pmid: "38630015"
title: "Um ensaio randomizado duplo-cego, controlado por placebo para avaliar a segurança e eficácia de vivo"
authors: "Srivastava S, Basak U, Naghibi M, Vijayakumar V, Parihar R, Patel J, Jadon PS, Pandit A, Dargad RR, Khanna S, Kumar S, Day R"
journal: "Gut microbes"
pubdate: "2024"
doi: "10.1080/19490976.2024.2338322"
source: "PMC Full Text"

Um ensaio randomizado duplo-cego, controlado por placebo para avaliar a segurança e eficácia de vivo

Autores

Srivastava S, Basak U, Naghibi M, Vijayakumar V, Parihar R, Patel J, Jadon PS, Pandit A, Dargad RR, Khanna S, Kumar S, Day R

Periodico

Gut microbes (2024)

Conteudo

Um ensaio clínico randomizado, duplo-cego e controlado por placebo para avaliar a segurança e eficácia do Bifidobacterium longum CECT 7347 (ES1) vivo e do Bifidobacterium longum CECT 7347 (ES1) tratado termicamente (HT-ES1) em participantes com síndrome do intestino irritável com predominância de diarreia

RESUMO
Para determinar a eficácia do probiótico Bifidobacterium longum CECT 7347 (ES1) e do pós-biótico Bifidobacterium longum CECT 7347 tratado termicamente (HT-ES1) na melhora da gravidade dos sintomas em adultos com síndrome do intestino irritável com predominância de diarreia (SII-D), foi realizado um ensaio clínico randomizado, duplo-cego e controlado por placebo com 200 participantes divididos em três grupos. Duas cápsulas de ES1, HT-ES1 ou placebo foram administradas por via oral, uma vez ao dia, durante 84 dias (12 semanas). O desfecho primário foi a alteração na pontuação total da Escala de Gravidade de Sintomas da SII (IBS-SSS) desde o início, em comparação com o placebo. Os desfechos secundários foram consistência das fezes, qualidade de vida, gravidade da dor abdominal e escores de ansiedade. Parâmetros de segurança e eventos adversos também foram monitorados. A alteração nos escores IBS-SSS desde o início em comparação com o placebo atingiu significância nos grupos ES1 e HT-ES1 nos Dias 28, 56 e 84. A diminuição no escore médio IBS-SSS desde o início até o Dia 84 foi: ES1 (−173,70 [±75,60]) vs placebo (−60,44 [±65,5]) (p < 0,0001) e HT-ES1 (−177,60 [±79,32]) vs placebo (−60,44 [±65,5]) (p < 0,0001). Os desfechos secundários incluíram alterações nos escores IBS-QoL, APS-NRS, consistência das fezes e STAI-S e STAI-T, com alterações desde o início até o Dia 84 sendo significativas nos grupos ES1 e HT-ES1, em comparação com o grupo placebo. Tanto ES1 quanto HT-ES1 foram eficazes na redução da gravidade dos sintomas da SII-D, conforme avaliado por medidas como IBS-SSS, IBS-QoL, APS-NRS, consistência das fezes e STAI, em comparação com o placebo. Esses resultados são estatisticamente significativos e clinicamente relevantes, representando, até onde os autores sabem, os primeiros resultados positivos observados para um probiótico ou pós-biótico da mesma cepa, nesta população específica.

MENSAGENS-CHAVE
O que já se sabe sobre este tópico
A SII é um distúrbio gastrointestinal funcional crônico caracterizado por dor abdominal, distensão abdominal e anormalidades na frequência ou forma das fezes. A microbiota intestinal de pessoas que vivem com SII difere marcadamente da microbiota de indivíduos saudáveis. A microbiota intestinal pode desempenhar um papel fundamental na etiologia da SII e os sintomas da SII podem ser aliviados pela modulação da microbiota intestinal. Várias formas propostas para modular a saúde intestinal incluem normalizar a microbiota intestinal, prevenir o crescimento excessivo de bactérias patogênicas, modular as vias aferentes viscerais e melhorar a função de barreira intestinal. No entanto, a heterogeneidade significativa entre estudos, a qualidade do estudo e da população, o desenho do estudo e as preocupações com o tamanho da amostra limitaram os órgãos nacionais e supranacionais a recomendar probióticos para a SII. Mais ensaios clínicos randomizados, repetíveis e controlados com poder estatístico adequado são necessários.
O que este estudo acrescenta
Os resultados deste estudo contribuem substancialmente para o campo de pesquisa da SII, primeiramente ao fornecer resultados clinicamente significativos e estatisticamente relevantes de um ensaio clínico randomizado, controlado por placebo, rigoroso e bem delineado e, em segundo lugar, ao explorar o uso de pós-bióticos na SII, uma área de pesquisa ainda em seus estágios iniciais. A suplementação com probiótico (ES1) e pós-biótico (HT-ES1) reduziu significativamente os escores de gravidade dos sintomas da SII em comparação ao placebo. Este estudo atingiu os desfechos primários e secundários e sugere fortemente que ES1 e HT-ES1 podem ser benéficos no manejo da SII.
Como este estudo pode afetar a pesquisa, a prática ou a política
Este estudo contribui para a base de evidências atual, apoiando o uso de probióticos/pós-bióticos para a SII. Esta pesquisa pode ser utilizada para informar profissionais de saúde sobre o uso de probióticos na SII e ajudar a melhorar a qualidade de vida e o bem-estar das pessoas que vivem com a condição.
Introdução
A síndrome do intestino irritável (SII) é um distúrbio gastrointestinal funcional caracterizado por dor abdominal, anormalidades nas fezes e hábitos intestinais alterados. Os sintomas podem ser debilitantes e impactar significativamente a qualidade de vida (QV). A SII é um distúrbio multifatorial, e sua fisiopatologia complexa ainda não é totalmente compreendida. Anormalidades funcionais, como sensibilidade visceral alterada, motilidade intestinal e disfunções secretoras, juntamente com anormalidades estruturais, como desequilíbrios microbianos, são fatores contribuintes subjacentes à fisiopatologia da SII.
A prevalência global da SII é estimada em 11,2%, com taxas de 5–15% relatadas para a maioria dos países europeus, Estados Unidos e China. O estudo global mais recente conduzido pela fundação ROME em 33 países relatou taxas de SII entre 3% e 5%.
A SII é um diagnóstico de exclusão baseado nos sintomas do paciente e é classificada pelos hábitos intestinais predominantes; SII com predominância de diarreia (SII-D), SII com predominância de constipação (SII-C) e hábitos intestinais mistos (SII-M). O manejo depende das principais apresentações e pode incluir intervenção farmacológica, como antiespasmódicos, antidiarreicos e laxantes, modificação da dieta e psicoterapia. No entanto, dada a natureza multifatorial da SII, atualmente não existe uma estratégia de manejo única para um subtipo específico que tenha sido universalmente adotada. Estudos recentes sugerem que agentes como probióticos, que modulam a microbiota intestinal, podem ajudar no manejo da SII.
Probióticos são definidos como microrganismos vivos que, quando administrados em quantidades adequadas, conferem um benefício à saúde do hospedeiro. Vários probióticos, particularmente dos gêneros Lactobacilos e Bifidobactérias, têm sido sugeridos para o tratamento da SII. Diversas revisões sistemáticas foram publicadas sobre o uso de probióticos no manejo da SII. Uma revisão recente concluiu que, para o subtipo SII-D, os probióticos podem ser uma solução eficaz para melhorar a dor abdominal e a distensão, Zhang et al. (2016) relataram que probióticos de cepa única e baixa dosagem pareciam ser mais bem-sucedidos na melhora da resposta sintomática e da qualidade de vida, e Konstantis et al. (2023) demonstraram um efeito positivo na dor e no inchaço. Uma metanálise publicada recentemente comparou o tratamento convencional e as intervenções probióticas em participantes com SII, e os resultados indicaram que ambas as intervenções foram eficazes na melhora da persistência dos sintomas da SII e dos escores de dor abdominal. A metanálise concluiu que ensaios clínicos randomizados maiores, com foco em subtipos específicos de SII e cepas probióticas específicas, com metodologia comparável, foram recomendados para determinar a eficácia de forma confiável. Essas metanálises destacaram o alto grau de heterogeneidade não apenas entre o desenho e a metodologia, mas também nos subtipos de SII. Portanto, são necessários ensaios padronizados, com ferramentas validadas, para medir os desfechos primários e secundários.
A grande maioria dos estudos clínicos bióticos na SII foi realizada com probióticos. No entanto, muitos estudos levantam a hipótese de que alguns dos mecanismos por trás dos benefícios à saúde dos probióticos poderiam ser independentes da viabilidade celular e, em vez disso, poderiam ser mediados por cepas inativadas pelo calor, ou pós-bióticos. Pós-bióticos são definidos como microrganismos inanimados e/ou seus componentes, que conferem benefícios à saúde do hospedeiro. Neste ECR, nos referimos às cepas tratadas pelo calor como pós-bióticos. Foi demonstrado que os pós-bióticos apresentam algumas vantagens sobre os probióticos vivos em termos de estabilidade, segurança, maior vida útil e melhor padronização. Resultados do primeiro ensaio clínico randomizado e controlado por placebo do pós-biótico Bifidobacterium bifidum MIMBb75 demonstraram alívio dos sintomas da SII em um ambiente da vida real, e o ensaio atingiu seu desfecho primário composto. No entanto, os ECRs sobre pós-bióticos e SII são limitados, e mais pesquisas são necessárias nessa área.
O objetivo deste estudo foi determinar a eficácia do probiótico Bifidobacterium longum (ES1) e do pós-biótico tratado pelo calor Bifidobacterium longum ES1 (HT-ES1) na melhora dos sintomas gastrointestinais de participantes com SII-D. A medida de desfecho primário foi a alteração nos escores da Escala de Gravidade de Sintomas da SII (IBS-SSS) e as medidas de desfecho secundário foram as alterações no escore de qualidade de vida, no escore da Escala Numérica de Dor Abdominal (APS-NRS), no escore do Inventário de Ansiedade Traço-Estado para Adultos (STAI-AD) (-S e -T), na consistência das fezes e nos parâmetros de segurança.
Materiais e métodos
Conformidade com os padrões éticos
Estudo conduzido em conformidade com a Declaração de Helsinque e as Diretrizes Éticas Nacionais para Pesquisa Biomédica e em Saúde envolvendo Seres Humanos. O estudo foi registrado no NIH ClinicalTrials.gov (Identificador: NCT05339243) e no Registro de Ensaios Clínicos da Índia (Número de Registro: CTRI/2022/04/041875). O consentimento informado por escrito foi obtido de todos os participantes antes do início dos procedimentos do estudo. Os participantes não estiveram envolvidos no desenho do ensaio, recrutamento ou divulgação. Consideraremos o envolvimento público, se possível, em ensaios futuros.

Intervenção
Este estudo de 3 braços envolveu a administração oral de duas cápsulas uma vez ao dia durante 84 dias (12 semanas). Essas duas intervenções com cápsulas consistiram em Bifidobacterium longum CECT 7347 (ES1) (1×10⁹ unidades formadoras de colônias (UFC)/dia); ou Bifidobacterium longum CECT 7347 tratado termicamente (HT-ES1) (2,5×10⁹ células/dia equivalente a 50 mg/dia quando preparado a partir de um lote pós-biótico a uma concentração de 5×10¹⁰ células/g); ou maltodextrina 250 mg como controle. O pós-biótico é preparado por meio de um método proprietário de tratamento térmico da solução probiótica seguido por uma etapa de secagem, para criar um pó sólido. As cápsulas foram produzidas pela ADM em sua unidade de fabricação em Somerset, Reino Unido.

Todos os três produtos investigacionais eram visualmente idênticos à inspeção, apresentando o mesmo tamanho, cor e peso. Cápsulas idênticas foram embaladas em frascos correspondentes e rotuladas de acordo com o protocolo de cegamento.

Participantes do estudo
Este ensaio foi conduzido na Índia entre abril de 2022 e janeiro de 2023. Um total de 200 participantes saudáveis que atendiam aos seguintes critérios de inclusão foram inscritos; homens ou mulheres com idade ≥18 a ≤65 anos, diagnosticados com SII-D de acordo com os critérios ROME IV e um IBS-SSS ≥175. Detalhes completos dos critérios de inclusão e exclusão estão disponíveis nos Métodos Suplementares (Seção 1).

Desenho do estudo
Um diagrama de fluxo CONSORT ilustrando o progresso através das fases do ensaio clínico.
Um estudo randomizado, duplo-cego, controlado por placebo, de grupos paralelos, multicêntrico, de três braços: Grupo 1: ES1, Grupo 2: HT-ES1 e Grupo 3: placebo. Os participantes foram randomizados em uma proporção de 1:1:1 de acordo com uma lista de randomização bloqueada gerada por computador com um tamanho de bloco de seis usando o software estatístico StatsDirect versão 3.1.17. A alocação foi realizada usando CRFWEB pela Clindox e ocultada. Um diagrama de fluxo CONSORT (Figura 1) e um cronograma de visitas do estudo (Métodos Suplementares (Seção 2)) fornecem mais detalhes sobre o desenho do estudo.

Desfechos de segurança e eficácia
Variáveis de segurança
Pressão arterial, frequência de pulso, parâmetros laboratoriais relacionados à função hepática e renal (ALT, AST, ALP e creatinina) e eventos adversos (EAs)/eventos adversos graves (EAGs) foram registrados ao longo do estudo nos momentos detalhados nos Métodos Suplementares (Seção 2).

Desfechos primários
IBS-SSS
O IBS-SSS é uma ferramenta de avaliação validada internacionalmente, usada para medir a intensidade dos sintomas da SII. O IBS-SSS é um escore composto por dor abdominal, número de dias com dor abdominal, distensão abdominal e satisfação com os hábitos intestinais. Cada medida é avaliada de 0 a 100, com pontuações totais variando de 0 a 500: pontuações entre 75–175 são consideradas leves, 175–300 moderadas e >300 graves (Métodos Suplementares, Seção 3).
Desfechos secundários
Análise de respondedores
Foi realizada uma análise de respondedores para este estudo, com resultados incluindo a porcentagem de respondedores em cada grupo. O IBS-SSS é uma ferramenta validada com critérios padrão para interpretação da gravidade dos sintomas; no entanto, não existe um padrão ouro para interpretação de mudanças no escore. Três abordagens diferentes foram publicadas anteriormente: respondedores do IBS-SSS definidos como participantes que apresentaram uma mudança clinicamente significativa de 50 ou 95 pontos no escore total do IBS-SSS em relação ao valor basal, ou uma mudança de 30% no escore de dor abdominal em relação ao valor basal. A avaliação dos resultados do estudo em relação aos três critérios permitiu compreender melhor a magnitude das mudanças e a relevância dos resultados, independentemente de qual critério fosse aplicado.
Consistência das fezes
A Escala de Forma de Fezes de Bristol (BSFS) foi utilizada para categorizar as fezes dos participantes em tipos, variando do tipo 1 (grumos duros) ao tipo 7 (diarreia líquida). Os tipos 6 e 7 da escala de Bristol são categorizados como fezes soltas ou líquidas, e os tipos 3, 4 e 5 são considerados fezes normais. A BSFS foi registrada em pontos de tempo pré-determinados ao longo do estudo (Métodos Suplementares, Seção 2).
Qualidade de vida
O IBS-QoL é um questionário de qualidade de vida autoaplicável com 34 itens, que avalia o impacto da SII e seu tratamento. Ele contém oito domínios relacionados à doença: disforia, interferência nas atividades, imagem corporal, preocupação com a saúde, evitação alimentar, reação social e questões sexuais e de relacionamento, com cada item avaliado em uma escala de 5 pontos (34–170). Para facilitar a comparação, as pontuações somadas do IBS-QoL foram transformadas em uma escala de 0 a 100, variando de 0 (má qualidade de vida) a 100 (máxima qualidade de vida). A diferença mínima clinicamente importante (DMCI) no IBS-QOL é definida como uma mudança de 10 pontos na pontuação total.
Gravidade da dor abdominal
A Escala Numérica de Avaliação da Dor Abdominal (APS-NRS) de 11 pontos foi utilizada para avaliar a dor abdominal dos participantes, sendo 10 representando a dor mais intensa e 0 representando ausência de dor. O período de recordação para a APS-NRS é de 7 dias, e as pontuações nos dias 28, 56 e 84 são apresentadas como a média das quatro pontuações semanais anteriores à visita do estudo. A DMCI na APS-NRS é uma mudança de 2,2 pontos na pontuação total.
Saúde mental
O Inventário de Ansiedade Estado-Traço para Adultos (STAI-AD) é um questionário de autorrelato de 40 itens usado para avaliar a ansiedade. Existem duas subescalas: a Escala de Ansiedade Estado (STAI-S) (20 itens) avalia o estado atual de ansiedade; e a Escala de Ansiedade Traço (STAI-T) (20 itens) avalia a “propensão à ansiedade”. A faixa de pontuação para cada subteste é de 20 a 80, com uma pontuação mais alta indicando maior ansiedade.
Os participantes forneceram respostas aos seus questionários usando um aplicativo em seus telefones celulares. Cada participante recebeu detalhes da conta que eram protegidos por ID de login e senha, gerados automaticamente apenas para o número de celular pessoal registrado de um participante.
Análise estatística
Os dados de medição (variáveis contínuas) foram submetidos a teste de normalidade usando o teste de Shapiro-Wilk. Todos os dados normais foram analisados usando testes paramétricos, e dados não normais foram analisados usando testes não paramétricos para teste de hipóteses. Para dados contínuos, ANOVA e teste qui-quadrado/exato de Fisher para variáveis categóricas foram usados para comparar os dados demográficos basais entre os grupos. A alteração na pontuação total do IBS-SSS ao final do estudo e em todas as outras visitas desde o início em comparação entre os três grupos foi analisada usando análise de covariância (ANCOVA). O teste post hoc de Dunnett foi usado para comparar os grupos de investigação em relação ao braço controle para determinar quais grupos de investigação eram estatisticamente significativamente diferentes do placebo. A comparação dentro do grupo desde o início até a avaliação pós-início foi feita usando teste t pareado. Mais informações são fornecidas nos Métodos Suplementares (Seção 3). Todas as análises estatísticas foram realizadas na população de intenção de tratar modificada (mITT), que compreendeu todos os pacientes randomizados que receberam pelo menos uma dose do produto de intervenção [n = 64 (ES1), 67 (HT-ES1) e 66 (Placebo)].
Determinação do tamanho da amostra
Para ensaios clínicos piloto que avaliam a viabilidade, um tamanho de amostra entre 24 e 50 tem sido recomendado. Neste ensaio, um total de 225 participantes foram triados. Destes, 200 participantes que atenderam aos critérios de inclusão foram randomizados com uma taxa de desistência prevista de 25% devido à pandemia de COVID-19. Nosso objetivo era ter 150 completadores ao final do ensaio. Os participantes foram randomizados em três grupos na proporção de 1:1:1.
Resultados
Características basais dos participantes do estudo
Demografia dos participantes.
Parâmetro Categorias ES1(N = 65) HT-ES1(N = 68) Placebo(N = 67) Total(N = 200)
Idade (anos) Média (DP) 37.28 (11.04) 34.88 (9.56) 35.73 (11.42) 35.95 (10.68)
Faixa (Mín., Máx.) (19.00, 58.00) (20.00, 58.00) (20.00, 63.00) (19.00, 63.00)
Sexo Feminino 17 (26.15%) 30 (44.12%) 26 (38.81%) 73 (36.50%)
Masculino 48 (73.85%) 38 (55.88%) 41 (61.19%) 127 (63.50%)
IMC (kg/m2) Média (DP) 23.26 (2.86) 22.62 (2.57) 22.29 (2.83) 22.72 (2.77)
Faixa (Mín., Máx.) (17.04, 29.74) (16.14, 29.28) (16.91, 28.13) (16.14, 29.74)
IMC, índice de massa corporal; ES1, Bifidobacterium longum (grupo 1); HT-ES1, Bifidobacterium longum tratado termicamente (grupo 2); kg/m², quilograma por metro quadrado; Máx, máximo; Mín, mínimo; N, número de participantes; DP, desvio padrão.
Os três grupos de intervenção foram comparáveis em relação às características demográficas basais (Tabela 1). Parâmetros basais adicionais e uso de medicação concomitante estão detalhados nas Tabelas S1 e S2. Dos 200 participantes randomizados, 197 completaram o estudo até pelo menos uma visita de acompanhamento (64, 67 e 66 participantes nos grupos ES1, HT-ES1 e placebo, respectivamente) e 194 participantes completaram o estudo até o final (63, 66 e 65 participantes nos grupos ES1, HT-ES1 e placebo, respectivamente).
Pontuação total do IBS-SSS
Mudança na pontuação total média do IBS-SSS nos três grupos nos Dias 28, 56 e 84.
Mudança na pontuação total do IBS-SSS.
Visita Categorias ES1(N = 64) HT-ES1(N = 67) Placebo(N = 66) # valor-p vs. placebo * valor-p vs. basal Basal Média (DP) 291,64 (45,63) 292,12 (43,42) 299,38 (47,05) ES1 0,5219 (T)HT-ES1 0,5550 (T) –– Dia 28 Média (DP) −51,77 (44,00) −61,10 (47,39) −23,45 (31,61) ES1 0,0001 (T)HT-ES1 < 0,0001 (T) ES1 < 0,0001 (T)HT-ES1 < 0,0001 (T)Placebo <0,0001 (T) Dia 56 Média (DP) −99,14 (62,80) −93,42 (58,00) −33,03 (49,04) ES1 < 0,0001 (T)HT-ES1 < 0,0001 (T) ES1 < 0,0001 (T)HT-ES1 < 0,0001 (T)Placebo <0,0001 (T) Dia 84 Média (DP) −173,70 (75,60) −177,60 (79,32) −60,44 (65,50) ES1 < 0,0001 (T)HT-ES1 < 0,0001 (T) ES1 < 0,0001 (T)HT-ES1 < 0,0001 (T)Placebo <0,0001 (T)
Os valores basais (medidos no Dia 0) estão listados. Os Dias 28, 56 e 84 mostram a mudança na pontuação do IBS-SSS em relação ao basal.
*Os valores-p foram calculados usando o teste t pareado (T).

A estimativa da diferença e os valores-p foram calculados usando ANCOVA com tratamento e visita como fatores e basal como covariável vs. Placebo (ajuste de Dunnett).

ES1, Bifidobacterium longum; HT-ES1, Bifidobacterium longum tratado termicamente; IBS-SSS, Escala de Gravidade de Sintomas da Síndrome do Intestino Irritável; N, número de participantes; DP, desvio padrão; vs., versus.
No início do estudo, a pontuação total média do IBS-SSS foi comparável entre os três grupos de intervenção (Placebo: 299,38 [±47,05], ES1: 291,64 [±45,63] (p = 0,5219) e HT-ES1: 292,12 [±43,42] (p = 0,5550)) (Tabela 2). A alteração desde o início na pontuação total do IBS-SSS foi estatisticamente significativa nos grupos ES1 e HT-ES1 em comparação com o grupo placebo nos Dias 28, 56 e 84 (Tabela 2, Figura 2). A maior alteração média desde o início foi observada no Dia 84: (Placebo: −60,44 [±65,50] (p < 0,0001), ES1: −173,70 [±75,60] (p < 0,0001) e HT-ES1: −177,60 [±79,32] (p < 0,0001)) (Figura 2). Isso equivale a uma redução de 60,8% e 59,6% nas pontuações do IBS-SSS desde o início nos grupos HT-ES1 e ES1, respectivamente, em comparação com apenas uma redução de 21,2% no grupo placebo (p < 0,0001). As pontuações totais do IBS-SSS são apresentadas na Figura S1. Em ambos os grupos ES1 e HT-ES1, as pontuações totais do IBS-SSS foram significativamente menores em comparação com o placebo nos Dias 28, 56 e 84.
Em termos de categoria de gravidade da SII, no Dia 84, 46,15% dos participantes no grupo ES1 e 35,29% no grupo HT-ES1 melhoraram da categoria Moderada para Leve. 12,31% dos participantes no ES1 e 19,12% no grupo HT-ES1 melhoraram de SII grave para ausência de sintomas no Dia 84, em comparação com 0% no grupo placebo. O grupo placebo teve 31,34% dos participantes que não apresentaram melhora e permaneceram na categoria de SII moderada após 84 dias (Figura S2).
Análise de respondedores
A porcentagem de respondedores para todos os três critérios no dia 84.
Análise de respondedores desde o início até a conclusão do estudo.
Critérios de análise Visita Respondedores/Não respondedores ES1(N = 64) HT-ES1(N = 67) Placebo(N = 66) Valor-p* Redução de 30% na dor abdominal em relação à pontuação inicial Dia 28 Respondedores N (%) 15 (23,44) 14 (20,90) 2 (3,03) 0,0022 (C) Não respondedores N (%) 49 (76,56) 53 (79,10) 64 (96,97)   Dia 56 Respondedores N (%) 35 (54,69) 37 (55,22) 8 (12,12) <0,0001 (C) Não respondedores N (%) 29 (45,31) 30 (44,78) 58 (87,88)   Dia 84 Respondedores N (%) 58 (90,63) 59 (88,06) 19 (28,79) <0,0001 (C) Não respondedores N (%) 6 (9,38) 8 (11,94) 47 (71,21)   Redução de 50 pontos na pontuação do IBS-SSS em relação ao início Dia 28 Respondedores N (%) 32 (50,00) 37 (55,22) 12 (18,18) <0,0001 (C) Não respondedores N (%) 32 (50,00) 30 (44,78) 54 (81,82)   Dia 56 Respondedores N (%) 52 (81,25) 52 (77,61) 23 (34,85) <0,0001 (C) Não respondedores N (%) 12 (18,75) 15 (22,39) 43 (65,15)   Dia 84 Respondedores N (%) 60 (93,75) 61 (91,04) 31 (46,97) <0,0001 (C) Não respondedores N (%) 4 (6,25) 6 (8,96) 35 (53,03)   Redução de 95 pontos na pontuação do IBS-SSS em relação ao início Dia 28 Respondedores N (%) 11 (17,19) 14 (20,90) 1 (1,52) 0,0022 (C) Não respondedores N (%) 53 (82,81) 53 (79,10) 65 (98,48)   Dia 56 Respondedores N (%) 32 (50,00) 31 (46,27) 5 (7,58) <0,0001 (C) Não respondedores N (%) 32 (50,00) 36 (53,73) 61 (92,42)   Dia 84 Respondedores N (%) 57 (89,06) 59 (88,06) 21 (31,82) <0,0001 (C) Não respondedores N (%) 7 (10,94) 8 (11,94) 45 (68,18)  
As porcentagens (%) foram calculadas usando a contagem representativa do cabeçalho da coluna como denominador.
*Os valores de p foram calculados usando o teste Qui-Quadrado (C).
ES1, Bifidobacterium longum (grupo 1); HT-ES1, Bifidobacterium longum tratado por calor (grupo 2), IBS-SSS, Escala de Gravidade dos Sintomas da Síndrome do Intestino Irritável; N, número de participantes.

O número de respondedores para todos os 3 critérios de análise foi significativamente maior nos grupos ES1 e HT-ES1 em todos os momentos em comparação com o grupo placebo (Tabela 3). No Dia 84, 90,63% dos participantes do grupo ES1 e 88,06% do grupo HT-ES1 relataram uma redução de 30% na dor abdominal em relação aos escores basais, em comparação com apenas 28,79% no grupo placebo. Resultados semelhantes foram observados para redução de 95 pontos nos escores IBS-SSS em relação ao basal, onde a porcentagem de respondedores no grupo ES1 foi de 89,06%, no grupo HT-ES1 88,06% e no grupo placebo 31,82%. No Dia 84 para redução de 50 pontos nos escores IBS-SSS em relação ao basal, a porcentagem de respondedores no grupo ES1 foi de 93,75%, no grupo HT-ES1 91,04% e no grupo placebo 46,97%. Os resultados foram estatisticamente significativos para ES1 e HT-ES1 em comparação com o placebo para todos os três critérios (Tabela 3, Figura 3).

Consistência das fezes
Número médio de dias em que os participantes registraram escores dos tipos 6 e 7 da BSFS.
O registro no clinicaltrials.gov afirma que a medida de desfecho relacionada à consistência das fezes seria a porcentagem da população que atingiu os tipos 3, 4 ou 5 da BSFS. No entanto, devido a um descuido durante o desenvolvimento do formulário de relato de caso (CRF), os dados coletados não podem ser expressos dessa forma. Em vez disso, apresentamos o número médio de dias dos tipos de fezes da BSFS. Após 84 dias, o número médio de dias por semana com tipo de fezes normal foi significativamente maior nos grupos ES1 e HT-ES1 em comparação com o placebo [Placebo: 2,55 (±2,53), ES1: 4,63 (±1,92) (p < 0,0001), HT-ES1: 4,36 (±1,84) (p < 0,0001)]. Ao final do período de intervenção, houve uma redução significativa no número médio de dias em que os participantes tiveram fezes amolecidas (tipo 6 e 7 da BSFS) nos grupos ES1 e HT-ES1 em comparação com o grupo placebo (placebo: −1,46 [±1,99], ES1: −3,52 [±2,05] (p < 0,05), HT-ES: −3,81 [±2,00] (p < 0,05)) (Figura 4). Os dados da BSFS registrados ao longo do estudo podem ser encontrados na Tabela S3.

Qualidade de vida
Mudança na média do escore total do IBS-QoL nos três grupos.
A pontuação total média do IBS-QoL foi comparável entre os três grupos do estudo no início do estudo [Placebo: 62,46 (±18,34), ES1: 64,84 (±19,50) e HT-ES1: 59,99 (±20,23)] (Tabela S4). No Dia 84, a mudança desde o início na pontuação total média do IBS-QoL foi significativa nos grupos de estudo ES1 e HT-ES1 em comparação com o grupo placebo [Placebo: −5,74 (±16,07), ES1: 19,54 (±19,52) (p < 0,0001) e HT-ES1: 24,80 (±21,58) (p < 0,0001)] (Figura 5, Tabela S4). A melhora nas pontuações do IBS-QoL para ES1 e HT-ES1 em comparação com o placebo foi observada já a partir do Dia 28. As pontuações totais médias do IBS-QoL para os três grupos são apresentadas na Figura S3 e mostram melhora significativa em todos os momentos quando comparadas com as pontuações do grupo placebo. A diferença mínima clinicamente importante (DMCI) no IBS-QoL é uma mudança de 10 pontos na pontuação total, e este estudo alcançou um aumento >10 pontos nas pontuações de QoL após 84 dias de suplementação com ES1 e HT-ES1.
Gravidade da dor abdominal
Mudança na pontuação total média da APS-NRS nos três grupos.
As pontuações médias da APS-NRS no início do estudo foram comparáveis entre os grupos: [placebo: 6,48 (±0,86), ES1: 6,49 (±0,91) e HT-ES1: 6,36 (±1,13)]. A mudança média nas pontuações da APS-NRS para cada grupo das semanas 1–4 para as semanas 9–12 é apresentada na Figura 6. A redução na pontuação da APS-NRS nas semanas 9–12 após suplementação com ES1 e HT-ES1 foi significativa em comparação com o placebo [placebo −0,88 (±1,32), ES1: −2,23 (±2,00) (p < 0,0001) e HT-ES1 −2,06 (±1,99) (p < 0,0001)]. Além disso, a pontuação total média da APS-NRS também foi relatada como significativamente diferente nas semanas 1–4, 5–8 e 9–12 nos grupos ES1 e HT-ES1 em comparação com o grupo placebo (Figura S4). A DMCI foi definida como uma mudança de 2,2 pontos na pontuação total e, com base nesse critério, a porcentagem de respondedores para cada grupo nas semanas 9–12 foi a seguinte: ES1: 53,13%, HT-ES1: 47,76% e placebo 16,67% (p < 0,0001).
Saúde mental
Pontuação média do STAI-AD.
As pontuações médias do STAI-AD (S-Anxiety e T-Anxiety) no início do estudo foram comparáveis entre os grupos, sem diferenças estatisticamente significativas. Pontuações basais do STAI S-ansiedade [placebo: +28,58 (±4,94), ES1: +28,66 (±4,43), HT-ES1: +29,04 (±4,50)] e pontuações basais do T-ansiedade [placebo: +29,80 (±8,00), ES1: +29,06 (+5,53), HT-ES1: +29,93 (±7,38)]. Os resultados mostraram uma diminuição significativa das pontuações médias do STAI-AD, S-ansiedade e T-ansiedade após suplementação com ES1 e HT-ES1 em comparação com o controle placebo (Figura 7a, b). No Dia 84, as mudanças nas pontuações médias foram: STAI-S [placebo: +2,53 (±6,01), ES1: −2,16 (±4,83) (p < 0,001), HT-ES1: −2,58 (±7,17) (p < 0,001)] e STAI-T [placebo: +1,44 (±5,70), ES1: −1,59 (±5,44) (p < 0,0002), HT-ES1: −3,21 (±6,19) (p < 0,0001)].
Medicação de resgate
Medicação de resgate foi permitida para garantir a segurança e a adesão dos participantes; aqueles que tivessem mais de 5 evacuações por dia podiam usar uma dose de Loperamida por até 3 dias. A Loperamida foi utilizada como medicação de resgate entre os participantes de todos os grupos ao longo do estudo. Houve uma redução significativa no número médio de comprimidos de Loperamida nos grupos ES1 e HT-ES1 em todos os momentos, em comparação com o placebo (Tabela S5). Ao final do estudo, entre os Dias 57–84, o número médio de comprimidos utilizados por participante foi: ES1: 2,19 (±2,93), HT-ES1: 2,43 (±3,06) vs. Placebo: 5,58 (±5,22) (p < 0,0001).

Segurança
Todos os participantes mantiveram níveis estáveis de ALP, AST, ALT e creatinina ao longo do estudo, e não houve alterações médias significativas nos sinais vitais (Tabelas S6 e S7). Além disso, em todos os grupos de tratamento, os EAs foram leves e não houve EAGs relatados (Tabela S8). Um total de 22 participantes em todo o estudo relataram EAs. Destes, sete participantes estavam no grupo HT-ES, nove no ES1 e seis no grupo placebo.

Discussão
Este estudo investigou a eficácia do probiótico Bifidobacterium longum (ES1) e do pós-biótico Bifidobacterium longum ES1 tratado termicamente (HT-ES1) na melhora dos sintomas gastrointestinais de participantes com SII-D. O estudo atingiu seu desfecho primário e demonstrou que houve uma redução significativa nos escores do IBS-SSS em ambos os grupos de intervenção em comparação com o grupo placebo, e o número de participantes que atingiram a MCID para os escores do IBS-SSS foi significativamente maior em ambos os grupos de intervenção em comparação com o grupo placebo. Além disso, todos os desfechos secundários atingiram significância estatística. O estudo também coletou e analisou amostras fecais para análise metagenômica, cujos resultados serão apresentados em uma publicação subsequente.
Resultados semelhantes aos observados neste estudo foram encontrados em um estudo de quatro semanas utilizando o probiótico Bifidobacterium infantis 35624 em mulheres com SII. Os efeitos positivos do probiótico Bifidobacterium infantis 35624 foram confirmados posteriormente em um estudo subsequente, menor, de oito semanas com 77 pacientes com SII. Até o momento, há apenas um pequeno número de estudos investigando o papel dos pós-bióticos do gênero Bifidobacterium na SII, incluindo um ECR de oito semanas realizado em 443 pacientes com SII. Os resultados deste estudo demonstraram que o Bifidobacterium bifidum MIMBb75 inativado por calor aliviou substancialmente os sintomas da SII. Coletivamente, esses estudos destacam os benefícios das espécies probióticas e pós-bióticas de Bifidobacterium na SII; no entanto, nenhum desses estudos investigou o efeito em subtipos específicos de SII. Embora tenham havido vários ECRs focados no uso de probióticos multicepas na SII-D, este estudo é o primeiro a focar especificamente em um probiótico e pós-biótico de cepa única na SII-D. Os resultados do desfecho primário demonstram uma redução significativa de mais de 170 pontos nos escores do IBS-SSS em ambos os grupos de intervenção (ES1 e HT-ES1) após 84 dias de suplementação, em comparação com uma redução de 60,44 pontos no grupo placebo. Resultados semelhantes a estes foram observados anteriormente em um ECR utilizando uma formulação probiótica multicepas (Bio-Kult®), com uma redução de 223 pontos nos escores do IBS-SSS no grupo de tratamento em comparação com a linha de base. No entanto, a combinação de um grande tamanho de efeito e a novidade de ter resultados positivos tanto de um probiótico quanto de um pós-biótico da mesma cepa tornam este estudo altamente significativo.
A avaliação dos desfechos secundários confirmou ainda os efeitos positivos de ES1 e HT-ES1. A consistência das fezes melhorou ao longo do estudo, com os participantes dos grupos ES1 e HT-ES1 apresentando, em média, 5–6 dias de fezes soltas na linha de base, o que diminuiu para uma média de 1–2 dias por semana no Dia 84. Da mesma forma, o número de dias por semana com tipo de fezes normal, conforme definido pelos tipos 3, 4, 5 da BSFS, aumentou de 1,45 e 0,95 dias na linha de base para 4,63 e 4,36 dias ao final do estudo nos grupos ES1 e HT-ES1, respectivamente.
Houve uma melhora significativa nos escores do IBS-QoL nos grupos ES1 e HT-ES1 em comparação com o grupo placebo, incluindo uma melhora significativa na QoL para participantes com SII moderada a grave. Além disso, a dor abdominal foi significativamente reduzida em todos os momentos nos grupos ES1 e HT-ES1 em comparação com o grupo placebo. A média do escore STAI-AD (Ansiedade-Estado e Ansiedade-Traço) também mostrou reduções significativas nos grupos ES1 e HT-ES1 em comparação com o grupo placebo, indicando uma diminuição nos sintomas de ansiedade. No entanto, esses resultados devem ser interpretados com a compreensão de que essa população não apresentava níveis significativos de ansiedade na linha de base; portanto, embora estatisticamente significativos, a relevância clínica desses achados pode estar aberta a interpretação.
Finalmente, a incidência de EAs registrada neste estudo foi baixa e não houve EAGs relatados em nenhum dos braços do estudo. Além disso, não foram identificadas anormalidades significativas em nenhum dos exames de sangue ou sinais vitais. Considerando esses achados, a suplementação com ES1 e HT-ES1 mostrou-se segura e bem tolerada.
Deve-se notar que um artigo publicado anteriormente examinou o efeito do probiótico vivo ES1 nos níveis séricos de zonulina e nos perfis de citocinas em adultos com SII-D. Este ensaio anterior com ES1, embora em uma população semelhante, difere consideravelmente dos principais resultados aqui apresentados: os dados aqui foram gerados usando ferramentas padrão-ouro para avaliar a gravidade dos sintomas da SII, dor abdominal, qualidade de vida e ansiedade, e também inclui o pós-biótico HT-ES1, que estava ausente no trabalho realizado por Caviglia e colegas.
Os pontos fortes notáveis deste estudo incluem o rigoroso desenho do estudo e a duração da intervenção/acompanhamento. As limitações/qualificações a serem observadas são, em primeiro lugar, que, embora este tenha sido um ECR multicêntrico, todos os locais do estudo estavam no mesmo país, e as práticas de manejo da SII e os hábitos alimentares podem variar em comparação com outras partes do mundo. Dito isso, uma revisão recente que examinou a epidemiologia da SII na Índia, Bangladesh e Malásia observou que as diferenças nas taxas de prevalência da SII em populações orientais e ocidentais podem ser atribuídas a diferenças nos métodos de avaliação. Em nosso ensaio clínico, usamos os critérios diagnósticos ROME IV, que são consistentes com os padrões da prática clínica na Europa. Essa escolha ajudou a mitigar algumas fontes potenciais de variabilidade. Em segundo lugar, a dieta não foi padronizada durante o ensaio, sendo assim possível que o consumo de certos alimentos na dieta dos participantes pudesse ter afetado os sintomas da SII, independentemente de fatores de intervenção, como maior consumo de fibras alimentares, taxas diferentes de má absorção de lactose, prevalência de parasitoses, SII pós-infecciosa, bem como a predominância de populações rurais em comparação com ensaios ocidentais de SII, podendo potencialmente ter um impacto que não pode ser facilmente quantificado em um estudo deste porte. Em terceiro lugar, nem o IBS-SSS nem o IBS-QoL avaliam especificamente a urgência, e nenhuma ferramenta adicional foi usada para focar nesse aspecto, embora indiretamente qualquer impacto na urgência seria medido pela mudança nos escores do IBS-QoL, onde várias perguntas estão ligadas a questões de urgência. Por último, os dados mecanicistas coletados neste ensaio são essencialmente limitados a análises metagenômicas fecais, cujos resultados serão apresentados em uma publicação separada. Em qualquer estudo futuro, será essencial examinar uma gama mais ampla de desfechos mecanicistas – como o papel do sistema imunológico, especialmente relevante dados os resultados aqui observados no grupo pós-biótico. No entanto, até onde sabemos, este é o primeiro ECR a demonstrar que a mesma cepa de Bifidobacterium longum, tanto na forma de probiótico vivo quanto na forma de pós-biótico tratado termicamente, é eficaz na redução da gravidade dos sintomas em adultos com SII-D, destacando o potencial de uso desses pró e pós-bióticos nessa população.

Embora não tenha sido desenhado como um ensaio mecanicista, estudos como este ainda podem auxiliar na nossa compreensão dos potenciais mecanismos de ação. Está bem documentado que os probióticos, e especificamente as Bifidobactérias, são conhecidos por ajudar a restaurar a microbiota intestinal, competindo com bactérias nocivas e melhorando o crescimento de micróbios benéficos.
Mas uma descoberta particularmente interessante deste estudo é que tanto o grupo probiótico quanto o pós-biótico relataram um efeito positivo nos níveis de ansiedade. Portanto, propõe-se que a suplementação com esta cepa pode ter influenciado o chamado eixo intestino-cérebro. Há um crescente corpo de evidências demonstrando o impacto de vários probióticos na modulação de neurotransmissores como a serotonina e o ácido gama-aminobutírico (GABA). Esses compostos estão envolvidos na motilidade intestinal, sensação e regulação do humor, fornecendo uma direção futura interessante para a pesquisa sobre o microbioma e a SII.
Conclusão
Os resultados demonstraram que ES1 e HT-ES1 foram seguros e bem tolerados. O desfecho primário foi alcançado e tanto ES1 quanto HT-ES1 mostraram-se eficazes na redução da gravidade dos sintomas da SII, conforme medido pelo IBS-SSS. O estudo também atingiu seus desfechos secundários relacionados às taxas de resposta, consistência das fezes, QV, gravidade da dor abdominal e ansiedade, quando comparado ao placebo durante o período de intervenção de 84 dias. No geral, esses resultados demonstram que tanto ES1 quanto HT-ES1 são fortes candidatos para pesquisas adicionais sobre SII, com futuros ensaios abordando algumas das limitações deste estudo, incluindo a realização de ECRs em outras localizações geográficas, o controle de fatores de confusão dietéticos e a exploração adicional de potenciais mecanismos de ação.
Material Suplementar
Contribuições dos autores
Conceito e desenho do estudo: MN, RD, SS, UB Análise de dados: SK Redação do manuscrito: VV, RD Revisão do manuscrito: Todos os autores.Investigadores do local do estudo: RP, JP, RRD, SK, AP, PSJ, SM, AK.
Declaração de divulgação
Este estudo foi financiado pela ADM. RD, MN e VV são funcionários da ADM, mas não estiveram envolvidos na condução do estudo, no gerenciamento de dados ou na análise estatística.
Declaração de disponibilidade de dados
Os dados que suportam as conclusões deste estudo estão disponíveis com o autor correspondente, RD, mediante solicitação razoável.
Material suplementar
Os dados suplementares para este artigo podem ser acessados online em https://doi.org/10.1080/19490976.2024.2338322
Referências
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