pmid: "36708806"
title: "Regulação estromal da barreira intestinal."
authors: "Sylvestre M, Di Carlo SE, Peduto L"
journal: "Mucosal immunology"
pubdate: "2023 Apr"
doi: "10.1016/j.mucimm.2023.01.006"
source: "PMC Full Text"

Regulação estromal da barreira intestinal.

Autores

Sylvestre M, Di Carlo SE, Peduto L

Periodico

Mucosal immunology (2023 Apr)

Conteudo

Regulação estromal da barreira intestinal
A barreira intestinal é uma estrutura complexa que permite a absorção de nutrientes enquanto garante proteção contra patógenos intestinais e imunidade equilibrada. O desenvolvimento e a manutenção de uma barreira intestinal funcional é um processo multifatorial que é apenas parcialmente compreendido. Aqui revisamos novas descobertas sobre o papel emergente das células mesenquimais nesse processo, utilizando insights obtidos a partir de abordagens de rastreamento de linhagens, deleção gênica baseada em Cre e transcriptômica de célula única. As evidências atuais apontam para um papel organizador chave de linhagens mesenquimais distintas no desenvolvimento e homeostase intestinais, regulando tanto os componentes epiteliais quanto imunológicos da barreira intestinal. Discutimos ainda descobertas recentes sobre heterogeneidade mesenquimal funcional e suas implicações para a regeneração intestinal e patologias intestinais inflamatórias.
INTRODUÇÃO
O intestino constitui uma barreira de superfície entre o hospedeiro e o ambiente, que contém uma microbiota abundante, antígenos alimentares e potenciais patógenos. Como as células nos locais de barreira estão constantemente expostas a elementos microbianos e danosos que podem comprometer a função tecidual, um grande desafio é eliminar eficientemente patógenos e promover reparo enquanto se evita inflamação crônica. A desregulação da barreira intestinal leva a respostas patológicas ao dano tecidual e à microbiota, o que está associado a várias doenças crônicas e distúrbios sistêmicos, incluindo doenças inflamatórias intestinais (DIIs), fibrose intestinal e câncer.
Uma barreira intestinal funcional requer um diálogo rigorosamente regulado entre uma camada epitelial autorrenovável e um compartimento subepitelial contendo células imunes inatas e adaptativas, vasos sanguíneos e células mesenquimais estromais (MCs). A camada epitelial intestinal renova-se continuamente a partir das células-tronco epiteliais intestinais (IESCs) localizadas nas criptas. As IESCs geram células proliferativas de amplificação transitória (TA) que se diferenciam em linhagens epiteliais distintas, incluindo enterócitos absortivos, células enteroendócrinas (EECs), células de Paneth secretoras de peptídeos antimicrobianos e células caliciformes produtoras de muco, fornecendo em conjunto uma primeira linha de defesa intestinal. Células epiteliais terminalmente diferenciadas sofrem apoptose no ápice das vilosidades e são eliminadas no lúmen intestinal ou amostradas por fagócitos na lâmina própria (LP) do intestino delgado. A homeostase intestinal requer a sinalização WNT/β-catenina e fatores pró-mantença de células-tronco para manter as IESCs nas criptas e proteínas morfogenéticas ósseas (BMPs) ao longo do eixo cripta-vilosidade para promover a diferenciação epitelial. As células de Paneth estão intimamente adjacentes às IESCs e produzem o ligante WNT, WNT3A, ligantes Notch (DLL4, DLL1) e fator de crescimento epidérmico (EGF), sugerindo que constituem o nicho para as IESCs. No entanto, a depleção in vivo de células de Paneth ou a ablação de Wnt3, ou de Porcn, e de Wls (essenciais para a secreção de WNT) em células epiteliais não impactou a homeostase intestinal. No cólon, que carece de células de Paneth, as células secretoras profundas das criptas ativam a sinalização Notch nas IESCs, mas não produzem ligantes canônicos de WNT, que são indispensáveis para as IESCs. Essas descobertas apoiam a existência de fontes não epiteliais para sinais de WNT e outros fatores necessários para as IESCs.
Abaixo do epitélio intestinal encontra-se a LP. A LP contém uma rede densa de MCs, que inclui populações mesenquimais subepiteliais, perivasculares e intersticiais, bem como células reticulares fibroblásticas (FRCs) dos tecidos linfoides associados ao intestino (GALTs). Como sugere sua localização distinta, os MCs interagem com diversas populações celulares, incluindo células epiteliais, imunes e vasculares, sendo essenciais para sustentar sua função. Quando desregulados, os MCs promovem inflamação crônica, fibrose e câncer. Os MCs não expressam marcadores hematopoiéticos (CD45), endoteliais (CD31) e epiteliais (EpCAM); no entanto, a população resultante CD45−CD31−EpCAM−, historicamente chamada de fibroblasto (αSMA−) ou miofibroblasto (αSMAlow), não é homogênea nem define um único tipo celular. Marcadores adicionais, como o receptor alfa do fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGFRα), Podoplanina (PDPN, GP38) ou Thy1 (CD90), podem ser úteis para visualizar a extensa e diversificada rede mesenquimal da LP, pois são amplamente expressos por várias populações mesenquimais. Devido à escassez de marcadores específicos, os MCs intestinais foram estudados principalmente in vitro até recentemente, seja a partir de células primárias em massa isoladas de órgãos e selecionadas com base em sua aderência e capacidade de crescimento, ou utilizando linhagens celulares. Embora esses estudos tenham fornecido informações importantes, notadamente sobre a interação com células imunes, eles não refletiam a heterogeneidade e a diversidade funcional do compartimento mesenquimal in vivo.
Modelos de camundongos e modificações genéticas para avaliar a função de subconjuntos estromais na homeostase e doença intestinais.
Modelo de camundongo Modificação genética Deleção (dias) Modelo Impacto Referência Ccl19-cre Myd88floxIl15flox desde a concepção Infecção (MHV/C. Rodentium) Respostas antivirais de ILC1 e células NK em PPs/linfonodos mesentéricosInflamação intestinal Ccl19-creCol6a1-cre LtbrfloxTnfr1floxTnfr1cneo/− desde a concepção Estado estacionárioInfecção (M-CoV) Desenvolvimento de PPs/organização estromalResposta imune antiviral Col6a1-creTwist2-cre Tnfsf11flox desde a concepção Estado estacionário Homeostase imune intestinal Col6a1-cre TnfΔARETnfr1flxneo desde a concepção Estado estacionário Inflamação intestinalInflamação articular Col6a1-cre Rosa26flstopiDTR Adulto (3d) Estado estacionárioInflamação (DSS) Redução de células enteroendócrinas/proliferação homeostáticaSem efeito na regeneração intestinal Col1a2-creERT2 Map3k2flox Adulto (10d) Inflamação (DSS) Inflamação intestinal Foxl1-creFoxl1-hDTR Rosa26flstopiDTR Adulto (3d) Estado estacionário Redução de células-tronco/progenitoras intestinais Foxl1-creERT2 Porcnflox Adulto (1-3d) Estado estacionário Redução de células-tronco/progenitoras intestinais Gli1-creERT2 Wlsflox Adulto (15-21d) Estado estacionário Redução de células-tronco/progenitoras intestinais Grem1-creERT2 Rosa26flstopiDTR Adulto (2d) Estado estacionário Dano intestinal / letal Lepr-cre Rosa26flstopiDTRIgf1flox Adulto (5-10d)Desde a concepção Estado estacionárioIrradiação Redução de células-tronco/progenitoras intestinaisRegeneração intestinal prejudicada Lgr5-creERT2 Rosa26flstopDTA Adulto (7d) Estado estacionário Sinalização VEGFA desregulada na ponta das vilosidades Lgr5-GFP-DTR Adulto (1d) Estado estacionário Expressão gênica desregulada em enterócitos da ponta das vilosidades LtbrtTAx tetO-cre (LC1) Pdgfraflox desde o nascimento até 28d Pós-natal P28Inflamação (DSS/ Indo) Aumento de células-tronco/progenitoras intestinaisRedução de células caliciformesRespostas inflamatórias e de reparo desreguladas Pdgfra-cre PorcnfloxRspo3flox desde a concepção Pós-natal P5Estado estacionárioInflamação (DSS) Redução de células-tronco/progenitoras intestinaisRedução de células de PanethRegeneração intestinal prejudicada Pdgfra-creGrem1-creERT2Col1a-creERT2 Il1r1flox desde a concepçãoAdulto Infecção (C. Rodentium)Inflamação (DSS) Inflamação/regeneração intestinal Twist2-creMyh11-cre MiR-143/145flox desde a concepção Inflamação (DSS) Regeneração intestinal prejudicada
DTR = receptor da toxina diftérica; DSS = sulfato de dextrana sódico; Indo = Indometacina; M-CoV = coronavírus murino; MHV = vírus da hepatite murina; ILC1 = células linfoides inatas 1; NK = células exterminadoras naturais; mLNs = linfonodos mesentéricos; PPs = placas de Peyer.
A recente expansão da transcriptômica de célula única (scRNAseq) e o desenvolvimento de novos modelos de camundongos que permitem o rastreamento de linhagens genéticas e a depleção de subconjuntos mesenquimais baseada em Cre estão lançando nova luz sobre a diversidade funcional das MCs intestinais in vivo (Tabela 1). As evidências resultantes sugerem um microambiente mesenquimal complexo, com papéis-chave emergentes na maturação pós-natal da barreira intestinal, imunidade da mucosa e reparo tecidual. Discutiremos ainda esses resultados no contexto de doenças inflamatórias intestinais, já que evidências crescentes sugerem um papel das MCs como retransmissoras de informações, respondendo a sinais derivados de células imunes e direcionando a função imune.

Crosstalk mesenquimal-epitelial na morfogênese intestinal

Crosstalk epitelial-mesenquimal na morfogênese intestinal em camundongos. O desenvolvimento intestinal começa no embrião e requer um crosstalk rigorosamente regulado entre uma camada epitelial em desenvolvimento e MCs e SMCs responsivas a Hh subjacentes, que orquestram a proliferação, migração e diferenciação das células epiteliais. Em camundongos, a diferenciação em enterócitos, células caliciformes e CEEs começa no feto, enquanto criptas maduras contendo CIEIs se desenvolvem após o nascimento, concomitantemente ao desenvolvimento de células de Paneth e um nicho estromal especializado que promove localmente a sinalização de WNT. BMPs = proteínas morfogenéticas ósseas; CEEs = células enteroendócrinas; Hh = Hedgehog; CIEIs = células-tronco epiteliais intestinais; MCs = células mesenquimais; PDGF-A = fator de crescimento derivado de plaquetas A; SMCs = células musculares lisas.
Uma comunicação bidirecional entre mesênquima e epitélio é necessária para o desenvolvimento intestinal. A morfogênese intestinal começa no embrião e segue uma ordem de eventos semelhante na maioria dos vertebrados. A atividade de Hedgehog (Hh) direciona vários eventos de padronização intestinal, como padronização esquerda/direita, padronização radial, diferenciação de músculo liso, expansão mesenquimal e morfogênese das vilosidades. A sinalização de Hh é parácrina, pois os ligantes de Hh são produzidos por células epiteliais, enquanto seu principal receptor Ptch1 é exclusivamente não epitelial. A partir de E13,5 em camundongos (semanas 8–10 em humanos), a comunicação mesenquimal-epitelial resulta na formação de vilosidades, que representa um marco no desenvolvimento intestinal. A formação de vilosidades aumenta massivamente a área de superfície epitelial intestinal, que será necessária para a absorção suficiente de nutrientes. Antes da morfogênese das vilosidades, o epitélio pseudoestratificado é uniformemente proliferativo, mas após a formação das vilosidades, a proliferação epitelial torna-se restrita às áreas intervilosas. O início da morfogênese das vilosidades começa com a formação de aglomerados mesenquimais subepiteliais, iniciada por ligantes de Hh secretados pelo epitélio intestinal. Os aglomerados mesenquimais das vilosidades, visualizados usando PDPN ou COL6A1, expressam PDGFRα, PTCH1 e os fatores de transcrição GLI1 e GLI2, o que leva à expressão de BMP2 e BMP4, bloqueando a proliferação epitelial acima de cada aglomerado mesenquimal, enquanto as células epiteliais localizadas entre aglomerados adjacentes permanecem proliferativas. Várias rodadas de morfogênese de vilosidades ocorrem à medida que novos aglomerados mesenquimais se formam adjacentes ao domínio interviloso (Fig. 1). A via de Hh é crítica para o início do agrupamento de CMs, enquanto tanto os ligantes de Hh quanto o PDGF-A secretado pelo epitélio são essenciais para a proliferação mesenquimal subsequente. A deleção genética dos genes alvo de Hh Foxf1, Foxf2 e Foxl1 em CMs resultou em desenvolvimento reduzido de vilosidades, e camundongos PDGF-A−/− apresentam grandes defeitos na morfogênese das vilosidades e no desenvolvimento de CMs pericriptais e células caliciformes. Ligantes da via de Hh, como SHH (Sonic hedgehog) e IHH (Indian hedgehog), produzidos por células epiteliais, também mediaram a diferenciação de miofibroblastos αSMAmid e células musculares lisas (CMLs) αSMAhigh da camada muscular intestinal. No intestino fetal humano, as CMLs αSMA+ estão localizadas próximas a criptas em proliferação e são uma fonte de RSPOs (R-espondinas) e ligantes WNT.
Durante a morfogênese tardia, o crosstalk mesenquimal-epitelial molda a regionalização intestinal. Células MCs PDGFRαhigh promoveram um gradiente de sinalização WNT, que impactou a expressão epitelial de SHH, a regionalização anteroposterior e a formação de vilosidades. Sinais adicionais de MCs subepiteliais, incluindo BMPs e FGFs (fator de crescimento de fibroblastos), direcionam ainda mais os destinos e a diferenciação epiteliais intestinais. Em camundongos, a diferenciação em enterócitos, células caliciformes e CEEs começa no feto, enquanto as criptas contendo CIEIs e células TA de rápida proliferação se desenvolvem após o nascimento (cerca de 10 a 12 dias pós-natais), concomitante às células de Paneth. As MCs PDGFRα+, coexpressando parcialmente Foxl1, PDPN, CD34, COL6A1 e GREM1, expandem-se ao redor das criptas nas primeiras semanas pós-natais para promover a sinalização WNT (Fig. 1). No cólon, a depleção da linhagem mesenquimal Col6a1Cre+ em camundongos adultos diminuiu a diferenciação de CEEs. As células de Paneth foram reduzidas quando a atividade de RSPO foi diminuída pela expressão adenoviral de receptores decoy ou ablação de Rspo3 em MCs. Em contraste, a diferenciação de células de Paneth e células caliciformes aumentou em camundongos superexpressando interleucina (IL)-33, altamente expressa por MCs e células epiteliais, e camundongos sem Il33 foram mais suscetíveis à infecção por Salmonella Typhimurium. No intestino fetal, as células PDGFRαhigh expressavam Neuregulina (NRG1), que aumentou a diferenciação de linhagens secretoras em culturas de enteroides de intestino humano em desenvolvimento. Como as células de Paneth e as células caliciformes produzem notavelmente peptídeos antimicrobianos e muco, respectivamente, essenciais para a homeostase intestinal, a desregulação da morfogênese intestinal pode comprometer a barreira intestinal.
Regulação estromal da homeostase intestinal
Regulação estromal da homeostase intestinal. Várias populações estromais ao redor das criptas contribuem para a manutenção de CIEIs ao promover localmente a sinalização WNT, incluindo MCs PDGFRαlow CD34+ pericriptais e subcriptais (amarelo), que são os principais produtores de RSPOs, WNT2B e do antagonista de BMP GREM1, bem como lactíferos Lyve1+ (cinza). Nas vilosidades, as MCs PDGFRαhigh CD34− subepiteliais (verde) se opõem à sinalização WNT e promovem a diferenciação epitelial ao secretar BMPs sob controle de ligantes Hh, produzidos por células epiteliais. A expressão de LGR5 e LEPR identifica subpopulações específicas de MCs subepiteliais ou pericriptais. BMPs = Proteínas morfogenéticas ósseas; CEEs = Células enteroendócrinas; Hh = Hedgehog; CIEIs = Células-tronco epiteliais intestinais; LEPR = Receptor de leptina; MCs = Células mesenquimais; PDGFR = Receptor do fator de crescimento derivado de plaquetas; RSPOs = R-espondinas; CMLs = Células musculares lisas.
A manutenção das IESCs dentro das criptas requer um ambiente específico, pois o destino das IESCs Lgr5+ é se diferenciar, a menos que ambos os ligantes RSPO e WNT estejam presentes para promover a autorrenovação. Várias populações estromais ao redor das criptas expressam antagonistas de BMP, WNTs, e RSPO1 e RSPO2, que potencializam a sinalização canônica de WNT ao se ligar aos receptores Lgr4-6 nas IESCs. A identificação de novos marcadores de superfície, bem como os avanços no rastreamento de linhagens genéticas, na depleção de genes/células baseada em Cre, em coculturas de organoides intestinais com MCs e em scRNAseq, permitiram definir melhor o nicho para as IESCs. Descobertas recentes identificaram MCs pericriptais e trofócitos, identificados pela expressão de PDGFRαlow, PDPN, CD34 e CD81, como principais produtores de WNTs canônicos, do antagonista de BMP GREM1 e de RSPO1, RSPO2, RSPO3, que promovem a sinalização de WNT nas IESCs. Eles estão localizados ao redor das criptas, bem como entre o músculo externo e a base da cripta. As células PDGFRα+ coexpressam parcialmente FOXL1 e GLI1, e a ablação genética de fatores necessários para a secreção de WNT em MCs PDGFRα+, FoxL1+ ou GLI1+, bem como a depleção genética de células FOXL1+, induziu a perda de criptas intestinais e de IESCs. Nas vilosidades, MCs subepiteliais PDGFRαhigh PDPN+CD34−, que compartilham algumas semelhanças com os telócitos descritos anteriormente em vários órgãos, promoveram a diferenciação epitelial ao secretar BMPs sob o controle de ligantes Hh, produzidos por células epiteliais (Fig. 2). Os BMPs se opõem à sinalização de WNT e suprimem os genes característicos das IESCs independentemente da sinalização de WNT.
Principais tipos de células mesenquimais e vasculares da lâmina própria intestinal. MCs subepiteliais, também conhecidos como telócitos ou miofibroblastos subepiteliais, expressam altos níveis de PDGFRα e são os principais produtores de BMPs. As células PDGFRαlow/mid são a população mais abundante e heterogênea, incluindo MCs pericriptais e subcriptais (também conhecidos como trofócitos), que garantem um ambiente pró-estaminalidade, MCs intersticiais e MCs associados ao GALT. Células murais referem-se a populações da parede dos vasos sanguíneos, como os pericitos. Vale ressaltar que, embora a combinação de vários marcadores e a localização permita a discriminação entre essas populações, nenhum marcador único identifica um tipo celular único. Círculos escuros e claros denotam expressão alta e baixa. BECs = Células endoteliais sanguíneas; LECs = Células endoteliais linfáticas; MCs = Células mesenquimais; PDGFR = Receptor do fator de crescimento derivado de plaquetas; SMCs = Células musculares lisas; SM = Músculo liso.
O scRNAseq da LP identificou populações estromais adicionais além das células pericriptais/trofócitos PDGFRαlow CD81+ CD34+ e MCs/telócitos subepiteliais PDGFRαhigh Foxl1+Acta2low. Estes incluem abundantes MCs intersticiais PDGFRαlowCD81−, pericitos Cspg4 (NG2)+Pdgfrb+, CML Acta2highMyh11+Hhip+ no vilo e abaixo das criptas, endotélio vascular CD31+CD34+Lyve1−, endotélio linfático CD31+CD34−Lyve1+, células gliais S100b+, e camada muscular lisa externa Acta2high Myh11+ Hhip−. Populações similares foram encontradas no mesênquima colônico humano, embora CD34 não seja expresso em células PDGFRαlow, e CD81 seja expresso pela maioria dos MCs PDGFRα+. Recentemente, foi demonstrado que os linfáticos intestinais contribuem para a homeostase e reparo das criptas ao secretar fatores pró-estaminalidade RSPO3, WNT2 e Reelina. Portanto, o compartimento mesenquimal/vascular parece ter um papel fundamental na coordenação da manutenção e reparo do nicho das IESCs (Fig. 2). Como nenhum marcador único é restrito a um único tipo celular mesenquimal ou vascular, a depleção gênica ou celular dirigida por Cre deve ser interpretada de acordo. No entanto, a maioria dos estudos concorda com a localização peri/subcriptal dos MCs GREM1+, que podem ser isolados por citometria de fluxo usando coexpressão de PDGFRα e CD81, ou PDPN e CD34, dentro da população CD45−CD31−. Um resumo das principais populações mesenquimais e vasculares intestinais e seus marcadores é fornecido na Fig. 3.
Marcadores adicionais têm sido úteis na caracterização do mesênquima da LP. Na região da cripta, um subconjunto de MCs PDGFRα+ FOXL1− GLI1− que expressam o receptor de leptina (LEPR+) demonstrou expandir-se após irradiação. As células LEPR+ foram essenciais para a homeostase e regeneração intestinal em um mecanismo dependente de IGF1. Interessantemente, o número de células LEPR+ foi modulado pela dieta, sugerindo que a alteração dos MCs do nicho pela dieta (jejum, HFD) representa um mecanismo adicional para regular as IESC e a homeostase intestinal. Na ponta do vilo, estudos recentes identificaram subconjuntos mesenquimais LGR5 positivos PDGFRαhigh. As células LGR5+ subepiteliais promoveram a diferenciação de enterócitos, presumivelmente ao afetar a produção de ligantes de BMP, o ligante não canônico de WNT Wnt5a e a matriz. As células LGR5+ ADAMTS18+ perivasculares mantiveram uma polarização e fenestração funcional das células endoteliais na ponta do vilo ao restringir o acúmulo de fibronectina e regular o VEGFA ligado à MEC.
Células mesenquimais dos tecidos linfoides associados ao intestino
Células imunes efetoras intestinais se disseminam pela lâmina própria e camada epitelial, enquanto células predominantemente naive se agrupam nos GALT, como as placas de Peyer (PPs) no intestino delgado e os folículos linfoides isolados (ILFs) na mucosa do intestino delgado e do cólon. Os GALT são sítios locais para a geração de linfócitos efetores intestinais, como células T produtoras de citocinas e células B secretoras de imunoglobulina (Ig) A. Além das células imunes, os GALT contêm um retículo fino de populações mesenquimais heterogêneas, principalmente PDPN+ PDGFRαmed/baixo, que compartilham semelhanças com as CEF dos órgãos linfoides secundários (SLOS). Nos SLOs, as CEF são as principais produtoras de quimiocinas, proteínas da matriz, fatores de sobrevivência e moléculas de adesão essenciais para a interação célula DC-célula T, encontro de antígenos, posicionamento, sobrevivência e diferenciação de linfócitos. As CEF dos SLO e GALT são atores essenciais na homeostase imune e na indução/regulação da imunidade adaptativa.
No intestino delgado, os subconjuntos mesenquimais de ILFs incluem telócitos LEPR+ PDGFRα+ no topo do epitélio associado ao folículo, distintos dos telócitos da ponta das vilosidades que expressam Lgr5. A deleção de Rankl em células TWIST2+ ou células COL6A1+, que incluem várias populações estromais e vasculares, incluindo MCs no domínio subepitelial (SED) dos GALT, prejudicou a amostragem de antígenos dependente de células M e a interação célula B-célula dendrítica no SED, diminuindo a produção de IgA e a diversidade microbiana. Os MCs da linhagem CCL19+, que também marcam as CEF da PP, regulam a infecção pelo coronavírus murino (M-CoV) por meio do controle mediado por IL15 das células linfoides inatas (ILCs) do grupo 1. A interrupção da mecanossensação em MCs CCL19+ pela deleção de Piezo1 desorganizou o conduto associado às CEF perivasculares e às vênulas endoteliais altas, prejudicando a entrada de linfócitos nas PPs e o início das respostas de anticorpos na mucosa. A ativação por linfotoxina das CEF CCL19+ também desempenhou um papel na maturação das criptopatches (CPs) em ILFs, afetando a homeostase e a função das ILCs. No cólon, MCs CD34− PDPN+ que expressam as enzimas sintetizadoras de 7α,25-OHC, Ch25h e Cyp7b1, foram localizados nos ILFs, enquanto MCs CD34+ PDPN+, abundantes fora dos ILFs, expressaram níveis mais elevados da enzima degradadora de oxisterol Hsd3b7. A comunicação cruzada entre esses dois tipos celulares pode contribuir para o gradiente localizado de 7α,25-OHC necessário para a migração de ILC3 GPR183+ e remodelação tecidual inflamatória durante a colite.
Regulação mesenquimal/vascular da barreira intestinal pós-natal
Regulação estromal/vascular da barreira intestinal pós-natal. (A) A colonização microbiana do intestino após o nascimento desempenha um papel importante na maturação dos componentes imune, vascular e estromal. Ao nascimento, o intestino neonatal murino é praticamente desprovido de células imunes adaptativas. As estruturas do tecido linfoide intestinal se desenvolvem nas primeiras semanas após o nascimento, enquanto os anlagen dos linfonodos mesentéricos e das placas de Peyer se desenvolvem no período pré-natal. Nas primeiras semanas após o nascimento, os PDGFs desempenham um papel essencial na maturação dos MCs PDGFRαalto, induzindo genes pró-diferenciação e imunorreguladores, incluindo BMPs, RA e lamininas (B), bem como na organização estromal espacial dentro da cripta-vilosidade. Esse programa é essencial para promover a homeostase/função de barreira intestinal e prevenir reparo desregulado e respostas inflamatórias após lesão. BM = Membrana basal; BMPs = Proteínas morfogenéticas ósseas; IL = Interleucina; PP = Placa de Peyer; MCs = Células mesenquimais; EC = Células endoteliais; PDGFR = Receptor do fator de crescimento derivado de plaquetas; LTβR = Receptor de linfotoxina beta; RA = Ácido retinoico; SMCs = Células musculares lisas; TNF = Fator de necrose tumoral; AMPs = Peptídeos antimicrobianos; ECM = Matriz extracelular.

No período perinatal, a maturação dos componentes epiteliais, imunes e vasculares intestinais é necessária para garantir as funções digestiva e de barreira e a imunidade equilibrada (Fig. 4). Vários desses processos são regulados pela microbiota intestinal que coloniza o intestino após o nascimento. A mucosa intestinal humana apresenta uma estrutura intestinal totalmente diferenciada ao nascimento, em contraste com os camundongos. Embora existam diferenças na maturidade intestinal ao nascer, tanto humanos quanto camundongos precisam fazer a transição de um ambiente protegido, desprovido de microbiota, para um intestino maduro, colonizado por microrganismos comensais e potencialmente patogênicos. No intestino neonatal, essas diferenças estruturais, incluindo a falta de criptas regenerativas/células de Paneth maduras e a diminuição da renovação das células epiteliais, têm implicações para a infecção. De fato, a rápida renovação da superfície no intestino adulto, bem como os peptídeos antimicrobianos derivados das células de Paneth, representam uma primeira linha de proteção contra patógenos entéricos (Fig. 4A).
Isso é particularmente importante, pois o intestino neonatal murino possui um sistema imunológico imaturo, em grande parte desprovido de células imunes adaptativas ao nascimento, exceto por uma onda fetal de linfócitos T γδ, uma fonte importante de IL17. Esses linfócitos residem na LP, pois, ao contrário dos neonatos humanos, os camundongos não contêm linfócitos associados ao epitélio até o desmame. As estruturas do tecido linfoide intestinal se desenvolvem nas primeiras semanas após o nascimento, em contraste com os anlagen dos linfonodos mesentéricos e das placas de Peyer, que se desenvolvem no pré-natal. Durante as primeiras semanas pós-natais, os linfócitos T e B recrutados no local dos anlagen das PP induzem a expansão e diferenciação de células semelhantes a FRC associadas às PP. A rede mesenquimal das PP se desenvolve a partir de linhagens mesenquimais fetais perivasculares CCL19+ e subepiteliais COL6A1+, que colonizam zonas distintas das PP de maneira dependente de LTβR e do receptor 1 do fator de necrose tumoral (TNF)R1. Mecanismos sinérgicos e parcialmente compensatórios entre ambas as linhagens garantem a regulação dependente de IgA da microbiota comensal e das respostas imunes adaptativas contra infecção viral intestinal.

Um pré-requisito para o crescimento intestinal pós-natal é a capacidade de estabelecer uma vasculatura funcional. Foi demonstrado que a microbiota regula a vasculatura por meio de diferentes mecanismos, incluindo sinalização através de um tipo de célula epitelial que detecta bactérias, promovendo a sinalização do Fator Tecidual (TF)–receptor ativado por protease (PAR1), por meio da ativação de receptores Toll-like (TLRs) e receptores do tipo NOD em células endoteliais e MCs, bem como induzindo VEGF-C (Fator de crescimento endotelial vascular C) em macrófagos das vilosidades. Em peixes-zebra, que possuem organização intestinal semelhante, a microbiota promoveu angiogênese intestinal, metabolismo mesenquimal e indução de quimiocinas recrutadoras de leucócitos em células musculares lisas vasculares (SMCs).
Concomitantemente à maturação imune e vascular, o epitélio intestinal perinatal sofre grandes alterações, incluindo a formação de criptas contendo células-tronco e o desenvolvimento de células de Paneth. Os MCs PDGFRα+, co-expressando parcialmente Foxl1, PDPN, CD34, COL6A1 e GREM1, expandiram-se ao redor das criptas nas primeiras semanas pós-natais. Em concordância com um papel progenitor dessas células, o rastreamento de linhagem indutível de células GREM1+ usando o modelo de camundongo Grem1CreERT mostrou que os MCs GREM1+ precoces geram a maioria dos MCs intestinais subepiteliais em 1 ano. Camundongos PDGFRα−/− são letais embrionários, o que impediu investigações sobre o papel do PDGFRα na maturação pós-natal do mesênquima intestinal. Essa questão foi investigada recentemente utilizando um novo modelo de camundongo que permite o rastreamento de linhagem indutível e a depleção gênica em células que expressam o receptor de linfotoxina β (LTBR). O rastreamento de linhagem de progenitores LTBR+ identificou uma linhagem mesenquimal subepitelial PDGFRαhigh distinta, desenvolvendo-se cerca de 2 semanas após o nascimento nas vilosidades do intestino delgado, em um processo dependente da microbiota. A linhagem LTBR PDGFRαhigh expressou níveis mais elevados de genes promotores de imunorregulação e diferenciação epitelial em comparação com MCs PDGFRα+ não gerados a partir de progenitores LTBR+, que apresentavam uma assinatura gênica pró-célula-tronco/pró-inflamatória. Essas identidades transcriptômicas distintas foram mantidas após lesão, sugerindo que a resposta ao dano dos MCs PDGFRα+ é impactada por sua origem ou período de desenvolvimento (Fig. 4A).

O PDGFRα tem um grande impacto na maturação mesenquimal pós-natal e no destino. De fato, a ablação condicional de Pdgfra na linhagem mesenquimal LTBR impediu a aquisição de fatores promotores de diferenciação epitelial e imunorregulação, incluindo o receptor de ligantes de Hh Ptch1, BMPs, proteínas da membrana basal (MB), lamininas, enzimas de síntese de ácido retinóico (AR), Il33, bem como o arranjo espacial adequado dentro do eixo cripta-vilosidade. Tal defeito na maturação mesenquimal reduziu o crescimento pós-natal e perturbou a homeostase intestinal, levando a um aumento de CESIs e células proliferativas e diminuição de células caliciformes, enterócitos maduros e células dendríticas (DCs) CD11b+CD103+, que desempenham um papel fundamental na imunidade neonatal. Em geral, a falta de maturação do estroma desregulou as respostas de reparo e aumentou a suscetibilidade à inflamação intestinal em indivíduos jovens (Fig. 4B).
Esses dados sugerem que linhagens distintas PDGFRα+ com funções pró-diferenciação/imunorreguladoras (PTCH1high) ou pró-tronco/inflamatórias (PTCH1−/low) são estabelecidas nas primeiras semanas após o nascimento e que sua abundância relativa determina o estado inflamatório do intestino. Isso é consistente com os ligantes epiteliais Hh que atuam como sensores chave para a integridade epitelial e com a redução observada da via de sinalização Hh em pacientes com DIIs. Portanto, a maturação pós-natal dos elementos mesenquimais/vascular do intestino parece representar uma etapa essencial no desenvolvimento de uma barreira intestinal funcional e é, pelo menos parcialmente, regulada pela microbiota (Fig. 4).

Regulação estromal da regeneração e inflamação intestinal

O dano tecidual induz a ativação de um programa regenerativo para restaurar a integridade epitelial. No intestino, essa resposta envolve células-tronco, bem como as linhagens secretoras/absortivas, que têm o potencial de reverter a um estado de célula-tronco, e células quiescentes de retenção de marcadores. A resposta regenerativa intestinal é estritamente regulada pelo microambiente, incluindo células imunes, células neuronais entéricas, a matriz extracelular, a dieta e o microbioma. Além disso, o compartimento mesenquimal está emergindo recentemente como um ator crítico na regeneração e inflamação intestinal.

Vários fatores essenciais para a regeneração foram identificados. O knockout dos microRNAs miR-143/145 usando camundongos Twist2Cre, que marcam principalmente CMLs da muscular própria e miofibroblastos αSMA+, resultou em respostas regenerativas desorganizadas, perda de proliferação epitelial e exacerbação da colite induzida por sulfato de sódio dextrano (DSS). O miR-143 funciona como um supressor tumoral autônomo celular no câncer de cólon e descobriu-se que ele desreprime Igfbp5, o que prejudicou a sinalização de IGF1 após lesão. O IGF1 é um potente fator de crescimento e reparo na regeneração intestinal após ressecção, lesão por radiação e colite induzida por DSS. Usando um modelo de depleção celular mediada por toxina diftérica, a ablação de MCs da cripta LEPR+ e sua progênie em camundongos LeprCreRosa26–iDTR prejudicou a regeneração após irradiação em um mecanismo dependente de IGF1. O WNT2B derivado de células LEPR+ também promoveu a regeneração durante a colite.
Um fator adicional que favorece a regeneração do cólon após danos induzidos por DSS é a prostaglandina E2 (PGE2), produzida por MCs intestinais. A PGE2 aumentou a atividade de YAP (regulador transcricional associado a Yes1), o que promoveu a regeneração do cólon ao aumentar a expressão da enzima de síntese de PGE2 COX-2 e do receptor de prostaglandina EP4, mas também induziu a tumorigênese do cólon por meio de mecanismos dependentes de YAP e das vias de sinalização Gs-axina-βcatenina. Vale notar que a deficiência de Slco2a1 (que aumenta as concentrações de PGE2) foi associada a inflamação/ulcerações do intestino delgado em humanos e ao aumento da sensibilidade à colite em modelos murinos, sugerindo um mecanismo de faca de dois gumes. Durante os primeiros dias após a lesão em camundongos, o ligante não canônico WNT5A produzido por MCs adjacentes à ferida foi necessário para a inibição transitória da proliferação epitelial, uma etapa essencial na regeneração das criptas. Embora a identidade dos MCs produtores de WNT5A permaneça incerta, as células PDPN+CD34− produziram níveis mais elevados de Wnt5a do que as células PDPN+CD34+ pericriptais na colite induzida por DSS.

O nicho mesenquimal também mantém o compartimento de células-tronco enquanto regula a proliferação de células epiteliais. Após a inflamação induzida por DSS, populações mesenquimais localizadas na proximidade das criptas, incluindo MCs PDPN+CD34+, trofócitos, MCs GL1+ e PDPN+CD90+, superexpressaram fatores pró-tronco como Grem1, Rspo1 e Rspo3. Diversos gatilhos ativam essa resposta mesenquimal protetora. A regulação positiva de Rspo1 por MCs PDPN+CD90+ após DSS foi dependente da sinalização de Map3k2 e ROS (espécies reativas de oxigênio), e a deleção de Map3k2 em células que expressam COL1A1 usando Col1a2CreERT2Map3k2fl/fl aumentou a gravidade da colite induzida por DSS. Fatores adicionais que promovem a expressão de fatores pró-tronco incluem a citocina pró-inflamatória IL1, consistente com a hipótese de que vias semelhantes estão envolvidas na inflamação e na regeneração. O IL1R1 foi altamente expresso por MCs GREM1+PDGFRα+ pericriptais, e a ativação de IL1R1 induziu a regulação positiva de Rspo3 durante a infecção para proteger as células-tronco.
O diálogo mesenquimal com as células imunes é rigidamente regulado e provavelmente adaptado à intensidade do dano. De fato, a estimulação de IL1 em células que expressam GREM1+ Rspo3 foi suficiente para o reparo epitelial na colite induzida por DSS, mas exigiu a produção de IL22 por ILCs, também expressando IL1R1, para promover a proliferação e o reparo epiteliais na infecção intestinal causada por Citrobacter rodentium. Em um modelo de infecção por Listeria (Lm), a comunicação de vários subtipos imunes e MCs PDPN+, que produziam IL11, foi necessária para a resposta epitelial dependente de STAT3 e a depleção de células caliciformes, levando no geral à diminuição da invasão de Lm nas vilosidades, mas a maior suscetibilidade à colite. No cólon, a produção de oxisteróis por MCs PDPN+CD34–, abundantes em ILFs e CPs, desempenhou um papel fundamental no recrutamento de ILC3s que expressam GPR138. O aumento da produção de oxisteróis durante a inflamação elevou a suscetibilidade à colite por meio do recrutamento celular mediado por GPR183.
Células mesenquimais em doenças inflamatórias intestinais
Em condições crônicas, ciclos contínuos de regeneração levam a respostas inflamatórias e de reparo desreguladas, como observado nas DIIs, incluindo a doença de Crohn (DC) e a colite ulcerativa (CU). Estudos recentes de scRNAseq lançaram nova luz sobre a heterogeneidade do compartimento mesenquimal em pacientes com DII, sugerindo uma comunicação mesenquimal desregulada com leucócitos, células epiteliais e a matriz extracelular (MEC).
A análise de RNAseq de célula única do compartimento mesenquimal do cólon em controles saudáveis e pacientes com CU identificou vários aglomerados mesenquimais que expressam colágenos não fibrilares, proteínas matricelulares e fatores BMP/WNT envolvidos na formação da membrana basal e na estaminalidade/diferenciação epitelial. Um aglomerado superexpressando PDPN, CCL19 e IL33 expandiu-se fortemente em pacientes com CU, sugerindo um papel causal na patogênese da doença CU ou uma reação para promover o reparo. Um aglomerado semelhante na colite induzida por DSS superexpressou Lox e Loxl1, que catalisam a reticulação covalente de colágeno e elastina, gerando peróxido de hidrogênio como subproduto. O bloqueio das enzimas Lox reduziu a gravidade da colite por DSS, muito provavelmente devido ao impacto nos processos redox ou na remodelação da matriz.
Estudos de associação genômica ampla (GWASs) revelaram alelos de risco para a retocolite ulcerativa (RCU). Um atlas celular da mucosa do cólon de 18 pacientes com RCU e 12 indivíduos saudáveis identificou um subconjunto de fibroblastos inflamatórios IL11+IL13RA2+ associados à resistência ao tratamento anti-TNF. Um dos genes mais enriquecidos em fibroblastos inflamatórios é o receptor de Oncostatina M (OSMR), que também é um gene de risco putativo para a DII. OSM é altamente expresso em células mieloides, que também se expandem durante a inflamação, fornecendo ainda mais uma ligação entre fibroblastos inflamatórios e a resistência mediada por OSM ao tratamento anti-TNF. Vale notar que a resposta induzida por TNF em CFs foi suficiente para induzir várias patologias inflamatórias crônicas, incluindo na DII. Uma interação mieloide-mesenquimal semelhante foi recentemente demonstrada em pacientes portadores de alelos de risco para DC do NOD2. A perda de NOD2 desregulou a homeostase de fibroblastos e macrófagos ativados, notavelmente através de níveis elevados de STAT3 e ligantes do receptor gp130, como OSM e IL6, potencialmente impulsionando a fibrose. Portanto, o bloqueio de membros da família gp130 foi sugerido como representando um tratamento alternativo para pacientes selecionados com DC, ao interromper o circuito de interações fibroblasto-célula imune. Em pacientes com DC ileal, o scRNAseq identificou módulos celulares patogênicos associados à resistência à terapia anti-TNF, que incluíam CFs pró-inflamatórios e células endoteliais superexpressando IL6 e quimiocinas recrutando neutrófilos e monócitos. O desenvolvimento de células mesenquimais e endoteliais enriquecidas em assinaturas inflamatórias, de remodelação da matriz e de interferon Tipo I também foi identificado em pacientes pediátricos com DII.
Evidências crescentes apontam para uma comunicação cruzada desregulada entre CFs ativados que expressam citocinas como IL6 e IL11, que respondem à IL1β e OSM (majoritariamente expressas por células mieloides), levando a ciclos desregulados de inflamação/regeneração e disfunção da barreira epitelial, características-chave da DII. Além disso, os CFs também são grandes produtores de proteínas estruturais e reguladoras da MEC, incluindo colágenos, proteoglicanos, proteínas da MB e enzimas envolvidas na degradação e remodelação da MEC. Como vários elementos da MEC regulam o recrutamento de células imunes, bem como a integridade dos vasos sanguíneos e das células epiteliais, mudanças locais na composição da MEC têm muito provavelmente um impacto na homeostase e inflamação intestinal. Mudanças na MEC também podem ter implicações sistêmicas, pois estudos sugeriram que a associação entre inflamação cutânea e DII envolve o reconhecimento, por CFs do cólon, de fragmentos de hialuronano (HA) liberados na inflamação da pele. O HA também foi sugerido como desempenhando um papel na adipogênese reativa do cólon e na defesa do hospedeiro após lesão.
CONCLUSÃO
Como células regenerativas chave do intestino, as IESCs recebem sinais de um nicho "expandido", que inclui células estromais, células de Paneth, células imunes e a microbiota. O tipo de lesão, o estresse intestinal, a idade e as diferenças na microbiota podem afetar ainda mais sua função de nicho. Em relação aos recentes experimentos de scRNA-sequencing, será interessante investigar se e em que extensão os aglomerados mesenquimais identificados em diferentes estudos são semelhantes, mapear sua localização dentro do tecido durante a progressão da doença e definir relações de linhagem.
No geral, permanece incerto como direcionar especificamente MCs fibróticas ou inflamatórias em patologias. Em vários órgãos, MCs próximas a vasos sanguíneos foram identificadas como principais contribuintes para tecido cicatricial e fibrose. O desenvolvimento de modelos de camundongos baseados em Cre mais específicos pode ajudar a identificar e direcionar subconjuntos mesenquimais patológicos, protegendo ao mesmo tempo o mesênquima normal (no intestino como em outros órgãos), que é necessário para manter a homeostase epitelial, vascular e imune e para o reparo tecidual. Uma "normalização" do compartimento mesenquimal, em vez de direcionar moléculas específicas, representa uma abordagem alternativa promissora, mas requer uma melhor compreensão da biologia das MCs, que ainda é apenas parcialmente compreendida.
Contribuições dos autores
Todos os autores contribuíram para a definição do conteúdo e das figuras da revisão. LP escreveu o manuscrito.
Declaração de interesses concorrentes
Os autores não têm interesses concorrentes a declarar.
Financiamento
O laboratório recebeu financiamento do Conselho Europeu de Pesquisa (ERC) Consolidator grant 648428-PERIF (para LP), INSERM e Institut Pasteur.
REFERÊNCIAS
Identificação de células-tronco no intestino delgado e cólon pelo gene marcador Lgr5
Células-tronco, autorrenovação e diferenciação no epitélio intestinal
Diferenciação de células de Paneth no intestino em desenvolvimento de camundongos normais e transgênicos
Diferentes fagócitos teciduais amostram células apoptóticas para direcionar programas distintos de homeostase
Não equivalência dos ligantes Wnt e R-spondina durante a autorrenovação de células-tronco intestinais Lgr5+
Células de Paneth constituem o nicho para células-tronco Lgr5 nas criptas intestinais
Células-tronco intestinais funcionais após ablação de células de Paneth induzida pela perda do fator de transcrição Math1 (Atoh1)
Fontes redundantes de Wnt regulam células-tronco intestinais e promovem a formação de células de Paneth
O estroma fornece um nicho de células-tronco intestinais na ausência de Wnts epiteliais
A secreção de Wnt de células epiteliais e miofibroblastos subepiteliais não é necessária no nicho de células-tronco intestinais de camundongos in vivo
Células secretoras profundas das criptas Reg4+ funcionam como nicho epitelial para células-tronco Lgr5+ no cólon
Células mesenquimais da lâmina própria intestinal
Células reticulares fibroblásticas no nexo das respostas imunes inata e adaptativa
A origem perivascular de fibroblastos patológicos
Células estromais na inflamação crônica e formação de órgãos linfoides terciários
Fibroblastos como reguladores imunológicos em infecção, inflamação e câncer
Células estromais intestinais na imunidade mucosa e homeostase
Sinalização Hedgehog no desenvolvimento intestinal e homeostase
Desenvolvimento gastrointestinal anormal em camundongos deficientes em PDGF-A e PDGFR-(alfa) implica uma nova estrutura mesenquimal com propriedades instrutivas putativas na morfogênese das vilosidades
Células mesenquimais CD34+ são um componente importante do nicho de células-tronco intestinais na homeostase e após lesão
Células mesenquimais Col6a1+/CD201+ regulam a morfogênese e homeostase intestinal
O fator de transcrição mesenquimal de asa helicoidal Fkh6 é necessário para o controle da proliferação e diferenciação gastrointestinal
Foxf1 e Foxf2 controlam o desenvolvimento intestinal murino limitando a sinalização Wnt mesenquimal e promovendo a produção de matriz extracelular
Mapeamento do desenvolvimento do nicho intestinal humano em resolução de célula única
A comunicação cruzada mesênquima-epitélio molda a regionalização intestinal via sinalização Wnt e Shh
A sinalização BMP inibe a autorrenovação das células-tronco intestinais através da supressão da sinalização Wnt-beta-catenina
O fator de transcrição mesenquimal do estômago Barx1 especifica a identidade epitelial gástrica através da inibição da sinalização Wnt transitória
A sinalização FGF recíproca epitélio-mesenquimal é necessária para o desenvolvimento do ceco
Desenvolvimento e diferenciação do epitélio intestinal
Células estromais pericriptais PDGFRα+ são a fonte crítica de Wnts e RSPO3 para células-tronco intestinais murinas in vivo
Programação da diferenciação epitelial intestinal por IL-33 derivada de fibroblastos pericriptais em resposta à infecção sistêmica
Camundongos deficientes em Muc2 desenvolvem colite espontaneamente, indicando que MUC2 é crítico para a proteção colônica
Células mesenquimais que expressam Foxl1 constituem o nicho de células-tronco intestinais
Células mesenquimais que expressam GLI1 formam o nicho essencial secretor de Wnt para células-tronco do cólon
Telócitos subepiteliais são uma fonte importante de Wnts que sustenta as criptas intestinais
A sinalização Bmp é necessária para o crescimento e morfogênese intestinal
Padrões de expressão gênica dos topos e criptas basais do cólon humano e antagonistas de BMP como fatores do nicho de células-tronco intestinais
TELÓCITOS – um caso de serendipidade: o caminho tortuoso das Células Intersticiais de Cajal (ICC), passando pelas Células Intersticiais Semelhantes a Cajal (ICLC) até os TELÓCITOS
Diversos papéis emergentes dos telócitos
O hedgehog indiano regula o destino das células-tronco intestinais através de interações epitélio-mesenquimais durante o desenvolvimento
Populações distintas de células mesenquimais geram o gradiente essencial de sinalização BMP intestinal
BMP restringe a pluripotência das células-tronco Lgr5+ intestinais suprimindo diretamente seus genes de assinatura
Remodelação estrutural do mesênquima do cólon humano na doença inflamatória intestinal
Delineação e nascimento de um nicho de células-tronco intestinais em camadas
Reconfiguração intra e intercelular do cólon humano durante a colite ulcerativa
Os linfáticos atuam como um centro de sinalização para regular a atividade das células-tronco intestinais
Linfáticos e fibroblastos sustentam células-tronco intestinais na homeostase e lesão
Sinais linfangiócrinos são necessários para a reparação intestinal adequada após lesão citotóxica
Células mesenquimais Lepr+ detectam a dieta para modular células-tronco/progenitoras intestinais via eixo leptina-Igf1
Análise de camada estratificada revela que a leptina intrínseca estimula células mesenquimais das criptas para controlar a inflamação da mucosa
Telócitos Lgr5+ são uma fonte de sinalização na ponta das vilosidades intestinais
Telócitos da ponta das vilosidades ADAMTS18+ mantêm um domínio de sinalização VEGFA polarizado e fenestrações em vasos sanguíneos intestinais absortivos de nutrientes
Tecidos linfoides associados ao intestino humano (GALT); diversidade, estrutura e função
Sequenciamento de RNA de célula única de células estromais de linfonodos revela heterogeneidade associada a nicho
Diferenciação e ativação de células reticulares fibroblásticas
Células estromais de linfonodos: cartógrafas do sistema imunológico
Visualização e caracterização funcional de fibroblastos de órgãos linfoides
Mapas de expressão gênica espacial do folículo linfoide intestinal e epitélio associado identificam programas de expressão zonados
Identificação de células mesenquimais subepiteliais que induzem IgA e diversificam a microbiota intestinal
Deleção direcionada de RANKL em células indutoras de células M pelo driver Col6a1-Cre
Células reticulares fibroblásticas regulam a inflamação intestinal via controle mediado por IL-15 das ILCs do grupo 1
Mecanosensação pelo estroma das placas de Peyer regula a migração de linfócitos e as respostas de anticorpos da mucosa
Ninhos de células reticulares fibroblásticas intestinais controlam a homeostase e função das células linfoides inatas
Detecção de oxisterol através do receptor GPR183 promove a função indutora de tecido linfoide das células linfoides inatas e inflamação do cólon
Morfogênese e maturação do intestino embrionário e pós-natal
Bactérias intestinais e a regulação da homeostase de células imunes
Troca molecular micróbio-hospedeiro e suas consequências funcionais no início da vida de mamíferos
Imprinting do sistema imunológico pela microbiota no início da vida
Invasão de enterócitos e formação de microcolônias por Salmonella dependente da idade
Defensinas entéricas são reguladores essenciais da ecologia microbiana intestinal
Duas ondas de células progenitoras hematopoiéticas distintas colonizam o timo fetal
O desenvolvimento de células T γδ produtoras de interleucina-17 é restrito a uma onda embrionária funcional
Alta frequência de células T portadoras de homodímero CD8 alfa alfa no intestino fetal humano
Os lados claro e escuro dos linfócitos intraepiteliais intestinais
Identificação de novos tecidos linfoides na mucosa intestinal murina onde aglomerados de progenitores linfoides-hematopoiéticos c-kit+ IL-7R+ Thy1+ se desenvolvem
Imunologia da mucosa neonatal
Convergência da linhagem de células reticulares fibroblásticas nas placas de Peyer governa a imunidade intestinal
Regulação do desenvolvimento da angiogênese intestinal por micróbios indígenas via células de Paneth
Fator tecidual e PAR1 promovem remodelação vascular intestinal induzida por microbiota
Atividade pró-angiogênica de TLRs e NLRs: um novo elo entre a microbiota intestinal e a angiogênese intestinal
A microbiota intestinal regula a integridade dos lacteais induzindo VEGF-C em macrófagos das vilosidades intestinais
Um atlas celular de processos responsivos a micróbios no intestino do peixe-zebra
Gremlin 1 identifica uma célula-tronco esquelética com potencial ósseo, cartilaginoso e estromal reticular
O receptor alfa de PDGF é necessário para o desenvolvimento das células da crista neural e para o padrão normal dos somitos
A maturação estromal induzida por PDGFRalfa é necessária para conter a staminalidade do epitélio intestinal pós-natal e promover mecanismos de defesa
As células dendríticas CD103+ intestinais são atores-chave no controle imune inato da infecção por Cryptosporidium parvum em camundongos neonatos
Células dendríticas CD103+ intestinais: reguladoras mestras da tolerância?
A perda de Indian hedgehog ativa múltiplos aspectos da resposta de cicatrização de feridas no intestino de camundongos
A análise da variação germinativa de GLI1 implica a sinalização hedgehog na regulação das vias inflamatórias intestinais
Regeneração intestinal: regulação pelo microambiente
O eixo neuroimune intestinal: interação entre neurônios, células imunes e micróbios
Uma função mesenquimal essencial para miR-143/145 na regeneração do epitélio intestinal
O posicionamento dependente de Myd88 de células estromais que expressam Ptgs2 mantém a proliferação do epitélio colônico durante a lesão
A prostaglandina E2 ativa YAP e um loop de sinalização positiva para promover a regeneração do cólon após colite, mas também carcinogênese em camundongos
Orquestração parácrina da tumorigênese intestinal por um nicho mesenquimal
A prostaglandina E2 promove o crescimento de células de câncer de cólon através de um eixo de sinalização Gs-axina-beta-catenina
A deficiência de Slco2a1 exacerba a colite experimental via ativação do inflamassomo em macrófagos: um possível mecanismo de enteropatia crônica associada ao gene SLCO2A1
Wnt5a potencializa a sinalização de TGF-beta para promover a regeneração das criptas do cólon após lesão tecidual
Células estromais intestinais reguladas por MAP3K2 definem um nicho distinto de células-tronco
A sinalização dependente de IL-1R1 coordena a regeneração epitelial em resposta ao dano intestinal
A infecção de células mieloides das placas de Peyer por Listeria sinaliza através de células estromais gp38+ e bloqueia a invasão das vilosidades intestinais
Análises de associação identificam 38 loci de suscetibilidade para doença inflamatória intestinal e destacam risco genético compartilhado entre populações
A oncostatina M impulsiona a inflamação intestinal e prediz a resposta à terapia neutralizante do fator de necrose tumoral em pacientes com doença inflamatória intestinal
O direcionamento de células mesenquimais pelo TNF como um princípio patogênico comum em doenças inflamatórias crônicas articulares e intestinais
Uma mutação frameshift em NOD2 associada à suscetibilidade à doença de Crohn
Um nicho mieloide-estromal e resgate de gp130 na doença de Crohn impulsionada por NOD2
A análise de células únicas de lesões da doença de Crohn identifica um módulo celular patogênico associado à resistência à terapia anti-TNF
Perfil mucoso da colite de início pediátrico e DII revela vias patogênicas e terapêuticas comuns
A matriz extracelular na DII: um mediador dinâmico da inflamação
Remodelação da MEC na DII: espectador inocente ou cúmplice? O papel emergente dos eventos moleculares extracelulares na sustentação da inflamação intestinal
A inflamação cutânea ativa fibroblastos estromais intestinais e promove colite
Hialuronidase inibe adipogênese reativa e inflamação do cólon e da pele
O receptor imune inato NOD2 medeia a proteção das células-tronco intestinais LGR5+ contra a citotoxicidade das ROS por meio da estimulação da mitofagia
Células estromais mesenquimais residentes nos tecidos: implicações para terapias antifibróticas específicas de tecidos