pmid: "37445780"
title: "Revisão Sistêmica dos Moduladores da Retração do Coágulo."
authors: "Guilbeau A, Majumder R"
journal: "International journal of molecular sciences"
pubdate: "2023 Jun 25"
doi: "10.3390/ijms241310602"
source: "PMC Full Text"
Revisão Sistêmica dos Moduladores da Retração do Coágulo.
Autores
Guilbeau A, Majumder R
Periodico
International journal of molecular sciences (2023 Jun 25)
Conteudo
Revisão Sistêmica dos Moduladores da Retração do Coágulo
Através de um processo denominado retração do coágulo, as plaquetas fazem com que os trombos se contraiam e se tornem mais estáveis. Após a ativação das plaquetas por sinalização inside-out, a glicoproteína αIIbβIII se liga ao fibrinogênio e inicia uma cascata de sinalização intracelular que termina na remodelação da actina, o que faz com que a plaqueta mude sua forma. A retração do coágulo também é importante para a cicatrização de feridas. Embora a biologia molecular detalhada da retração do coágulo seja apenas parcialmente compreendida, várias substâncias e condições fisiológicas modulam a retração do coágulo. Nesta revisão, descrevemos parte da literatura atual referente aos moduladores da retração do coágulo. Além disso, discutimos compostos de Cudrania trucuspidata, Arctium lappa e Panax ginseng que diminuem a retração do coágulo e têm inúmeros outros benefícios para a saúde. O ácido cafeico e o diindolilmetano, ambos comuns em plantas e vegetais, também reduzem a retração do coágulo, assim como o ácido all-trans retinoico (um derivado da vitamina A), dois inibidores de MAP4K e o fármaco quimioterápico Dasatinibe. Por outro lado, o anticoagulante endógeno Proteína S (PS) e a proteína matricelular secretada proteína moduladora de cálcio ligante 1 (SMOC1) ambos aumentam a retração do coágulo. A maioria dos estudos que visam identificar mecanismos dos moduladores da retração do coágulo concentrou-se no aumento da fosforilação da fosfoproteína estimulada por vasodilatador e do receptor de inositol 1,4,5-trifosfato I e na diminuição da fosforilação de várias fosfolipases (por exemplo, fosfolipase A2 (PLA2) e fosfolipase Cγ2 específica de fosfatidilinositol (PLCγ2), c-Jun N-terminal quinase e (PI3Ks). Um estudo concentrou-se na diminuição da fosforilação das Quinases da Família Sarcoma (SFK), e outros se concentraram no aumento dos níveis de cAMP e na regulação negativa de marcadores inflamatórios, como tromboxanos, incluindo tromboxano A2 (TXA2) e tromboxano B2 (TXB2); prostaglandina A2 (PGE2); espécies reativas de oxigênio (ERO); e atividade da enzima ciclooxigenase (COX). Adicionalmente, a gravidez, a fibrinólise e a condição autoimune lúpus eritematoso sistêmico parecem afetar, ou pelo menos ter alguma relação com, a retração do coágulo. Todos os moduladores da retração do coágulo necessitam de estudo aprofundado para explicar esses efeitos.
- Introdução
A retração do coágulo é vital na cicatrização de feridas e na formação de cicatrizes. A ativação e retração plaquetárias não apenas estabilizam o coágulo e facilitam a organização do trombo, mas a ativação também causa a liberação de fatores de crescimento, como o fator de crescimento transformador beta 1 (TGF-β1), o fator de crescimento epidérmico (EGF) e o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), metaloproteinases de matriz 1, 2, 3, 9 e 14, ADAMTS 13 e várias elastases. Singh et al. mostraram que a interleucina (IL)-6 liberada pelas plaquetas induziu a expressão de semaforina 7A (SEMA7A), angiopoietina-like 4 (ANGPLT4), IL-32 e metaloproteinase de matriz 2 (MMP-2) em queratinócitos adjacentes in vitro. Além disso, Samson et al. sugeriram que a natureza contrátil das plaquetas pode ajudar a restabelecer a patência de pequenos vasos após eventos tromboembólicos e ruptura de placa. A retração do coágulo é uma função plaquetária importante no delicado equilíbrio entre hemostasia e hemorragia. O mecanismo detalhado da retração do coágulo tornou-se um tópico de pesquisa altamente ativa, mas ainda há muito a aprender sobre as vias de sinalização associadas e as maneiras pelas quais o processo pode ser modificado. O objetivo desta revisão da literatura é descrever alguns dos compostos e condições que afetam a taxa e a intensidade da retração do coágulo.
As plaquetas expressam receptores acoplados à proteína G que se ligam à trombina, TXA2, ADP, epinefrina e colágeno para ativar a sinalização de dentro para fora. A proteína G ativa a fosfolipase α, β ou γ, o que causa um aumento no diacilglicerol e no inositol 1,4,5-trifosfato. Essas duas moléculas ativam a proteína quinase C, que, por sua vez, ativa o fator de troca de nucleotídeos guanina. Em seguida, a GTPase proteína 1 relacionada a Ras (Rap 1) se liga a uma molécula adaptadora, que ativa as proteínas do citoesqueleto talina e kindlina. O grande final da sinalização de dentro para fora é uma mudança conformacional na glicoproteína altamente expressa αIIbβIII (um estudo encontrou até 100.000 em cada plaqueta), que então adquire maior afinidade por fibrina e fibrinogênio. Esse processo é mostrado contra o fundo cinza na Figura 1.
A ligação da glicoproteína αIIbβIII ao fibrinogênio inicia a cascata de sinalização de fora para dentro que leva a uma mudança na arquitetura da actina. A calpaína cliva a quinase não receptora, o proto-oncogene src conhecido como tirosina quinase não receptora (Src) da cauda β3 da integrina GP-αIIbβIII, o que ativa múltiplas cascatas de sinalização que envolvem as pequenas GTPases da família Rho, a fosfatidilinositol 3-quinase, a quinase de adesão focal, a quinase Syk, várias fosfatases e, notavelmente, a talina e a kindlina, as mesmas proteínas envolvidas na sinalização de dentro para fora. A talina, kindlina, tensina e vinculina formam um complexo com a Src e se conectam à actina, causando mudanças dinâmicas no citoesqueleto plaquetário, conforme mostrado contra o fundo branco na Figura 1. Dessa forma, a plaqueta se transforma de uma forma plana em uma esfera. Quando essa transformação ocorre com muitas plaquetas ao mesmo tempo, reduz drasticamente o tamanho do coágulo. - Métodos
Realizamos uma busca na literatura no Pubmed e ResearchGate utilizando as palavras-chave “retração do coágulo”, “contração do coágulo”, “contração plaquetária”, “actina plaquetária”, “tamanho do trombo” e “ativação plaquetária”. No total, 1.621 trabalhos foram identificados no PubMed e 3 foram identificados no ResearchGate. Apenas artigos completos revisados por pares, publicados nos últimos seis anos (2018–2023), foram utilizados nesta revisão; assim, 1.442 itens foram excluídos no processo de triagem usando ferramentas automatizadas nos mecanismos de busca. Um total de 182 artigos completos foram avaliados quanto à elegibilidade. Destes, 145 foram excluídos por não descreverem moduladores da retração do coágulo (fora do escopo) e 3 foram excluídos devido à insuficiência de rigor das evidências. Os 24 artigos identificados como produtos deste processo de seleção foram utilizados neste artigo de revisão. Este processo de seleção é mostrado em um diagrama de fluxo na Figura 2. - Resultados e Discussão
3.1. Moduladores Exógenos da Retração do Coágulo
A amoreira chinesa Cudrania trucuspidata é uma planta que tem sido usada na medicina do Leste Asiático há séculos. Alguns de seus poderes incluem redução da inflamação e efeitos anticancerígenos e antiobesidade. Tradicionalmente, tem sido usada para tratar caxumba, eczema, tuberculose e artrite. No entanto, seus efeitos fisiológicos não param por aí. Estudos recentes forneceram evidências mostrando que vários compostos em C. tricuspidata são capazes de reduzir a retração do coágulo.
Shin et al. descobriram que a derrona, uma isoflavona em C. tricuspidata, inibiu a retração do coágulo através da fosforilação da fosfoproteína estimulada por vasodilatador plaquetária (VASP) e do receptor de inositol 1,4,5-trifosfato I (IP3RI) e da desfosforilação da fosfolipase A2 citosólica, p38, c-Jun N-terminal quinase e (PI3Ks). Outros efeitos a jusante incluíram diminuições na mobilização de cálcio, agregação plaquetária e afinidade da glicoproteína αIIbβIII. Além disso, a liberação de TXA2 e serotonina foi regulada negativamente na presença de derrona, enquanto cAMP e cGMP foram regulados positivamente. Shin et al. mostraram que a Cudraxantona B, uma xantona de C. tricuspidata, inibiu a retração do coágulo de maneira aparentemente idêntica à derrona, e teve o mesmo efeito nas vias de sinalização plaquetária. Na Tabela 1, pode-se ver um esquema organizado dos mecanismos propostos por trás de cada modulador exógeno.
Shin et al. descobriram mais uma substância em C. tricuspidata, uma flavona chamada artocarpesina, que inibiu a retração do coágulo. A artocarpesina produziu todos os mesmos efeitos na sinalização que a derrona e a cudraxantona B. Os estudos foram todos realizados in vitro usando plaquetas lavadas. A retração do coágulo foi medida por meio de imagem digital sequencial e análise computacional, a agregação plaquetária foi medida como porcentagem de transmitância de luz, a mobilização de cálcio foi medida com um espectrofluorômetro, as moléculas de sinalização foram medidas por imunotransferência, e a liberação de serotonina e TXA2 foi medida por ELISA ou EIA. Em cada estudo, os investigadores analisaram a morte celular medindo a lactato desidrogenase extracelular; não encontraram citotoxicidade significativa. Notavelmente, a fosforilação de VASP e do receptor de trifosfato de inositol evocado por agonista (IP3-RI) só foi afetada em altas concentrações (>30 μM) de cudraxantona B e derrona, e a artocarpesina só afetou a fosforilação de IP3-RI em concentrações de 80–100 μM.
Nam et al. identificaram a morina hidratada como outro inibidor da retração do coágulo proveniente de C. tricuspidata. A morina hidratada também pode ser isolada da amoreira-branca Morus alba e da amendoeira Prunus dulcis. Os efeitos da morina hidratada na sinalização plaquetária são semelhantes aos efeitos dos compostos mencionados anteriormente, com o acréscimo da regulação negativa da P-selectina e do ATP, bem como da diminuição da fosforilação de (PLCγ2) e da quinase regulada por sinal extracelular (ERK). Efeitos na fosforilação de VASP não foram descritos para a morina hidratada. Curiosamente, Nam et al. também mediram o efeito da morina hidratada na coagulação sanguínea utilizando os ensaios de tempo de tromboplastina parcial ativada (aPTT) e tempo de protrombina (PT); os investigadores não encontraram diferença significativa em comparação com o controle. Esse resultado sugeriu que a morina hidratada é um potencial agente terapêutico para reduzir o risco de ruptura de placa e acúmulo prejudicial de plaquetas nos vasos, sem o risco de hemorragia associado às terapias anticoagulantes atuais. Mais estudos devem ser conduzidos para avaliar a eficácia dos compostos de C. tricuspidata em camundongos ou outros modelos animais para a prevenção de eventos trombóticos, como acidente vascular cerebral e infarto do miocárdio. Cudrania trucuspidata é uma planta valiosa que poderia ser usada para beneficiar inúmeros pacientes que têm doença cardiovascular; seu uso deve ser integrado à medicina ocidental, assim como foi integrado à medicina asiática por muitos anos.
Kwon et al. investigaram a arctigenina, um ligante que inibe a retração do coágulo. A arctigenina é encontrada na Arctium lappa, comumente chamada de bardana-maior, da família Asteraceae. A arctigenina reduziu a agregação plaquetária induzida por trombina, ADP e colágeno, a liberação de ATP e serotonina, a mobilização de cálcio, a ligação do fibrinogênio à GP-αIIbβIII, a expressão de P-selectina, a produção de TXA2 e a atividade da COX-1. Também aumentou a fosforilação de VASP e IP3-RI e a produção de cAMP. Não houve efeitos significativos na coagulação, conforme medido pelos ensaios de aPTT e TP. Um ensaio de lactato desidrogenase novamente não mostrou qualquer citotoxicidade da arctigenina. Assim como C. tricuspidata, A. lappa poderia ser um agente terapêutico para a prevenção da aterosclerose. A arctigenina tem os benefícios adicionais de ser um agente anticancerígeno; promove a saúde renal e possivelmente combate a depressão ao inibir as células da glia.
O ácido cafeico é um polifenol que ocorre em muitas plantas e foi estudado em camundongos devido aos seus efeitos antitrombóticos. Nam et al. relataram que o ácido cafeico parecia ser antiplaquetário por natureza, o que incluía a inibição da retração do coágulo. Os investigadores focaram no aumento da produção de cAMP na presença de ácido cafeico. O dipiridamol, um inibidor da fosfodiesterase 3, também reduziu a retração do coágulo in vitro. Assim, Nam et al. concluíram que a principal ação do ácido cafeico era aumentar os níveis de cAMP nas plaquetas, o que levava à fosforilação a jusante de moléculas de sinalização como VASP e IP3-RI. Essa conclusão explicaria como tantas substâncias diferentes podem afetar um processo multifacetado como a retração do coágulo de maneira aparentemente idêntica.
O indol-3-carbinol é um fitoquímico presente em vegetais crucíferos, como repolho, couve, brócolis e couve-de-bruxelas. Às vezes é tomado como suplemento devido aos seus efeitos anti-inflamatórios, anticancerígenos e antitrombóticos. No entanto, Ramakrishna et al. focaram no diindolilmetano, um metabólito do indol-3-carbinol que tem efeitos mais potentes sobre as plaquetas e a retração do coágulo em comparação com seu composto original. O diindolilmetano foi primeiro analisado por simulação computacional. Descobriu-se que a glicoproteína VI e o receptor purinérgico Y12 nas plaquetas foram modificados tanto pelo indol-3-carbinol quanto pelo diindolilmetano, mas o diindolilmetano teve um efeito maior. A retração do coágulo e a agregação plaquetária foram ambas reduzidas substancialmente pelo diindolilmetano in vitro.
Nos estudos in vivo, a lesão induzida por FeCl3 na artéria carótida ocluiu mais lentamente em camundongos pré-tratados com diindolilmetano, e as plaquetas desses camundongos produziram níveis mais baixos de ROS, TXB2, COX-1 e PGE2 e níveis mais elevados de cAMP. A oclusão vascular foi medida por ultrassom. Como o estudo foi realizado in vivo, a retração do coágulo foi medida com base no peso e no tamanho do trombo, coletado da artéria carótida, em vez de usar a técnica de imagem sequencial convencional. As medidas de peso e tamanho não são a abordagem mais precisa, pois essas medições não indicam a diferença entre o tamanho inicial do coágulo e o tamanho após a retração. Múltiplos pontos temporais são necessários para concluir adequadamente que a retração do coágulo é inibida in vivo. No entanto, o estudo mostrou que o diindolilmetano teve um importante efeito antiplaquetário.
O Panax ginseng é outra erva utilizada na medicina tradicional do Leste Asiático. Kwon et al. descobriram que o ginsenosídeo Ro, um composto desta planta, inibiu a agregação plaquetária induzida por trombina, a retração do coágulo e a adesão de fibronectina à GP-αIIbβIII. Este estudo concentrou-se nas vias Akt e PI3K, que foram propostas como os locais de ação do ginsenosídeo Ro. O inibidor da fosforilação de Akt, miltefosina, comumente usado para tratar leishmaniose, além do inibidor da fosforilação de PI3K, wortmannina, foram utilizados como controles positivos. A miltefosina e a wortmannina diminuíram a agregação plaquetária, a retração do coágulo e a ligação de fibronectina, e, em combinação com o ginsenosídeo Ro, tiveram efeitos sinérgicos em cada processo. O ginsenosídeo Ro, isoladamente, inibiu a fosforilação de Akt e PI3K, conforme avaliado por imunotransferência. Este estudo foi limitado porque a ligação de fibrinogênio à GP-αIIbβIII foi medida em apenas uma concentração de ginsenosídeo Ro (300 μM), enquanto a adesão de fibronectina e outros parâmetros foram medidos em múltiplas concentrações. Da mesma forma, os efeitos antiplaquetários da miltefosina e da wortmannina foram demonstrados apenas em uma concentração (10 μM). Conclusões mais confiáveis poderiam ter sido obtidas se esses efeitos tivessem se mostrado dependentes da dose. Embora o estudo conduzido por Kwon seja um primeiro passo importante na avaliação da atividade do ginsenosídeo Ro, a especulação de que ele afeta principalmente as vias Akt e PI3K deve ser expandida para incluir vias implicadas por outros inibidores da retração do coágulo—vias como a regulação positiva de cAMP, regulação negativa de COX1, TXA2/TXB2 e ROS, e o aumento da fosforilação de VASP e IP3RI.
Luo et al. propuseram que o ácido all-trans retinóico (ATRA, também conhecido como tretinoína) reduziu a retração do coágulo ao causar diminuição da fosforilação de Syk e PLCγ2. Esse efeito é significativo porque o mecanismo proposto anteriormente para a hidrata de morina também incluía diminuição da fosforilação de PLCγ2; possivelmente, esses efeitos são indícios de que a PLCγ2 tem uma função central na regulação da retração do coágulo. Essa ideia é ainda apoiada pela posição upstream da PLCγ2 no processo de sinalização de dentro para fora. Notavelmente, os investigadores descobriram que a ATRA é um agente hemofílico, em contraste com a hidrata de morina, que não afetou o tempo de coagulação, embora o efeito da ATRA na coagulação tenha sido medido com base no tempo de sangramento da cauda de camundongos, enquanto o efeito da hidrata de morina foi medido através de ensaios de coagulação.
Um estudo interessante conduzido por Debreceni et al. mostrou que o fármaco quimioterápico Dasatinibe reduz a retração do coágulo ao atenuar a fosforilação da Quinase da Família Sarcoma (SFK). O Dasatinibe é uma variação do Imatinibe, a terapia alvo para Leucemia Mieloide Crônica (LMC). Ele funciona inibindo a tirosina quinase BCR-ABL, uma proteína de fusão aberrante expressa na LMC. Efeitos adversos hemofílicos foram documentados em muitos pacientes que tomam Dasatinibe, o que se acredita ser devido à disfunção plaquetária, bem como à pancitopenia. Este estudo focou no mecanismo molecular envolvido na disfunção plaquetária. Quando adicionado ao plasma de pacientes saudáveis, o Dasatinibe demonstrou diminuir a exposição de fosfatidilserina em resposta à convulsina, a geração total de trombina e o pico de trombina, e aumentar o tempo de latência e o tempo necessário para atingir o pico de trombina. Plaquetas tratadas com Dasatinibe também apresentaram menor expressão de GP-αIIbβIII induzida por convulsina (medida por citometria de fluxo) e retração do coágulo (medida pela porcentagem de soro extraído). Esta pesquisa foi diferente dos estudos discutidos anteriormente, pois os efeitos foram mostrados na cascata de coagulação, juntamente com as plaquetas. Em seguida, foi realizada a técnica de Western blot para demonstrar que o plasma tratado com Dasatinibe apresentava níveis mais baixos de fosforilação de SFK na cauda C-terminal e no loop ativo. A atenuação da fosforilação de SFK foi demonstrada em Src, Fyn e Lyn. Esses resultados ampliam nossa compreensão sobre a retração do coágulo ao solidificar o papel central das SFKs na sinalização de fora para dentro.
Por último, Nam et al. descobriram que os inibidores da proteína quinase 4 ativada por mitógeno (MAP4K4) GNE 495 e PF06260933 diminuíram a retração do coágulo, com os mesmos efeitos a jusante observados com muitos dos compostos mencionados anteriormente. Esses efeitos incluíram menor ligação de TXB2, ATP, serotonina e fibrinogênio e maior fosforilação de cAMP, IP3-RI e VASP. A fosforilação da subunidade catalítica da proteína quinase A (PKAc) foi um parâmetro adicional medido neste estudo; a PKAc foi aumentada por ambos os inibidores de MAP4K4. Não houve efeito significativo na atividade total da COX, no tempo de coagulação (aPTT e TP) ou na citotoxicidade. Como no estudo do ácido cafeico, o dipiridamol foi usado como controle positivo, e verificou-se que ele atua sinergicamente com o GNE 495, fornecendo evidências adicionais de que o cAMP é um componente importante na regulação da retração do coágulo.
3.2. Moduladores Endógenos
Em um estudo transversal com 100 mulheres grávidas e 100 não grávidas, Okoroiwu et al. observaram que tanto o tempo de retração do coágulo quanto a contagem de plaquetas eram menores nas mulheres grávidas. Os autores concluíram que a gravidez e, possivelmente, os níveis de estrogênio e progesterona influenciam a retração do coágulo. No entanto, são necessárias mais evidências para apoiar essa conclusão. Neste estudo, o tempo de retração do coágulo foi medido apenas em intervalos de 1, 2, 4 e 24 horas, e o tempo registrado para cada amostra foi "o período de tempo que o sangue coagulado levou para retrair", sem parâmetros que definissem o que isso implicava. A alteração na ativação plaquetária durante a gravidez é um fenômeno interessante de significado incerto, e deve ser investigada mais a fundo usando ensaios convencionais de retração do coágulo, como a medição de volume em intervalos curtos (10–20 min) com fotografia ou tecnologia de transdução de força.
A fibrinólise é outra condição fisiológica proposta como tendo relação com a retração do coágulo. Em um estudo in vivo, Andre et al. descobriram que a fibrinólise aumentou acentuadamente a retração do coágulo. As veias mesentéricas de camundongos foram lesionadas usando uma agulha, e então a trombina foi injetada na circulação para promover a formação do coágulo. A retração do coágulo foi medida por meio de microscopia confocal de fluorescência. Quando a fibrinólise foi iniciada através da adição de uma pequena quantidade de ativador do plasminogênio tecidual (≤500 pM), a retração do coágulo foi aumentada. Além disso, a retração do coágulo foi medida na presença de seis inibidores da fibrinólise: ácido tranexâmico, inibidor da fibrinólise ativado pela trombina, α2 antiplasmina, inibidor do fator XIIIa e dois anticorpos IgG diferentes atuando como antagonistas do tPA. Verificou-se que cada um desses inibidores da fibrinólise reduziu individualmente a retração do coágulo.
Curiosamente, Tutwiler et al. relataram achados exatamente opostos, ou seja, a retração do coágulo influenciou a taxa de fibrinólise. Os autores inibiram a retração do coágulo com blebbistatina, um inibidor da miosina IIa; abciximabe, um inibidor de αIIbβIII; ou latrunculina A, que impede a polimerização da actina. O resultado foi uma redução de 4 vezes na fibrinólise externa e um aumento de 2 vezes na fibrinólise interna. Obviamente, a fibrinólise e a retração do coágulo são processos que interagem de alguma forma, talvez até de maneira bidirecional, mas o mecanismo exato ainda não está claro.
Conforme demonstrado para muitos dos moduladores exógenos descritos anteriormente, marcadores inflamatórios como PGE2 e TXB2/TXA2 estão intimamente ligados à retração do coágulo. Assim, não é surpreendente que Misztal et al. tenham encontrado uma redução dose-dependente (50–500 μM) na retração do coágulo mediada pelo produto da mieloperoxidase, o hipoclorito. Em concentrações mais altas (125–500 μM), o hipoclorito reduziu a fibrinólise. A agregação plaquetária, a formação de trombos (em câmaras de fluxo artificiais que simulavam vasos sanguíneos), a produção de ATP e a expressão de P-selectina também foram diminuídas na presença de hipoclorito. Curiosamente, o hipoclorito afetou a estrutura do coágulo, conforme avaliado por microscopia confocal, e quando fibrinogênio foi adicionado à solução de hipoclorito, ligações cruzadas de di-tirosina foram observadas como um possível mecanismo para os fenômenos mencionados. Isso pode ter implicações importantes para pacientes com estados inflamatórios crônicos, como tuberculose, diabetes e doenças autoimunes.
Em relação às doenças autoimunes, Le Minh et al. observaram que a retração do coágulo estava reduzida em pacientes com lúpus eritematoso sistêmico (LES), mas não devido ao hipoclorito. Os autores compararam amostras de sangue de 51 pacientes com lúpus e 60 pacientes saudáveis, e encontraram menor retração do coágulo, menor expressão de P-selectina e menor capacidade de ligação fibrinogênio–GP-αIIbβIII nos pacientes com LES. Na verdade, pacientes com níveis mais elevados de anticorpos anti-dsDNA apresentaram a maior redução na retração do coágulo. Essa descoberta motivou um experimento in vitro no qual sangue normal foi incubado com autoanticorpos de pacientes com lúpus antes da coagulação; as plaquetas pareciam ser continuamente estimuladas pelos anticorpos (aumento da retração do coágulo) e, em seguida, as plaquetas perdiam rapidamente a atividade (diminuição da retração do coágulo). Os autores sugeriram que os autoanticorpos do lúpus se ligam e "desgastam" as plaquetas, o que sugere a desregulação da retração do coágulo em pacientes com LES.
No tópico das condições inflamatórias, outro estudo investigou uma proteína de matriz chamada proteína secretada modular de ligação ao cálcio 1 (SMOC1), que é superexpressa em plaquetas de indivíduos com diabetes mellitus tipo II. Como a SMOC1 é regulada pelo microRNA-223, que é abundantemente expresso em plaquetas, teorizou-se que a SMOC1 poderia ter alguma função na ativação e atividade plaquetária. Assim, Lagos et al. utilizaram plaquetas de camundongos com um alelo de SMOC1 nocauteado (SMOC1+/−) para medir a retração do coágulo, agregação plaquetária, espalhamento plaquetário, agregações leucócito-plaqueta e mobilização de cálcio induzida por trombina. Todos esses parâmetros foram significativamente menores nas plaquetas SMOC1+/− em comparação com o tipo selvagem, sugerindo que essa proteína pode desempenhar um papel no estado pró-trombótico de pacientes diabéticos. A hiperatividade plaquetária foi adicionalmente evidenciada pelo aumento da fosforilação da integrina β1, bem como pela agregação em plaquetas isoladas de pacientes diabéticos, e esses efeitos foram atenuados com a adição de anticorpo anti-SMOC1. Esta é uma descoberta inestimável, uma vez que sabemos que o infarto do miocárdio é a principal causa de morte em indivíduos diabéticos, e essas pessoas têm um risco maior de sofrer tal evento do que a população não diabética. Estudos adicionais devem solidificar essa correlação usando um número maior de amostras de sangue de diabéticos, já que este estudo incluiu apenas 16.
Uma última descoberta significativa diz respeito ao anticoagulante endógeno Proteína S. A Proteína S é majoritariamente sintetizada por hepatócitos, mas também é expressa em plaquetas em baixo nível. Camundongos geneticamente modificados Cre-Lox foram criados usando o promotor do Fator Plaquetário 4 para remover o gene PROS1 (gene da Proteína S) nas plaquetas, preservando-o em outros tecidos. O objetivo deste estudo, conduzido por Calzavarini et al., foi mostrar que a inativação da expressão plaquetária da Proteína S leva ao aumento da formação de trombos na veia cava. Em uma condição de baixa trombina, a retração do coágulo não foi afetada, mas com altas concentrações de trombina (10 U/mL), a retração do coágulo foi prejudicada nos camundongos Pros1lox/loxPf4-Cre+. Em outro estudo, Brouns et al. utilizaram imagens microscópicas multicoloridas em tempo real para comparar 23 amostras de sangue de pacientes com deficiência de Proteína S ou Proteína C com amostras de 15 pessoas saudáveis. O primeiro grupo exibiu menor ativação plaquetária, formação de fibrina e retração do coágulo, o que indicou que a Proteína S plaquetária pode aumentar a retração do coágulo em humanos. Ensaios in vitro com sangue normal e adição de Proteína S ou anticorpo anti-PS poderiam ser o próximo passo para confirmar essa teoria.
3.3. Discussão
A retração do coágulo é um tópico interessante e clinicamente relevante, e entender sua regulação é especialmente importante, já que as doenças cardiovasculares são a principal causa de morte no mundo. Descrevemos algumas pesquisas recentes sobre a modulação da retração do coágulo e as condições fisiológicas que podem afetar esse processo. Notavelmente, a C. trucuspidata, com quatro compostos diferentes que inibem independentemente a retração do coágulo, é um agente terapêutico potencial para reduzir a aterosclerose e a ruptura da placa. Outras substâncias vegetais, como arctigenina, ácido cafeico, diindolilmetano e Ginsenosídeo Ro, têm potencial como agentes terapêuticos. O tratamento da LMC com Dasatinibe parece inibir a função plaquetária, o que pode causar eventos adversos como sangramento. Gravidez, fibrinólise, lúpus eritematoso sistêmico e o hipoclorito de ROS parecem influenciar a retração do coágulo, embora alguns desses mecanismos sejam mais claros do que outros, e a superexpressão da proteína da matriz SMOC1 parece contribuir para a atividade plaquetária anormal em pacientes diabéticos. Além disso, há evidências de que a Proteína S plaquetária facilita a retração do coágulo em camundongos e humanos.
- Conclusões
Embora não conheçamos todas as vias envolvidas na retração do coágulo, é promissor ver uma coleção tão diversa de pesquisas pertinentes na literatura. De fato, mais biólogos, profissionais de saúde, empresas farmacêuticas e pesquisadores deveriam conhecer a natureza cinética das plaquetas, pois elas são necessárias para uma compreensão completa da trombose e da hemodinâmica. A retração do coágulo é vital para a estabilização do trombo, mas também mantém aberturas nos vasos após a coagulação e inicia a cicatrização de feridas após o trauma. Esperamos que esta revisão incentive o compartilhamento de ideias e aumente o interesse no tópico da retração do coágulo.
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Contribuições dos Autores
A.G.: redação—preparação do rascunho original. R.M.: redação—revisão e edição. Todos os autores leram e concordaram com a versão publicada do manuscrito.
Declaração do Comitê de Revisão Institucional
Não aplicável.
Declaração de Consentimento Informado
Não aplicável.
Declaração de Disponibilidade de Dados
Esta é uma revisão baseada na literatura publicada.
Conflitos de Interesse
Os autores declaram não haver conflito de interesses.
Referências
Base molecular da retração do coágulo e seu papel na cicatrização de feridas
Fatores de Crescimento Liberados por Plaquetas Influenciam Genes Associados à Cicatrização de Feridas em Queratinócitos Humanos e Explantes de Pele Ex Vivo
A fibrinólise endógena facilita a retração do coágulo in vivo
Retração do Coágulo: Mecanismos Celulares e Inibidores, Métodos de Medição e Implicações Clínicas
Integrina alfaIIb beta3 plaquetária: Transdução de sinal, regulação e seu direcionamento terapêutico
Efeitos Anti-Inflamatórios de Compostos de Cudrania tricuspidata em Queratinócitos Humanos HaCaT
Extrato de Cudrania tricuspidata e Seus Principais Constituintes Inibem a Lesão Hepática Induzida por Estresse Oxidativo
Compostos bioativos de Cudrania tricuspidata: Uma fonte natural anticâncer
Efeito protetor contra o câncer de uma combinação simbiótica entre Lactobacillus gasseri 505 e um extrato de folha de Cudrania tricuspidata no câncer colorretal associado à colite
Efeito sinérgico de Lactobacillus gasseri e Cudrania tricuspidata na modulação do peso corporal e da estrutura da microbiota intestinal em camundongos obesos induzidos por dieta
Xantonas dos caules de Cudrania tricuspidata e seus efeitos inibidores sobre a lipase pancreática e o acúmulo de gordura
A administração de vinagre de fruta de Cudrania tricuspidata a curto prazo atenua a obesidade em camundongos alimentados com dieta rica em gordura, melhorando o acúmulo de gordura e os parâmetros metabólicos
Derrone Inibe a Agregação Plaquetária, a Secreção de Grânulos, a Geração de Tromboxano A(2) e a Retração do Coágulo: Um Estudo In Vitro
O efeito antiplaquetário da cudraxantona B está relacionado à inibição da mobilização de cálcio, ativação de αIIbβ3 e retração do coágulo
Artocarpesina atua na agregação plaquetária humana através da inibição de nucleotídeos cíclicos e MAPKs
Hidrato de morina inibe a ativação plaquetária e a retração do coágulo ao regular os níveis de integrina alfa(IIb)beta(3), TXA(2) e AMPc
Arctigenina atenua a ativação plaquetária e a retração do coágulo pela regulação da síntese de tromboxano A(2) e da via do AMPc
Mecanismos moleculares da ação da Arctigenina no câncer
Arctigenina, um agente antitumoral; um tópico de ponta e abordagem atualizada no tratamento do câncer
Arctigenina, um novo inibidor de TMEM16A para terapia de adenocarcinoma de pulmão
Arctigenina atenua a doença renal diabética através da ativação de PP2A em podócitos
Arctigenina alivia a nefrotoxicidade induzida por cádmio: Visando o estresse do retículo endoplasmático, a sinalização Nrf2 e a resposta inflamatória associada
Arctigenina protege contra a depressão ao inibir a ativação microglial e a neuroinflamação através das vias HMGB1/TLR4/NF-kappaB e TNF-alfa/TNFR1/NF-kappaB
O efeito antitrombótico do ácido cafeico está associado a uma via dependente de AMPc e à retração do coágulo em plaquetas humanas
Indol-3-carbinol previne a colite e a disbiose microbiana associada de maneira dependente de IL-22
Derivado de Indol-3-Carbinol DIM Mitiga a Lesão Hepática Aguda Induzida por Tetracloreto de Carbono em Camundongos ao Inibir a Resposta Inflamatória, a Apoptose e Regular o Estresse Oxidativo
Indol-3-carbinol: Um hormônio vegetal combatendo o câncer
A Inibição do Crescimento Tumoral pelo Indol-3-Carbinol Dietético em um Modelo de Xenotransplante de Câncer de Próstata Pode Estar Associada a Interações Microbianas Intestinais Disruptivas
Indução de apoptose em células de câncer de pulmão H1299 tratadas com indol-3-carbinol via elevação do nível de ROS
Fitoquímicos Nutricionais que Afetam a Sinalização e Responsividade Plaquetária: Implicações para Trombose e Hemostasia
O Indol-3-carbinol melhora os sintomas neurocomportamentais em um modelo de acidente vascular cerebral isquêmico
O Diindolilmetano melhora a agregação plaquetária e a trombose: Estudos in silico, in vitro e in vivo
Efeitos Inibidores do Ginsenosídeo Ro na Retração do Coágulo através da Supressão da Via de Sinalização PI3K/Akt em Plaquetas Humanas
As membranas do vacúolo parasitóforo da Leishmania exibem fosfoinositídeos que criam condições para a ativação contínua da Akt e um alvo para a miltefosina em infecções por Leishmania
A Wortmannina, visando a fosfatidilinositol 3-quinase, suprime fatores angiogênicos em células endoteliais sob estresse de cisalhamento
O Ácido All-Trans Retinoico Prejudica a Função Plaquetária e a Formação de Trombo e Inibe a Fosforilação da Proteína Quinase CssI/delta
A sinalização plaquetária intracelular como alvo para o desenvolvimento de fármacos
O Dasatinibe Inibe as Atividades Pró-coagulantes e de Retração do Coágulo das Plaquetas Humanas
Reações adversas após tratamento com dasatinibe na leucemia mieloide crônica: Características, mecanismos potenciais e estratégias de manejo clínico
Uma nova função para os inibidores de MAP4K4 durante a agregação plaquetária e a retração do coágulo mediada por plaquetas
Determinação da Retração do Coágulo em Gestantes Atendidas no Ambulatório de Pré-natal do Centro Médico Federal
A contração do coágulo sanguíneo modula diferencialmente a fibrinólise interna e externa
O produto da mieloperoxidase, ácido hipocloroso, reduz a formação de trombo sob fluxo e atenua a retração do coágulo e a fibrinólise no sangue humano
A contração prejudicada dos coágulos sanguíneos como um novo mecanismo protrombótico no lúpus eritematoso sistêmico
A proteína 1 secretada modular de ligação ao cálcio liga-se e ativa a trombina para explicar a hiper-reatividade plaquetária no diabetes
Mortalidade atribuível ao diabetes nos Estados Unidos de 2003 a 2016 usando uma abordagem de causa múltipla de morte
A proteína S plaquetária limita a propensão à trombose venosa, mas não arterial, controlando a coagulação no trombo
A deficiência de Proteína C ou Proteína S associa-se à formação de trombo e fibrina dependente de plaquetas paradoxalmente prejudicada sob fluxo
Mortalidade por Doença Cardíaca Isquêmica
Cascata de sinalização da retração do coágulo. O receptor acoplado à proteína G liga-se à trombina, TXA2, ADP, epinefrina e colágeno, ativando várias fosfolipases. O cálcio intracelular e o IP3 ativam a proteína quinase C, que sinaliza para RAP-1 se ligar a uma molécula adaptadora. Talina e kindlina produzem uma mudança conformacional na GP-αIIbβIII, aumentando sua afinidade pelo fibrinogênio. Este processo de sinalização de dentro para fora é mostrado contra o fundo cinza. A Src é clivada da cauda β3 da GP-αIIbβIII e, através de várias vias de sinalização (não mostradas), forma um complexo com tensina, vinculina, talina e kindlina. Ocorre o rearranjo da actina, que, em última análise, causa a contração plaquetária e estabiliza o coágulo. A sinalização de fora para dentro é mostrada contra o fundo branco.
Diagrama PRISMA do processo de qualificação da literatura.
Efeitos propostos a jusante de moduladores exógenos.
Origem Composto Aumentados Diminuídos Cudrania tricuspidata derrone p-VASP, p-IP3RI, cAMP, cGMP p-cPLA2, p-p38, p-JNK, p-PI3K, Ca++, PltAgg, αIIbβIIIaff, TXA2, 5-HT Cudraxanthone B artocarpesin morin hydrate p-IP3RI, cAMP, cGMP P-selectinex, ATP, p-PLCγ2, p-ERK, p-cPLA2, p-p38, p-JNK, p-I3K, Ca++, PltAgg, αIIbβIIIaff, TXA2, 5-HT Arctium lappa arctigenin p-VASP, p-IP3RI, cAMP PltAgg, ATP, 5-HT, Ca++, αIIbβIIIaff, P-selectinex, TXA2, COX-1act Muitas plantas ácido cafeico cAMP, p-VASP, p-IP3RI Vegetais crucíferos diindolilmetano GPVImod, PRY12mod, cAMP ROS, TXB2, COX-1, PGE2 Panax ginseng Ginsenoside Ro PltAgg, αIIbβIIIaff, p-Akt, p-PI3K, Sintético ácido all-trans retinóico P- PLCγ2, p-syk Sintético Dasatinib p-Src, p-Fyn, p-Lyn, PSex, trombina, αIIbβIIIex Sintético GNE 495 e PF06260933 p-VASP, p-IP3RI, cAMP, p-PKAc TXB2, ATP, 5-HT, αIIbβIIIaff,
A abreviação p- indica fosforilação. PltAgg descreve agregação plaquetária. Ca++ indica mobilização de cálcio dos estoques intracelulares. αIIbβIIIaff descreve a afinidade da GP-αIIbβIII pela ligação ao fibrinogênio ou fibronectina, enquanto αIIbβIIIex descreve o nível de expressão. A serotonina é abreviada como 5-HT. P-selectinex descreve a expressão de P-selectina. COX-1act refere-se à atividade da COX-1. GPVImod e PRY12mod indicam modificação da glicoproteína VI e do receptor purinérgico Y12, respectivamente (alterações não especificadas). PSex descreve a expressão da fosfatidilserina.