10 7 Minoxin® (5%) 200
A CLAE-FR foi realizada utilizando coluna cromatográfica do tipo C18-ODS (250 mm × 4,6 mm), mantendo as condições do sistema a 40°C e vazão de 10 µl/min por 30 min, enquanto a absorbância foi registrada a 254 nm. A eluição isocrática foi realizada, preparando uma fase móvel com metanol e água (80:20) e filtrando-a para remover qualquer contaminação. A porcentagem de inibição da SRD5AII foi observada a partir da altura do pico e da razão de área do pico (r) aplicando a seguinte fórmula: r = ; Área do pico (mm²) = altura × largura1/2.
2.3 Docking Molecular
Para determinar as interações de ligação ligante–receptor, realizamos o docking do SD5ARII com minoxidil e constituintes bioativos relatados: (-)-Galocatequina, Reína e Mucusosídeo dos FBLEs utilizando AutoDock Vina e AutoDock Tools 1.5.6. A estrutura cristalina de raios-X do SD5ARII de mamífero alvo com uma resolução de 2,8 Å foi recuperada do Protein Data Bank (PDB ID: 7BW1). Após o docking, as energias de ligação (ELs) foram anotadas, e os valores mais baixos foram escolhidos para visualizar as interações no PyMol.
2.4 Estudo In Vivo para HG
As coelhas albinas (6–11 meses de idade; 1–2 kg) foram adquiridas da Universidade de Ciências Veterinárias e Animais, Lahore, Paquistão. Antes de prosseguir, os coelhos foram autorizados pelo comitê de ética da Faculdade de Farmácia, UOS, fornecendo o número de aprovação 70B18 IAEC/UOS. Os animais foram aclimatados por 3 dias, recebendo ração padrão e água em uma instalação de alojamento animal da Faculdade de Farmácia, UOS. Os coelhos foram divididos em oito grupos, raspados na área dorsal (5 × 4 cm) usando uma lâmina de barbear, e deixados por 24 h para observar qualquer edema ou eritema. As formulações de HG (500 µl) foram pulverizadas uma vez ao dia na área nua, e, eventualmente, o HG foi observado. No 28º dia, os coelhos foram sacrificados e biópsias de pele foram realizadas, enquanto os tecidos cutâneos foram mantidos em formol a 10% para estudo histológico. Dez fios de cabelo foram arrancados aleatoriamente a cada semana, e o comprimento médio de cada fio foi anotado em mm usando um paquímetro digital Vernier. A histologia foi realizada usando coloração subcutânea com hematoxilina e eosina para analisar os FHs, observados em aumento de ×10 usando um microscópio digital (Bresser, Rhede, Alemanha).
2.4.1 Formulações de Crescimento Capilar
As formulações de HG foram preparadas misturando FBLEs diluídos (10 ml), EtOH (7,5 ml) e 32 ml de água destilada, seguido de ultrassonicação. Posteriormente, foi filtrado com seringa (0,24 µm) para evitar qualquer infecção microbiana na pele do animal e o pH foi anotado. Minoxin® 5% (Brookes Pharma, Karachi, Paquistão) foi usado como CP, enquanto PE, AcOEt e EtOH 70% aq. foram usados como controles negativos (CNs).
2.5 Análise Fitoquímica Qualitativa
A análise fitoquímica foi realizada para analisar diversos fitoconstituintes em extratos brutos, como compostos fenólicos e taninos, alcaloides, saponinas e glicosídeos, terpenoides e esteroides, antocianinas, flavonoides, cumarinas e quinonas. Os resultados da análise qualitativa foram anotados com mudança de cor, aparência espumosa ou formação de precipitados.
2.6 Caracterização dos FBLEs
Os FBLEs foram analisados quanto ao cálcio, ferro, zinco e potássio usando FAAS. As folhas em pó (50 mg) foram digeridas usando 15 ml de HCl e HNO3 (3:1) para extrair os íons metálicos. A mistura ácida foi derramada no béquer contendo as folhas em pó e colocada em uma chapa de aquecimento até que a amostra se misturasse completamente. A mistura ácida foi deixada esfriar, depois filtrada e finalmente diluída até 100,0 ml usando água destilada. Soluções estoque de 3, 6, 9, 12 e 15 ppm de sais metálicos foram preparadas para detecção de minerais, e as concentrações foram anotadas em mg/g. A caracterização química dos FBLEs foi feita através de espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier (FTIR). Os extratos gordurosos foram secos usando pastilhas de KBr e analisados na faixa média, 4.000–600 cm-1.
2.6 Atividade Antioxidante
O conteúdo total de polifenóis (TPC) foi estimado modificando-se um método, utilizando ácido gálico como padrão, e FBLEs (50 mg) diluídos em 5 ml de metanol foram usados para determinar o TPC. A absorbância foi registrada a 765 nm em triplicata. O conteúdo total de flavonoides (TFC) foi estimado pelo ensaio colorimétrico de cloreto de alumínio, utilizando catequina como padrão, usando as diluições de FBLE preparadas para o TPC. Cada leitura foi medida em triplicata a 510 nm.
2.7 Ensaio de DPPH
A atividade de captura de radicais (RSA) foi avaliada usando o ensaio de DPPH (1,1-difenil-2-picrilhidrazila), tomando 100 µl de diluições de FBLE, adicionados a 3 ml de DPPH (0.1 mM), seguido de incubação à temperatura ambiente no escuro por 30 min. A absorbância foi registrada em triplicata a 517 nm, utilizando 3 ml de DPPH como controle. Os dados foram registrados como % RSA, e a IC50 (concentração inibitória mínima) foi calculada usando o MS Excel 2016. A porcentagem de RSA foi calculada usando a seguinte fórmula;
2.8 Análise Estatística
A análise estatística foi examinada por ANOVA de uma via via teste de Tukey usando SigmaPlot ver. 14.0. O coeficiente de correlação de Pearson (p) foi aplicado para correlacionar os resultados de HG entre todos os grupos de teste no nível de significância p < 0.05 ou altamente significativo p < 0.01 usando SPSS versão 21.
3 Resultados
3.1 Rendimento Percentual
O rendimento percentual dos FBLEs (PE, EtOAc e 70% EtOH aq.) foi calculado como 3.9%, 4.8% e 20.6%, respectivamente.
3.2 Estudo Enzimático In Vitro
A proteína quantificada da glândula prostática de bode macho foi de 7.99 mg/ml de BSA. Nos cromatogramas de RP-HPLC, um pico proeminente (b) no tempo de retenção (RT) em torno de 6 min foi denominado como o pico da testosterona (Figura 5D). Os resultados são justificados pela intensidade da altura do pico (mAU), que determina quanta testosterona foi deixada no RM. Os resultados de (r) e altura do pico revelaram mais testosterona não convertida no FBLE hidroalcoólico, favorecendo inibição percentual suficiente para SRD5AII, do que Minoxin 5% (Tabela 2). Nenhum fosfato de dinucleotídeo de nicotinamida adenina hidrogênio (NADPH) foi adicionado no "controle de reação" para comparar a altura do pico dos PE 1-3 e PC. No entanto, a altura mínima do pico a) observada na reação completa com IS indicou mais conversão de testosterona em DHT. Um pico atrasado c) refere-se à SRD5AII devido à natureza hidrofóbica tanto da enzima esteroide quanto da fase estacionária.
Pico Área (mm2) Razão % inibição Padrão 330 2.5 − IS 132.6 1.0 − Minoxin 5% 233.3 1.76 50.6 PE 1 225.5 1.7 46.6 PE 2 215.1 1.62 41.3 PE 3 274.5 2.07 71.3
3.3 Docking Molecular
Estudos de docking mostraram uma forte interação de ligação da Rhein (BE; −7,4 kcal/mol) com os sítios ativos da enzima, revelando um potencial inibitório imediato contra SD5ARII. Em comparação, as energias de ligação (BEs) dos fitoconstituintes dos extratos brutos FBLEs mostraram interações significativas com a proteína receptora em relação ao Minoxidil. A Figura 1 e a Tabela 3 mostram as interações proteína-ligante e os valores de suas BEs em Kcal/mol e o tipo de interação de ligação.
Docking molecular do SD5ARII com os ligantes. (A) (–)-Galocatequina; (B) Rhein; (C) Mucusasoide e (D) Minoxidil.
Docking dos compostos bioativos relatados nos extratos das folhas de Ficus benghalensis.
Ligantes Pontuação de docking (kcal/mol) Resíduos Interação (-)- Galocatequina −6,9 NDX A:602 Ligação H convencional PHE A:114 Ligação H convencional e Pi–Pi em forma de T ARG A:114 Pi-alquila LEU A:17 Pi-alquila ALA A:117 Pi-alquila e ligação C–H Rhein (1,8-OH,3-COOH) −7,4 ALA A:117 Empilhamento Amida-Pi GLY A:121 Empilhamento Amida-Pi LEU A:125 Pi-alquila Mucusoside −4,5 GLY A:32 Ligação H convencional THR A:37 Ligação H convencional PHE A:223 Pi-sigma e alquila HIS A:36 Ligação C–H ILE A:110 Alquila LEU A:110 Alquila PRO A:108 Alquila PRO A:30 Alquila NDX A:602 Alquila VAL A:27 Alquila ARG A:227 Alquila LUE A:26 Alquila Minoxidil −6,0 GLY A:13 Ligação C–H LEU A:125 Pi-alquila LEU A:17 Pi-alquila PHE A:118 Pi-alquila
3.4 Análise In Vivo
Nenhuma irritação cutânea foi observada nos coelhos, e um rápido crescimento capilar foi notado na primeira semana, variando posteriormente (Figura 2). A textura do cabelo pareceu áspera e fraca no PC e NCs, mas lisa nos demais. O comprimento médio do cabelo confirma que o HG (crescimento capilar) semanal foi de aproximadamente 1–2 mm (Figura 3). A correlação de Pearson (p < 0,05) revelou uma taxa de HG excepcional no grupo 5. A partir das fotomicrografias da seção longitudinal, as fases do HF e DPCs foram observadas nos tecidos tratados (Figura 4). O pH resultante foi 7,6, 4,3 e 6,4 para FBLE1-3, respectivamente.
Progresso do crescimento capilar in vivo após 28 dias de tratamento.
A melhora no crescimento capilar ao longo do tempo mostra o aumento semanal no comprimento do cabelo. Média ± DP * Significativo a p < 0,05; **p < 0,01.
Fotomicrografias da seção longitudinal de biópsias de pele sob microscópio digital × 10 de resolução; PC (Minoxin 5%) e extratos brutos de FBLE mostram HF = Folículo Capilar, anágeno (A) e C = catágeno (B).
3.5 Análise Fitoquímica Qualitativa
A triagem dos fitoquímicos preliminares mostrou a presença de carboidratos, proteínas, compostos fenólicos, flavonoides, alcaloides, saponinas, glicosídeos, esteroides e taninos. Os resultados de todos os fitoquímicos estão representados na Tabela 4.
Triagem fitoquímica preliminar dos extratos de Ficus benghalensis.
Fitoquímicos Testes fitoquímicos Observação (Éter de petróleo) (AcOEt) (EtOH) Proteínas 1) Teste de Ninhidrina Cor/ppt azul/violeta +++ ++ − 2) Teste de Biureto +++ ++ + Carboidratos 1) Teste de Fehling Ppt vermelho-tijolo + ++ +++ 2) Teste de Benedict + ++ +++ Alcaloides Teste de Wagner Marrom-avermelhado + + ++ Saponinas Teste de espuma Espuma na superfície +++ + − Fenóis e taninos Teste de cloreto férrico Azul-esverdeado + + + Terpenoides e esteroides Teste de Salkowski Marrom-avermelhado ++ + +++ Glicosídeos A) Teste de Keller–Kilani Anel marrom/marrom-avermelhado ++ + +++ B) Teste de Salkowski ++ + +++ Antocianinas Teste do ácido clorídrico Cor azul ++ + + Quinonas Teste do ácido sulfúrico Cor vermelha + + + Flavonoides e cumarinas Teste do hidróxido de sódio Cor amarela + + ++
- Ligeiramente presente, ++ presente, +++ fortemente presente, − ausente.
3.6 Análise de FAAS e FTIR
A FAAS mostrou as concentrações minerais em mg/g (cobre = 13; zinco = 9; ferro = 23,4; potássio = 21,8) encontradas nas folhas em pó. Nos espectros de FTIR, os picos são atribuídos a vibrações de estiramento e deformação, caracterizando grupos funcionais em metabólitos essenciais (Figuras 5A,C).
Caracterização dos FBLEs e análise por RP-HPLC. Em (A), os espectros de FTIR mostram os grupos funcionais; (B) presença de minerais essenciais em folhas secas; (C) representa os antioxidantes presentes nos FBLEs. Os valores são média ± DP. (D) demonstra o quanto os FBLEs são ativos na limitação da atividade da SRD5AII. O pico (B) nos gráficos de RP-HPLC indica a disponibilidade de testosterona nos RMs; o mesmo pico é representado por (A) no gráfico rotulado como “IS”.
3.7 Atividade Antioxidante
Os FBLEs apresentaram concentrações para TPC, TFC e RSA, apresentadas na Figura 5B.
3.8 Atividade de Sequestro de DPPH
Diferentes concentrações de FBLEs contra DPPH foram testadas para encontrar o potencial inibitório dos antioxidantes presentes nos extratos brutos. Observou-se que a %RSA aumentou à medida que as concentrações de FBLEs aumentaram. Os dados foram registrados como média ± DP. A Tabela 5 mostra os valores máximos de %RSA e IC50 para os FBLEs.
Capacidade de sequestro do radical DPPH e capacidade antioxidante dos FBLEs.
Extratos vegetais TPC (mg EAG/g) TFC (mg EC/g) % RSA IC50 FBLE (PE) 23,1 ± 0,33*** 70,2 ± 0,72*** 75,8 ± 0,01 2,57 ± 0,05 FBLE (AcOEt) 19,4 ± 0,60*** 94,4 ± 0,51*** 60,3 ± 0,01 14,1 ± 0,01 FBLE (EtOH aq.) 21,1 ± 0,79*** 38,9 ± 0,36*** 77,5 ± 0,01 18,9 ± 0,01
Os valores são média ± DP; n = 3; ***significativo a p < 0,001 aplicando o teste de Tukey.
4 Discussão
A alopecia androgênica (AGA), um distúrbio predominante em ambos os sexos, desempenha um papel na construção de traumas psicológicos, exigindo um estudo detalhado para lidar com a doença. No presente estudo, os efeitos in vitro e in vivo dos FBLEs foram testados para promover o HG em coelhos. Anteriormente, mulheres que sofrem de AGA foram testadas quanto aos níveis de mRNA da aromatase por RT-PCR a partir de fios de cabelo arrancados do topo do couro cabeludo. A maioria das mulheres apresentou baixos níveis de mRNA da aromatase e altos níveis para SRD5AI, II e III. A avaliação in vitro do ácido valproico em DPCs humanos cultivados diminuiu o nível de β-catenina e aumentou a indução anágena em camundongos.
A glândula prostática contém quantidade suficiente da isoenzima SRD5AII, e seu homogeneizado explica os fenômenos da conversão da testosterona em DHT em RM. Para estudar a atividade inibitória da SRD5AII, 17 extratos hidroalcoólicos de plantas tailandesas foram examinados por análise de HPLC. O estudo in vitro descreve a limitação da conversão da testosterona em DHT ao reduzir a atividade catalítica da SRD5AII. Em RP-HPLC, a intensidade do pico indica maior nível de testosterona nos RMs e, portanto, maior inibição da SRD5AII por Ocimum basilicum; em comparação, os FBLEs inibiram significativamente a SRD5AII (Figura 5D; Tabela 2). Assumimos que o pico em (RT = 11,8 min) corresponde ao óleo de rícino presente no padrão e na testosterona. O docking molecular in silico dos fitoquímicos dos FBLEs foi realizado para observar a inibição da acetilcolinesterase contra o Alzheimer.
A proliferação de células da papila dérmica (DPCs) e queratinócitos desempenha um papel fundamental na extensão da anágena do HF, enquanto protege os tecidos da pele. As DPCs, marcadores especializados, são cultivadas como ferramenta terapêutica durante ensaios de constituição capilar para expandir os HFs e sustentar a indutividade capilar. Os estudos in vivo afirmam que o HG promoveu o potencial do ácido chiquímico e do cilostazol em camundongos C57BL/6 e a proliferação ex vivo de DPCs de HF humano, aumentando a vasodilatação e os fatores de HG por meio de ensaios de quinase. Eclipta alba proporcionou mais HG em ratos do que o minoxidil. Os FBLEs promoveram a proliferação celular e prolongaram a anágena, indicado pelo aumento na taxa de HG (Figuras 3,4). Pesquisadores relataram que um pH levemente ácido é essencial para um HG saudável; resultados de pH na faixa entre 4 e 8 para FBLE1-3 favorecem o estudo.
A falta de minerais poderia representar um risco para a produção de alopecia em mulheres; pacientes homens com AGA apresentavam níveis insuficientes de zinco e cobre no cabelo, soro e urina. Concentrações em folhas em pó (0,01–0,6 mg/100 g) foram consideradas suficientes (como dose diária recomendada) (Figura 5C) em comparação com outras espécies de Ficus. O ensaio DPPH foi escolhido como um método confiável para encontrar o potencial dos antioxidantes em converter a solução de DPPH em DPPH não radical. O extrato hidroalcoólico da casca de F. benghalensis apresentou TPC (23,2 ± 0,6), TFC (100,24 ± 4,21) e RSA (45,73 ± 1,17) µg/ml, respectivamente. Um %RSA significativo (85,20 ± 0,96%) foi demonstrado pelo extrato do fruto de F. auriculata. Nossos achados revelaram resultados competitivos para antioxidantes nos FBLEs mencionados na Tabela 5 e Figura 5B. Folhas de F. benghalensis produzem β-amirina juntamente com psoraleno, β-sitosterol, bergapteno, friedelina, glicil-d-asparagina, lupeol, quercetina-3-galactosídeo, rutina e taraxosterol, todos pertencentes às classes de fitoconstituintes. Além disso, uma avaliação qualitativa dos metabólitos secundários e compostos relatados dos FBLEs que utilizamos para análise in silico favorece a confirmação da presença de componentes essenciais nos FBLEs.
Em conjunto, os FBLEs preparados por maceração aumentaram o HG em coelhos sem deixar erupção cutânea e reduzindo o potencial biocatalítico da SRD5AII, privando assim a conversão de testosterona em DHT mais potente. O estudo mostrou a possível interação de ligação dos fitoquímicos com a SRD5AII, inibindo a atividade da enzima. Os achados histológicos demonstraram anágeno claro no grupo tratado especialmente com FBLE hidroalcoólico, validando visualmente o aumento do HG no modelo animal. Portanto, a conclusão favorece que os fitoconstituintes de F. benghalensis poderiam servir como candidatos futuros a fármacos.
Declaração de Disponibilidade de Dados
Os dados brutos que suportam a conclusão deste artigo serão disponibilizados pelo autor, sem reservas indevidas.
Declaração de Ética
O estudo animal foi revisado e aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa Farmacêutica (PREC), sob o número de aprovação 70B18 IAEC/UOS. A aprovação foi obtida dos conselhos de revisão institucionais locais. O consentimento informado por escrito foi obtido dos proprietários para a participação de seus animais neste estudo.
Contribuições dos Autores
SN e MFUR conceberam, planejaram e supervisionaram o trabalho experimental. JI coletou e compilou os dados e realizou a análise. FB interpretou os espectros de todas as técnicas. MM e SH ajudaram na redação do manuscrito e realizaram estudos in silico básicos. MA e HB realizaram os estudos computacionais conforme recomendado pelos revisores, validaram a análise de dados e a revisão do manuscrito.
Os autores agradecem à Khalifa University of Science and Technology (KUST) pelo financiamento da pesquisa do KU-KAIST Joint Research Center (Código do projeto: 8474000220-KKRJC-2019-Health1). Agradecemos também à Sandooq Al Watan LLC e à Aldar Properties pelo financiamento da pesquisa (SWARD Program - AWARD Project code: 8434000391 - EX2020-044).
Conflito de Interesses
Os autores declaram que a pesquisa foi conduzida na ausência de quaisquer relações comerciais ou financeiras que pudessem ser interpretadas como um potencial conflito de interesses.
Nota do Editor
Todas as afirmações expressas neste artigo são de responsabilidade exclusiva dos autores e não representam necessariamente as de suas organizações afiliadas, nem as do editor, dos editores e dos revisores. Qualquer produto que possa ser avaliado neste artigo, ou alegação que possa ser feita por seu fabricante, não é garantido ou endossado pelo editor.
Referências
Análise Fitoquímica, Triagem Antioxidante e Antimicrobiana de Extratos Vegetais de Seriphidium Oliverianum
Avaliação In Vivo e In Vitro do Potencial de Crescimento Capilar de Hibiscus Rosa-Sinensis Linn
Padronização Físico-Química e Fitoquímica com Impressão Digital HPTLC de Sementes de Nigella Sativa L.
O Papel das Vitaminas e Minerais na Queda de Cabelo: uma Revisão
Regeneração do Órgão Capilar através do Transplante de Unidade Folicular Bioengenheirada
O Extrato de Torta de Prensagem de Argan (Argania Spinosa) Melhora a Proliferação Celular e Previne o Estresse Oxidativo e a Inflamação de Células da Papila Dérmica Humana
Composição Fitoquímica e Atividade Antioxidante do Extrato de Folhas de Ficus benghalensis (Moraceae)
Um Biossensor de Acetilcolinesterase de Insetos Utilizando Eletrodo de Grafite de Lápis Modificado com Nanocompósito WO3/g-C3N4 para Detecção de Fosmete em Grãos Armazenados
Eficácia do Plasma Rico em Plaquetas para Alopecia Androgenética: uma Revisão da Literatura
O Efeito do Cilostazol, um Inibidor da Fosfodiesterase 3 (PDE3), no Crescimento Capilar Humano com os Mecanismos Duais de Promoção
O Ácido Chiquímico, um Bioisóstero da Manose, Promove o Crescimento Capilar com a Indução do Ciclo Capilar Anágeno
A Corticosterona Inibe GAS6 para Regular a Quiescência das Células-Tronco do Folículo Capilar
A Inibição do Recrecimento Capilar Induzida por Diidrotestosterona ao Ativar o Receptor Androgênico em Camundongos C57BL6 Simula a Alopecia Androgenética
O pH do Shampoo Pode Afetar o Cabelo: Mito ou Realidade
Triagem Fitoquímica e Análise por FT-IR de Frutos de Ficus Benghalensis
Citocinas e Outros Mediadores na Alopecia Areata
Tecnologias de Extração para Plantas Medicinais e Aromáticas: Earth
Isolamento e Caracterização de Novos Inibidores da Acetilcolinesterase de Folhas de Ficus Benghalensis L.
Impacto do Extrato de Folhas de Trigonella Foenum-Graecum no Crescimento Capilar de Camundongos
Uma Abordagem Holística para Extração Assistida por Micro-ondas de Compostos Fenólicos de Frutos de Ficus Benghalensis e seu Perfil Fitoquímico
O Ácido Valproico Promove o Crescimento Capilar Humano em Modelo de Cultura In Vitro
Uso de Ervas Novas em Cosméticos para Cuidados com a Pele e o Cabelo: uma Revisão
A Biologia do Cabelo Humano: uma Revisão Multidisciplinar
Triagem da Atividade Inibitória da Esteroide 5-redutase e do Conteúdo Fenólico Total de Plantas Tailandesas
Expressão da Sinalização Wnt/β-Catenina, Marcadores de Células-Tronco e Marcadores de Células em Proliferação em Folículos Pilosos de Vibrissas de Ratos
Efeitos Promotores do Crescimento Capilar In Vitro da Naringenina e Hesperetina em Células da Papila Dérmica Humana e Queratinócitos
Atenuação dos Efeitos Amnésicos, Ansiolíticos e Antidepressivos Induzidos por Escopolamina de Ficus Benghalensis em Modelos Experimentais Comportamentais
Propriedades Etnofarmacológicas de Ficus Benghalensis Linn: Uma Revisão
IMC e Níveis de Zinco e Cobre no Cabelo, Soro e Urina de Pacientes Turcos do Sexo Masculino com Alopecia Androgenética
Critérios de Tricoscopia para o Diagnóstico de Alopecia Androgênica Feminina
Isolamento de Atividades Celulolíticas de Tribolium castaneum (Besouro da Farinha Vermelha)
Eficácia de Antioxidantes Naturais contra SARS-CoV-2? Insights do Mundo In Silico
Locus de Suscetibilidade à Calvície Padrão Masculino em 20p11
Atividade Promotora do Crescimento Capilar de Eclipta alba em Ratos Albino Machos
Isoenzimas da 5α-Redutase e Níveis de mRNA da Aromatase em Cabelos Arrancados de Mulheres Jovens com Perda Capilar Padrão Feminino
Novas Perspectivas sobre os Compostos Fenólicos do Extrato Otimizado de Frutos de Ficus Auriculata
Extração, Purificação e Caracterização da Proteína Cristalina do Núcleo do Cristalino Ocular Cataractoso
Descoberta de Inibidores Naturais da Esteroide 5 Alfa-Redutase
Atividade da 5α-redutase na próstata
Monitoramento In Vivo dos Estágios do Ciclo Capilar por Imagem de Bioluminescência de Células NG2 do Folículo Piloso
Regeneração Totalmente Funcional do Folículo Piloso através do Reorganização de Células-Tronco e seus Nichos
Estudo Comparativo de Folhas de Ficus Pomifera Wall., Ficus Hispida Linn. e Ficus Religiosa Linn
Estrutura da Esteroide 5α-Redutase 2 Humana com o Medicamento Antiandrogênico Finasterida
Revisão das Células Dérmicas do Folículo Piloso
Microagulhas Integradas com Nanozimas de Céria Remodelam o Microambiente Perifolicular para o Tratamento da Alopecia Androgenética