pmid: "39578798"
title: "Explorando o impacto do 3,3'-diindolilmetano no perfil de estrogênio urinário de mulheres na pré-menopausa."
authors: "Newman M, Smeaton J"
journal: "BMC complementary medicine and therapies"
pubdate: "2024 Nov 22"
doi: "10.1186/s12906-024-04708-7"
source: "PMC Full Text"

Explorando o impacto do 3,3'-diindolilmetano no perfil de estrogênio urinário de mulheres na pré-menopausa.

Autores

Newman M, Smeaton J

Periodico

BMC complementary medicine and therapies (2024 Nov 22)

Conteudo

Explorando o impacto do 3,3'-diindolilmetano no perfil de estrogênio urinário de mulheres na pré-menopausa

Contexto
O 3,3'-diindolilmetano (DIM) é um fitonutriente derivado de vegetais crucíferos, frequentemente utilizado como suplemento no campo da medicina complementar e alternativa. O objetivo mais comum dos profissionais ao recomendar DIM a seus pacientes é alterar o metabolismo do estrogênio, no entanto, faltam pesquisas na literatura publicada sobre o efeito do DIM no perfil estrogênico. O objetivo deste estudo foi avaliar de forma abrangente o efeito do DIM no perfil de estrogênio urinário.

Métodos
Neste estudo de coorte retrospectivo, analisamos dados de um laboratório clínico, incluindo concentrações de estrogênio urinário e metabólitos de estrogênio. As concentrações dos analitos foram determinadas a partir de amostras de urina seca usando um ensaio de cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas em tandem. Os indivíduos foram separados em dois grupos: aqueles que relataram tomar DIM (N = 909) e aqueles que relataram não tomar DIM (N = 18.385). As comparações entre os indivíduos desses dois grupos foram feitas usando o teste de soma de postos de Wilcoxon. Além disso, também pudemos explorar um subconjunto de mulheres que tinham resultados laboratoriais no banco de dados antes e depois de iniciar o tratamento com DIM (N = 53). Nesse subconjunto, as diferenças foram avaliadas com testes de postos sinalizados de Wilcoxon.

Resultados
No grupo maior, separado entre mulheres que relataram uso ou não de DIM, foram observadas diferenças significativas nas concentrações de quase todos os estrogênios urinários e metabólitos de estrogênio (com a única exceção sendo a 2-metoxiestrona) nos perfis de estrogênio urinário daquelas que tomavam DIM em comparação com aquelas que não tomavam DIM (todos os valores de P < 0,001). No subconjunto menor de indivíduos com resultados antes e depois de iniciar o uso de DIM, diferenças foram observadas apenas em 4 dos estrogênios urinários e metabólitos de estrogênio (P < 0,001 para estrona, estradiol, estriol e 16-hidroxiestrona). As diferenças nos estrogênios totais foram significativas tanto no grupo maior quanto no subconjunto menor (ambos com P < 0,001). Além disso, as diferenças observadas nas razões dos metabólitos seguiram uma tendência semelhante, com diferenças mais significativas observadas no grupo maior. Notavelmente, a razão 2-hidroxiestrona:16-hidroxiestrona aumentou significativamente tanto no grupo maior quanto no subconjunto menor com resultados antes e depois do uso de DIM.

Conclusões
Os resultados deste estudo fornecem a avaliação mais abrangente até o momento do efeito do DIM no perfil de estrogênio urinário. Além disso, os resultados demonstram que a coleta de urina seca e o ensaio acompanhante utilizados capturam mudanças que são semelhantes em direção, mas não necessariamente em magnitude, aos relatos anteriores na literatura. Considerados em conjunto, esses dois aspectos destacam a validade clínica e a utilidade dessa abordagem para a avaliação da suplementação com DIM e sugerem a necessidade de estudos adicionais usando essa abordagem para compreender completamente a potencial utilidade clínica do DIM.

Introdução
Como parte do crescente interesse em abordagens de medicina integrativa e funcional para a saúde da mulher, suplementos dietéticos como indol-3-carbinol (I3C) e 3,3’-diindolilmetano (DIM) ganharam atenção por seu potencial impacto no metabolismo do estrogênio. I3C e DIM são derivados de vegetais crucíferos, incluindo brócolis, couve de Bruxelas, couve chinesa, repolho, couve-flor, couve-manteiga e couve. Uma vez ingerido, o I3C é rapidamente convertido em múltiplos oligômeros, dos quais o DIM é o principal agente ativo, e a molécula responsável pela maioria dos efeitos observados. No entanto, embora considerável esforço experimental e teórico tenha sido direcionado para compreender o mecanismo de ação (MOA) e os efeitos do DIM em outros contextos, pouca atenção foi dedicada à compreensão do seu MOA e efeitos em aplicações comuns à medicina funcional e integrativa.

O MOA do DIM é complexo e não completamente compreendido. Ao recomendar suplementos de DIM a pacientes, o objetivo dos profissionais de medicina integrativa e funcional é geralmente alterar o metabolismo do estrogênio ou reduzir os níveis totais de estrogênio. Nesse contexto, o componente mais relevante do MOA do DIM é a modulação do metabolismo do estrogênio por meio da indução e inibição das enzimas do citocromo P450 (CYP). Em estudos anteriores, demonstrou-se que o DIM é um indutor de CYP1A1, CYP1A2 e, em menor grau, CYP3A4. Importante: o MOA do DIM tem muitos outros componentes propostos que não são diretamente relevantes para o estudo atual.

Para compreender o potencial impacto do DIM no metabolismo do estrogênio, é necessário entender o papel das enzimas CYP no metabolismo do estrogênio. Na fase 1 do metabolismo do estrogênio, a estrona (E1) e o estradiol (E2) passam por reações de hidroxilação que são mediadas pelas mesmas enzimas CYP que o DIM induz, juntamente com CYP1B1 e, em menor grau, CYP3A5 e CYP3A7. CYP1A1 e CYP1A2 catalisam a hidroxilação de E1 e E2, levando à formação de 2-hidroxiestrona (2-OHE1) e 2-hidroxiestradiol (2-OHE2), que são considerados menos proliferativos em comparação com outros metabólitos da fase 1. Em contraste, CYP1B1 catalisa a 4-hidroxilação de E1 e E2, produzindo 4-hidroxiestrona (4-OHE1) e 4-hidroxiestradiol (4-OHE2), que são considerados metabólitos mais proliferativos devido às quinonas reativas que podem gerar por meio do ciclo redox. A reação de 4-hidroxilação também é catalisada, em menor grau, por CYP3A4 e CYP3A5.
Além de haver pouca investigação sobre o MOA do DIM em relação às indicações da medicina integrativa e funcional, há também pouca pesquisa sobre a compreensão dos efeitos do DIM em todo o perfil de estrogênio. Os estudos publicados geralmente analisam apenas um componente do perfil de estrogênio de interesse, como a razão 2-OHE1/16-OHE1. Esse fato apresentou um dilema para os profissionais de medicina funcional e integrativa. Apesar de evidências anedóticas convincentes da eficácia do DIM em aplicações de medicina integrativa e funcional, não há estudos publicados que forneçam evidências definitivas das mudanças esperadas no perfil de estrogênio. Agravando essa questão está o fato de que o mecanismo de ação do DIM não é completamente compreendido.

A escassez de evidências diretas na literatura publicada nos levou a explorar mecanismos potenciais que podem ser elucidados no perfil de estrogênio urinário. Estudos anteriores validaram o método de coleta e ensaio utilizado no presente estudo para explorar o metabolismo do estrogênio em outros contextos. O objetivo principal deste estudo foi utilizar esse método validado para explorar e apresentar uma análise detalhada dos efeitos do DIM no metabolismo do estrogênio em humanos, avaliando o perfil completo de estrogênio urinário de mulheres na pré-menopausa na fase lútea do seu ciclo. O perfil completo de estrogênio urinário que buscamos explorar inclui estrogênios parentais, metabólitos de estrogênio e razões relevantes.

Materiais e métodos
Fonte de dados
Neste estudo retrospectivo de mineração de dados registrado como Precision Analytical Retrospective Data Correlation (Clinical Trials ID, NCT04305093), dados estavam disponíveis para 144.561 acessos laboratoriais de 129.883 indivíduos entre 1º de janeiro de 2016 e 9 de dezembro de 2019. O estudo foi aprovado pelo Conselho de Revisão Institucional da National University of Natural Medicine, e como todos os dados analisados neste estudo de mineração de dados foram desidentificados, o conselho de revisão institucional determinou que o consentimento informado por escrito poderia ser dispensado. Dados desidentificados foram extraídos do banco de dados e incluíram as seguintes variáveis: idade, sexo, estado menstrual (regular, irregular, nenhum), último período menstrual, índice de massa corporal (IMC) calculado a partir de altura e peso autorrelatados, uso de DIM, comorbidades e medidas urinárias de estrona, estradiol, estriol, α e β-pregnanodiol, 2-hidroxiestrona, 2-hidroxiestradiol, 4-hidroxiestrona, 4-hidroxiestradiol, 16-hidroxiestrona e 2-metoxiestrona. Dados sobre raça/etnia não estavam disponíveis. Os critérios de inclusão para este estudo incluíram ser mulher na pré-menopausa relatando menstruação regular e ter coletado amostras na fase lútea do ciclo menstrual. Os critérios de exclusão incluíram o seguinte: IMC menor que 16 ou maior que 60 kg/m²; gravidez; qualquer doença renal relatada; insuficiência ou excesso adrenal relatado; SOP suspeita ou diagnosticada; dados faltantes de estrogênios urinários ou metabólitos de estrogênio (com exceção de 4-hidroxiestradiol e 2-metoxiestradiol); uso de qualquer suplementação estrogênica (oral, sublingual em pellets, injetável ou outra formulação transdérmica); uso de β-gonadotrofina coriônica humana; uso de anastrazol; uso de tamoxifeno; evidência de urina excessivamente diluída (qualquer creatinina em amostra spot < 0,1 mg/ml).
Coleta de amostras e métodos laboratoriais
Os métodos de coleta de amostras e ensaio utilizados para produzir os dados analisados neste estudo, incluindo as características de desempenho do ensaio, foram descritos anteriormente. Resumidamente, os participantes coletaram um total de quatro amostras de urina em papel filtro ao longo de 24 h. Essas amostras foram secas e depois enviadas ao laboratório para análise. Uma vez recebidas no laboratório, a urina foi extraída do papel filtro e as quatro amostras foram combinadas em uma única amostra representativa. Essa combinação foi feita usando as concentrações de creatinina de cada amostra individual para determinar o volume de amostra que deveria ser adicionado à amostra combinada para melhor representar as concentrações medidas ao longo de um período de 24 horas. A amostra combinada foi então analisada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas em tandem em um Agilent 7890/7000B (Agilent Technologies, Santa Clara, CA). As concentrações de estrogênio e metabólitos de estrogênio foram normalizadas pela creatinina para considerar a variação tanto na concentração da urina quanto na saturação do papel filtro. A coleta de amostras urinárias foi a mesma para todos os participantes em qualquer grupo (mulheres que relataram uso de DIM ou não uso, e para mulheres antes e depois de iniciar o DIM).
Métodos estatísticos
Todos os valores são apresentados como medianas e intervalos interquartis, pois não estavam normalmente distribuídos. No grupo maior, comparamos as características de mulheres na pré-menopausa que tomam DIM e mulheres na pré-menopausa que não tomam DIM. Essas comparações foram feitas usando o teste de Wilcoxon (soma de postos). No subgrupo menor de indivíduos que tinham resultados laboratoriais disponíveis tanto antes quanto depois de iniciar o DIM, as comparações foram feitas com o teste de Wilcoxon pareado. Como este foi um estudo de mineração de dados usando uma amostra de conveniência, nenhum cálculo de tamanho amostral ou poder foi realizado a priori, e todas as comparações devem ser consideradas exploratórias e geradoras de hipóteses. Todas as análises foram conduzidas usando R versão 4.3.1 (R Version for Statistical Computing, Viena, Áustria).
Resultados
Comparação de mulheres que não tomam DIM com mulheres que tomam DIM
Após aplicar os critérios de inclusão e exclusão, havia 18.385 mulheres que não relataram tomar DIM e 909 mulheres que relataram tomar DIM. As características das pacientes e as concentrações urinárias de estrogênio e metabólitos de estrogênio para esses dois grupos de mulheres são relatadas e comparadas na Tabela 1. As razões de metabólitos de estrogênio urinário para esses dois grupos são relatadas e comparadas na Tabela 2. Diferenças significativas foram observadas tanto na idade quanto no IMC, juntamente com todos os metabólitos de estrogênio urinário, com exceção da 2-metoxiestrona. As concentrações urinárias de E1, E2 e E3 foram todas menores no grupo que tomou DIM, assim como as concentrações de 16-hidroxiestrona e estrogênios urinários totais. As concentrações de 2-hidroxiestrona, 4-hidroxiestrona, 2-hidroxiestradiol e 4-hidroxiestradiol foram todas maiores nas mulheres que tomavam DIM. Essas diferenças nas concentrações de metabólitos resultaram em diferenças significativas em todas as razões de metabólitos que foram calculadas.

Características das pacientes e concentrações urinárias de estrogênio
Característica Sem DIM, N = 18.385¹ DIM, N = 909¹ Valor-p² Idade na Coleta 38 (33, 43) 40 (35, 44) < 0,001 IMC 23,8 (21,3, 26,6) 23,4 (21,0, 25,8) 0,003 Estrona Urinária (ng/mg-Cr) 18,00 (12,70, 24,90) 14,70 (10,30, 20,70) < 0,001 Estradiol Urinário (ng/mg-Cr) 3,10 (2,22, 4,34) 2,62 (1,89, 3,86) < 0,001 Estriol Urinário (ng/mg-Cr) 9,60 (5,90, 15,10) 5,20 (3,00, 9,50) < 0,001 2-hidroxiestrona Urinária (ng/mg-Cr) 8,24 (5,40, 11,50) 11,55 (7,90, 15,81) < 0,001 4-hidroxiestrona Urinária (ng/mg-Cr) 1,09 (0,75, 1,50) 1,37 (0,97, 2,00) < 0,001 16-hidroxiestrona Urinária (ng/mg-Cr) 1,21 (0,73, 1,99) 0,82 (0,45, 1,44) < 0,001 2-metoxiestrona Urinária (ng/mg-Cr) 4,20 (2,79, 5,91) 4,05 (2,70, 5,97) 0,7 2-hidroxiestradiol Urinário (ng/mg-Cr) 0,66 (0,36, 1,09) 0,99 (0,55, 1,58) < 0,001 4-hidroxiestradiol Urinário (ng/mg-Cr) 0,30 (0,20, 0,40) 0,40 (0,20, 0,50) < 0,001 Valores Ausentes 5.560 260 Estrogênios Urinários Totais (ng/mg-Cr) 48,50 (36,50, 63,30) 44,20 (33,00, 58,10) < 0,001
¹Mediana (IQR)
²Teste de soma de postos de Wilcoxon

Características das pacientes e razões de metabólitos de estrogênio urinário
Característica Sem DIM, N = 18.385¹ DIM, N = 909¹ Valor-p² Idade na Coleta 38 (33, 43) 40 (35, 44) < 0,001 IMC 23,8 (21,3, 26,6) 23,4 (21,0, 25,8) 0,003 Razão 2OHE1/16OHE1 6,89 (3,72, 12,10) 15,36 (7,49, 25,65) < 0,001 Valores Ausentes 1 0 Razão 2OHE1/E1 0,44 (0,31, 0,61) 0,79 (0,54, 1,10) < 0,001 Valores Ausentes 1 0 Razão 2OHE1/E2 2,56 (1,69, 3,63) 4,30 (2,87, 5,99) < 0,001 Razão 2OHE1/4OHE1 7,27 (5,36, 9,46) 8,15 (6,00, 10,43) < 0,001 Valores Ausentes 2 0 Razão 2-metoxiE1/2OHE1 0,51 (0,40, 0,66) 0,35 (0,27, 0,46) < 0,001 Razão 2OHE2/2OHE1 0,08 (0,06, 0,11) 0,08 (0,06, 0,12) 0,004
¹Mediana (IQR)
²Teste de soma de postos de Wilcoxon

Antes e depois de iniciar o DIM
Houve um total de 53 mulheres que tiveram resultados laboratoriais disponíveis tanto antes quanto depois de iniciar DIM. Idade, IMC e concentrações urinárias de estrogênio e metabólitos de estrogênio para essas mulheres são relatadas e comparadas na Tabela 3. As razões dos metabólitos de estrogênio urinário para essas mulheres antes e depois de iniciar DIM são comparadas na Tabela 4. Os valores antes e depois para alguns dos metabólitos e algumas das razões podem ser vistos no contexto da via metabólica do estrogênio nas Figuras 1 e 2. Com exceção da 2-metoxiestrona e 2OHE2, todos os estrogênios parentais e metabólitos mudaram na mesma direção que no grupo maior (Figuras 3, 4, 5 e 6). No entanto, apenas as mudanças em E1, E2, E3 e 16-OHE1 atingiram o limiar de significância. Todas as razões mudaram na mesma direção que no grupo maior; contudo, as únicas mudanças nas razões que atingiram significância foram as razões 2-OHE1/16-OHE1, 2-OHE1/E1, 2-OHE1/E2 e 2-metoxiE1/2-OHE1. As mudanças percentuais para E2, 2-OHE1, 4-OHE1, 16-OHE1 e a razão 2/16 são apresentadas na Tabela 5.
Valores de metabólitos de estrogênio urinário antes e depois. Mostrados estão valores antes e depois da terapia com DIM para alguns dos metabólitos e razões de estrogênio no contexto da via metabólica do estrogênio
Razão de metabólitos de estrogênio urinário antes e depois. Mostrados estão valores antes e depois da terapia com DIM para as razões de metabólitos de estrogênio durante a fase 1 e desintoxicação por metilação
Comparação das distribuições de E1, E2 e E3. Mostrados estão estrona urinária (E1), estradiol (E2) e estriol (E3) em mulheres relatando uso de DIM ou não uso de DIM
Comparação das distribuições de metabólitos selecionados. Mostrados estão 2OHE1 urinário, 4OHE1 e 16OHE1 em mulheres relatando uso de DIM ou não uso de DIM
Comparação das distribuições de E1, E2 e E3 (antes e depois de DIM). Mostrados estão estrona urinária (E1), estradiol (E2) e estriol (E3) em um subconjunto de mulheres antes e depois de iniciar a terapia com DIM
Comparação das distribuições de metabólitos selecionados (antes e depois de DIM). Mostrados estão 2OHE1 urinário, 4OHE1 e 16OHE1 em um subconjunto de mulheres antes e depois de iniciar a terapia com DIM
Concentrações de estrogênio e metabólitos de estrogênio antes e depois
Variável Antes DIM1 Após DIM1 p-valor2 Idade na Coleta 39 (32, 42) 40 (34, 44) 0,2 IMC 24,1 (21,3, 26,6) 23,4 (21,3, 25,7) 0,8 Pregnanodiol a urinário (ng/mg-Cr) 417 (284, 843) 427 (308, 681) 0,6 Pregnanodiol b urinário (ng/mg-Cr) 1.350 (1.144, 1.657) 1.263 (973, 1.964) 0,7 Estrona urinária (ng/mg-Cr) 23,40 (18,40, 32,10) 15,10 (11,10, 22,30) < 0,001 Estradiol urinário (ng/mg-Cr) 4,10 (3,00, 5,55) 2,84 (2,17, 4,03) < 0,001 Estriol urinário (ng/mg-Cr) 10,60 (6,50, 19,90) 4,70 (2,90, 8,00) < 0,001 2-hidroxiestrona urinária (ng/mg-Cr) 10,50 (7,70, 14,50) 11,70 (8,46, 16,64) 0,4 4-hidroxiestrona urinária (ng/mg-Cr) 1,37 (1,10, 2,10) 1,57 (1,12, 2,07) 0,5 16-hidroxiestrona urinária (ng/mg-Cr) 1,80 (1,00, 3,62) 0,70 (0,39, 1,24) < 0,001 2-metoxiestrona urinária (ng/mg-Cr) 4,70 (3,70, 6,20) 4,86 (3,20, 6,12) 0,8 2-hidroxiestradiol urinário (ng/mg-Cr) 1,10 (0,51, 1,86) 1,01 (0,58, 1,68) 0,8 4-hidroxiestradiol urinário (ng/mg-Cr) 0,35 (0,30, 0,50) 0,40 (0,30, 0,60) 0,6 Valores Ausentes 37 5 2-metoxiestradiol urinário (ng/mg-Cr) 0,55 (0,48, 0,83) 0,50 (0,30, 0,73) 0,4 Valores Ausentes 37 5 Estrogênios Urinários Totais (ng/mg-Cr) 64,0 (50,3, 77,0) 47,2 (35,3, 60,7) < 0,001
1Mediana (AIQ)
2Teste de soma de postos de Wilcoxon
Valores da razão de metabólitos de estrogênio antes e depois
Variável Antes DIM1 Após DIM1 p-valor2 Idade na Coleta 39 (32, 42) 40 (34, 44) 0,2 IMC 24,1 (21,3, 26,6) 23,4 (21,3, 25,7) 0,8 Razão 2OHE1/16OHE1 5,67 (2,79, 13,66) 18,20 (9,64, 31,58) < 0,001 Razão 2OHE1/E1 0,45 (0,30, 0,61) 0,88 (0,56, 1,14) < 0,001 Razão 2OHE1/E2 2,40 (1,59, 3,81) 4,27 (3,05, 5,80) < 0,001 Razão 2OHE1/4OHE1 6,92 (5,41, 9,33) 7,51 (6,21, 9,69) 0,3 Razão 2-metoxiE1/2OHE1 0,41 (0,32, 0,57) 0,35 (0,27, 0,51) 0,027 Razão 2OHE2/2OHE1 0,09 (0,07, 0,12) 0,08 (0,07, 0,11) 0,6
1Mediana (AIQ)
2Teste de soma de postos de Wilcoxon
Mudança percentual nos principais metabólitos e na razão 2/16 (em mulheres com resultados antes e depois de iniciar DIM)
Variável Mudança Percentual Estradiol -23,13% 2-Hidroxiestrona 19,24% 4-Hidroxiestrona 8,95% 16-Hidroxiestrona -55,56% Razão 2OHE1/16OHE1 188,31%
Discussão
Neste estudo, examinamos dados retrospectivos na tentativa de compreender mais completamente o efeito do DIM no metabolismo do estrogênio em mulheres na pré-menopausa. Encontramos diferenças significativas em quase todos os estrogênios, metabólitos de estrogênio e razões de metabólitos de estrogênio quando comparamos os grupos maiores de mulheres que estavam tomando DIM ou não tomando DIM. No grupo menor de mulheres que tinham resultados laboratoriais disponíveis antes e depois de iniciar o DIM, embora tenhamos visto diferenças nas mesmas direções que no grupo maior, menos dessas diferenças atingiram significância.
Este estudo apresenta várias limitações. Os dados utilizados nesta análise provêm de uma amostra de conveniência e, portanto, há uma generalização externa limitada para populações diferentes da população estudada. No entanto, dado o grande tamanho amostral, insights valiosos podem ser obtidos para orientar o desenho de futuros estudos mais direcionados. Também não tivemos acesso a dados sobre a dieta dos participantes, o que poderia ter um impacto significativo se a dieta de um participante fosse particularmente rica em vegetais crucíferos (ou particularmente pobre). Além de não termos acesso a dados sobre a dieta, embora tenhamos coletado alguns dados sobre o uso de medicamentos prescritos e suplementos, não conseguimos coletar uma lista exaustiva de medicamentos prescritos e suplementos de venda livre em uso concomitante. Nesta população de pacientes, há, por vezes, o uso concomitante de outros agentes que reduzem o estrogênio ou alteram seu metabolismo, como o cálcio-d-glucarato. Esses agentes também podem ter contribuído para algumas das concentrações mais baixas de estrogênio e metabólitos de estrogênio observadas, mas esses agentes seriam menos propensos a afetar as proporções dos metabólitos de estrogênio. Não coletamos dados sobre a dose ou formulação de DIM/I3C, frequência de administração ou adesão. Embora isso seja certamente uma limitação, também reflete a natureza real dos dados e representa o que provavelmente é observado na prática clínica real. Existem produtos de DIM que alegam maior biodisponibilidade, portanto, é possível que o uso de diferentes produtos possa ter impactos significativamente diferentes no perfil de estrogênio urinário. Os resultados deste estudo destacam que este método de coleta e ensaio seria uma ferramenta útil para investigar possíveis impactos diferenciais entre os produtos de DIM. Devido à biodisponibilidade e meia-vida diferentes, alguns produtos podem recomendar dosagens mais ou menos frequentes, no entanto, a dosagem geralmente é uma ou duas vezes ao dia. Por fim, não temos dados sobre a justificativa empregada para iniciar o DIM. As razões para o uso de DIM variam amplamente no campo da medicina integrativa e funcional, e capturar as potenciais "indicações" para o uso de DIM de forma concisa está além do escopo deste manuscrito. Não obstante essas limitações, este estudo fornece tanto uma avaliação comparativa de mulheres na pré-menopausa que tomam versus não tomam DIM quanto uma avaliação de medidas repetidas de um subconjunto de mulheres que usam DIM. Essas avaliações esclarecem o impacto do DIM em todo o perfil de estrogênio urinário, o que, até onde sabemos, não foi explorado de forma tão abrangente anteriormente.
Muitos dos estudos anteriores que avaliaram os efeitos do DIM concentraram-se nas alterações de 2-OHE1, 16-OHE1 e na razão 2/16. Além do foco em 2-OHE1 e 16-OHE1, Dalessandri e colaboradores também relataram concentrações urinárias de E1, E2 e E3 antes e após o uso de DIM, juntamente com 6β-hidroxicortisol (6β-OHC) urinário, cortisol e a razão 6β-OHC/cortisol, que se mostrou um indicador da atividade da enzima CYP3A4. Conforme discutido anteriormente, em relação ao DIM, a atividade da CYP3A4 influencia a produção de 16-OHE1 e 4-OHE2, os metabólitos estrogênicos não preferenciais. Um dos únicos estudos na literatura que se assemelha ao presente estudo é o realizado por Green e colaboradores, que utilizou o mesmo ensaio do presente estudo. No entanto, os participantes daquele estudo receberam um suplemento dietético que continha I3C e pelo menos 8 ingredientes adicionais. Além disso, as mulheres participantes daquele estudo podem não ter tido uma restrição hídrica adequada, e as amostras foram coletadas durante o dia. A combinação desses 2 fatores pode ter levado a valores baixos de creatinina, aos quais as concentrações de metabólitos estrogênicos são indexadas. Além disso, as concentrações gerais de estrogênio e metabólitos estrogênicos dos participantes do estudo foram baixas em comparação com as faixas de referência estabelecidas. O objetivo principal daquele estudo era simplesmente determinar se o produto nutracêutico utilizado, Estrosense, aumentava a razão 2/16.

Os resultados deste estudo são semelhantes em direção aos quatro estudos mencionados anteriormente, conduzidos por Rajoria e colaboradores, Thomson e colaboradores, Godinez-Martinez e colaboradores, e Green e colaboradores. Aqui, assim como em todos esses estudos, o 2-OHE1 aumentou e o 16-OHE1 diminuiu com o tratamento com DIM, o que se traduziu em um aumento na razão 2/16. Uma observação interessante diz respeito à mudança no 4-OHE1. No presente estudo, embora o 4-OHE1 tenha aumentado no grupo antes e depois, a alteração não atingiu significância. Resultados semelhantes foram observados no estudo de Thomson e colaboradores. Eles relataram uma pequena diminuição mediana inicial aos 6 meses, seguida por um aumento aos 12 meses; no entanto, a mudança mediana desde o início até 12 meses foi de 0,0, e o valor-P comparando os participantes tratados com DIM com o braço placebo não foi significativo (P = 0,534), indicando nenhuma diferença no efeito sobre 4-OHE1 entre DIM e placebo. Isso ecoa a conclusão que extraímos de nossos dados. Essa conclusão pode ser surpreendente para alguns profissionais de medicina integrativa e funcional que esperam que o DIM reduza o 4-OHE1. As evidências atualmente disponíveis não apoiam o uso de DIM para esse fim. A razão 2OHE1/4OHE1 aumentou em ambos os grupos, embora essa mudança não tenha atingido o limiar de significância no grupo antes e depois.
Curiosamente, no estudo conduzido por Green e colaboradores, as únicas medidas de desfecho com alterações em relação ao valor basal que atingiram significância estatística foram 2-OHE1 (P = 0,01) e a razão 2/16 (P < 0,001). Isso indica que a mudança no desfecho primário foi impulsionada pelo aumento observado em 2-OHE1, que foi de apenas 0,43 ng/mg-Cr. No presente estudo, observamos um resultado um tanto oposto, pois embora a concentração mediana de 2-OHE1 tenha aumentado em uma margem maior (1,20 ng/mg-Cr), a diferença em relação ao valor basal não foi significativa (P = 0,4). No entanto, a diferença em 16-OHE1 foi significativa (P < 0,001). Isso sugere que, embora a medida de desfecho de aumento na razão 2/16 tenha sido a mesma em ambos os estudos, a alteração subjacente no metabolismo do estrogênio que impulsiona o aumento da razão foi diferente nesses dois estudos. Isso tem implicações importantes para a tomada de decisão clínica, dependendo dos objetivos do profissional.

Futuros estudos randomizados, controlados por placebo, com múltiplos produtos de DIM são necessários para compreender completamente a potencial utilidade clínica da suplementação com DIM. As ferramentas apresentadas aqui para avaliar os efeitos do DIM parecem ser a abordagem mais abrangente para obter clareza acionável.

Conclusão

Embora uma compreensão completa do mecanismo de ação do DIM continue a escapar dos pesquisadores, este e estudos anteriores servem para iluminar alguns dos efeitos esperados em mulheres na pré-menopausa. Os resultados deste estudo demonstram que o método de amostragem de urina seca e o ensaio correspondente usados para medir os metabólitos do estrogênio são uma abordagem útil para monitorar os efeitos da terapia com DIM na prática clínica do mundo real. Para concluir, propomos que as alterações observadas aqui nas concentrações de estrogênio parental, concentrações de metabólitos de estrogênio e razões de metabólitos de estrogênio representam um componente-chave para a compreensão do mecanismo de ação complexo e um tanto intrincado do DIM. As alterações específicas que confirmamos ou descobrimos fornecem uma explicação molecular para alguns dos efeitos observados do DIM. Os resultados deste estudo, em conjunto com o mecanismo de ação parcial teórico e observado do DIM, fornecem evidências moderadas que apoiam a potencial utilidade clínica do DIM e fortes evidências que apoiam a utilidade clínica definitiva do monitoramento de estrogênio urinário e metabólitos de estrogênio no contexto da suplementação com DIM. Mais trabalho é necessário para revelar completamente como o complexo mecanismo de ação do DIM se reflete na complexa via do metabolismo do estrogênio. Desvendar a complexidade do metabolismo do estrogênio continua sendo um desafio formidável, que pode muito bem exigir o uso de métodos inovadores. Propomos que o uso de alterações nas concentrações de estrogênio urinário e metabólitos de estrogênio para explorar consequências teóricas e reais do metabolismo alterado do estrogênio provará ser um drama de oportunidade redescoberta nos próximos anos.

Nota do editor
A Springer Nature mantém-se neutra em relação a reivindicações jurisdicionais em mapas publicados e afiliações institucionais.

Contribuições dos autores
M.N. concebeu e desenhou a pesquisa e coletou os dados. Ambos M.N. e J.S. analisaram e interpretaram os dados, redigiram e revisaram o manuscrito, e revisaram e aprovaram a versão final do manuscrito.

Financiamento
Não aplicável.

Disponibilidade de dados
Os conjuntos de dados utilizados e/ou analisados durante o estudo atual estão disponíveis junto ao autor correspondente mediante solicitação razoável.

Declarações
Aprovação ética e consentimento para participação
O estudo foi aprovado pelo Conselho de Revisão Institucional da National University of Natural Medicine, e como todos os dados analisados neste estudo de mineração de dados foram desidentificados, o conselho de revisão institucional determinou que o consentimento informado por escrito poderia ser dispensado.

Consentimento para publicação
Não aplicável.

Interesses concorrentes
M.N. é o fundador e CEO da Precision Analytical, Inc. J.S. é funcionário da Precision Analytical, Inc.

Referências
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