pmid: "20965155"
title: "Maior exposição ao estrogênio endógeno está associada a telômeros mais longos em mulheres na pós-menopausa com risco de declínio cognitivo."
authors: "Lin J, Kroenke CH, Epel E, Kenna HA, Wolkowitz OM, Blackburn E, Rasgon NL"
journal: "Brain research"
pubdate: "2011 Mar 16"
doi: "10.1016/j.brainres.2010.10.033"
source: "PMC Full Text"
Maior exposição ao estrogênio endógeno está associada a telômeros mais longos em mulheres na pós-menopausa com risco de declínio cognitivo.
Autores
Lin J, Kroenke CH, Epel E, Kenna HA, Wolkowitz OM, Blackburn E, Rasgon NL
Periodico
Brain research (2011 Mar 16)
Conteudo
Maior exposição ao estrogênio endógeno está associada à manutenção dos telômeros em mulheres na pós-menopausa com risco de declínio cognitivo
A maior duração dos anos reprodutivos da vida e, portanto, maior exposição ao estrogênio endógeno pode estar associada a um menor risco de doenças relacionadas à idade em mulheres. O presente estudo examinou a relação entre a exposição estimada ao estrogênio endógeno e o comprimento dos telômeros (TL) e a atividade da telomerase, dois biomarcadores de envelhecimento celular, em uma amostra de mulheres na pós-menopausa com risco de declínio cognitivo. O comprimento dos telômeros foi medido usando um método de PCR quantitativo e a atividade da telomerase pelo ensaio TRAP (Protocolo de Amplificação de Repetições de Telômeros) em células mononucleares do sangue periférico (PBMCs). Os sujeitos do estudo foram 53 mulheres na pós-menopausa (35 com menopausa natural e 18 com menopausa cirúrgica) recebendo terapia hormonal (TH) por pelo menos um ano ou mais. A duração dos anos reprodutivos da vida, calculada como a diferença entre a idade na menopausa e a idade na menarca, foi usada como proxy da duração da exposição ao estrogênio endógeno. O tempo de uso de TH foi a medida utilizada para a duração da exposição ao estrogênio exógeno. Descobrimos que uma maior exposição ao estrogênio endógeno estava associada a um maior TL (β padronizado = 0,06, Wald χ² = 3,7, p = 0,04) e a uma menor atividade da telomerase (β padronizado = −0,09, Wald χ² = 5,0, p = 0,03). A duração dos anos reprodutivos também foi inversamente associada à combinação de TL curto e telomerase alta (OR = 0,78, IC 95%: 0,63, 0,97, p = 0,02). O tempo de uso de TH não foi associado ao TL ou à atividade da telomerase neste estudo. Os resultados sugerem que os estrogênios endógenos podem estar associados à desaceleração do envelhecimento celular. Este é o primeiro estudo a examinar associações entre estrogênios endógenos, comprimento dos telômeros e atividade da telomerase.
Seção: Sistemas Reguladores
Introdução
O papel do estrogênio na modificação do risco de doença vascular em mulheres é controverso. A menopausa está associada ao aumento do risco de doença cardíaca isquêmica e doença cerebrovascular, que coletivamente são as principais causas de morbidade e mortalidade em mulheres de nações desenvolvidas. Embora estudos observacionais tenham sugerido um papel protetor do estrogênio, ensaios clínicos randomizados recentes relatam um papel negativo do estrogênio oral na prevenção primária e secundária de eventos cardiovasculares. A inflamação está subjacente ao desenvolvimento da aterosclerose e, como tal, a modulação do processo inflamatório pode ser um meio potencial de reduzir o risco cardiovascular. Postulados processos anti-inflamatórios e efeitos antioxidantes do estrogênio podem, portanto, modificar o risco de doenças vasculares. O papel do estrogênio na função cognitiva é igualmente controverso (para revisão, ver. Especificamente, a terapia com estrogênio na pós-menopausa tem sido associada tanto à melhora cognitiva quanto ao declínio, enquanto a exposição endógena mais prolongada ao estrogênio tem sido mais consistentemente associada a um melhor desempenho cognitivo. A hipótese unificadora por trás dos efeitos discrepantes do estrogênio na DCV e na função cognitiva é a teoria da "janela de oportunidade", postulando o momento da exposição exógena à TH como um preditor crítico de seus efeitos estendidos. Ao mesmo tempo, dados em evolução sugerem que a duração da exposição endógena ao estrogênio pode ter um efeito independente tanto na função cardiovascular quanto na cognição.
Os telômeros, complexos de DNA-proteína que consistem em repetições curtas e em tandem de DNA e proteínas associadas, protegem as extremidades dos cromossomos eucarióticos da degradação e recombinação prejudiciais. A telomerase reabastece a perda de telômeros pela adição de DNA terminal. Telômeros curtos em leucócitos têm sido associados em muitos estudos a doenças relacionadas à idade, incluindo doença cardiovascular, doença de Alzheimer e alguns tipos de câncer, embora alguns estudos tenham relatado associação de telômeros mais longos com doenças.
Trabalhos anteriores associaram a baixa atividade da telomerase em PBMCs de mulheres saudáveis ao estresse psicológico. No entanto, níveis mais elevados de telomerase em PBMCs foram associados ao desenvolvimento precoce de aterosclerose e foram encontrados em pessoas com doença coronariana estabelecida e em pessoas com depressão maior. Além disso, a combinação de maior nível de atividade da telomerase e menor comprimento dos telômeros em PBMCs foi relatada em cuidadores de pacientes com Alzheimer, em pessoas com depressão em comparação com controles e em pessoas com maior calcificação coronariana, podendo assim marcar certos estados patológicos. Nem a atividade da telomerase nem a combinação de telomerase com comprimento dos telômeros foram estudadas em relação à função cognitiva, e a literatura que relaciona telômeros com função cognitiva é decididamente mista. No entanto, há evidências crescentes de comprometimento cognitivo secundário a doenças cardiovasculares (DCV), sugerindo ligações importantes e possíveis insights nesta literatura para a pesquisa cognitiva.
Existe uma diferença consistente de gênero no comprimento dos telômeros, com maior comprimento dos telômeros leucocitários em mulheres em comparação com homens. Telômeros mais longos em mulheres têm sido atribuídos à capacidade do estrogênio de regular positivamente a telomerase e, ao mesmo tempo, reduzir o estresse oxidativo. In vitro, o estrogênio regula positivamente a atividade da telomerase em células normais, incluindo, mas não se limitando a, células hematopoiéticas, células-tronco mesenquimais humanas, células endoteliais e células epiteliais ovarianas. O estresse oxidativo pode contribuir para telômeros mais curtos por várias vias potenciais: danifica diretamente a sequência telomérica rica em G e T, que é preferencialmente sensível ao dano oxidativo; as espécies reativas de oxigênio (ERO) diminuem a atividade da telomerase, potencialmente comprometendo a capacidade de reposição do DNA telomérico. Além disso, as ERO estimulam a produção de citocinas pró-inflamatórias, que potencialmente aceleram a renovação das células imunes e, consequentemente, a perda de telômeros. O estrogênio demonstrou reduzir o estresse oxidativo e, portanto, pode afetar indiretamente a manutenção dos telômeros. No entanto, a relação in vivo entre estrogênio, comprimento dos telômeros e telomerase não é bem compreendida. Compreender essas relações seria benéfico para entender possíveis mecanismos pelos quais os estrogênios podem influenciar tanto a doença cardiovascular quanto a função cognitiva.
Aqui, examinamos associações da exposição endógena ao estrogênio, estimada pela duração dos anos reprodutivos, com o comprimento dos telômeros e a atividade da telomerase em um grupo de mulheres na pós-menopausa com risco de declínio cognitivo, todas em uso de terapia hormonal (TH) por pelo menos um ano ou mais. Também examinamos a associação entre exposição exógena ao estrogênio, medida como tempo de uso de TH, e comprimento dos telômeros e atividade da telomerase. Isso fez parte de um estudo longitudinal maior sobre os efeitos da TH em biomarcadores cerebrais, e os resultados atuais representam a avaliação basal de biomarcadores reprodutivos e da manutenção dos telômeros.
Hipotetizamos uma relação inversa da exposição endógena e uma relação positiva da exposição exógena ao estrogênio com o comprimento dos telômeros. Se o complexo telomérico estiver relacionado ao funcionamento cognitivo, relações semelhantes podem ser observadas entre estrogênios e funcionamento cognitivo. As análises da telomerase foram mais exploratórias devido a achados mistos sobre a natureza potencialmente adversa ou benéfica da telomerase no desenvolvimento de doenças cardiovasculares.
Resultados
Características da população do estudo
A Tabela 1 descreve as características gerais de interesse das participantes do estudo categorizadas por duração reprodutiva. Mulheres com maior duração da vida reprodutiva (>35 anos) apresentaram menor duração do uso de TH, menopausa mais tardia e maior probabilidade de menopausa natural (vs. cirúrgica), em comparação com aquelas com menor duração reprodutiva (<=35 anos). No entanto, não houve diferenças quanto à idade, idade da menarca, IMC, número de gestações ou nascidos vivos. Exposição endógena ao estrogênio
A exposição endógena estimada ao estrogênio foi positivamente associada ao CT (β padronizado=0,06, Wald χ2=3,7, p=0,04), ajustada por idade e tipo de menopausa. Além disso, cada ano adicional de exposição endógena ao estrogênio foi associado a uma redução de 14% na chance (OR=0,86, IC 95%: 0,74, 0,99, p=0,04) de ter um CT abaixo da mediana. A duração dos anos reprodutivos diferiu por tipo de menopausa (p=0,003) e foi de 31,6 vs. 35,7 anos para mulheres com menopausa cirúrgica vs. natural. No entanto, as associações entre anos reprodutivos e CT não variaram por tipo de menopausa na análise estratificada. O ajuste pela duração do uso de TH não influenciou substancialmente as associações (OR=0,85, IC 95%: 0,72, 1,00, p=0,06) (Tabela 2).
A exposição endógena estimada ao estrogênio também foi inversamente associada à atividade da telomerase em PBMC (β padronizado= −0,09, Wald χ2=5,0, p=0,03) na amostra completa ajustada por idade e tipo de menopausa (Tabela 2). Também testamos quaisquer associações com os estados de telômeros curtos ou longos em combinação com telomerase alta ou baixa. A combinação de CT curto e telomerase alta, mas nenhuma outra combinação, foi significativamente associada à exposição endógena estimada ao estrogênio (Figura 1); cada ano adicional de exposição endógena ao estrogênio foi associado a uma menor chance de ter a combinação de CT curto e telomerase alta (OR=0,78, IC 95%: 0,63, 0,97 p=0,02; OR=0,79, IC 95%: 0,65, 0,96 p=0,02, ajustado adicionalmente por TH). Semelhante ao achado geral para a duração estimada da exposição ao estrogênio, a idade na menopausa foi positivamente relacionada ao CT (β padronizado=0,05, p=0,07) e inversamente (mas não significativamente) relacionada à telomerase (β padronizado= −0,08, p=0,19) (Tabela 2). O tempo desde a menopausa foi inversamente, embora não significativamente, relacionado ao CT (β padronizado= −0,05, p=0,07) (Tabela 2). Embora a idade da menarca não estivesse relacionada ao CT, ela foi positivamente relacionada à atividade da telomerase (Tabela 2).
Exposição exógena ao estrogênio
Não encontramos associações entre o uso de HT e o comprimento dos telômeros ou a atividade da telomerase na amostra completa e em mulheres com menopausa natural, embora a duração do uso de HT tenha sido inversamente associada ao TL em mulheres com menopausa cirúrgica (Tabela 3). A interação entre o tipo de menopausa e a duração do uso de HT não foi significativa (p=0,42). Na amostra completa, a duração do HT não foi significativamente relacionada a uma maior odds de TL curto (OR=1,07, IC 95%: 0,94–1,21) nem à combinação de TL curto e telomerase alta (OR=1,22, IC 95%: 0,97–1,53, p=0,09). O ajuste simultâneo para duração do uso de HT e duração da vida reprodutiva não alterou substancialmente as associações. O ajuste para ingestão de vitaminas, índice de massa corporal (IMC), HOMA (avaliação do modelo homeostático, um método usado para quantificar resistência à insulina e função das células beta) também não teve influência significativa nas associações (dados não mostrados).Discussão
Aqui relatamos o primeiro estudo a examinar a relação entre a exposição estimada a estrogênio endógeno e exógeno, o comprimento dos telômeros e a atividade da telomerase. Maior exposição a estrogênio endógeno, medida pela maior duração dos anos reprodutivos, foi relacionada a um maior comprimento dos telômeros do PBMC e a uma menor atividade da telomerase.
Em contraste, a exposição exógena ao estrogênio, medida pela duração do uso de HT, não foi associada a TL mais longo ou à telomerase.
Nossa descoberta de que a duração da exposição ao estrogênio endógeno está negativamente correlacionada com a atividade da telomerase neste grupo de mulheres na pós-menopausa com risco de declínio cognitivo pode parecer contraditória em relação a relatos de que o estrogênio regula positivamente a atividade da telomerase in vitro. No entanto, no presente estudo, a atividade da telomerase foi medida vários anos após a ocorrência da menopausa. Dado que a telomerase do PBMC pode responder rapidamente (de minutos a horas) a condições fisiológicas em mudança, não foi surpreendente que a atividade da telomerase não tenha mostrado uma relação próxima com o status de estrogênio anos antes.
Assim, a partir desses dados, não foi possível avaliar diretamente a associação dos estrogênios endógenos com a atividade da telomerase, uma vez que a telomerase foi medida anos após a maior exposição.
A alta atividade da telomerase, no entanto, pode ser uma resposta celular à inflamação e, portanto, pode indicar comprometimento da saúde. Por exemplo, a citocina pró-inflamatória IL-6 demonstrou aumentar a atividade da telomerase em células cultivadas in vitro. Níveis elevados de outra citocina pró-inflamatória, TNF-alfa, também foram relatados em células desses cuidadores em resposta à estimulação in vitro. Assim, a descoberta inversa entre exposição ao estrogênio endógeno e atividade da telomerase pode ser devida em parte aos efeitos anti-inflamatórios relatados do estrogênio. Nossa descoberta de que uma telomerase mais alta está associada a menos anos reprodutivos é consistente com achados anteriores in vivo que sugerem que a telomerase pode aumentar a capacidade proliferativa de linfócitos, macrófagos e células musculares lisas no desenvolvimento da aterosclerose. Portanto, esses dados são consistentes com a noção de que anos reprodutivos mais longos (e idade mais tardia na menopausa) poderiam retardar o desenvolvimento de doenças cardiovasculares associadas à menopausa.
A duração estimada da exposição ao estrogênio endógeno foi inversamente associada ao estado de TL curto combinado com alta atividade da telomerase. Embora as implicações dessa descoberta não sejam totalmente compreendidas, notamos que a atividade da telomerase é altamente regulada por um grande número de mecanismos, incluindo, em sistemas modelo não humanos, respostas a danos no DNA que atuam para aumentar a ação da telomerase nos telômeros. Portanto, nossa descoberta, em conjunto com relatos pré-clínicos anteriores, é consistente com a possibilidade de que a atividade da telomerase em PBMCs possa aumentar em resposta à sinalização de danos de telômeros muito curtos, embora esse mecanismo ainda precise ser melhor elucidado.
O estrogênio endógeno tem sido associado a um menor risco de doença cardiovascular em mulheres e a um menor risco de declínio cognitivo. Os possíveis mecanismos envolvidos no papel protetor do estrogênio incluem sua capacidade de reduzir o estresse oxidativo, diminuir a inflamação, melhorar a vasodilatação e alterar os perfis de expressão gênica na vasculatura e no coração. Correspondentemente, tanto o dano oxidativo quanto as citocinas pró-inflamatórias têm sido associados ao encurtamento dos telômeros. Nossos achados sugerem que um possível mecanismo pelo qual os estrogênios endógenos podem exercer efeitos cardioprotetores e cognitivos pode ser através da desaceleração do encurtamento dos telômeros e, consequentemente, do envelhecimento celular. Os efeitos podem ser exclusivos dos hormônios endógenos, no entanto. Enquanto os níveis endógenos de estradiol biodisponível têm sido benéficos para a função cognitiva e resultados cardiovasculares, o uso de estrogênio exógeno tem sido associado a demência precoce e eventos coronarianos.
O único estudo publicado que examinou a relação in vivo entre estrogênios e comprimento dos telômeros descobriu que mulheres que estavam em TH por mais de cinco anos apresentavam TL mais longo em comparação com mulheres da mesma idade que não haviam usado TH. No entanto, os autores observaram que mulheres que se exercitavam regularmente e tomavam vitaminas diariamente estavam melhor representadas no grupo de mulheres que usavam TH. Tanto o exercício quanto a ingestão de vitaminas foram relatados como associados a TL mais longo. A correlação positiva entre TL e TH nesse relato, portanto, pode ser pelo menos parcialmente explicada pela diferença no exercício e na ingestão de vitaminas entre os dois grupos, ou pode também ser explicada por outras variáveis não medidas que representam bons cuidados pessoais ao longo da vida, o que pode levar a confusão residual mesmo com ajuste para essas outras variáveis. Assim, não está claro a partir dos dados atuais se a exposição ao estrogênio exógeno em mulheres está associada ao TL.
Houve várias limitações neste estudo. Primeiro, todas as participantes deste estudo receberam prescrição de TH por seus médicos, com pelo menos um fator de risco para declínio cognitivo, conforme descrito nos métodos, incluindo a possibilidade de aumento do risco de declínio cognitivo que foi relatado como associado a TL curto. Portanto, esses resultados do estudo podem não se estender à população geral. Estudos futuros devem examinar essa associação em mulheres que nunca usaram TH, sem fatores de risco para declínio cognitivo. O pequeno tamanho amostral limitou nossa capacidade de explorar a influência mais complexa das combinações de fatores reprodutivos, incluindo contraceptivo oral e diferentes tipos de regimes de TH.
Como em todos os estudos observacionais, não podemos descartar a possibilidade de que a relação observada entre exposição ao estrogênio e TL tenha sido devida a algum fator não medido relacionado tanto a anos reprodutivos mais longos quanto ao envelhecimento celular reduzido. O status socioeconômico é um fator importante que, teoricamente, deveria influenciar tanto a história reprodutiva quanto o envelhecimento celular, mas o ajuste para educação teve pouca influência em nossas associações. O comprimento dos telômeros também é 30–70% geneticamente determinado; fatores genéticos podem, em última análise, ser responsáveis tanto pelo TL longo quanto por anos reprodutivos longos. Não conseguimos abordar essa questão, mas estudos longitudinais que examinem a relação entre anos reprodutivos e mudanças no comprimento dos telômeros ao longo do tempo, bem como a análise genética em todo o genoma, podem ajudar a abordar essas limitações no futuro.
Em resumo, fornecemos evidências preliminares de que o estrogênio endógeno está associado a um comprimento de telômeros mais longo e menor atividade da telomerase em PBMCs. Estudos maiores são necessários para tirar conclusões mais definitivas sobre a relação entre estrogênio, telômeros e telomerase.
3. Procedimento Experimental
População do estudo
Os participantes foram derivados de um estudo longitudinal de 2 anos que examinou os possíveis efeitos neuroprotetores da randomização para descontinuação da terapia hormonal em mulheres na pós-menopausa com risco de declínio cognitivo (ou seja, portadoras do APOE-ε4, histórico familiar de DA, hipotireoidismo ou histórico pessoal ou familiar de transtorno do humor). Todas as participantes eram caucasianas, exceto uma nipo-americana. Dado que todas as participantes do estudo deveriam ser usuárias estáveis de TH (tomando TH por um ano ou mais), uma fração substancial de mulheres nesta amostra (35,8%) apresentava menopausa cirúrgica por vários motivos, incluindo miomas e endometriose. Nenhuma das histerectomias foi devida a câncer ginecológico. Aproximadamente 76% das participantes do estudo haviam utilizado contraceptivos hormonais em algum momento da vida, embora não tivéssemos informações detalhadas sobre seu uso.
O comprimento dos telômeros foi medido no momento do recrutamento (basal) para 53 participantes, com idades entre 49 e 69 anos, nas quais células mononucleares do sangue periférico estavam disponíveis, e a telomerase foi medida em 33 dessas mulheres nas quais havia PBMCs viáveis suficientes (mais de 0,5 milhão). O estudo foi aprovado pelo Institutional Review Board para Pesquisa em Humanos da Universidade de Stanford.
Coleta de dados sobre exposição endógena a estrogênio e outras variáveis reprodutivas
Os dados sobre histórico reprodutivo, incluindo idade da menarca e da menopausa, paridade, uso de contracepção hormonal durante os anos reprodutivos, duração da transição perimenopáusica em relação ao início do uso de TH e tipo de sintomas menopáusicos, foram coletados pelo médico do estudo durante a avaliação de triagem, na qual foram realizados exames psiquiátrico, físico e neurológico, incluindo análises clínicas de sangue para confirmar o estado pós-menopáusico e a saúde médica geral. Como proxy da duração da exposição endógena ao estrogênio, a duração da vida reprodutiva em anos foi calculada como a diferença entre a idade na menopausa, definida como a idade em que a menstruação havia cessado por 12 meses, e a idade da menarca. O tempo desde a menopausa foi calculado como a diferença entre a idade atual e a idade na menopausa, e foi utilizado para explorar os efeitos separados da idade per se e da idade em relação ao declínio dos estrogênios endógenos.
Todas as mulheres neste estudo haviam tomado TH por um ano ou mais, e assim a duração do uso de TH caracterizou a exposição exógena ao estrogênio.
Medição do comprimento dos telômeros
As participantes foram submetidas a coleta de sangue por venopunção em jejum durante o período da manhã, entre 7h e 10h. Todas as amostras foram processadas para isolamento de células mononucleares dentro de 1 hora após a coleta. 1 ml de PBMCs criopreservados foi descongelado a 37 °C, lavado duas vezes com 10 ml de DPBS frio (Invitrogen, Calsbard, CA). Os pellets celulares foram coletados e o DNA foi preparado usando o kit de purificação de DNA Puregene (QIAGEN, Valencia, CA).
O comprimento relativo médio dos telômeros foi medido a partir do DNA por um ensaio de reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR) que compara o número médio de cópias da sequência repetitiva dos telômeros (T) ao número de cópias de um gene de referência de cópia única (S) em cada amostra, conforme descrito anteriormente e validado por comparação com a análise de fragmentos terminais de restrição (TRF) por Southern blot. Os valores de T e S foram determinados pelo método da curva padrão usando um DNA de referência diluído em série e a razão T/S foi derivada dos valores de T e S para cada amostra. O coeficiente de variabilidade inter-ensaio para a medição do comprimento dos telômeros foi de 3,7%. O coeficiente de variabilidade intra-ensaio foi de 2,5%.
Ensaio de atividade da telomerase
1 ml de PBMCs criopreservados foi descongelado a 37 °C, lavado duas vezes com 10 ml de DPBS frio (Invitrogen, Carlsbad, CA) e as células vivas foram contadas usando um hemocitômetro com o método de exclusão por Trypan. 1X10⁶ células viáveis foram sedimentadas e lisadas com tampão 1XCHAPS conforme instruções do manual do kit Trapeze (kit de detecção de telomerase Trapeze, Millipore, Billerica, MA). Duas concentrações, correspondentes a 5.000 e 10.000 células, foram utilizadas para as reações TRAP para cada amostra a fim de garantir a linearidade do ensaio. A reação foi realizada de acordo com o manual do kit Trapeze e executada em um gel de sequenciamento de 10% poliacrilamida-8M ureia. O gel foi exposto a uma placa de phosphorimager durante a noite e escaneado em um STORM 860 (GE Healthcare, Piscataway, NJ). A linhagem celular cancerígena 293T foi utilizada como controle positivo e padrão de atividade da telomerase. A atividade da telomerase é definida como 1 unidade = a quantidade de produto de uma célula 293T/10.000 PBMCs, e foi quantificada usando o software ImageQuant 5.2 (GE Healthcare, Piscataway, NJ).
Detalhes dos métodos de medição do comprimento dos telômeros e da atividade da telomerase estão publicados em. A medição de TL e da atividade da telomerase foi realizada de forma cega, sem conhecimento dos dados clínicos. Finalmente, definimos mulheres com TL curto ou longo e atividade da telomerase alta ou baixa com base na mediana, em vez de pontos de corte derivados fisiologicamente, dado o pequeno tamanho amostral.
Análise Estatística
Usando análise de covariância (PROC GLM), examinamos as covariáveis por anos de vida reprodutiva altos e baixos (acima ou abaixo da mediana) (mediana=35 anos) (Tabela 1).
A normalidade do TL e da atividade da telomerase foi avaliada e verificou-se que foi melhorada pelo cálculo dos logaritmos desses valores. Portanto, utilizando modelos lineares gerais, regredimos os logaritmos do comprimento linear dos telômeros e da atividade da telomerase contra a duração dos anos reprodutivos e o comprimento da HT, ajustados por idade e tipo de menopausa (PROC GENMOD). Usando regressão logística (PROC LOGISTIC), também avaliamos se o período reprodutivo estava relacionado ao TL curto, definido como abaixo da mediana do TL. Além disso, avaliamos um modelo ajustado simultaneamente para período reprodutivo e comprimento da HT. Adicionalmente, avaliamos modelos ajustados para comportamentos ou parâmetros saudáveis, incluindo ingestão de vitaminas e índice de massa corporal (IMC), e também ajustados para outras variáveis, incluindo o modelo de avaliação da homeostase (HOMA, um marcador de sensibilidade à insulina) e a presença do alelo APOE-ε4, adicionados um de cada vez aos modelos. Não havia dados disponíveis em relação à atividade física e apenas uma mulher na amostra era fumante atual, portanto não avaliamos essas variáveis. Avaliamos modelos ajustados por escolaridade, mas o ajuste não influenciou as associações. Portanto, essa variável foi excluída das análises.
Conforme mencionado anteriormente, este estudo incluiu mulheres com menopausa cirúrgica. Isso exigiu ajuste para tipo de menopausa em todas as análises. No entanto, também examinamos as análises principais estratificadas por tipo de menopausa, dadas as diferenças no histórico reprodutivo dos dois grupos. As principais razões para a menopausa cirúrgica são endometriose e miomas, condições comumente associadas à infertilidade e obesidade, que potencialmente confundem ou alteram a natureza das relações entre as exposições endógenas e exógenas ao estrogênio e os desfechos de interesse. Avaliamos modelos estratificados ajustados simultaneamente para duração dos anos reprodutivos e anos de uso de HT.
Finalmente, empregamos regressão logística (PROC LOGISTIC) para avaliar associações entre anos reprodutivos e duração do uso exógeno de HT e o risco de apresentar a combinação de TL curto e níveis elevados de telomerase, ajustados por idade, uma vez que essa combinação pode estar associada a um estado de doença. Com base nos pontos de corte medianos para TL e telomerase (para as 53 mulheres com TL e 33 mulheres para telomerase, 10 mulheres (30% daquelas com dados sobre TL e telomerase) foram definidas como tendo TL curto e telomerase elevada. Esse estado combinado não estava relacionado a marcadores de resistência à insulina, índice de massa corporal, uso de vitaminas ou tipo de menopausa.
Para avaliar melhor o padrão das associações, também avaliamos as relações entre TL, atividade da telomerase e outros marcadores da função reprodutiva, incluindo idade na menarca, idade na menopausa, tempo desde a menopausa e número de gestações. Como a possível influência do uso de HT nos desfechos relacionados à saúde pode ser influenciada pelo momento do início, examinamos as associações entre o momento do início da HT (precoce ou início na perimenopausa vs. tardio—menopausa ou mais tarde), TL e telomerase.
O software estatístico SAS versão 9.2 (SAS Institute, Cary, NC) foi usado em todas as análises estatísticas.
Figura e Tabelas
Porcentagem com o estado combinado de TL curto e alta atividade da telomerase por duração reprodutiva*
Mulheres com duração reprodutiva longa (>35 anos) apresentaram risco significativamente reduzido do estado caracterizado por atividade da telomerase acima da mediana e comprimento dos telômeros abaixo da mediana, OR=0,04 (IC 95%: 0,00–0,48), p=0,01) do que mulheres com duração reprodutiva mais curta (≤ 35 anos) em um modelo ajustado por idade e tipo de menopausa.
Características da população do estudo por duração reprodutiva, N=53
Duração reprodutiva (anos) ≤35 anos >35 anos Idade (anos, faixa 49–69) 57 58 Escolaridade (anos) 16 17 Presença do alelo APOE-ε4 (%) 34 42 Modelo de avaliação da homeostase (HOMA) (N=45) 0,6 0,8 Fatores de estilo de vida IMC (kg/m²) 26 24 Consumo de vitaminas (%) 72 72 Variáveis hormonais Duração do uso de HT (anos) 12 8† Duração dos anos reprodutivos de vida 31 38† Idade na menopausa (anos) 44 52† Menopausa natural (vs. cirúrgica) (%) 51 84† Tempo desde a menopausa (anos): 14 6† Idade na menarca (anos) 13 13 Número de gestações 3 2 Número de nascidos vivos 2 2 Tempo desde o início do uso de HT (anos) 2,4 0†
Médias de quadrados mínimos de análises de covariância, ajustadas por idade (contínua). Exceto para a variável idade, todas as análises ajustadas por idade.
Valor de p, teste de Wald ≤ 0,05
Betas padronizados para fatores reprodutivos, comprimento dos telômeros e telomerase.
TL (N=53) Telomerase (N=33) β valor de p* β valor de p Idade na menarca† −0,04 0,64 0,26 0,02 Gestações 0,10 0,17 0,04 0,73 Anos reprodutivos 0,06 0,04 −0,08 0,03 Idade na menopausa 0,05 0,07 −0,08 0,19 Tempo desde a menopausa −0,05 0,07 0,05 0,19
valor de p, variável contínua. Valores em negrito denotam achados significativos (valor de p < 0,05)
Modelos ajustados por idade e tipo de menopausa.
Betas padronizados ajustados por idade para variáveis que caracterizam a terapia hormonal, comprimento dos telômeros e telomerase, por tipo de menopausa.
TL (N=53) Telomerase (N=33) N β valor de p* N β valor de p Menopausa natural† 35 22 Início precoce de HT −0,03 0,92 −0,66 0,10 Duração do uso de HT‡ 0,01 0,75 −0,03 0,50 Tempo desde o uso de HT −0,06 0,15 0,07 0,22 Menopausa cirúrgica 18 11 Início precoce de HT 0,98 0,005 −1,38 0,04 Duração do uso de HT‡ −0,11 0,02 0,07 0,34 Tempo desde o uso de HT −0,03 0,34 0,01 0,80
valor-p, variável contínua. Valores em negrito indicam achados significativos (p<0,05).
Modelos ajustados por idade. O ajuste adicional por anos de educação teve pouco efeito substancial nas associações.
Como todas as mulheres neste estudo fizeram terapia hormonal (HT), a duração do uso de HT serviu como nossa medida proxy de estrogênios exógenos
Abreviações
TL
comprimento dos telômeros
HT
terapia hormonal
Cérebro e cognição. Existe algum caso para melhora da função cognitiva em mulheres na menopausa usando tratamento com estrogênio?
Exposição hormonal endógena e exógena e risco de comprometimento cognitivo em gêmeos suecos: um estudo preliminar
Características da terapia hormonal, função cognitiva e demência: o estudo prospectivo 3C
O comprimento dos telômeros no sangue periférico prediz a sobrevida no carcinoma de células renais de células claras
A sobrevida do câncer de mama está associada ao comprimento dos telômeros em células sanguíneas periféricas
Associação do comprimento dos telômeros leucocitários com a massa ventricular esquerda ecocardiográfica: o estudo do coração de Framingham
Envelhecimento celular em relação à ativação do estresse e fatores de risco para doenças cardiovasculares
Formação intensa de miócitos a partir de células-tronco cardíacas na hipertrofia cardíaca humana
Senescência e morte de células primitivas e miócitos levam ao envelhecimento cardíaco prematuro e insuficiência cardíaca
Ativação da telomerase e expressão da transcriptase reversa da telomerase humana na aterosclerose coronariana
Depressão Maior e Histórico de Abuso Sexual na Infância Estão Relacionados ao Aumento da Atividade da Telomerase em PBMC
A erosão acelerada dos telômeros está associada ao declínio da função imunológica de cuidadores de pacientes com doença de Alzheimer
Efeitos do estradiol transdérmico em dose ultrabaixa na cognição e na qualidade de vida relacionada à saúde
Genótipo do receptor de estrogênio e risco de comprometimento cognitivo em idosos: achados do estudo Health ABC
APOE épsilon4 está associado a telômeros mais longos, e telômeros mais longos entre portadores de épsilon4 prediz pior memória episódica
Comprimento dos telômeros e polimorfismo da ApoE no comprometimento cognitivo leve, demência degenerativa e vascular
O comprimento dos telômeros não é preditivo de demência ou conversão para CCL em idosos muito idosos
Trajetórias longitudinais do declínio cognitivo entre adultos mais velhos com doença cardiovascular
Associações entre risco de acidente vascular cerebral e cognição no envelhecimento normal e na doença de Alzheimer com e sem depressão
O comprimento dos telômeros está associado a parâmetros de obesidade, mas com diferença de gênero
A diferença de gênero na longevidade: os telômeros são a explicação?
Telômeros e falência medular
O receptor de estrogênio alfa medeia os efeitos do estradiol na atividade da telomerase em células-tronco mesenquimais humanas
O complexo nuclear do receptor de estrogênio alfa e da óxido nítrico sintase endotelial regula a transcrição da telomerase humana
Indução da expressão de hTERT e atividade da telomerase por estrogênios em células do epitélio ovariano humano
Envelhecimento replicativo, telômeros e estresse oxidativo
Peróxido de hidrogênio desencadeia a exportação nuclear da transcriptase reversa da telomerase via fosforilação dependente da família de quinases Src da tirosina 707
Efeito antioxidante do estrogênio em células endoteliais aórticas bovinas
Raloxifeno protege a função das células endoteliais contra o estresse oxidativo
Dinâmica da atividade da telomerase em resposta ao estresse psicológico agudo
Citocinas modulam a atividade da telomerase em uma linhagem celular de mieloma múltiplo humano
Telômeros curtos protegem contra aterosclerose induzida por dieta em camundongos com apolipoproteína E nula
Sinalização de danos ao DNA previne a adição deletéria de telômeros em quebras de DNA
Indução de telomerase em astrócitos de ratos Sprague-Dawley após lesão cerebral isquêmica
Expressão ectópica da subunidade catalítica da telomerase protege contra lesão cerebral resultante de isquemia e neurotoxicidade induzida por NMDA
Terapia de reposição hormonal e inflamação: interações na doença cardiovascular
Níveis endógenos de hormônios sexuais e risco de declínio cognitivo em uma coorte birracial idosa
Estrogênio, envelhecimento e o sistema cardiovascular
Estrogênio e mecanismos de proteção vascular
Pessimismo se correlaciona com encurtamento de telômeros leucocitários e interleucina-6 elevada em mulheres na pós-menopausa
Danos ao DNA em telômeros e mitocôndrias durante a senescência celular: existe uma conexão?
Estrogênio mais progestina e a incidência de demência e comprometimento cognitivo leve em mulheres na pós-menopausa: o Estudo de Memória da Iniciativa de Saúde da Mulher: um ensaio clínico randomizado controlado
Efeito da terapia hormonal de longo prazo no comprimento dos telômeros em mulheres na pós-menopausa
A associação entre atividade física no tempo de lazer e comprimento dos telômeros leucocitários
Uso de multivitamínicos e comprimento dos telômeros em mulheres
O comprimento dos telômeros leucocitários está associado ao desempenho cognitivo em mulheres saudáveis
Determinação genética do tamanho dos telômeros em humanos: um estudo de gêmeos de três faixas etárias
Mapeamento de loci genéticos que determinam o comprimento dos telômeros leucocitários em uma grande amostra de pares de irmãs não selecionadas
Mapeamento de um locus principal que determina o comprimento dos telômeros em humanos
Indicadores para a duração total da exposição endógena ao estrogênio na pré-menopausa em relação à DMO
Medição de telômeros por PCR quantitativo
Análises e comparações da atividade da telomerase e do comprimento dos telômeros em células T e B humanas: insights para a epidemiologia da manutenção dos telômeros