pmid: "39064703"
title: "Complemento"
authors: "Wang LJ, Tsai CS, Chou WJ, Kuo HC, Huang YH, Lee SY, Dai HY, Yang CY, Li CJ, Yeh YT"
journal: "Nutrients"
pubdate: "2024 Jul 13"
doi: "10.3390/nu16142260"
source: "PMC Full Text"

Complemento

Autores

Wang LJ, Tsai CS, Chou WJ, Kuo HC, Huang YH, Lee SY, Dai HY, Yang CY, Li CJ, Yeh YT

Periodico

Nutrients (2024 Jul 13)

Conteudo

Suplemento Adicional de Bifidobacterium Bifidum em Crianças com Transtorno de Déficit de Atenção/Hiperatividade: Um Ensaio Clínico Randomizado Duplo-Cego Controlado por Placebo de 12 Semanas
Conduzimos um ensaio clínico randomizado duplo-cego controlado por placebo de 12 semanas para investigar o impacto potencial da suplementação de Bifidobacterium bifidum (Bf-688) no transtorno de déficit de atenção/hiperatividade (TDAH). Foram inscritas crianças com TDAH que já estavam recebendo uma dose estável de tratamento com metilfenidato (MFD) e foram aleatoriamente designadas para dois grupos: um recebendo Bf-688 adicional (contagem bacteriana diária de 5 × 10⁹ UFCs) (n = 51) e o outro recebendo placebo (n = 51). Todos os participantes foram submetidos a avaliações usando o Teste de Desempenho Contínuo de Conners (CPT) e o Teste de Atenção Auditiva Contínua de Conners (CATA). Além disso, amostras fecais foram coletadas no início do ensaio (semana 0) e no ponto final (semana 12). Notavelmente, o grupo que recebeu suplementação de Bf-688, mas não o grupo placebo, apresentou melhorias significativas nos erros de omissão no CPT, bem como no tempo de reação de acerto (Hit reaction time) tanto no CPT quanto no CATA. A análise do microbioma intestinal revelou um aumento significativo na razão Firmicutes/Bacteroidetes (razão F/B) apenas no grupo Bf-688. Além disso, identificamos correlações negativas significativas entre a biossíntese de N-Glicanos e o tempo de reação de acerto tanto no CPT quanto no CATA. Nossos resultados demonstram que o suplemento probiótico Bf-688 pode melhorar o desempenho neuropsicológico em crianças com TDAH, possivelmente alterando a composição da microbiota intestinal, levando em última análise a uma redução na biossíntese de N-Glicanos.

1. Introdução
   O transtorno de déficit de atenção/hiperatividade (TDAH) destaca-se como um dos transtornos do neurodesenvolvimento mais prevalentes, afetando aproximadamente 8% das crianças em idade escolar em todo o mundo. Recentemente, tem havido um foco crescente nas vias de comunicação complexas e bidirecionais entre a microbiota intestinal e o sistema nervoso central, frequentemente referidas como “eixo intestino–cérebro”. Este eixo está implicado em vários aspectos físicos, incluindo padrões alimentares, neurotransmissores, sistema endócrino, processos imunológicos e permeabilidade intestinal. O microbioma intestinal tem potencial para influenciar o desenvolvimento inicial do cérebro humano e pode desempenhar um papel na fisiopatologia do TDAH. Os psicobióticos, termo moderno para um tipo de probiótico, parecem agir através da dopamina, epinefrina, noradrenalina e 5-hidroxitriptamina. A manipulação do microbioma por meio de suplementos probióticos em indivíduos com TDAH é promissora para descobrir novas abordagens terapêuticas.
   A família de probióticos Lactobacillus, Lactobacillus rhamnosus (LGG), é a mais frequentemente estudada e é conhecida por modular a relação entre o sistema neuroimune, o sistema neuroendócrino e o sistema nervoso central. Além disso, pesquisas da Suécia relataram que o Synbiotic 2000 poderia aliviar sintomas de autismo e melhorar a regulação emocional em crianças, potencialmente através da redução da inflamação intestinal e vascular e do aumento dos níveis de ácidos graxos de cadeia curta (AGCC).

Não apenas cepas de Lactobacillus, mas também membros do gênero Bifidobacterium mostram promessa no tratamento de transtornos do neurodesenvolvimento em crianças, como o TDAH. O gênero Bifidobacterium está ligado à síntese de precursores de dopamina e é considerado um dos biomarcadores associados ao TDAH. Em um estudo animal anterior, a suplementação com Bifidobacterium breve durante o início da vida pareceu ajudar a reduzir a hiperatividade em ratos adolescentes com baixo peso ao nascer.

Além disso, um ensaio clínico randomizado de 10 semanas envolvendo suplementação de micronutrientes alterou a abundância de Bifidobacterium e teve o potencial de influenciar o comportamento do TDAH em crianças. Entre as comunidades de Bifidobacterium, a espécie Bifidobacterium bifidum (B. bifidum) se destaca como um dos táxons predominantes. B. bifidum G9-1 (BBG9-1) foi encontrado para melhorar a disbiose, levando a um aumento de ácidos orgânicos e a um aprimoramento da neurotransmissão, incluindo dopamina. Além disso, nosso estudo aberto anterior também revelou que a suplementação com uma cepa específica de B. bifidum, o probiótico Bf-688, foi associada a uma melhora nos sintomas relacionados à desatenção e hiperatividade/impulsividade.
Os tratamentos farmacológicos têm demonstrado sua eficácia no enfrentamento dos sintomas do TDAH e na melhora de vários aspectos funcionais, incluindo qualidade de vida, desempenho acadêmico e redução das taxas de acidentes. O metilfenidato (MFD), agindo como um inibidor da recaptação de dopamina e norepinefrina, destaca-se como o psicoestimulante mais prescrito para o TDAH. No entanto, sabe-se que o MFD causa efeitos adversos comuns em crianças e adolescentes, incluindo redução do apetite, perda de peso e desconforto abdominal. Uma meta-análise revelou a prevalência de efeitos colaterais do MFD, como distúrbios do sono (17,9%), cefaleia (14,4%), dor abdominal (10,7%) e redução do apetite (31,1%). O B. bifidum MIMBb75 inativado por calor (SYN-HI-001) demonstrou aliviar significativamente os sintomas da síndrome do intestino irritável. Além disso, nosso estudo aberto anterior revelou que a suplementação com o probiótico Bf-688 foi associada ao ganho de peso em crianças com TDAH virgens de tratamento medicamentoso. Assim, postulamos que a inclusão de Bf-688 como tratamento adjuvante poderia trazer vantagens no alívio dos sintomas gastrointestinais e na promoção do ganho de peso em indivíduos com TDAH que também estão recebendo farmacoterapia. Além disso, antecipamos que o aumento do tratamento com Bf-688 poderia ser benéfico no enfrentamento dos sintomas do TDAH e na correção dos desequilíbrios da microbiota.
Consequentemente, conduzimos um ensaio clínico randomizado duplo-cego controlado por placebo com o objetivo primário de avaliar o impacto da terapia adicional com Bf-688 na apresentação clínica do TDAH, no desempenho neuropsicológico e na progressão do peso corporal em crianças submetidas à farmacoterapia para TDAH. O desfecho secundário concentrou-se na potencial alteração da composição do microbioma intestinal durante o ensaio clínico.
2. Materiais e Métodos
2.1. Participantes do Estudo
Este protocolo de pesquisa recebeu aprovação do Institutional Review Board (IRB) do Chang Gung Memorial Hospital, em Taiwan (Aprovação nº 202100880A3). O ensaio foi registrado no (NCT04958460). Recrutamos pacientes elegíveis com TDAH do Ambulatório de Psiquiatria Infantil do Chang Gung Children’s Hospital, em Taiwan. Antes da inclusão dos participantes neste estudo, fornecemos uma explicação detalhada dos protocolos do estudo tanto aos participantes quanto aos seus pais ou responsáveis legais. O consentimento informado por escrito foi obtido tanto da criança quanto do pai/responsável assim que concordaram em participar do estudo.
Os critérios de elegibilidade para pacientes com TDAH foram os seguintes: (a) diagnóstico clínico confirmado de TDAH por um psiquiatra infantil experiente, determinado por entrevistas estruturadas com base nos critérios do Manual Diagnóstico e Estatístico de Transtornos Mentais (DSM-5); (b) idade entre 6 e 12 anos; e (c) farmacoterapia em andamento para TDAH com dosagem estável por no mínimo quatro semanas.
Por outro lado, indivíduos que atendiam a qualquer um dos seguintes critérios foram excluídos deste estudo: (a) pacientes com histórico de condições neuropsiquiátricas significativas, incluindo deficiências intelectuais, transtorno do espectro autista, transtornos bipolares, transtornos depressivos maiores, transtornos psicóticos ou transtornos por uso de substâncias; (b) pacientes com doenças físicas subjacentes importantes, como distúrbios genéticos ou endócrinos, traumatismo craniano grave ou distúrbios gastrointestinais; e (c) pacientes que seguiam uma dieta vegetariana ou estavam atualmente tomando probióticos ou antibióticos.
2.2. Alocação
Realizamos cálculos de poder para determinar o tamanho da amostra para o ensaio clínico randomizado (ECR). Utilizamos uma calculadora de tamanho amostral online disponível em (acessado em 28 de junho de 2021). Com base nos achados do nosso estudo piloto aberto, os tamanhos amostrais estimados necessários para este ensaio clínico randomizado duplo-cego controlado por placebo foram determinados como n = 45 em cada grupo.
Neste ensaio clínico, que seguiu um delineamento randomizado duplo-cego controlado por placebo, um total de 107 crianças entre 6 e 12 anos de idade, que preenchiam os critérios para diagnóstico de TDAH, foram recrutadas. A alocação dos pacientes foi realizada utilizando um número aleatório gerado por computador, sendo os participantes designados em uma proporção de 1:1 para o grupo Bf-688 (n = 54) ou para o grupo placebo (n = 53).
Os indivíduos do grupo Bf-688 receberam Bf-688 por um período de 12 semanas, com um sachê tomado pela manhã e outro à noite, resultando em uma contagem bacteriana diária de 5 × 10⁹ UFCs. Por outro lado, os participantes do grupo placebo receberam pacotes de placebo compostos por maltodextrina e amido de milho, também tomados duas vezes ao dia durante 12 semanas.
Os pacientes foram instruídos a aderir consistentemente ao seu tratamento prescrito com MPH, mantendo uma dosagem estável. A adesão ao regime medicamentoso foi verificada em cada visita por meio da avaliação dos relatos dos pacientes fornecidos por seus pais e do exame de qualquer medicação restante. O uso de outros medicamentos concomitantes foi proibido. Além disso, todos os participantes foram instruídos a não fazer qualquer alteração em seus hábitos alimentares ou estilo de vida durante o estudo.
2.3. Procedimentos do Estudo
Os pacientes seguiram o regime de prescrição mencionado anteriormente de forma consistente por um período de 12 semanas consecutivas. O protocolo do estudo e o cronograma de acompanhamento estão representados na Figura 1. Em quatro momentos distintos, especificamente no início do estudo (basal), na 4ª semana, na 8ª semana e na 12ª semana, as seguintes avaliações e medições foram realizadas: registro da altura, peso corporal e índice de massa corporal (IMC) das crianças. A avaliação dos sintomas de TDAH foi conduzida utilizando duas ferramentas estabelecidas: a Escala de Avaliação de Swanson, Nolan e Pelham (SNAP-IV) e a escala de avaliação de TDAH (ADHD-RS). Os pais das crianças foram solicitados a preencher o formulário de pais da SNAP-IV, bem como a Escala de Avaliação de Efeitos Colaterais de Barkley (SERS), e os sintomas clínicos foram avaliados pelo pesquisador utilizando a ADHD-RS. Para explorar quaisquer potenciais benefícios do Bf-688 em relação aos sintomas gastrointestinais (GI), analisamos separadamente os escores cumulativos para dores de estômago e perda de apetite.

Além disso, tanto no início (semana 0) quanto na conclusão (semana 12) do estudo, um psicólogo infantil administrou o Teste de Desempenho Contínuo de Conners (Conners CPT) e o Teste de Atenção Auditiva Contínua de Conners (CATA) para avaliar as habilidades de atenção visual e auditiva dos pacientes, respectivamente. Pesquisas anteriores demonstraram que os testes neuropsicológicos CPT3 e CATA fornecem informações objetivas relacionadas aos casos de TDAH. As medidas específicas empregadas nas análises incluem detectabilidade (d'), omissões, comissões e tempo de reação de acerto (TR).

2.4. Análise do Microbioma Intestinal

Todos os participantes foram instruídos a fornecer amostras fecais tanto no início do estudo (semana 0) quanto na sua conclusão (semana 12). A extração de DNA bacteriano dessas amostras fecais foi realizada utilizando o QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit, fabricado pela Qiagen em Hilden, Alemanha, embora com alguns ajustes ao protocolo padrão.

Em resumo, a amostra fecal passou por uma etapa de centrifugação a 13.200 rpm por 10 min para eliminar o tampão de armazenamento, seguida de lise utilizando o tampão InhibitEX da Qiagen em Hilden, Alemanha. Após a homogeneização, protease K e etanol foram introduzidos para processar o sobrenadante resultante. Subsequentemente, o sobrenadante passou por uma etapa de lavagem usando uma coluna de centrifugação QIAamp, com a eluição final sendo realizada utilizando tampão de eluição. A concentração do DNA extraído foi avaliada usando um NanoDrop 2000 (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, EUA), e uma diluição subsequente de 10× foi realizada usando tampão de eluição.

2.5. Análise de Sequenciamento de Próxima Geração (NGS)

A biblioteca do microbioma intestinal foi construída visando a região padrão V3-V4 do gene 16S rRNA. A amplificação por PCR foi realizada utilizando KAPA HiFi HotStart ReadyMix da Roche nos Estados Unidos, e a purificação subsequente foi realizada utilizando esferas magnéticas AMPure XP fabricadas pela Beckman Coulter (Brea, CA, EUA).
Para garantir a qualidade e a quantidade do produto de PCR, foi realizada uma avaliação utilizando um Fragment Analyzer, produto da Advanced Analytical, nos Estados Unidos. Além disso, a quantificação foi feita com um Fluorômetro Qubit 3.0 (Thermo Fisher, Waltham, MA, EUA). Após essas etapas, a biblioteca foi submetida ao sequenciamento em uma plataforma MiSeq fornecida pela Illumina, nos Estados Unidos, utilizando leituras paired-end com dimensões de 2 × 301 nt para cada amostra.
2.6. Análise de Dados
A análise estatística foi realizada utilizando o software SPSS versão 22 da IBM (Armonk, NY, EUA). Os dados contínuos foram apresentados como média ± erro padrão da média ou desvio padrão, e as comparações foram feitas usando o teste t independente. Para dados categóricos, foram utilizadas porcentagens, e as comparações foram realizadas com o teste qui-quadrado.
Ao analisar os dados longitudinais, seguimos o princípio de intenção de tratar modificado (ITT). Especificamente, os participantes que foram randomizados para receber tratamento e que haviam tomado pelo menos uma dose de probióticos ou placebo (conforme evidenciado pela sua presença na semana 4) foram incluídos na análise. Para lidar com dados ausentes na semana 8 e na semana 12, empregamos o método de última observação transportada (LOCF). Para avaliar a extensão da mudança em várias medidas de desfecho ao longo do curso, utilizamos uma análise de variância (ANOVA) de modelo misto. Essa análise nos permitiu examinar diferenças dentro do grupo (referidas como "efeito do tempo"), diferenças entre grupos (comparando o grupo Bf-688 com o grupo placebo) e possíveis interações entre tempo e grupos. A homogeneidade das variâncias e covariâncias foi examinada usando o teste de Levene para garantir que a distribuição dos resultados estivesse próxima do normal. A significância estatística foi indicada por p  <  0,05.
Realizamos o controle de qualidade dos dados de sequência e construímos a tabela de características usando o QIIME 2 versão 2023.2 (, acessado em 26 de maio de 2023) em conjunto com o pipeline DADA2 para correção. A diversidade alfa, que caracteriza a diversidade dentro de uma área ou ecossistema específico, foi avaliada usando métricas como os índices de Shannon e Chao-1. O índice Chao-1 foi empregado para medir a riqueza da comunidade, com valores mais altos indicando maior abundância. O índice de Shannon foi utilizado para medir a diversidade bacteriana, com valores mais altos significando uma comunidade mais diversa. Para a análise de diversidade beta, utilizamos o MicrobiomeAnalyst (versão 2.0). As composições taxonômicas das Variantes de Sequência de Amplicon (ASVs) foram mapeadas com base no banco de dados Greengenes 13_8 99% de Unidades Taxonômicas Operacionais (OTUs) como sequências de referência.
Todos os dados apresentados neste estudo são expressos como média ± desvio padrão. Os gráficos foram gerados utilizando os pacotes Python seaborn e matplotlib. Para investigar táxons bacterianos diferencialmente abundantes entre os grupos, realizamos uma análise de agrupamento hierárquico bidirecional com base em diferentes informações de agrupamento usando o pacote R heatmap. A análise funcional, especificamente a Investigação Filogenética de Comunidades pela Reconstrução de Estados Não Observados (PICRUSt), foi conduzida utilizando o site Galaxy/Hutlab (, acessado em 3 de julho de 2023).

A significância estatística foi definida como um valor de p menor que 0,05. Ajustes adicionais para a significância estatística foram feitos usando a Taxa de Falsa Descoberta (FDR). A correção do FDR envolveu a determinação do menor valor de p ajustado por Benjamini–Hochberg ao aplicar testes t não pareados com a correção de Welch. Um valor de p ajustado por FDR, também referido como valor q, de 0,05 indica que 5% dos testes significativos podem resultar em falsos positivos.

3. Resultados
   3.1. Análise de Desfecho Clínico

Um total de 107 crianças diagnosticadas com TDAH que atenderam aos critérios de triagem foram recrutadas e divididas em dois grupos: o grupo Bf-688, composto por 54 participantes, e o grupo placebo, com 53 participantes. Todos os 107 participantes concluíram com sucesso a avaliação inicial de linha de base, conforme ilustrado na Figura 1. No total, prosseguimos com uma análise ITT modificada envolvendo 51 indivíduos tanto no grupo Bf-688 (idade média: 9,1 anos, 82,4% meninos) quanto no grupo placebo (idade média: 9,1 anos, 88,2% meninos). As características desses 102 participantes estão detalhadas na Tabela 1. Importante ressaltar que, na linha de base, não foram observadas diferenças significativas em vários fatores, incluindo dados demográficos, subtipos de TDAH, comorbidades, doses de MPH, efeitos colaterais, sintomas clínicos e resultados de testes neuropsicológicos.

Conforme ilustrado na Figura 2, tanto o grupo Bf-688 quanto o grupo placebo exibiram padrões semelhantes em seus escores SNAP-IV, escores ADHD-RS, peso corporal, IMC e escores totais SERS ao longo do período de estudo de 12 semanas. Especificamente, os escores relacionados à desatenção e hiperatividade nas escalas SNAP-IV e ADHD-RS registraram reduções significativas em ambos os grupos durante esse período.

Além disso, tanto no grupo Bf-688 quanto no grupo placebo, o peso corporal das crianças aumentou ao final do período de 12 semanas em comparação com suas medidas iniciais. Notavelmente, o IMC e os escores totais SERS não apresentaram mudanças significativas ao longo da duração do estudo em comparação com seus valores iniciais. Curiosamente, os sintomas gastrointestinais avaliados pela escala SERS diminuíram significativamente no grupo Bf-688 entre a semana 4 e o ponto final na semana 12. No entanto, no grupo placebo, os sintomas gastrointestinais apresentaram uma redução notável tanto na semana 4 quanto na semana 8, mas experimentaram uma tendência de aumento, retornando aos níveis basais no ponto final do estudo na semana 12.
Figure 3 ilustra os níveis de atenção visual (CPT) e auditiva (CATA) em crianças recebendo farmacoterapia para TDAH em ambos os grupos em dois momentos: semana 0 e semana 12. Após 12 semanas, ambos os grupos apresentaram melhorias significativas em comissões e detectabilidade (d'). No entanto, o grupo Bf-688 mostrou melhorias significativas em erros de omissão no CPT e no Hit RT tanto no CPT quanto no CATA, enquanto não foram observadas tais melhorias no grupo placebo.
3.2. Análise do Microbioma Intestinal
Para explorar a influência do eixo intestino-cérebro, amostras fecais foram coletadas de pacientes antes e após 12 semanas de administração consistente do tratamento prescrito. No total, 76 pacientes forneceram amostras fecais com sucesso, incluindo 37 indivíduos do grupo Bf-688 e 39 do grupo placebo. Utilizamos o sequenciamento do gene 16S rRNA para rastrear mudanças na comunidade microbiana intestinal.
Inicialmente, a análise de diversidade alfa, incluindo os índices de Simpson e Chao-1, foi realizada para examinar diferenças na composição da microbiota intestinal antes e após o tratamento. Tanto o grupo placebo quanto o grupo Bf-688 exibiram um aumento significativo na uniformidade microbiana após o tratamento, conforme representado na Figura 4A. No entanto, não houve diferenças significativas no número de espécies microbianas raras (índice Chao-1) entre os grupos Bf-688 e placebo (Figura 4A). A Figura 4B revela variações significativas na análise de diversidade beta entre os dois grupos antes e após o período de tratamento de 12 semanas. Para elucidar as comunidades microbianas, analisamos inicialmente os micróbios dominantes nos níveis de filo, gênero e espécie, conforme representado na Figura 4C. Entre os dez filos principais, diferenças notáveis na abundância foram observadas especificamente em Firmicutes e Bacteroidetes antes e após a intervenção, e isso foi significativo apenas no grupo Bf-688. Além disso, ao comparar a razão Firmicutes/Bacteroidetes (F/B), um aumento significativo foi observado na razão F/B do grupo Bf-688 após a intervenção, em contraste com o grupo placebo.
Um exame adicional dos dez principais gêneros e espécies não revelou alterações significativas antes e após a intervenção, conforme representado na Figura S1. Para representar visualmente as diferenças significativas nas comunidades microbianas entre o grupo placebo (à esquerda) e o grupo Bf-688 (à direita) antes e após a intervenção, um mapa de calor foi utilizado (Figura S2). Por exemplo, no grupo placebo, apenas cinco bactérias exibiram mudanças significativas em sua riqueza antes e após a intervenção, e as bactérias correspondentes no grupo Bf-688 foram apresentadas no mesmo mapa de calor. Notavelmente, ambos os grupos exibiram tendências semelhantes com base em diferenças significativas nas comunidades microbianas antes e após a intervenção.
Considerando que todos os participantes receberam tratamento consistente e adequado ao longo do estudo e qualquer influência potencial atribuível ao placebo foi excluída de acordo com os princípios éticos que regem os ensaios em humanos, empregamos uma análise de diagrama de Venn para delinear diferenças distintas e significativas na microbiota intestinal antes e após a intervenção com Bf-688 (Figura S3). Essa análise nos permitiu identificar as bactérias intestinais específicas que foram verdadeiramente afetadas pelo Bf-688. Entre estas, 20 bactérias intestinais apresentaram diferenças significativas antes e após a administração de Bf-688. Subsequentemente, apresentamos box plots para representar visualmente essas diferenças individualmente (Figura S4).

Estendemos nossa análise empregando o PICRUSt para prever mecanismos potenciais pelos quais as bactérias intestinais poderiam estar envolvidas (Figura 5A). A fim de descobrir as vias específicas influenciadas pelo Bf-688, examinamos as diferenças distintas e significativas nas vias antes e após a intervenção com Bf-688 usando um diagrama de Venn (Figura S5). Esse exame revelou seis vias que apresentaram diferenças significativas antes e após a administração de Bf-688. Essas vias incluíram o metabolismo da riboflavina, Fatores de transcrição, Biossíntese de lipopolissacarídeos, digestão e absorção de proteínas, Proteínas de biossíntese de lipopolissacarídeos e Biossíntese de N-glicanos. Para ilustrar as variações antes e após a administração de Bf-688 em comparação com o grupo placebo, essas vias foram apresentadas usando box plots (Figura S6).

Exploramos correlações envolvendo a razão F/B, sintomas gastrointestinais, CPT Hit RT, CATA Hit RT e as comunidades microbianas e vias (Figura 5B). Notavelmente, correlações significativas foram identificadas entre a Biossíntese de N-glicanos e CPT Hit RT, bem como CATA Hit RT (Figura 5C). Além disso, a Biossíntese de N-glicanos exibiu correlações negativas com Firmicutes, Clostridia, Clostridiales e a razão F/B, enquanto apresentou correlações positivas com Bacteroidetes, Bacteroidia e Bacteroidales (Figura S7a). Adicionalmente, CPT Hit RT mostrou uma correlação negativa com digestão e absorção de proteínas. Além disso, digestão e absorção de proteínas exibiram correlações negativas com a razão F/B, Firmicutes, Clostridia, Clostridiales, Bulleidia e Bulleidia moorei. Por outro lado, digestão e absorção de proteínas apresentaram correlações positivas com Bacteroidetes, Bacteroidia e Bacteroidales (Figura S7b).

4. Discussão
   Este estudo representa o primeiro ensaio randomizado duplo-cego investigando os efeitos da suplementação de B. bifidum (cepa Bf-688) nos sintomas clínicos e no microbioma intestinal associado em indivíduos com TDAH. O foco principal deste estudo foi avaliar os sintomas gastrointestinais e as alterações de peso corporal em indivíduos em tratamento com MPH. Embora os resultados deste ensaio tenham indicado que Bf-688 não levou a alterações adicionais no peso corporal, o grupo Bf-688 apresentou um resultado superior em comparação ao grupo placebo em termos de efeitos colaterais gastrointestinais no ponto final do estudo na semana 12. Cepas específicas dos gêneros Lactobacillus e Bifidobacterium demonstraram eficácia na redução do peso corporal em indivíduos com sobrepeso ou obesidade. Um artigo de revisão destacou os efeitos positivos significativos de Bifidobacterium animalis subsp. lactis 420 (B420) no gerenciamento de peso e na saúde metabólica através de uma complexa rede de vias de sinalização, incluindo aquelas relacionadas à função de barreira epitelial e ao sistema imunológico intestinal. No presente estudo, observamos diferenças significativas na composição de Firmicutes e Bacteroidetes após a intervenção no grupo Bf-688. Além disso, houve um aumento notável na razão F/B no grupo Bf-688, embora nenhum aumento desse tipo tenha sido observado no grupo placebo. Uma razão F/B elevada tem sido associada a condições como obesidade e várias doenças. Apesar desses achados, Bf-688 não resultou em efeitos adicionais de ganho de peso corporal em nosso estudo. Em resumo, nossos resultados sugerem que os suplementos de Bf-688 podem ter o potencial de aliviar os sintomas gastrointestinais ao modular a disbiose do microbioma intestinal em indivíduos em tratamento com MPH.

Tanto as avaliações dos pais (SNAP-IV) quanto as avaliações clínicas (ADHD-RS) demonstraram reduções significativas em ambos os grupos de estudo durante o período de 12 semanas. No entanto, o grupo Bf-688 superou o grupo placebo em termos de redução de erros de omissão e melhora nas taxas de resposta na atenção visual (CPT) e atenção auditiva (CATA). Numerosas cepas de B. bifidum demonstraram ter efeitos positivos em várias condições físicas. Por exemplo, B. bifidum G9-1 (BBG9-1) tem potencial para lidar com a disbiose, resultando na modulação de ácidos orgânicos e neurotransmissores como a dopamina. As cepas de Bifidobacterium podem contribuir para a produção de fenilalanina, que está envolvida na síntese de dopamina. Importante, distúrbios nos mecanismos neuroquímicos que afetam a síntese de neurotransmissores monoaminérgicos têm sido implicados na fisiopatologia do TDAH.
Em comparação com as escalas SNAP-IV e ADHD-RS, as avaliações CPT e CATA fornecem medidas relativamente objetivas para avaliar a função neuropsicológica. Nossa pesquisa anterior indicou que o desempenho no CPT, em vez dos sintomas comportamentais, tende a apresentar associações com marcadores biológicos como citocinas ou marcadores neuroendócrinos. Propomos que o Bf-688 pode influenciar indiretamente a função catecolaminérgica em indivíduos com TDAH, resultando em melhorias na atenção visual e auditiva. Além disso, foi sugerido que a abundância de Bifidobacterium poderia potencialmente servir como um biomarcador para o TDAH devido ao seu envolvimento no sistema de recompensa neural dopaminérgico. Nossos achados demonstram que o Bifidobacterium bifidum estava de fato presente em níveis muito baixos nesses pacientes com TDAH, e sua abundância aumentou significativamente após a suplementação com Bf-688, sugerindo benefícios potenciais para indivíduos com TDAH.

Nossos achados revelam correlações significativas entre o Hit RT do CPT, o Hit RT do CATA e a Biossíntese de N-glicanos, estabelecendo uma ligação entre anormalidades na N-glicosilação induzidas por disbiose intestinal e transtornos do neurodesenvolvimento como o TDAH. A N-glicosilação desempenha um papel crucial na vida multicelular, e sua ausência completa pode ser fatal durante o desenvolvimento embrionário. A desregulação da glicosilação está ligada a um amplo espectro de doenças, incluindo câncer, diabetes, distúrbios cardiovasculares, doenças congênitas, distúrbios imunológicos e doenças infecciosas. Variações na glicosilação têm significado fisiológico profundo, pois alterações nos glicanos podem impactar significativamente a estrutura e a função dos componentes polipeptídicos das glicoproteínas. Curiosamente, pesquisas anteriores mostraram aumentos nos grupos de glicanos GP11 e DG7, juntamente com uma diminuição em GP12, no plasma de indivíduos com TDAH. É concebível que diferenças na eficiência da glicosilação possam levar a alterações na sinalização neural e potencialmente contribuir para o desenvolvimento do TDAH. Portanto, nossos resultados sugerem que os efeitos benéficos do Bf-688 no TDAH podem ser mediados pela remodelação da disbiose intestinal e pela normalização dos processos anormais de N-glicosilação.
Nosso estudo apresenta várias limitações. Primeiramente, embora tenha sido um ensaio clínico randomizado controlado, o placebo contendo maltodextrina e amido de milho pode ter influenciado potencialmente o microbioma intestinal durante o período do estudo. Em segundo lugar, apesar dos nossos esforços para controlar hábitos alimentares, fatores de estilo de vida e o uso de antibióticos e anti-inflamatórios, outros fatores ambientais ainda podem ter afetado a microbiota intestinal. Em terceiro lugar, variações genéticas podem desempenhar um papel na pleiotropia biológica e na relação causal entre microbiota e transtornos psiquiátricos. O microbioma intestinal é um ecossistema complexo com táxons interdependentes envolvidos em interações intrincadas juntamente com genes do hospedeiro e vias de reação, algumas das quais relacionadas a neurotransmissores que desempenham um papel na neurocircuitaria do TDAH. No entanto, em nosso estudo atual, não medimos diretamente variantes genéticas, níveis de neurotransmissores, marcadores imunes ou AGCC (ácidos graxos de cadeia curta). Pesquisas adicionais são necessárias para elucidar os mecanismos moleculares que fundamentam o eixo intestino-cérebro e formam a base para modificar a microbiota comensal ou suas funções como uma abordagem terapêutica potencial para o TDAH. Em quarto lugar, a proporção de meninas no estudo foi pequena, portanto é necessário cuidado ao fazer recomendações gerais. Além disso, como o estudo focou em crianças da Ásia, é necessária uma investigação adicional para determinar se os resultados podem ser generalizados para crianças de outros continentes. Por fim, o período de estudo de 12 semanas foi curto e pode ser insuficiente para detectar potenciais mudanças comportamentais e funcionais neuropsicológicas em pacientes com TDAH.

5. Conclusões

Este estudo representa o primeiro ensaio clínico randomizado duplo-cego a investigar os efeitos clínicos e no microbioma intestinal da suplementação de B. bifidum (cepa Bf-688) em crianças com TDAH em tratamento farmacológico. Os resultados indicam que o suplemento probiótico Bf-688 foi associado a melhorias na atenção visual e auditiva nessas crianças com TDAH, possivelmente por meio de seu papel na remodelação da composição da microbiota intestinal e na redução da biossíntese de N-glicanos. Essas descobertas sugerem os benefícios potenciais da suplementação probiótica para crianças com TDAH que estão em tratamento farmacológico.

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Materiais Suplementares
As seguintes informações de suporte podem ser baixadas em , Figura S1. Alterações nos Filos, Gêneros e Espécies Microbianas Antes e Após a Intervenção. Figura S2. Visualização em Mapa de Calor das Diferenças Significativas nas Comunidades Microbianas. Figura S3. Análise de Diagrama de Venn das Alterações na Microbiota Intestinal. Figura S4. Alterações nas Abundâncias de Bactérias Intestinais com a Administração de Bf-688. Figura S5. Diagrama de Venn Ilustrando Diferenças Únicas e Significativas em Vias Antes e Após a Intervenção de Bf-688. Figura S6. Gráficos de Caixa Ilustrando Alterações nas Vias Antes e Após a Administração de Bf-688. Figura S7. Análise de Correlação da Biossíntese de N-Glicanos e da Digestão e Absorção de Proteínas com Táxons da Microbiota Intestinal.
Contribuições dos Autores
L.-J.W. participou do desenho do estudo, recrutamento de pacientes, revisão de referências e redação do manuscrito. C.-S.T., W.-J.C., H.-C.K., Y.-H.H., S.-Y.L., H.-Y.D., C.-Y.Y. e C.-J.L. participaram do desenvolvimento do protocolo e recrutamento de pacientes e forneceram suporte técnico e material. Y.-T.Y. realizou a análise e interpretação dos dados e redigiu e revisou o manuscrito. Todos os autores leram e concordaram com a versão publicada do manuscrito.
Declaração do Conselho de Revisão Institucional
Este protocolo de pesquisa recebeu aprovação do Conselho de Revisão Institucional (IRB) do Chang Gung Memorial Hospital em Taiwan (Nº de Aprovação 202100880A3; data 1 de setembro de 2021).
Declaração de Consentimento Informado
Fornecemos uma explicação detalhada dos protocolos do estudo tanto aos participantes quanto aos seus pais ou responsáveis legais. O consentimento informado por escrito foi obtido tanto da criança quanto do pai/responsável.
Declaração de Disponibilidade de Dados
Os dados apresentados neste estudo podem ser obtidos mediante solicitação ao autor correspondente por questões éticas.
Conflitos de Interesse
Todos os autores declaram que não possuem interesses financeiros ou potenciais conflitos de interesse relacionados a esta pesquisa na área biomédica.
Referências
Incidência, prevalência e carga global do TDAH de 1990 a 2019 em 204 países: Dados, com reanálise crítica, do estudo Global Burden of Disease
A prevalência global do transtorno de déficit de atenção e hiperatividade em crianças e adolescentes: Uma revisão guarda-chuva de meta-análises
O eixo microbiota-intestino-cérebro no comportamento e nos distúrbios cerebrais
Uma visão geral atualizada sobre a relação entre disbiose do microbioma intestinal humano e transtornos psiquiátricos e psicológicos
Doenças Neurodegenerativas e do Neurodesenvolvimento e o Eixo Intestino-Cérebro: O Potencial do Direcionamento Terapêutico do Microbioma
O Eixo Microbiota-Intestino-Cérebro em Transtornos Psiquiátricos
Microbiota intestinal e padrões alimentares em crianças com transtorno de déficit de atenção/hiperatividade
Microbiota intestinal e níveis de citocinas plasmáticas em pacientes com transtorno de déficit de atenção/hiperatividade
Disbiose do micobioma intestinal e seu impacto na permeabilidade intestinal no transtorno de déficit de atenção/hiperatividade
Compreendendo o Papel do Microbioma Intestinal no Desenvolvimento Cerebral e Sua Associação com Transtornos Psiquiátricos do Neurodesenvolvimento
O estado atual da pesquisa sobre o uso de psicobióticos no manejo de transtornos psiquiátricos—Uma revisão sistemática da literatura
O eixo microbiota-intestino-cérebro e os transtornos do neurodesenvolvimento
Crianças e adolescentes com transtorno de déficit de atenção e hiperatividade e transtorno do espectro autista compartilham composições distintas de microbiota
Explorando o eixo intestino-cérebro: Potencial impacto terapêutico dos psicobióticos na saúde mental
Existe disbiose em indivíduos com transtorno do neurodesenvolvimento em comparação com controles ao longo do desenvolvimento? Uma revisão sistemática
Uma revisão sistemática das alterações do microbioma e do impacto da suplementação probiótica em crianças e adolescentes com transtornos neuropsiquiátricos
Evidências Atuais sobre o Papel do Microbioma Intestinal na Fisiopatologia do TDAH e Implicações Terapêuticas
Microbiota intestinal e terapia probiótica no TDAH: Uma revisão do conhecimento atual
O futuro da psicofarmacologia clínica de crianças e adolescentes: Uma revisão sistemática de ensaios clínicos randomizados de fase 2, 3 ou 4 de agentes farmacológicos sem aprovação regulatória ou para indicações não aprovadas
Nutrição no Manejo do TDAH: Uma Revisão de Pesquisas Recentes
O papel dos probióticos e prebióticos na modulação do eixo intestino-cérebro
Psicobióticos e transplante de microbiota fecal para autismo e transtorno de déficit de atenção/hiperatividade: Modulação do microbioma e mecanismos terapêuticos
O eixo microbiota intestinal-cérebro, psicobióticos e sua influência no cérebro e no comportamento: Uma revisão sistemática
Uma possível ligação entre intervenção probiótica precoce e o risco de transtornos neuropsiquiátricos mais tarde na infância: Um ensaio randomizado
Um Ensaio Piloto Randomizado Controlado com a Cepa Probiótica Lactobacillus rhamnosus GG (LGG) no TDAH: Crianças e Adolescentes Relatam Melhor Qualidade de Vida Relacionada à Saúde
Efeito da suplementação probiótica na função cognitiva em crianças e adolescentes: Uma revisão sistemática de ensaios randomizados
Avaliação da suplementação da cepa probiótica Lactobacillus acidophilus LB como manejo adjuvante do transtorno de déficit de atenção e hiperatividade em crianças e adolescentes: Um ensaio clínico randomizado controlado
Efeitos de um simbiótico nos sintomas e no funcionamento diário no transtorno de déficit de atenção e hiperatividade—Um ensaio clínico randomizado duplo-cego controlado
Efeitos de um Simbiótico nos Marcadores de Atividade Imune Plasmática e Ácidos Graxos de Cadeia Curta em Crianças e Adultos com TDAH—Um Ensaio Clínico Randomizado Controlado
Papel Emergente e Lugar dos Probióticos no Manejo dos Transtornos do Neurodesenvolvimento Pediátrico
Possíveis ligações entre microbiota intestinal e transtornos de déficit de atenção/hiperatividade em crianças e adolescentes
Microbioma intestinal no TDAH e sua relação com a antecipação neuronal de recompensa
Bifidobacterium breve durante a infância atenua a mobilidade em ratos de baixo peso ao nascer
Mudanças no microbioma intestinal humano durante um Ensaio Clínico Randomizado de 10 semanas para suplementação de micronutrientes em crianças com transtorno de déficit de atenção e hiperatividade
Bifidobacterium bifidum: Um Membro Chave da Microbiota Intestinal Humana Precoce
Melhora da constipação de trânsito lento induzida por loperamida pelo Bifidobacterium bifidum G9-1 é mediada pela correção da produção de butirato e do perfil de neurotransmissores devido à melhora na disbiose
Efeito do Bifidobacterium bifidum nas Características Clínicas e na Microbiota Intestinal no Transtorno de Déficit de Atenção/Hiperatividade
Tratamentos Farmacológicos Atuais para TDAH
Transtorno de déficit de atenção e hiperatividade (TDAH) pediátrico: Atualizações de 2022 sobre o manejo farmacológico
Eventos adversos gastrointestinais durante o tratamento com metilfenidato em crianças e adolescentes com transtorno de déficit de atenção e hiperatividade: Uma revisão sistemática com metanálise e Análise Sequencial de Ensaios de ensaios clínicos randomizados
Metilfenidato para crianças e adolescentes com transtorno de déficit de atenção e hiperatividade (TDAH)
Metilfenidato para transtorno de déficit de atenção e hiperatividade (TDAH) em crianças e adolescentes—Avaliação de eventos adversos em estudos não randomizados
Bifidobacterium bifidum MIMBb75 inativado por calor (SYN-HI-001) no tratamento da síndrome do intestino irritável: Um ensaio clínico multicêntrico, randomizado, duplo-cego, controlado por placebo
O DSM-5: Classificação e mudanças nos critérios
Prevalência de transtornos mentais do DSM-5 em uma amostra nacionalmente representativa de crianças em Taiwan: Metodologia e principais achados
Como calcular o tamanho amostral em um ensaio clínico randomizado?
Propriedades psicométricas da versão chinesa da escala Swanson, Nolan e Pelham, versão IV—Formulário para pais
Avaliações de pais e professores dos sintomas de transtorno de déficit de atenção e hiperatividade pela SNAP-IV: Propriedades psicométricas e pontuações normativas de uma amostra de distrito escolar
Confiabilidade e validade transculturais do TDAH avaliado pela Escala de Avaliação de TDAH em um estudo pan-europeu
Efeitos colaterais do metilfenidato em crianças com transtorno de déficit de atenção e hiperatividade: Uma avaliação sistêmica controlada por placebo
Reações adversas ao tratamento com metilfenidato para transtorno de déficit de atenção/hiperatividade: Estrutura e associações com características clínicas e controle dos sintomas
A Atenção Melhora Durante o Exercício Físico em Indivíduos com TDAH
Validade dos Testes de Atenção Visual e Auditiva para Detectar TDAH
Níveis de Citocinas e Função Neuropsicológica em Pacientes com Transtorno de Déficit de Atenção/Hiperatividade e Doenças Atópicas
Relato de intenção de tratar modificada em ensaios clínicos randomizados: Revisão sistemática
Uma aplicação do modelo de delineamento misto de dois fatores na pesquisa educacional
Ciência de dados de microbioma reprodutível, interativa, escalável e extensível usando QIIME 2
DADA2: Inferência de amostras de alta resolução a partir de dados de amplicon Illumina
Usando MicrobiomeAnalyst para análise estatística, funcional e de metanálise abrangente de dados de microbioma
Uma taxonomia Greengenes aprimorada com níveis taxonômicos explícitos para análises ecológicas e evolutivas de bactérias e arqueias
Matplotlib: Um Ambiente de Gráficos 2D
Efeitos de Probióticos e Simbióticos na Perda de Peso em Indivíduos com Sobrepeso ou Obesidade: Uma Revisão Sistemática
A Razão Firmicutes/Bacteroidetes: Um Marcador Relevante de Disbiose Intestinal em Pacientes Obesos?
Sintomas de TDAH em doenças neurometabólicas: Mecanismos subjacentes e implicações clínicas
Sulfato de dehidroepiandrosterona, testosterona livre e globulina ligadora de hormônios sexuais na suscetibilidade ao transtorno de déficit de atenção/hiperatividade
A Influência Potencial do Microbioma Bacteriano no Desenvolvimento e Progressão do TDAH
Uma deleção recessiva no gene da GlcNAc-1-fosfotransferase resulta em letalidade embrionária no período de implantação
As Siglecs e seus papéis no sistema imunológico
Glicosilação mamífera na imunidade
Glicosilação em mecanismos celulares de saúde e doença
O efeito de N-glicanos individuais na atividade enzimática
Glicoma plasmático humano no transtorno de déficit de atenção/hiperatividade e transtornos do espectro autista
As interações entre genoma hospedeiro e microbioma intestinal aumentam o risco de transtornos psiquiátricos: randomização mendeliana e anotação biológica
Transtorno de Déficit de Atenção/Hiperatividade (TDAH) e o microbioma intestinal: Uma perspectiva ecológica
Limitações Atuais para a Avaliação do Papel do Microbioma Intestinal no Transtorno de Déficit de Atenção/Hiperatividade (TDAH)
Compreendendo o Eixo TDAH-Intestino por Análise de Redes Metabólicas
Diagrama CONSORT para o procedimento do estudo e fluxograma. Durante a segunda visita na semana 4, três indivíduos do grupo Bf-688 descontinuaram sua participação no ensaio. Isso incluiu dois participantes que acharam o gosto dos probióticos inaceitável e um que parou de tomar medicação para TDAH. No grupo placebo, um participante se retirou do ensaio devido a aversão ao gosto do placebo, e outro participante retirou seu consentimento.
Sintomas de TDAH, peso corporal, IMC e efeitos adversos da farmacoterapia de TDAH em crianças ao longo de um ensaio clínico duplo-cego controlado por placebo de 12 semanas. (A) Sintomas de desatenção SNAP-IV; (B) Sintomas de hiperatividade SNAP-IV; (C) Sintomas de desatenção ADHD-RS; (D) Sintomas de hiperatividade ADHD-RS; (E) Peso corporal; (F) Índice de massa corporal; (G) Pontuações totais SERS; e (H) Sintomas gastrointestinais SERS. Bf-688, Bifidobacterium Bifidum mais medicação para TDAH por 12 semanas; Placebo, placebo mais medicação para TDAH por 12 semanas; SNAP-IV, Escala de Avaliação de Swanson, Nolan e Pelham; ADHD-RS, Escala de Avaliação de TDAH; SERS, Escala de Avaliação de Efeitos Colaterais de Barkley; Sintomas SERS GI (gastrointestinais), gravidade de dor de estômago e perda de apetite. * p < 0,05, ** p < 0,01, *** p < 0,001 em comparação com os dados basais.
Atenção visual e auditiva dos pacientes com farmacoterapia para TDAH no início (semana 0) e no final (semana 12). CPT, Teste de Desempenho Contínuo de Conners; CATA, Teste de Atenção Auditiva Contínua de Conners; Tempo de reação ao acerto (RT). * p < 0,05, ** p < 0,01, *** p < 0,001 em comparação com os dados iniciais.
Análise de bactérias abundantes (A) As análises de Shannon e Chao-1 revelaram diferenças significativas tanto no grupo placebo quanto no grupo Bf-688 antes e após a suplementação probiótica. (B) Gráficos de PCoA da diversidade beta para distâncias UniFrac ponderadas e não ponderadas. Elipses representam os intervalos de confiança de 95% para cada grupo. As cores são atribuídas com base na alocação do grupo: vermelho para o grupo Bf-688 após a suplementação, verde para o grupo Bf-688 antes da suplementação, azul para o grupo placebo após a suplementação e roxo para o grupo placebo antes da suplementação. (C) Gráficos de barras representam as abundâncias médias de ASVs em nível de filo, gênero e espécie nas quatro diferentes amostras estudadas: grupo Bf-688 após suplementação, grupo Bf-688 antes da suplementação, grupo placebo após suplementação e grupo placebo antes da suplementação. “Outros” refere-se a todas as espécies representando menos de 10% de abundância após a 10ª espécie mais abundante.
Correlações entre o tempo de reação ao acerto do CPT (CPT Hit RT), o tempo de reação ao acerto do CATA (CATA Hit RT) e a biossíntese de N-glicanos Neste gráfico de barras de erro estendido, comparamos os dados funcionais preditos do KEGG com base em quatro amostras diferentes: o grupo Bf-688 antes e após a suplementação, e o grupo placebo antes e após a suplementação. Foram aplicados testes t de Welch, e apenas funções preditas com p < 0,05 entre os dois grupos são exibidas. (A) O gráfico de barras à esquerda representa as proporções médias de cada via KEGG, enquanto o gráfico de pontos à direita ilustra as diferenças nas proporções médias entre os dois grupos de amostras comparados, juntamente com seus respectivos valores de p. Empregamos o PICRUSt para predizer os mecanismos potenciais pelos quais as bactérias intestinais poderiam estar envolvidas nessas comparações. (B) Apresentamos as correlações entre comunidades microbianas, vias e parâmetros clínicos, incluindo a razão F/B, sintomas gastrointestinais SERS, tempo de reação ao acerto do CPT e tempo de reação ao acerto do CATA. * valores de p (C) Correlações significativas foram observadas entre CPT Hit RT, CATA Hit RT e a biossíntese de N-glicanos.
Características basais entre crianças com farmacoterapia para TDAH alocadas no grupo probiótico (Bf-688) (n = 51) e no grupo placebo (n = 51).
Variáveis Grupo Probiótico (n = 51) Grupo Placebo (n = 51) χ ou t Valor de p Sexo, n (%) 0,703 a 0,402     Meninos 42 (82,4) 45 (88,2)     Meninas 9 (17,6) 6 (11,8) Idade, anos 9,1 ± 1,8 9,1 ± 1,8 −0,117 0,97 Altura, cm 133,0 ± 12,0 133,4 ± 10,1 −0,151 0,88 Peso corporal, kg 28,8 ± 7,7 29,6 ± 8,0 −0,494 0,622 Índice de massa corporal (kg/m2) 16,0 ± 2,1 16,4 ± 2,7 −0,722 0,472 Peso ao nascer, g 3046,3 ± 483,0 3182,2 ± 519,3 −1,369 0,174 Subtipo de TDAH, n (%) 0,043 a 0,835   Desatento 17 (33,3) 18 (35,3)   Hiperativo ou combinado 34 (66,7) 33 (64,7) Comorbidade, n (%)   Transtorno desafiador de oposição 4 (7,8) 2 (3,9) 0,708 a 0,678   Transtornos de tique 0 (0) 2 (3,9) 2,040 a 0,495 Dose de metilfenidato (mg/dia) 22,1 ± 11,7 23,4 ± 10,0 −0,576 0,566 Formulação de MPH, n (%) 0,050 1,000   MPH de ação curta 14 (27,5) 13 (25,5)   MPH de ação prolongada 37 (72,5) 38 (74,5) Escala de Avaliação de Efeitos Colaterais de Barkley   Pontuação total 14,8 ± 12,7 13,7 ± 9,4 0,487 0,628   Sintomas gastrointestinais 3,8 ± 3,5 4,0 ± 3,3 −0,174 0,862 Pontuações SNAP-IV   Desatenção 14,7 ± 5,6 15,3 ± 6,2 −0,458 0,648   Hiperatividade/impulsividade 12,8 ± 6,1 12,7 ± 7,0 0,137 0,891 Pontuações ADHD-RS   Desatenção 11,7 ± 5,4 11,5 ± 6,7 0,197 0,844   Hiperatividade/impulsividade 13,9 ± 4,9 13,3 ± 7,1 0,462 0,645 CPT   Detectabilidade (d’) 50,1 ± 9,7 48,6 ± 10,7 0,756 0,451   Omissões 53,0 ± 12,6 53,5 ± 12,2 −0,135 0,893   Comissões 47,2 ± 8,9 46,1 ± 8,6 0,633 0,528   Tempo de reação ao acerto (TR) 62,7 ± 10,5 61,6 ± 13,2 0,481 0,632 CATA   Detectabilidade (d’) 51,6 ± 9,4 50,3 ± 10,0 0,663 0,509   Omissões 49,2 ± 8,6 48,7 ± 7,6 0,328 0,743   Comissões 52,1 ± 11,6 51,8 ± 12,4 0,14 0,889   Tempo de reação ao acerto (TR) 53,7 ± 10,6 51,3 ± 9,7 1,187 0,238
Notas: Os dados são expressos como média ± DP ou n (%); a Qui-quadrado de Pearson; CPT, Teste de Desempenho Contínuo de Conners; CATA, Teste de Atenção Auditiva Contínua de Conners; Tempo de reação ao acerto (TR); TDO, transtorno desafiador de oposição; SNAP-IV, Escala de Avaliação de Swanson, Nolan e Pelham; ADHD-RS, Escala de Avaliação de TDAH; SERS, Escala de Avaliação de Efeitos Colaterais de Barkley; Sintomas gastrointestinais SERS, gravidade de dor de estômago e perda de apetite.