pmid: "27483289"
title: "Ativação Diferencial de Canais TRP na Substância Gelatinosa da Medula Espinhal de Ratos Adultos por Estereoisômeros de Produtos Químicos Derivados de Plantas."
authors: "Kumamoto E, Fujita T"
journal: "Pharmaceuticals (Basel, Switzerland)"
pubdate: "2016 Jul 28"
doi: "10.3390/ph9030046"
source: "PMC Full Text"

Ativação Diferencial de Canais TRP na Substância Gelatinosa da Medula Espinhal de Ratos Adultos por Estereoisômeros de Produtos Químicos Derivados de Plantas.

Autores

Kumamoto E, Fujita T

Periodico

Pharmaceuticals (Basel, Switzerland) (2016 Jul 28)

Conteudo

Ativação Diferencial de Canais TRP na Substância Gelatinosa da Medula Espinhal de Ratos Adultos por Estereoisômeros de Produtos Químicos Derivados de Plantas

A ativação dos canais TRPV1, TRPA1 ou TRPM8 expressos no terminal central do neurônio do gânglio da raiz dorsal (DRG) aumenta a liberação espontânea de L-glutamato sobre os neurônios da lâmina II do corno dorsal da medula espinhal (substância gelatinosa; SG), que desempenham um papel fundamental na regulação da transmissão nociceptiva. Os canais TRP são ativados por diversos produtos químicos derivados de plantas. Embora os estereoisômeros ativem ou modulem canais iônicos de maneira distinta, esse fenômeno não é totalmente abordado para os canais TRP. Aplicando a técnica de patch-clamp de célula inteira em neurônios da SG de fatias da medula espinhal de ratos adultos, descobrimos que todos os produtos químicos derivados de plantas, carvacrol, timol, carvona e cineol, aumentam a frequência da corrente pós-sináptica excitatória espontânea, uma medida da liberação espontânea de L-glutamato dos terminais nervosos, ao ativar os canais TRP. As atividades pré-sinápticas foram diferentes entre os estereoisômeros (carvacrol e timol; (−)-carvona e (+)-carvona; 1,8-cineol e 1,4-cineol) na extensão ou nos tipos de canais TRP ativados, indicando que os canais TRP na SG são ativados por estereoisômeros de maneira distinta. Este resultado pode servir para conhecer as propriedades dos canais TRP do terminal central que são alvos de medicamentos para alívio da dor.

1. Canais TRP Envolvidos na Transmissão Nociceptiva através de Neurônios do Gânglio da Raiz Dorsal

Canais de potencial receptor transitório (TRP) permeáveis a cátions expressos em neurônios do gânglio da raiz dorsal (DRG) estão envolvidos na transmissão nociceptiva da periferia (para uma revisão, veja). Os canais TRP, que são sintetizados no corpo celular do neurônio do DRG, são transportados para os terminais periférico e central do neurônio por transporte axonal. Entre os canais TRP envolvidos na transmissão nociceptiva, estão os canais TRP vanilóide-1 (TRPV1), TRP anquirina-1 (TRPA1) e TRP melastatina-8 (TRPM8). O canal TRPA1 é encontrado em um subconjunto de neurônios do DRG de ratos no qual é coexpresso com o TRPV1, mas não com o canal TRPM8. Eles são ativados por substâncias químicas e temperatura (para revisões, veja). Por exemplo, no terminal periférico do neurônio do DRG, o canal TRPV1 é ativado por capsaicina (um ingrediente pungente natural contido em pimentas vermelhas), prótons e calor nocivo (>43 °C; para revisão, veja); o canal TRPA1 por compostos pungentes em mostarda, canela e alho (isotiocianato de alila (AITC), cinamaldeído e alicina, respectivamente), e temperatura fria nociva (<17 °C); e o canal TRPM8 por mentol (um álcool secundário contido em hortelã-pimenta ou outra menta) e temperatura amena (<25 °C). Tal ativação despolariza a membrana do terminal periférico, resultando na produção de potenciais de ação. Como resultado, a informação nociceptiva ou de temperatura é transferida para o corno dorsal da medula espinhal.
Por outro lado, os canais TRP no terminal central do neurônio DRG são expressos nas lâminas superficiais do corno dorsal, especialmente na substância gelatinosa (SG; lâmina II de Rexed). Em apoio a essa ideia sobre a ativação de TRP na SG, muitos produtos químicos derivados de plantas aumentam nos neurônios da SG a frequência da corrente excitatória pós-sináptica espontânea (sEPSC), uma medida da liberação espontânea de L-glutamato dos terminais nervosos, ativando o canal TRPV1, o canal TRPA1 e o canal TRPM8 (; para uma revisão, veja). Os neurônios da SG desempenham um papel fundamental na modulação da transmissão nociceptiva da periferia e, portanto, os canais TRP na SG estão envolvidos em sua modulação. Suas expressões na SG foram demonstradas por imuno-histoquímica.

2. Substância Gelatinosa Espinhal Envolvida na Regulação da Transmissão Nociceptiva

A transmissão nociceptiva na SG é, em origem, não apenas monossináptica a partir de neurônios DRG glutamatérgicos, mas também polissináptica a partir de interneurônios contendo glutamato, GABA e/ou glicina. Em apoio ao envolvimento da SG na transmissão nociceptiva, uma mudança plástica nas entradas glutamatérgicas para os neurônios da SG através de neurônios DRG ocorreu em ratos hiperalgésicos que foram submetidos a uma injeção intraplantar de adjuvante completo de Freund ou à ovariectomia. Analgésicos endógenos e exógenos, que exibem antinocicepção quando administrados por via intratecal, hiperpolarizam as membranas dos neurônios da SG e reduzem a liberação de L-glutamato sobre os neurônios da SG a partir dos terminais nervosos, ambas as ações reduzem a excitabilidade da membrana dos neurônios da SG. Por exemplo, opioides (; para uma revisão, veja), nociceptina, um agonista do receptor GABAB baclofeno, um agonista do receptor μ-opioide tramadol, norepinefrina, serotonina, adenosina (; para uma revisão, veja), somatostatina, dopamina e galanina hiperpolarizaram as membranas dos neurônios da SG de ratos. A inibição da liberação de L-glutamato dos terminais nervosos sobre os neurônios da SG de ratos foi produzida por opioides (; para uma revisão, veja), nociceptina, baclofeno, o endocanabinoide anandamida, norepinefrina, serotonina, adenosina (; para uma revisão, veja) e galanina.

3. Canais TRP na Nocicepção
   Muitas evidências demonstram que os canais TRP desempenham um papel na transferência de informações nociceptivas. Por exemplo, a dor neuropática e a hiperalgesia se desenvolveram após a expressão excessiva ou ectópica do canal TRPV1 no sistema nervoso central (SNC) e no sistema nervoso periférico, tanto em animais quanto em humanos. A hiperalgesia em modelos de dor inflamatória foi reduzida em camundongos knockout para TRPV1. O fator de crescimento nervoso, que medeia a dor inflamatória, aumentou a expressão do canal TRPV1 em neurônios do gânglio da raiz dorsal (DRG) de ratos por ação da pequena GTPase Ras. A expressão excessiva do canal TRPV1 em fibras aferentes primárias ocorreu em estados de doença, incluindo doença inflamatória e síndrome do intestino irritável. A inflamação periférica aumentou a expressão do canal TRPV1 envolvido no aumento da transmissão excitatória espontânea em neurônios do SG de ratos. Quando administrada por via intratecal, a resiniferatoxina (RTX, um componente contido no látex seco da planta semelhante a um cacto), um potente agonista do TRPV1, produziu uma resposta antinociceptiva prolongada em cães com câncer ósseo, possivelmente devido a uma dessensibilização do canal TRPV1. A inibição seletiva do canal TRPV1 atenuou a dor do câncer ósseo em camundongos. O canal TRPV1, que é um potencial alvo de tratamento para a dor oncológica, foi expresso em neurônios que transferem informações desse tipo de dor (para uma revisão, veja). A aplicação intratecal de um antagonista do TRPV1, AS1928370, resultou na inibição da alodinia mecânica em um modelo de camundongo de dor neuropática.
   O agonista do TRPA1, cinamaldeído, evocou dor espontânea e induziu hiperalgesia mecânica e hipoalgesia ao frio após sua aplicação na pele do antebraço de voluntários humanos. Além disso, o canal TRPA1 foi superexpresso em neurônios do DRG de ratos após inflamação periférica e lesão nervosa, e a hiperalgesia ao frio produzida por inflamação e lesão nervosa foi acompanhada pela ativação do canal TRPA1, mas não do canal TRPM8. Alternativamente, o canal TRPA1 foi expresso excessivamente na medula espinhal e no DRG de camundongos após a ocorrência de inflamação periférica como resultado da injeção intraplantar de adjuvante completo de Freund; o antagonista do TRPA1 aplicado por via intratecal reverteu a hiperalgesia que ocorreu em modelos de camundongos de dor neuropática.
   O canal TRPM8 também está envolvido na transmissão nociceptiva. Proudfoot et al. propuseram a ideia de que a ativação do TRPM8 tanto nos terminais periféricos quanto centrais de neurônios do DRG de ratos adultos produz a liberação de L-glutamato de seu terminal central em neurônios do corno dorsal que expressam receptores metabotrópicos de glutamato do grupo II/III, cuja ativação resulta em antinocicepção. Em modelos de ratos com lesão nervosa constritiva crônica, que exibiam alodinia ao frio nos membros posteriores, em comparação com o grupo sham, o número de neurônios do DRG imunorreativos ao TRPM8 aumentou, o número de neurônios do DRG sensíveis ao mentol aumentou entre os neurônios que respondiam à capsaicina, e as correntes de membrana produzidas pelo mentol nos neurônios do DRG tiveram sua amplitude aumentada. Kono et al. sugeriram o envolvimento do canal TRPM8 na hipersensibilidade periférica aguda ao frio em pacientes com câncer tratados com oxaliplatina (um análogo de platina de terceira geração). Em camundongos adultos, o (−)-mentol e seu derivado WS-12 (que ativam o canal TRPM8 em neurônios do DRG) inibiram o comportamento nociceptivo agudo induzido por estímulo térmico, capsaicina e acroleína, de maneira sensível ao antagonista não seletivo do receptor opioide naloxona, sugerindo o envolvimento de opioides endógenos na antinocicepção produzida pela ativação do TRPM8.
   Em conclusão, os efeitos da ativação dos canais TRPV1, TRPA1 ou TRPM8 na transmissão nociceptiva parecem depender da localização dos canais TRP ativados, ou seja, do terminal periférico ou central do neurônio do DRG, ou de ambos. Quando fármacos antinociceptivos são administrados por via intratecal, seria necessário considerar a ativação de canais TRP localizados não apenas no terminal central da aferência primária, mas também em células neuronais e gliais no SNC, pois suas expressões no SNC foram relatadas.
4. Ações de Estereoisômeros Derivados de Plantas na Transmissão Excitatória Espontânea em Neurônios da Substância Gelatinosa
   É bem conhecido que existe uma diferença entre estereoisômeros em suas ações sobre canais iônicos dependentes de voltagem e receptores de neurotransmissores (ver revisões). A ativação do canal TRPA1 expresso em células de ovário de hamster chinês difere em eficácia entre estereoisômeros como (+)-mentol e (−)-mentol. Para saber se tal diferença entre estereoisômeros é observada na SG, examinamos as ações de estereoisômeros derivados de plantas na transmissão excitatória espontânea em neurônios da SG, com foco na ativação de TRP, utilizando preparações de fatias transversais dissecadas da medula espinhal de ratos adultos.
   4.1. Ações do Timol e do Carvacrol
   Timol (5-metil-2-isopropilfenol, um composto onde o anel cicloexano do mentol é substituído por um anel benzeno) difere apenas na posição do -OH no anel benzeno do carvacrol (5-isopropil-2-metilfenol; Figura 1A,B). O timol e o carvacrol estão contidos no tomilho e no orégano, respectivamente, e exibem antinocicepção. Em todos os neurônios do SG testados, a aplicação em banho de timol (1 mM) por 3 min aumentou a frequência das sEPSC com um pequeno aumento em sua amplitude. O aumento médio da frequência das sEPSC foi de 326% por volta de 5 min (quando um efeito máximo foi obtido) após o início da superfusão com timol. Tal aumento na frequência das sEPSC foi dependente da concentração, com um valor de concentração efetiva média (EC50) de 0,18 mM (Figura 1C). Em 77% dos neurônios testados, o timol (1 mM) produziu uma corrente de saída com amplitude média de pico de 16 pA no VH de −70 mV (ver Figura 1E); os neurônios restantes não apresentaram correntes de saída.
   O carvacrol exibiu ações semelhantes às do timol. Em 22% dos neurônios do SG testados, o carvacrol (1 mM) superfundido por 2 min produziu uma corrente de saída, que não foi acompanhada por uma alteração na frequência das sEPSC, a −70 mV. Por outro lado, 11% dos neurônios do SG não apresentaram alteração nas correntes de manutenção, enquanto exibiram aumento na frequência das sEPSC (ver Figura 1Fa). Em 63% dos neurônios, tanto a corrente de saída quanto o aumento na frequência das sEPSC foram produzidos.
   O aumento da frequência de sEPSC por volta de 3,5 min (quando um efeito máximo foi obtido) após o início da superfusão com carvacrol foi, em média, de 262%, com um pequeno aumento em sua amplitude, e a corrente de saída teve amplitude média de pico de 26 pA. Esse aumento na frequência de sEPSC foi dependente da concentração, com valor de EC50 de 0,69 mM (Figura 1D), um valor maior que o do timol. O timol tem a capacidade de ativar os canais TRP vanilóide-3 (TRPV3), TRPA1 e TRPM8 expressos em células heterólogas. Por outro lado, foi relatado que o carvacrol ativa os canais TRPV3 e TRPA1, mas não o canal TRPV1, expressos em células embrionárias de rim humano (HEK) ou oócitos de Xenopus laevis. Em seguida, examinamos quais tipos de canais TRP medeiam os aumentos na frequência de sEPSC produzidos pelo timol e carvacrol. A atividade do timol foi inibida por um antagonista de TRPA1, HC-030031 (50 μM), mas não por um antagonista de TRPV1, capsazepina (10 μM), e um antagonista de TRPM8 (4-(3-cloro-2-piridinil)-N-[4-(1,1-dimetil-etil)fenil]-1-piperazinacarboxamida, BCTC, 3 μM; Figura 1E). O BCTC nessa concentração foi eficaz em inibir o aumento da frequência de sEPSC produzido pelo mentol em neurônios do SG de ratos adultos. Assim como o timol, a atividade do carvacrol foi resistente à capsazepina (10 μM), enquanto foi suprimida pelo HC-030031 (50 μM; Figura 1F). Esses resultados indicam o envolvimento do canal TRPA1 nas atividades pré-sinápticas do timol e carvacrol. Diferentemente dessas ações pré-sinápticas, as correntes de saída produzidas pelo timol e carvacrol foram insensíveis à capsazepina (10 μM), BCTC (3 μM) e HC-030031 (50 μM), indicando nenhum envolvimento dos canais TRP (; por exemplo, veja Figura 1E). A corrente do carvacrol foi inibida em solução de Krebs com 10 mM de K+, mas não na presença de bloqueadores de canais de K+ (5 mM de tetraetilamônio e 0,1 mM de Ba2+) e com 11,0 mM de Cl−, indicando o envolvimento de canais de K+ insensíveis ao tetraetilamônio e ao Ba2+. Permanece a ser examinado quais tipos de canais iônicos estão envolvidos na corrente do timol.
   4.2. Ações da (−)-Carvona e (+)-Carvona
   (-)-Carvona [(-)-2-metil-5-(1-metiletenil)-2-cicloexenona; Figura 2A] presente na hortelã-verde aumentou a concentração intracelular de Ca2+ em neurônios de DRG de rato de maneira sensível à capsazepina, indicando envolvimento do canal TRPV1. Uma ação similar da (-)-carvona foi observada em células HEK293 expressando o canal TRPV1 humano. A (+)-carvona (um estereoisômero da (-)-carvona; Figura 2B) presente no cominho mostrou ter ações diferentes das da (-)-carvona nas atividades locomotora e anticonvulsivante em camundongos. Examinamos os efeitos da (-)-carvona e da (+)-carvona na transmissão excitatória espontânea glutamatérgica com foco na ativação de TRP. (-)-Carvona e (+)-carvona (cada 1 mM) superfundidas por 2 min aumentaram a frequência de sEPSC com um ligeiro aumento em sua amplitude. Seus aumentos de frequência de sEPSC tiveram média de 299% e 284%, respectivamente, cerca de 3 min (quando um efeito máximo foi obtido) após o início da superfusão. Tais atividades pré-sinápticas da (-)-carvona e da (+)-carvona foram dependentes da concentração com valores de EC50 de 0,70 mM e 0,72 mM, respectivamente (Figura 2C,D).

(-)-Carvona e (+)-carvona (cada 1 mM) não produziram correntes de saída, ao contrário do timol e do carvacrol. Cerca de 40% dos neurônios do SG testados produziram uma pequena corrente de entrada após a aplicação de (-)-carvona ou (+)-carvona, como observado por muitos tipos de agonistas de TRPV1 (capsaicina e RTX) e agonistas de TRPA1 (AITC, cinamaldeído e alicina).

O aumento da frequência de sEPSC produzido pela (-)-carvona foi resistente ao HC-030031 (50 μM) enquanto foi inibido pela capsazepina (10 μM; Figura 2Ea,b). Por outro lado, o aumento da frequência de sEPSC produzido pela (+)-carvona foi inibido pelo HC-030031 (50 μM) enquanto foi resistente à capsazepina (10 μM; Figura 2Fa,b). Esses resultados indicam que a (-)-carvona e a (+)-carvona ativam os canais TRPV1 e TRPA1, respectivamente, no SG.

4.3. Ações do 1,8-Cineol e do 1,4-Cineol
1,8-Cineol (1,3,3-trimetil-2-oxabiciclo[2.2.2]octano; Figura 3A), presente no eucalipto e no alecrim, tem várias ações, incluindo antinocicepção. Como um componente menor de extratos vegetais contendo 1,8-cineol, existe seu estereoisômero 1,4-cineol (1-metil-4-(1-metiletil)-7-oxabiciclo[2.2.1]heptano; Figura 3B), que possui em espécies vegetais uma ação diferente da do 1,8-cineol.
1,8-Cineol e 1,4-cineol têm a capacidade de ativar o canal TRPM8 expresso heterologamente em oócitos de Xenopus ou células HEK293, embora suas eficácias sejam muito menores do que a do agonista de TRPM8 mentol. Examinamos os efeitos de 1,8-cineol e 1,4-cineol na transmissão excitatória espontânea glutamatérgica com foco na ativação de TRP. Assim como com (−)-carvona e (+)-carvona, a aplicação em banho de 1,8-cineol e 1,4-cineol por 3 min aumentou a frequência de sEPSC com um pequeno aumento em sua amplitude. Os aumentos na frequência de sEPSC produzidos por 1,8-cineol e 1,4-cineol (5 mM e 0,5 mM, respectivamente) foram em média de 159% e 226%, respectivamente, por volta de 3,5 min (quando um efeito máximo foi obtido) após o início de sua superfusão. Tais ações pré-sinápticas de 1,8-cineol e 1,4-cineol foram dependentes da concentração, com valores de EC50 de 3,2 mM e 0,42 mM, respectivamente (Figura 3C,D).

As atividades pré-sinápticas de 1,8-cineol e 1,4-cineol não foram acompanhadas pela produção de corrente de saída, ao contrário das de timol e carvacrol. Assim como muitos tipos de agonistas de TRPV1 e TRPA1, incluindo (−)-carvona e (+)-carvona, 1,8-cineol e 1,4-cineol produziram uma pequena corrente de entrada (Figura 3E,F).

A ação pré-sináptica de 1,8-cineol foi inibida por HC-030031 (50 μM) e outro antagonista de TRPA1, mecamylamine (100 μM; que também é conhecido por ser um antagonista do receptor nicotínico de acetilcolina), enquanto foi resistente a capsazepina (10 μM) e outro antagonista de TRPV1, SB-366791 (30 μM; Figura 3Ea–d). Por outro lado, a ação de 1,4-cineol foi reduzida por capsazepina (10 μM) e SB-366791 (30 μM), enquanto foi insensível a HC-030031 (50 μM) e mecamylamine (100 μM; Figura 3Fa–d). BCTC (3 μM) não afetou as atividades de 1,8-cineol e 1,4-cineol (Figura 3Ee,Fe). Esses resultados indicam que 1,8-cineol e 1,4-cineol ativam os canais TRPA1 e TRPV1, respectivamente, na SG.

5. Ativação por Estereoisômeros Derivados de Plantas de Canais TRP na Substância Gelatinosa de Maneira Diferente

Timol e carvacrol, que diferem apenas na posição do -OH no anel benzênico (Figura 1A,B), ativaram o canal TRPA1 com valores de EC50 que diferem quatro vezes entre si. Isômeros ópticos, (–)-carvona e (+)-carvona (Figura 2A,B), ativaram os canais TRPV1 e TRPA1, respectivamente, com valores de EC50 quase idênticos. 1,8-Cineol e 1,4-cineol, que diferem na posição da ponte de oxigênio (Figura 3A,B; onde há uma cadeia lateral dimetílica livre em 1,4-cineol, mas não em 1,8-cineol), ativaram os canais TRPA1 e TRPV1, respectivamente, com valores de EC50 oito vezes diferentes entre si. As ativações de TRPV1 e TRPA1 resultaram em um aumento na liberação espontânea de l-glutamato de terminais nervosos para neurônios da SG. Esses resultados indicam que os canais TRP na SG têm a capacidade de discriminar estereoisômeros derivados de plantas uns dos outros.
Os estereoisômeros mencionados neste artigo de revisão não são endógenos e não atuam nos canais TRP localizados nos terminais centrais dos neurônios do gânglio da raiz dorsal (DRG) em condições fisiológicas. Existem vários candidatos a substâncias endógenas que ativam os canais TRP. Por exemplo, agonistas endógenos para o canal TRPV1 incluem endocanabinoides, como a anandamida e metabólitos da lipoxigenase, que possuem estruturas semelhantes à da capsaicina, a qual não é produzida endogenamente (; para revisões, veja). O canal TRPV1 na substância gelatinosa (SG) não pareceu ser ativado pela anandamida, enquanto o inibidor do transporte de anandamida, AM404, ativou o canal TRPV1 na SG. Como candidatos a ativadores endógenos do TRPA1, há um inibidor potente e sistemicamente ativo da hidrolase de amidas de ácidos graxos, o 3′-carbamoilbifenil-3-il ciclohexilcarbamato (URB597), um metabólito da prostaglandina D2 do ciclopentano (15-desoxi-Δ12,14-prostaglandina J2) ou a bradicinina. Até onde sabemos, agonistas endógenos para o canal TRPM8 não parecem ter sido identificados com certeza. A testosterona (um hormônio esteroide do grupo androgênico) foi recentemente relatada como ativadora do canal TRPM8. Embora estereoisômeros endógenos para ativação de TRP não pareçam estar disponíveis, nossas descobertas sobre estereoisômeros podem servir para conhecer as propriedades dos canais TRP dos terminais centrais.

Muitas das propriedades dos canais TRP foram examinadas no corpo celular do neurônio aferente primário e em células heterólogas que expressam os canais TRP. Descobrimos que um anestésico local, a lidocaína, que atua no canal TRPV1 e, em menor grau, no canal TRPA1 no corpo celular do neurônio aferente primário, ativa o canal TRPA1, mas não o TRPV1, em seu terminal central. O canal TRPV1 do terminal central foi ativado pela piperina (um componente pungente da pimenta-do-reino), mas não pelo olvanil (o análogo sintético do ácido oleico da capsaicina), sendo que ambos os compostos ativaram o canal TRPV1 no corpo celular do neurônio aferente primário. Compostos vaniloides, como o eugenol (presente no cravo-da-índia) e a zingerona (um componente pungente do gengibre), que supostamente ativam o canal TRPV1 no corpo celular do neurônio aferente primário, mostraram ativar o canal TRPA1 do terminal central, mas não o TRPV1. Com base nessas descobertas, propusemos a ideia de que os canais TRP localizados no corpo celular e no terminal central do neurônio aferente primário possuem propriedades diferentes entre si. Tal diferença pode ser devida a uma distinção entre os canais TRPA1 do corpo celular e do terminal central em termos de uma interação funcional do canal TRPA1 com o receptor Toll-like 7 (; veja para outras possibilidades). Resta examinar se os canais TRP no corpo celular do neurônio do DRG são ativados por estereoisômeros derivados de plantas de maneira distinta.
O canal TRPA1 no terminal central do neurônio do DRG na SG é ativado por muitos produtos químicos derivados de plantas. Muito recentemente, relatamos que o citral, uma mistura de geranial e neral, contido no capim-limão, ativa o canal TRPA1 na SG. A Tabela 1 resume os valores disponíveis de EC50 para produtos químicos derivados de plantas na ativação dos canais TRPV1 e TRPA1 na SG de ratos adultos. Sua sequência de eficácia para a ativação do TRPA1 foi timol (EC50 = 0,18 mM) > citral (0,58 mM) ≥ carvacrol (0,69 mM) ≥ (+)-carvona (0,72 mM) > zingerona (1,3 mM) > 1,8-cineol (3,2 mM) ≥ eugenol (3,8 mM). Esse resultado poderia servir para conhecer a propriedade do canal TRPA1 do terminal central, que é um alvo de medicamentos para alívio da dor, juntamente com os resultados mencionados acima sobre estereoisômeros.
A ativação do TRP na SG é geralmente considerada envolvida na nocicepção, pois o aumento da liberação espontânea de L-glutamato dos terminais nervosos para os neurônios da SG, como resultado da ativação do TRP, aumenta a excitabilidade dos neurônios da SG, uma ação diferente daquela das substâncias analgésicas (ver Seção 2). No entanto, a antinocicepção produzida pela administração intratecal de paracetamol tem sido atribuída à ativação do TRPA1 no corno dorsal superficial da medula espinhal. O AITC inibiu as respostas de corrente registradas de neurônios da SG usando a técnica de patch-clamp in vivo em resposta a estímulos de pinça aplicados na pele. Ainda precisa ser investigado se a ativação do TRPA1 na SG resulta em nocicepção ou antinocicepção.
Embora o presente artigo de revisão mencione as ações de estereoisômeros derivados de plantas sobre a transmissão excitatória, a regulação da transmissão nociceptiva no SG deve-se à modulação não apenas das transmissões excitatórias, mas também das inibitórias GABAérgicas e/ou glicinérgicas. É possível que a modulação da transmissão inibitória pela ativação de TRP esteja envolvida na transmissão nociceptiva. Há muitas evidências que apoiam a ideia de que o aumento da transmissão inibitória no corno dorsal da medula espinhal resulta em antinocicepção. Primeiro, a falta da enzima sintetizadora de GABA e também a redução na expressão do exportador de K+-Cl− KCC2, que faz com que a resposta sináptica inibitória se torne excitatória, no corno dorsal da medula espinhal de ratos levou à nocicepção. Segundo, a inflamação periférica resultou em uma redução da transmissão glicinérgica em neurônios da lâmina I espinhal de ratos. Terceiro, um aumento na glicina endógena devido ao bloqueio do transportador de glicina-1 produziu um efeito inibitório na transmissão nociceptiva espinhal (; para revisões, veja). Quarto, os analgésicos endógenos, acetilcolina, norepinefrina e serotonina, aumentaram as transmissões inibitórias GABAérgicas e glicinérgicas. Parece depender dos agonistas usados para ativar os canais TRP como a ativação de TRP afeta a transmissão inibitória espontânea em neurônios do SG. AITC e zingerona aumentaram a transmissão inibitória, enquanto capsaicina e cinamaldeído não. Resta examinar como os estereoisômeros derivados de plantas afetam a transmissão inibitória espontânea.
A coceira é parcialmente semelhante à dor na via neuronal e nos receptores envolvidos, embora sejam distintos entre si em muitos pontos das transmissões neuronais. Há muitas evidências que apoiam a ideia de que os canais TRPV1 e TRPA1 estão envolvidos na coceira. Por exemplo, uma aplicação tópica de capsaicina na pele produziu coceira. É, portanto, provável que os canais TRP localizados no terminal central de um neurônio aferente primário pruriceptivo estejam envolvidos na modulação da sensação de coceira. Embora o receptor ativado por proteinase (PAR)-2 no terminal periférico de um neurônio aferente primário esteja envolvido na produção de coceira, outros tipos de PAR podem desempenhar um papel na modulação da transmissão pruriceptiva no corno dorsal da medula espinhal. Fujita et al. relataram que a ativação de PAR-1 aumenta pré-sinapticamente a transmissão excitatória espontânea em neurônios do SG de ratos adultos. As descobertas sobre estereoisômeros derivados de plantas, mencionadas neste artigo de revisão, podem servir para saber como modular a transmissão da coceira no corno dorsal da medula espinhal.
Sabemos que existem diferenças entre espécies na farmacologia dos canais TRP. Por exemplo, Jordt e Julius descobriram que o canal TRPV1 de galinha tem uma sensibilidade muito menor à capsaicina do que o de rato. Os canais TRPV1 de rato e humano eram cerca de 100 vezes mais sensíveis à capsaicina do que o de coelho. 4-Metil-N-[2,2,2-tricloro-1-(4-nitro-fenilsulfanil)-etil]-benzamida ativou o canal TRPA1 de rato enquanto bloqueava a ativação do TRPA1 humano por agonistas reativos e não reativos. A cafeína inibiu o canal TRPA1 humano, mas ativou o canal TRPA1 de camundongo. A967079 bloqueou o canal TRPA1 de mamíferos, mas não conseguiu inibir o canal TRPA1 de galinha. Resta investigar se uma diferença na ativação de TRP entre estereoisômeros derivados de plantas é observada em espécies animais além de ratos.
6. Conclusões
Estereoisômeros químicos derivados de plantas, ou seja, timol e carvacrol, (−)-carvona e (+)-carvona, ou 1,8-cineol e 1,4-cineol, ativaram os canais TRP na SG de maneira diferente entre si na extensão e nos tipos de canais TRP ativados. Sugere-se, portanto, que os canais TRP expressos nos terminais centrais dos neurônios do DRG têm a capacidade de discriminar estereoisômeros.
Conflitos de Interesse
Os autores declaram não haver conflito de interesses.
Referências
Canais de receptor potencial transitório: Direcionando a dor na fonte
ANKTM1, um canal semelhante a TRP expresso em neurônios nociceptivos, é ativado por temperaturas frias
Expressão distinta dos mRNAs de TRPM8, TRPA1 e TRPV1 em neurônios aferentes primários de rato com fibras Aδ/C e colocalização com receptores Trk
Canais TRP e nocicepção
Canais TRP e dor
O receptor de capsaicina: um canal iônico ativado por calor na via da dor
O receptor vanilóide: uma porta molecular para a via da dor
O canal iônico de frio nocivo TRPA1 é ativado por compostos pungentes e bradicinina
Óleos de mostarda e canabinoides excitam fibras nervosas sensoriais através do canal TRP ANKTM1
Canais TRP: um TR(I)P através de um mundo de canais catiônicos multifuncionais
Identificação de um receptor de frio revela um papel geral dos canais TRP na termossensação
Um canal TRP que detecta estímulos frios e mentol
Excitação de neurônios da marginal e da substância gelatinosa na medula espinhal de primatas: indicações de seu lugar na organização funcional do corno dorsal
Projeções centrais de fibras aferentes identificadas e não mielinizadas (C) que inervam a pele de mamíferos
Capsaicina facilita a transmissão sináptica excitatória, mas não inibitória, na substância gelatinosa da medula espinhal de rato
Inibição pré-sináptica induzida por canabinoides de EPSCs glutamatérgicas em neurônios da substância gelatinosa da medula espinhal de rato
Desenvolvimento de entradas sinápticas nociceptivas no corno dorsal neonatal de rato: liberação de glutamato por capsaicina e mentol
Efeito da resiniferatoxina na transmissão sináptica excitatória espontânea glutamatérgica em neurônios da substância gelatinosa da medula espinhal de rato adulto
Ativação do canal TRPA1 facilita a transmissão sináptica excitatória em neurônios da substância gelatinosa da medula espinhal de ratos adultos
Aferentes primários que expressam TRPA1 fazem sinapse com uma subclasse morfologicamente identificada de neurônios da substância gelatinosa na medula espinhal de ratos adultos
A caderina-8 é necessária para que as primeiras sinapses de retransmissão recebam entradas funcionais de aferentes sensoriais primários para a sensação de frio
Aferentes primários com perfis de TRPM8 e TRPA1 visam subpopulações distintas de neurônios do corno dorsal superficial de ratos
Canais TRP envolvidos no aumento da liberação espontânea de L-glutamato na substância gelatinosa espinhal de ratos adultos
Mecanismos da dor: uma nova teoria
Circuitos neuronais para o processamento da dor no corno dorsal
1,8- e 1,4-cineol aumentam a transmissão excitatória espontânea ativando diferentes tipos de canais de potencial receptor transitório na substância gelatinosa espinhal de ratos
Registros de patch-clamp cego de neurônios da substância gelatinosa em fatias da medula espinhal de ratos adultos: propriedades farmacológicas das correntes sinápticas
Mudanças plásticas nas entradas sensoriais para neurônios da substância gelatinosa de ratos após inflamação periférica
Mecanismos para hiperalgesia induzida por ovariectomia e seu alívio pela calcitonina: participação do receptor semelhante a 5-HT1A em terminais aferentes C na substância gelatinosa da medula espinhal de ratos
Transmissores envolvidos na antinocicepção na medula espinhal
Neurônios da substância gelatinosa hiperpolarizados in vitro por encefalina
Ativação de receptores opioides no corno dorsal espinhal
Imunorreatividade semelhante à nociceptina no corno dorsal de ratos e inibição de neurônios da substância gelatinosa
Corrente de saída induzida por nociceptina em neurônios da substância gelatinosa da medula espinhal de ratos adultos
Ações do (−)-baclofeno em neurônios do corno dorsal de ratos
A capsaicina induz uma corrente de entrada lenta que não é mediada pela substância P em neurônios da substância gelatinosa da medula espinhal de ratos
O tramadol produz correntes de saída ativando receptores μ-opioides em neurônios da substância gelatinosa de ratos adultos
Ações da noradrenalina em neurônios da substância gelatinosa na medula espinhal de ratos reveladas por registro de patch in vivo
Respostas à 5-HT em neurônios morfologicamente identificados na substância gelatinosa de ratos in vitro
Inibição da transmissão sináptica pela adenosina na substância gelatinosa
Regulação pelo transportador de nucleosídeo equilibrativo das correntes de saída de adenosina em neurônios do corno dorsal espinhal de ratos adultos
Papel da adenosina na regulação da transmissão nociceptiva no corno dorsal espinhal
A somatostatina inibe diretamente neurônios da substância gelatinosa no corno dorsal espinhal de ratos adultos in vitro
Ativação de canais GIRK em neurônios da substância gelatinosa da medula espinhal de ratos adultos: um possível envolvimento da somatostatina
Inibição direta de neurônios da substância gelatinosa na medula espinhal de ratos pela ativação de receptores semelhantes à dopamina D2
Análise de patch-clamp in vivo das ações antinociceptivas dopaminérgicas em neurônios da substância gelatinosa na medula espinhal
Modulação bifásica pela galanina da transmissão sináptica excitatória em neurônios da substância gelatinosa de fatias da medula espinhal de ratos adultos
Ações de opioides na transmissão excitatória e inibitória na substância gelatinosa da medula espinhal de ratos adultos
Modulação da transmissão sináptica excitatória pela nociceptina em neurônios do corno dorsal superficial da medula espinhal de ratos neonatos
Nociceptina inibe a transmissão excitatória, mas não a inibitória, para neurônios da substância gelatinosa da medula espinhal de ratos adultos
Baclofeno inibe mais efetivamente a transmissão glutamatérgica de fibras C do que de fibras Aδ em neurônios da substância gelatinosa de fatias da medula espinhal de ratos adultos
Inibição pré-sináptica pelo baclofeno de EPSCs e IPSCs miniatura em neurônios da substância gelatinosa do corno dorsal da medula espinhal de ratos adultos
Anandamida inibe a transmissão excitatória para neurônios da substância gelatinosa de ratos de maneira diferente da da capsaicina
Inibição pré-sináptica mediada por receptor α2-adrenérgico da transmissão glutamatérgica de aferentes primários em neurônios da substância gelatinosa de ratos
Adenosina inibe a transmissão excitatória para neurônios da substância gelatinosa da medula espinhal de ratos adultos através da ativação do receptor pré-sináptico A1 de adenosina
Modulação pela adenosina da transmissão glutamatérgica de aferentes primários Aδ e C em neurônios da substância gelatinosa de ratos adultos
Estimulação seletiva de GalR1 e GalR2 na substância gelatinosa de ratos revela uma base celular para as ações anti e pró-nociceptivas da galanina
A expressão da proteína VR1 aumenta em neurônios de DRG não danificados após lesão nervosa parcial
O antagonista de VR1 capsazepina reverte a hiperalgesia mecânica em modelos de dor inflamatória e neuropática
AMG 9810 [(E)-3-(4-t-butilfenil)-N-(2,3-di-hidrobenzo[b][1,4] dioxin-6-il)acrilamida], um novo antagonista do receptor vaniloide 1 (TRPV1) com propriedades anti-hiperalgésicas
Identificação e caracterização biológica de 6-aril-7-isopropilquinazolinonas como novos antagonistas de TRPV1 eficazes em modelos de dor crônica
O receptor vaniloide-1 é essencial para a hiperalgesia térmica inflamatória
A ativação de Ras é necessária e suficiente para a regulação positiva do receptor vaniloide tipo 1 em neurônios sensoriais por fatores neurotróficos
Imunorreatividade do receptor vaniloide 1 no intestino humano inflamado
Fibras sensoriais que expressam o receptor de capsaicina TRPV1 em pacientes com hipersensibilidade retal e urgência fecal
O antagonista de TRPV1, SB-366791, inibe a transmissão sináptica glutamatérgica no corno dorsal da medula espinhal de ratos após inflamação periférica
Resiniferatoxina, um diterpeno relacionado ao forbol, atua como um análogo ultrapotente da capsaicina, o constituinte irritante da pimenta vermelha
Efeitos fisiológicos e antinociceptivos da resiniferatoxina intratecal em um modelo de câncer ósseo em cães
Bloqueio seletivo do receptor de capsaicina TRPV1 atenua a dor do câncer ósseo
Canais TRP no câncer
Administração intratecal de AS1928370, um antagonista do receptor de potencial transitório vaniloide 1, atenua a alodinia mecânica em um modelo de camundongo de dor neuropática
Ativação de TRPA1 e TRPM8 em humanos: efeitos do cinamaldeído e do mentol
TRPA1 induzida em neurônios sensoriais contribui para a hiperalgesia ao frio após inflamação e lesão nervosa
O envolvimento do receptor de potencial transitório A1 (TRPA1) na manutenção da hiperalgesia mecânica e ao frio na inflamação persistente
Analgesia mediada pelo receptor de frio TRPM8 na dor neuropática crônica
Mecanismo do TRPM8 na alodinia ao frio após lesão nervosa crônica
Neurotoxicidade induzida por oxaliplatina envolve TRPM8 no mecanismo de hipersensibilidade aguda à sensação de frio
TRPM8 é o principal mediador da analgesia induzida por mentol na dor aguda e inflamatória
TRPV1 no sistema nervoso central: plasticidade sináptica, função e implicações farmacológicas
TRPA1
Estereosseletividade das interações fármaco-receptor
Interações estereosseletivas entre anestésicos locais e canais iônicos
Ação bimodal do mentol no canal de receptor de potencial transitório TRPA1
Registros de voltage-clamp de correntes pós-sinápticas em neurônios da substância gelatinosa in vitro e suas aplicações para avaliar a transmissão sináptica
Atividades biológicas e farmacológicas do carvacrol e de óleos essenciais contendo carvacrol
Efeito antinociceptivo de extratos e compostos de Hofmeisteria schaffneri
Ação do timol na transmissão excitatória espontânea em neurônios da substância gelatinosa da medula espinhal de ratos adultos
Carvacrol potencializa pré-sinapticamente a transmissão excitatória espontânea e produz corrente de saída em neurônios da substância gelatinosa da medula espinhal de ratos adultos
Sabores derivados de orégano, tomilho e cravo e sensibilizadores cutâneos ativam canais TRP específicos
Timol e fenóis alquílicos relacionados ativam o canal hTRPA1
Modulação de canais de receptor de potencial transitório térmico (canais TRP térmicos) por compostos à base de timol
Agonistas monoterpenoides do TRPV3
A base molecular para a ativação espécie-específica da proteína TRPA1 humana por prótons envolve resíduos pouco conservados nos domínios transmembrana 5 e 6
TRPA1 medeia a dor induzida por formalina
Capsazepina, um novo antagonista da capsaicina, antagoniza seletivamente os efeitos da capsaicina na medula espinhal de camundongos in vitro
Contribuição dos canais TRPM8 para a transdução do frio em neurônios sensoriais primários e terminações nervosas periféricas
O monoterpeno (−)-carvona: um novo agonista dos canais TRPV1
R-(+)- e S-(−)-carvona: influência da quiralidade na atividade locomotora em camundongos
Influência da quiralidade da (R)-(−)- e (S)-(+)-carvona no sistema nervoso central: um estudo comparativo
Aumento da liberação espontânea de L-glutamato em neurônios da substância gelatinosa de ratos por (−)-carvona e (+)-carvona, que ativam diferentes tipos de canal TRP
Propriedades antinociceptivas do 1,8-cineol e β-pineno, do óleo essencial de folhas de Eucalyptus camaldulensis, em roedores
Efeitos alelopáticos de cineóis voláteis em duas espécies de plantas daninhas
Caracterização do receptor de frio-mentol TRPM8 e do receptor vaniloide tipo-1 VR1 de camundongo utilizando ensaio de leitor de placas de imageamento fluorométrico (FLIPR)
1,8-Cineol, um agonista do TRPM8, é um novo antagonista natural do TRPA1 humano
A nicotina ativa o canal catiônico quimiossensorial TRPA1
Receptores vaniloides em nervos sensoriais medeiam a ação vasodilatadora da anandamida
Ativação direta de receptores de capsaicina por produtos de lipoxigenases: substâncias endógenas semelhantes à capsaicina
Bioquímica e farmacologia dos endovaniloides
AM404 aumenta a liberação espontânea de L-glutamato de maneira sensível à capsazepina em neurônios da substância gelatinosa de ratos adultos
Ativação de canais TRPA1 pelo inibidor da hidrolase de amida de ácido graxo 3′-carbamoilbifenil-3-il ciclohexilcarbamato (URB597)
Nocicepção cutânea evocada por 15-delta PGJ2 via ativação do canal iônico TRPA1
A bradicinina produz hipersensibilidade à dor potencializando a transmissão sináptica glutamatérgica na medula espinhal
A proteína TRPM8 é um receptor de testosterona: I. Evidências bioquímicas para interações diretas entre TRPM8 e testosterona
A proteína TRPM8 é um receptor de testosterona: II. Evidências funcionais para um efeito ionotrópico da testosterona no TRPM8
O receptor vaniloide TRPV1 é ativado e sensibilizado por anestésicos locais em neurônios sensoriais de roedores
Ativação do TRPA1 por anestésicos locais permeáveis à membrana
A ativação do TRPA1 pela lidocaína em terminais nervosos resulta em aumento da liberação de glutamato
Piperina: pesquisadores descobrem novo sabor em uma especiaria antiga
O agonista do TRPV1 piperina, mas não o olvanil, aumenta a transmissão excitatória espontânea glutamatérgica em neurônios da substância gelatinosa espinhal de ratos
Semelhanças e diferenças nas correntes ativadas por capsaicina, piperina e zingerona em células do gânglio trigêmeo de ratos
As respostas de neurônios do gânglio trigêmeo de ratos à capsaicina e a dois agonistas não pungentes do receptor vaniloide, olvanil e nonamida glicerílica
Ativação do receptor vaniloide 1 (VR1) pelo eugenol
O aumento pré-sináptico pelo eugenol da transmissão excitatória espontânea em neurônios da substância gelatinosa espinhal de ratos é mediado por canais de potencial receptor transitório A1
A zingerona aumenta a transmissão excitatória espontânea glutamatérgica ativando canais TRPA1, mas não TRPV1, na substância gelatinosa de ratos adultos
MicroRNAs extracelulares ativam neurônios nociceptores para provocar dor via TLR7 e TRPA1
Aumento pelo citral da transmissão excitatória espontânea glutamatérgica em neurônios da substância gelatinosa de ratos adultos
O TRPA1 medeia a antinocicepção espinhal induzida por paracetamol e pelo canabinoide Δ9-tetrahidrocanabiorcol
Responsividade de neurônios da substância gelatinosa de ratos a estímulos mecânicos, mas não térmicos, revelada por registro de patch-clamp in vivo
Análise por patch-clamp in vivo das ações antinociceptivas da ativação do TRPA1 no corno dorsal da medula espinhal
Colocalização de GABA, glicina e seus receptores nas sinapses da medula espinhal de ratos
Localização de receptores no corno dorsal de mamíferos e neurônios aferentes primários
A lesão parcial do nervo periférico promove uma perda seletiva da inibição GABAérgica no corno dorsal superficial da medula espinhal
O papel da inibição espinhal na dor neuropática
Mudança trans-sináptica no gradiente de ânions em neurônios da lâmina I espinhal como mecanismo da dor neuropática
Redução das correntes inibitórias pós-sinápticas em miniatura mediadas por receptores de glicina em neurônios da lâmina I espinhal de ratos após inflamação periférica
Inibidores do transportador de glicina como uma estratégia terapêutica potencial para dor crônica com comprometimento da memória
Modelos e mecanismos de hiperalgesia e alodinia
Inibição sináptica rápida no processamento sensorial espinhal e controle da dor
Facilitação muscarínica da liberação de GABA na substância gelatinosa do corno dorsal espinhal de ratos
A norepinefrina facilita a transmissão inibitória na substância gelatinosa da medula espinhal de ratos adultos (parte 2): efeitos em sítios somatodendríticos de neurônios GABAérgicos
A norepinefrina facilita a transmissão inibitória na substância gelatinosa da medula espinhal de ratos adultos (parte 1): efeitos em terminais axonais de neurônios GABAérgicos e glicinérgicos
Modulação da atividade sináptica inibitória por um subtipo não-α4β2, não-α7 de receptores nicotínicos na substância gelatinosa da medula espinhal de ratos adultos
Ações facilitadoras dos receptores de serotonina tipo 3 na transmissão sináptica inibitória GABAérgica no corno dorsal superficial espinhal
Acetilcolina e norepinefrina medeiam o aumento da transmissão GABAérgica, mas não glicinérgica, pela melitina em neurônios da substância gelatinosa de ratos adultos
Canais TRP como novos protagonistas na patogênese e terapia do prurido
Sensações semelhantes de prurido e nocicepção evocadas pela aplicação cutânea punctiforme de capsaicina, histamina e mucuna
Processamento neural do prurido
Novos insights sobre os mecanismos do prurido: a dor e o prurido são controlados por mecanismos distintos?
A ativação do receptor-1 ativado por proteinase aumenta pré-sinapticamente a transmissão excitatória glutamatérgica espontânea em neurônios da substância gelatinosa de ratos adultos
Base molecular para a sensibilidade espécie-específica a pimentas "ardidas"
Determinantes moleculares da sensibilidade à vanilóide no TRPV1
Determinantes moleculares da ativação ou bloqueio espécie-específico de canais TRPA1
A cafeína ativa canais TRPA1 de camundongos, mas suprime canais TRPA1 humanos
O bloqueio seletivo do canal TRPA1 atenua a dor patológica sem alterar a sensação ao frio nocivo ou a regulação da temperatura corporal
Base molecular determinante da inibição/ativação da proteína do receptor nociceptivo TRPA1: um único aminoácido dita as ações espécie-específicas do antagonista mais potente de TRPA1 de mamíferos
Efeitos do timol e carvacrol na transmissão excitatória espontânea glutamatérgica em neurônios da substância gelatinosa (SG) de ratos. (A,B) As estruturas químicas do timol (A) e carvacrol (B). (C,D) A frequência e amplitude das sEPSC sob ação do timol (C) ou carvacrol (D), em relação àquelas antes da superfusão do fármaco, foram plotadas contra o logaritmo da concentração do fármaco. Este efeito do timol (carvacrol) foi medido por 0,5 min em torno de 5 min (3,5 min) após o início de sua superfusão. Os resultados em (C) foram obtidos de todos os neurônios testados, enquanto aqueles em (D) foram obtidos de neurônios onde o carvacrol (1 mM) aumentou a frequência das sEPSC > 5%. As curvas contínuas em (C) e (D) foram traçadas de acordo com a equação de Hill [concentração efetiva metade máxima (EC50) e coeficiente de Hill (nH) em (C) e (D): 0,18 mM, 4,9 e 0,69 mM, 2,1, respectivamente]. (Ea–c) Registros gráficos mostrando sEPSCs e correntes de manutenção na ausência e presença de timol em solução de Krebs sem (esquerda) ou com um antagonista de TRPV1 capsazepina (Ea), um antagonista de TRPA1 HC-030031 (Eb) ou um antagonista de TRPM8 BCTC (Ec; direita). Em cada um de (Ea)–(Ec), o registro da direita foi obtido cerca de 30 min após o da esquerda do mesmo neurônio. (Ea–c) Registros gráficos mostrando sEPSCs na ausência e presença de carvacrol em solução de Krebs sem (Fa) e com capsazepina (Fb) ou HC-030031 (Fc); estes registros foram obtidos do mesmo neurônio com um intervalo de 30 min. Nesta e nas figuras subsequentes, o valor entre parênteses indica o número de neurônios testados; cada ponto com barras verticais representa os valores médios e o erro padrão da média (EPM); se o EPM dos valores for menor que o tamanho do símbolo, a barra vertical não é mostrada; o nível de controle (1) é indicado pela linha pontilhada horizontal; a duração da superfusão do fármaco é mostrada por uma barra horizontal acima do registro gráfico. Potencial de manutenção (VH) = −70 mV. Esta pesquisa foi originalmente publicada em.
Efeitos da (−)-carvona e (+)-carvona na transmissão excitatória espontânea glutamatérgica em neurônios da SG de ratos. (A,B) As estruturas químicas da (−)-carvona (A) e (+)-carvona (B). (C,D) A frequência e amplitude das sEPSC sob ação da (−)-carvona (C) ou (+)-carvona (D), em relação àquelas antes da superfusão do fármaco, foram plotadas contra o logaritmo da concentração do fármaco. Este efeito da carvona foi medido por 0,5 min em torno de 3 min após o início de sua superfusão. As curvas contínuas em (C) e (D) foram traçadas de acordo com a equação de Hill (EC50 e nH em (C) e (D): 0,70 mM, 2,2 e 0,72 mM, 2,4, respectivamente). (Ea,b,Fa,b) Registros gráficos mostrando sEPSCs na ausência e presença de (−)-carvona (E) ou (+)-carvona (F) em solução de Krebs sem (esquerda) e com capsazepina (Ea,Fa) ou HC-030031 (Eb,Fb; direita). Em cada um de (Ea,b,Fa,b), o registro da direita foi obtido cerca de 20 min após o da esquerda do mesmo neurônio. VH = −70 mV. Esta pesquisa foi originalmente publicada em.
Efeitos do 1,8-cineol e 1,4-cineol na transmissão excitatória espontânea glutamatérgica em neurônios do SG de ratos. (A,B) As estruturas químicas do 1,8-cineol (A) e 1,4-cineol (B). (C,D) A frequência e amplitude das sEPSC sob a ação do 1,8-cineol (C) ou 1,4-cineol (D), em relação àquelas antes da superfusão do fármaco, foram plotadas contra o logaritmo da concentração do fármaco. Este efeito do cineol foi medido por 0,5 min em torno de 3,5 min após a adição do fármaco. As curvas contínuas em (C) e (D) foram traçadas de acordo com a equação de Hill (CE50 e nH em (C) e (D): 3,2 mM, 1,3 e 0,42 mM, 1,7, respectivamente). (Ea–e,Fa–e) Registros gráficos mostrando sEPSCs na ausência e presença de 1,8-cineol (E) ou 1,4-cineol (F) em solução de Krebs sem (esquerda) e com capsazepina (a), SB-366791 (b), HC-030031 (c), mecamilamina (d) ou BCTC (e; direita). Em cada um de (Ea–e,Fa–e), o registro da direita foi obtido cerca de 20 min após o da esquerda do mesmo neurônio. VH = −70 mV. Esta pesquisa foi originalmente publicada em.
Valores de CE50 para substâncias químicas derivadas de plantas na ativação dos canais TRPV1 e TRPA1 no SG de ratos adultos.
Substâncias Químicas Derivadas de Plantas TRPV1 (mM) TRPA1 (mM) Referências Resiniferatoxina 2,1 × 10−4 − Piperina 0,052 − Eugenol − 3,8 Zingerona − 1,3 (−)-Carvona 0,70 − (+)-Carvona − 0,72 Carvacrol − 0,69 Timol − 0,18 1,8-Cineol − 3,2 1,4-Cineol 0,42 − Citral − 0,58