pmid: "29922338"
title: "Design, formulação e avaliação de um gel herbal contendo melissa, sumagre, alcaçuz, alecrim e gerânio para o tratamento de infecções recorrentes de herpes labial."
authors: "Aslani A, Zolfaghari B, Fereidani Y"
journal: "Dental research journal"
pubdate: "2018"
doi: "10.4103/1735-3327.231865"
source: "PMC Full Text"
Design, formulação e avaliação de um gel herbal contendo melissa, sumagre, alcaçuz, alecrim e gerânio para o tratamento de infecções recorrentes de herpes labial.
Autores
Aslani A, Zolfaghari B, Fereidani Y
Periodico
Dental research journal (2018)
Conteudo
Desenho, formulação e avaliação de um gel fitoterápico contendo melissa, sumagre, alcaçuz, alecrim e gerânio para tratamento de infecções recorrentes de herpes labial
Contexto:
O vírus herpes simplex é um patógeno humano que pode causar infecções na pele ou nas mucosas. Melissa, sumagre, alcaçuz, alecrim e gerânio possuem efeito antimicrobiano, antiviral, anti-inflamatório e analgésico local. A redução do período de recuperação do herpes labial recorrente e o controle da formação de proteínas virais são outros efeitos dessas ervas. O objetivo deste estudo é o desenho, a formulação e a avaliação do gel contendo extratos dessas cinco ervas.
Materiais e Métodos:
Neste estudo experimental, após avaliação fotoquímica e macroscópica dessas ervas medicinais, os extratos concentrados semissólidos foram incorporados em bases de gel. Géis mucoadesivos foram preparados usando carbopol 940, carboximetilcelulose sódica (Na CMC) e hidroxipropilmetilcelulose K4M como polímeros bioadesivos. Testes físico-químicos, viscosidade, medição da força mucoadesiva e estudo de liberação de fármaco in vitro foram realizados nas formulações F10 (carbopol 940, 0,5% e Na CMC, 3%) e F11 (carbopol 940, 1% e Na CMC, 3%).
Resultados:
O conteúdo de polifenóis da mistura de extratos foi medido em 210,8 ± 13,68 mg GAE/g. O pH das formulações foi de 6,0 ± 0,2. Foram preparadas 14 formulações de gel. A aparência física, homogeneidade e consistência de F10 e F11 foram boas. A mucoadesão e a viscosidade de F11 foram maiores que as de F10. O estudo dos perfis de liberação nas formulações F10 e F11 mostrou que a liberação do fármaco de F11 foi mais lenta.
Conclusão:
A melhor formulação para o tratamento e redução do período de recuperação de infecções recorrentes de herpes labial deve apresentar alto valor de mucoadesão e mostrar liberação controlada do fármaco. F11, com a maior viscosidade e mucoadesão e a menor taxa de liberação, foi considerada a melhor formulação.
INTRODUÇÃO
O vírus herpes simplex (HSV) é um vírus de DNA de fita dupla que causa infecções na pele e possui subtipos HSV-I e HSV-II. O tipo I está associado a infecções na parte superior das costas, mas o tipo II está associado a infecções na parte inferior das costas em ambos os sexos. As infecções por HSV têm dois estágios; infecções primárias nas quais o vírus se esconde em um gânglio e infecções secundárias com recorrência da doença. Danos locais, como ultravioleta, abrasão e fração, ou alterações sistêmicas, como febre, fadiga e menstruação, levam à ativação viral e ao retorno à superfície da pele através dos neurônios, e lesões cutâneas particulares, como mácula, pápula, pústula e ferida, se desenvolvem, mas melhoram em 10 a 14 dias.
Como resultado de extensos estudos nas últimas 2 décadas, um grande número de agentes antivirais contra o HSV (II) foi detectado, como aciclovir, penciclovir, valaciclovir, docosanol e fanciclovir. Esses medicamentos são virustáticos e citotóxicos e são usados para herpes simples labial recorrente. Complicações do sistema nervoso central, hiperplasia gengival, erupção cutânea, acne, urticária, insuficiência renal, alterações no ciclo menstrual, flebite na área de injeção e dor nas articulações são os efeitos colaterais desses medicamentos, que geralmente são observados nas formas farmacêuticas oral e parenteral.
Em um estudo, o creme tópico de aciclovir causa deformidades funcionais e superficiais graves no embrião de rato no primeiro trimestre de gravidez. O principal problema com esses medicamentos é a resistência aos medicamentos, e é por isso que o aciclovir tópico está ultrapassado hoje para o tratamento do herpes simples labial. O aciclovir acelera a cicatrização das lesões herpéticas, mas não pode prevenir a fase latente do vírus nos gânglios sensoriais e a frequência e gravidade das recidivas. Medicamentos como penciclovir e docosanol custam mais que outros.
Os fatos acima levaram à pesquisa para a descoberta de novos medicamentos, especialmente medicinas fitoterápicas tradicionais que são potencialmente menos tóxicas e têm menos efeitos colaterais e menor custo. Diferentes ervas de todo o mundo foram identificadas como agentes antivirais. Vamos mencionar algumas dessas ervas para a preparação dessas formulações abaixo:
Melissa officinalis L. (Lamiaceae) é usada para o tratamento de herpes labial recorrente há anos. Os compostos ativos desta erva são polifenóis (ácido rosmarínico, ácido protocatecuico, ácido cafeico, ácido clorogênico e derivados do ácido hidroxicinâmico), flavonoides (glicosídeo de luteolina, quercetina, apigenina e caempferol), óleos essenciais 0,1%–0,2% contendo monoterpenos aldeídicos (citronelal 30%–40%), citral (20%–30%) e sesquiterpenos.
Estudos indicam que a atividade antiviral desta erva se deve à ocupação dos receptores virais pelos compostos polifenólicos. Dessa forma, o vírus não consegue aderir à membrana celular. Esse efeito pode encurtar o período de recuperação do herpes labial recorrente. No entanto, o citral e o citronelal interrompem a produção de proteínas virais. O óleo essencial de melissa tem efeitos antimicrobiano, antiviral, anti-inflamatório, descongestionante e espasmolítico.
A raiz de Glycyrrhiza glabra L. possui um triterpeno chamado glicirrizina, que é 50–100 vezes mais doce que o açúcar, e esse adoçante confere um sabor agradável ao produto. A hidrólise da glicirrizina produz ácido glicirrízico, que impede a conversão de cortisol em cortisona nos tecidos periféricos e induz seu efeito anti-inflamatório.
Por outro lado, contém grandes quantidades de glabridina e hispaglabridinas A, B, e isoflavonas que atuam como agonistas de receptores de estrogênio, induzindo efeito analgésico e anti-inflamatório local. A glicirrizina inibe a reprodução e o crescimento de vírus de DNA e RNA, incluindo o HSV. A glicirrizina e a glabridina geram espécies reativas de oxigênio não reativas e inibem a atividade da enzima fosfolipase A2 no local da inflamação, o que acelera a cicatrização da área inflamada.
Rhus coriaria L. (Anacardiacea) ou Sumagre contém taninos (galotanino, ácido gálico e…), flavonoides, bioflavonoides, resinas e óleos essenciais. A erva diminui a inflamação gengival e a proliferação viral e tem efeito positivo na cicatrização de feridas. Há amplificação do efeito antimicrobiano devido aos taninos abundantes e seu efeito adstringente. Além disso, a adstringência evita secreções e auxilia na consistência e aparência.
Gerânio ou Pelargonium roseum R. Br (Geraniaceae) possui efeitos analgésicos e anti-inflamatórios devido a compostos como geraniol, citral e citronelal. Em um estudo, a anti-infecção do extrato polifenólico e a inibição da proliferação e crescimento viral foram investigadas no meio.
Alecrim ou Rosmarinus officinalis L. (Lamiaceae) possui efeitos antivirais, antibacterianos, anti-inflamatórios e antioxidantes devido a compostos como o ácido rosmarínico. Os compostos da erva cicatrizam a ferida aumentando o fluxo sanguíneo local. A dor local é uma das complicações das quais os pacientes sempre reclamam no herpes labial recorrente, e o alecrim pode ser aplicado para esse fim. O alecrim é muito aromático e confere um cheiro e sabor agradáveis ao produto.
Uma vez que os remédios fitoterápicos são mais aceitos no mundo por seus menores efeitos colaterais e custos mais baixos, e também não há cura definitiva para o herpes labial recorrente, o desenvolvimento de uma formulação adequada preparada a partir de extrato concentrado de ervas medicinais pode ser benéfico para reduzir os sintomas do herpes simplex e a doença.
MATERIAIS E MÉTODOS
Este estudo experimental foi apoiado pela Universidade de Ciências Médicas de Isfahan como um projeto de pesquisa de tese numerado 393142.
Coleta e identificação de plantas medicinais
Folha seca de Melissa officinalis L., raiz seca de Glycyrrhiza glabra L. e fruto seco de Rhus coriaria L. foram comprados no mercado de plantas medicinais. Brotos de alecrim foram coletados e secos do Jardim de Plantas Medicinais da Universidade de Ciências Médicas de Isfahan. As espécies vegetais foram identificadas e autenticadas no departamento de farmacognosia da Faculdade de Farmácia de Isfahan. A essência de gerânio foi fornecida pela Barij Essence Pharmaceutical Company (Isfahan, Irã).
Produtos químicos
Reagente de Folin–Ciocalteau, bicarbonato de sódio, ácido gálico, Carbopol 940, carboximetilcelulose de sódio (Na-CMC), hidroxipropilmetilcelulose (HPMC K4M) e PEG 400 foram adquiridos da Merck Company (Alemanha). Etanol 96% da Ararat Company foi utilizado nesta pesquisa. Sorbato de potássio foi preparado a partir da Sigma-Aldrich Chemie Gmbh Company (EUA).
Extração
Alecrim, alcaçuz e sumagre foram extraídos pelo método de percolação. Um total de 1500 g de cada material vegetal foi umedecido em 4 L de etanol 70% por 2 h. Em seguida, os componentes herbais foram percolados com 8 L de etanol 70%. Após 48 h, os extratos foram coletados e concentrados em evaporador rotativo (Heidolph VV 2000).
As folhas de melissa foram extraídas pelo método de infusão. Um total de 1500 g de pó moído de melissa foi umedecido por 24 h e, em seguida, infundido em água purificada a 90°C por 15 min e, depois, em água purificada a 70°C por 30 min. Finalmente, o extrato aquoso foi filtrado em papel de filtro nº 2 e, após a coleta, foi concentrado em evaporador rotativo (Heidolph VV 2000).
Determinação do pH do extrato
O pH dos extratos foi medido por pHmetro digital calibrado (Metrohm 632, Suíça). As medições foram realizadas imediatamente após a extração e, em seguida, 1 semana, 2 semanas, 1 mês, 3 meses e 6 meses após a extração. As medições foram repetidas em cada quatro amostras três vezes e os resultados foram relatados.
Quantificação do teor de polifenóis
O método colorimétrico de Folin–Ciocalteau é utilizado para a quantificação de fenóis totais. A concentração de polifenóis foi calculada pela curva padrão e pela equação linear obtida ao final. O teor fenólico foi determinado como equivalente de ácido gálico, expresso em mg de ácido gálico por g de extrato.
Para o traçado da curva de calibração, 20 μl de cada concentração de 50, 150, 250 e 500 mg/l da solução estoque de ácido gálico e do branco foram diluídos com 1,58 ml de água purificada e, em seguida, 100 μl do reagente de Folin–Ciocalteau foram adicionados e misturados bem. Após 8 min, 300 μl de carbonato de sódio a 20% foram adicionados às soluções e mantidos à temperatura ambiente por 2 h em local escuro. Este método também foi repetido no extrato concentrado com concentração de 5 g/l. Finalmente, a absorbância das amostras foi medida a 765 nm por espectrofotômetro UV-VIS (UV mini 1240, Shimadzu), e a curva padrão foi traçada. Os resultados foram relatados em experimentos em triplicata.
Preparação da formulação do gel
Utilizamos extrato concentrado de melissa, alecrim, sumagre, alcaçuz e essência de gerânio para a preparação das formulações do gel. Carbopol 940, Na CMC e HPMC K4M foram aplicados como agentes gelificantes nas formulações. Entre 14 formulações, 8 formulações apresentaram melhores propriedades em comparação com as demais, portanto foram selecionadas para testes adicionais.
Gel de Carbopol 940
Sorbato de potássio foi dissolvido em água purificada a 50°C. 0,5, 1, 1,5 e 2 g de carbopol 940 foram dispersos em água purificada a 40°C por um misturador a 1200 rpm por 30 min. Extratos herbais e óleo essencial foram dispersos separadamente em PEG 400 e adicionados à base de gel e misturados bem. O pH foi então ajustado para pH, 6 usando trietanolamina e agitado lentamente até obter um gel claro e transparente.
Gel de carboximetilcelulose sódica
Sorbato de potássio foi dissolvido em água purificada a 50°C. 1, 2, 3, 4 e 5 g de Na-CMC foram dispersos em água purificada a 50°C por um misturador a 1200 rpm por 30 min. Extratos herbais e óleo essencial foram dispersos separadamente em PEG 400 e adicionados à base de gel e misturados bem.
Gel de hidroxipropilmetilcelulose
Sorbato de potássio foi dissolvido em água purificada a 50°C. 3, 4 e 5 g de HPMC K4M foram dispersos nas quantidades de água purificada a 60°C por misturador magnético a 1200 rpm por 30 min até obter uma dispersão homogênea. Em seguida, a quantidade restante de água foi adicionada fria e misturada bem e mantida em geladeira por 24 h até obter um gel homogêneo (técnica quente/fria). Extratos herbais e óleo essencial foram dispersos separadamente em PEG 400 e adicionados à base de gel e misturados bem.
Gel de carbopol e carboximetilcelulose sódica
Primeiro, sorbato de potássio foi dissolvido em água purificada a 50°C. Em seguida, quantidades especificadas de carbopol 940 e Na-CMC foram dispersas em água purificada a 40°C e misturadas bem. Extratos herbais e óleo essencial foram dispersos separadamente em PEG 400 e adicionados à base de gel e misturados bem.
Avaliação das características físico-químicas
Estudo macroscópico
As formulações foram verificadas dentro de 48 h após a preparação e balanço macroscópico (ausência de partículas palpáveis e foliculares, cor e transparência).
Estudo microscópico
As formulações foram verificadas quanto à uniformidade, textura do gel e bolhas de ar por microscópio óptico com aumento de 10 e 40 dentro de 48 h.
Teste de centrífuga
A estabilidade das formulações foi investigada contra a gravidade por dispositivo centrífugo (centrífuga 5430). Cada formulação foi centrifugada separadamente dentro de um tubo com 10 cm de comprimento e 1 cm de diâmetro por 5, 15, 30 e 60 min a 2000 rpm. Finalmente, cada formulação foi verificada quanto à sedimentação.
Teste de determinação de pH
Primeiro, o pHmetro foi calibrado com tampões padrão (pH 4 e 7). O pH dos produtos foi medido 48 h, 1 semana, 2 semanas, 1 mês, 3 meses e 6 meses após a preparação. O teste foi repetido três vezes.
Determinação da viscosidade das formulações
O viscosímetro Brookfield DV-III foi utilizado para a determinação da viscosidade. No início, o viscosímetro foi calibrado pelo Kit Viscal Brookfield. Amostras de gel foram colocadas em temperatura ambiente por 30 min. Em seguida, foram vertidas no recipiente do aparelho. O spindle número 74 foi acoplado e a viscosidade foi determinada a 25°C e 100–250 rpm. Os resultados foram relatados como média após experimentos em triplicata.
Teste de estresse térmico
O teste foi feito como estudos de estabilidade primária. Os produtos embalados estavam sob estresse térmico em tubos revestidos de alumínio. As amostras foram levadas à estufa a 30°C ± 2°C e umidade relativa de 60% ± 5% durante 6 meses. As formulações em gel foram avaliadas nos tempos de 24 horas, 1 semana, 1 mês, 3 meses e 6 meses.
Teste de mudanças térmicas
Neste teste, os produtos foram colocados na geladeira (2°C-8°C), temperatura ambiente (25°C) e forno (45°C-50°C) e a qualidade aparente dos produtos foi avaliada após 24 horas, 1 semana, 1 mês, 3 meses e 6 meses.
Teste de congelamento e descongelamento
Os tubos preparados de cada formulação foram colocados a 25°C por 48 horas e a -8°C por 48 horas por 6 períodos consecutivos. Ao final do período, foi avaliada a qualidade aparente dos produtos.
Teste de resfriamento e aquecimento
Neste teste, os tubos preparados de cada formulação foram colocados em 6 períodos consecutivos que incluem 48 horas a 25°C e 48 horas a 4°C. Ao final do período, foi avaliada a qualidade aparente dos produtos.
Teste de mucoadesão em condições ex vivo
Foi utilizado aparelho SANTAM (STM-1, Irã) que possui 2 mandíbulas metálicas. Duas manchas de muco de vaca foram fixadas nas mandíbulas. Certa quantidade de géis (200 mg) foi dispersa neste pedaço de mucosa após hidratação das membranas mucosas com água purificada. Após 2 minutos de contato com a mucosa, a mandíbula superior moveu-se até o descolamento do gel e da membrana mucosa. A taxa de descolamento foi de 10 mm/min e a superfície da mucosa fixada foi de 235 mm. A força de descolamento/mucoadesão foi medida em termos de MPa. Os resultados de cada amostra foram repetidos três vezes.
Quantificação de polifenóis totais em formulações
Quarenta e oito horas após o preparo das formulações, 1 g de gel foi disperso em tampão fosfato, pH 6,8, e diluído para 10 ml em balão volumétrico. O conteúdo total de polifenóis foi medido pelo método de Folin-ciocalteu usando curva padrão de ácido gálico.
Determinação da liberação in vitro de medicamentos
A liberação in vitro do medicamento foi determinada utilizando célula de difusão de Franz e membrana sintética. 1 g de amostra de teste foi disperso uniformemente na superfície da membrana; finalmente, foi consertado no celular. a fase receptora celular continha tampão fosfato, pH 6,8. A temperatura de 37°C foi controlada por banho-maria bombeado circulando entre 2 conchas circundando a câmara.
A célula de difusão de Franz foi colocada no espaço da fase receptora por um agitador magnético para obter condições de afundamento. Este conjunto também foi colocado em um misturador magnético e a boca da célula foi coberta com parafilme para evitar a evaporação da fase doadora. Um volume de amostras de 1 ml foi coletado em intervalos de tempo especificados. Após cada amostragem, as alíquotas foram substituídas por tampão fosfato fresco, pH 6,8 posteriormente para ganhar o mesmo volume de fase receptora durante o experimento. O teste foi repetido três vezes para cada amostra, e as absorbâncias foram medidas pela curva padrão de concentração aparente após a realização do método de Folin-ciocalteau. A concentração aparente é convertida em concentração real pela equação abaixo:
Cn = C + (Cn−1)V/Vt
Cn: Concentração real na amostra n
C: Concentração aparente na amostra n
Cn-1: Concentração real na amostra n − 1
Vt: Volume da fase receptora
V: Volume da amostra.
Estudos cinéticos de liberação de fármacos de formulações em gel
Os dados de liberação de fármacos de F5 e F6 foram determinados no modelo de ordem zero, modelo de primeira ordem e modelo de Higuchi para investigar o mecanismo de liberação.
No modelo de ordem zero (equação 1), os polifenóis totais liberados não dependem dos compostos polifenólicos primários e o gráfico de porcentagem cumulativa de polifenóis liberados contra o tempo é linear. No modelo de primeira ordem (equação 2), o log do fármaco remanescente contra o tempo é linear. No modelo de Higuchi (equação 3), o diagrama de porcentagem cumulativa de polifenóis liberados contra a raiz quadrada do tempo é linear.
Qt = K0 t (equação 1).
In Qt = In Q0 − K1 t (equação 2).
Qt = Kh t1/2 (equação 3).
Nas equações de ordem zero e Higuchi, Qt é a quantidade de fármaco liberado no tempo especificado t, na equação de primeira ordem, Qt é o fármaco remanescente no tempo t, e Q0 é a quantidade inicial de fármaco no gel. K0, K1 e Kh são as constantes das equações.
Utilizamos a equação de Korsmeyer-Peppas para determinar o mecanismo de difusão do fármaco. A fórmula da equação é apresentada a seguir:
M∞ = A quantidade de fármaco liberado após tempo infinito.
Mt = Quantidade cumulativa de fármaco liberado em qualquer tempo especificado (t).
K = Constante da taxa de liberação.
n = Indica o tipo de difusão.
Quando o valor de n é 0,5 ou menor, o fenômeno de difusão Fickiana domina, e o valor de n entre 0,5 e 1 é difusão não Fickiana (transporte anômalo). O mecanismo de liberação do fármaco segue o transporte caso-II quando o valor de n é 1 e para valores de n maiores que 1, a liberação é caracterizada por transporte super caso-II. A liberação não Fickiana significa que o fármaco é liberado do gel através do mecanismo de difusão e também de outro processo chamado relaxamento da cadeia.
Cada um dos testes acima foi repetido três vezes para cada formulação, então a melhor formulação foi determinada de acordo com a análise dos resultados estatísticos.
Avaliação do teste dos géis
Os agentes flavorizantes foram testados usando teste de painel pelo método do quadrado latino na formulação selecionada (F6). De acordo com este método, 30 voluntários saudáveis foram solicitados a aplicar as últimas formulações sem flavorizante e as formulações finais que continham pó de limão, laranja, cereja e hortelã-pimenta em seus lábios. Em seguida, foram solicitados a pontuar suas opiniões como números atribuídos de 1 a 5 (excelente = 5, bom = 4, regular = 3, ruim = 2, muito ruim = 1).
RESULTADOS
Determinação dos extratos fitoterápicos
O peso e a porcentagem do extrato fitoterápico concentrado, a porcentagem de matéria seca nos extratos fitoterápicos concentrados e a porcentagem de matéria seca no extrato total pelo método de liofilização foram medidos após extração, concentração e remoção do extrato hidroalcoólico [Tabela 1].
Resultados da análise dos extratos fitoterápicos
O pH foi medido em diferentes momentos e apresentou valor de 6,1 ± 0,2. O teor de polifenóis foi expresso pela curva padrão de ácido gálico (Y = 0,1308x − 0,041, R² = 0,993) como 168,9 ± 13,53, 139,8 ± 16,42, 98,2 ± 13,82 e 102,38 ± 8,44 mg EAG por 1 g de extrato seco para os extratos de sumagre, alcaçuz, alecrim e melissa, respectivamente. O teor de polifenóis da mistura de extratos vegetais foi de 210,8 ± 13,68 mg EAG por 1 g de extrato seco.
Cerca de 2,5% de cada extrato concentrado de todas as ervas e 0,002% de essência de gerânio foram adicionados à base de gel de Carbopol 940, Na CMC e HPMC, utilizando PEG 400 como co-solvente [Tabela 2].
Composição das formulações de gel com diferentes polímeros (Carbopol 940, Na-CMC e HPMC K4M)
Os resultados do estudo de vários géis
A consolidação de F1, F2, F3, F5 e F6 foi baixa e não apresentou estabilidade suficiente para permanecer na mucosa. A uniformidade e as características físicas de F2, F3, F4, F7, F8 e F9 foram baixas. A compatibilidade de F12, F13 e F14 não foi boa devido às interações do pH. Eventualmente, essas formulações foram excluídas, e os testes foram realizados nas formulações F10 e F11.
As características físico-químicas e a estabilidade de F10 e F11 foram todas adequadas nos testes de centrifugação, estresse térmico, variação térmica e congelamento e descongelamento.
A Tabela 3 mostra os resultados da determinação de pH, teor de fármaco, medida de força mucoadesiva e determinação de viscosidade realizados em F10 e F11.
Resultados da determinação de pH, teor de fármaco, força mucoadesiva e viscosidade (a 100 rpm, 25°C) nas formulações F10 e F11 (Média±DP)
O teor de fármaco de F10 e F11 foi de 71,31 ± 0,1 e 71,86 ± 0,3 mg EAG por 1 g de extrato seco, respectivamente.
Os resultados da medida de força mucoadesiva pelo aparelho Santam estão apresentados na Tabela 3. A força mucoadesiva de F11 foi maior que a de F10. A viscosidade de F10 e F11 foi determinada por um Reômetro Brookfield DV-III. A viscosidade de F11 foi de 3 ± 0,2 N/mm². A liberação in vitro do fármaco foi avaliada em F10 e F11 por célula de difusão de Franz. Os resultados estão apresentados na Figura 1 como porcentagem cumulativa de liberação do fármaco em função do tempo. Esta determinação foi baseada na curva padrão de ácido gálico em tampão fosfato (Y = 0,1293x + 0,0121, R² = 0,999). O tempo necessário para a liberação de 50% de todo o teor de fármaco de F11 foi de aproximadamente 80 min, e para F10 foi de aproximadamente 70 min, e após 24 h, 100% do teor de fármaco foi liberado de ambas as formulações [Figura 1]. Para o estudo cinético de liberação in vitro, o perfil de dissolução de F10 e F11 foi ajustado às equações de ordem zero, primeira ordem e Higuchi para determinar a modelagem cinética da liberação do fármaco. Os dados de liberação de F10 e F11 mostraram valor de R² de 0,9682 e 0,9704 para primeira ordem, respectivamente. Para explicação de sua cinética, o modelo cinético de primeira ordem foi adequado [Tabela 4]. Para descrever o mecanismo de liberação do fármaco dos géis, os dados de liberação in vitro foram ajustados à equação de Korsmeyer-Peppas. A difusão do fármaco para todas as formulações foi do tipo não Fickiana.
Porcentagem de liberação cumulativa do fármaco das formulações F10 e F11.
Liberação do fármaco e cinética de liberação do fármaco das formulações gel (F10 e F11)
Os resultados da avaliação do sabor utilizando teste de painel foram apresentados na Figura 2.
Os resultados da avaliação do sabor.
DISCUSSÃO
No herpes labial recorrente, o vírus ativado chega à superfície da pele devido a trauma cutâneo e alterações sistêmicas através dos neurônios periféricos e cria lesões cutâneas que se recuperam em 7 a 10 dias. Os compostos antivirais apresentam muitos problemas no uso sistêmico, aumentam a resistência aos medicamentos e não têm grande impacto no período de incubação e recuperação. O objetivo do uso de ervas neste estudo é o tratamento do herpes labial recorrente com o mínimo de complicações e a maior eficiência e menor custo, reduzindo assim o período de recuperação.
Os compostos polifenólicos dessas ervas podem inibir a replicação viral ou a formação de proteínas e reduzir o período de recuperação. Além disso, possuem efeitos anti-inflamatórios locais, analgésicos locais, antissépticos e antioxidantes. Os terpenoides de duplo anel presentes na planta aceleram a cicatrização de feridas ao aumentar o fluxo sanguíneo local; por outro lado, a erva é altamente aromática, o que confere odor e sabor agradáveis ao produto.
O teor de polifenóis no extrato hidroalcoólico de sumagre, alcaçuz, alecrim e melissa foi medido como 168,9 ± 13,53, 139,8 ± 16,42, 98,2 ± 13,82 e 102,38 ± 8,44 mg GAE por 1 g de extrato seco e 210,8 ± 13,68 mg GAE por 1 g de mistura seca de extrato de ervas de acordo com a equação da curva padrão (Y = 0,1308x – 0,041, R² = 0,993).
De acordo com outros estudos conduzidos por Balouri et al., o teor de polifenóis foi relatado como 181,41 ± 9,89 e 116,51 ± 9,19 mg GAE por 1 g de extrato metanólico seco de alecrim e melissa, respectivamente. Neste estudo, o teor de polifenóis de alecrim e melissa foi relatado como 193,60 ± 8,48 e 195,11 ± 11,31 mg GAE por 1 g de extrato seco, respectivamente, que foi extraído pelo método de sonicação. Em estudos de Cakmak et al., o teor de polifenóis de brotos e raízes de Glycyrrhiza echinata L. foi relatado como 146,30 ± 4,58 e 114,13 ± 3,22 mg GAE por 1 g de extrato seco, respectivamente.
De acordo com o estudo de Al-Muwaly et al., o teor fenólico dos extratos aquoso, hidroalcoólico e metanólico de Sumagre foi medido como 136,67 ± 12,58, 222,56 ± 23,79 e 570,21 ± 82,20 mg GAE por 1 g, respectivamente. Em outro estudo de Kossah et al., o teor de polifenóis de duas espécies de Sumagre, Rhus coriaria L (Sumagre Sírio) e Rhus typhina L (Sumagre Chinês) foi medido como 159,32 ± 12,31 e 150,68 ± 11,98 mg GAE por 1 g de extrato seco, respectivamente. As razões para as diferenças na quantidade desses compostos são a fonte de coleta, o clima, as várias espécies de plantas, o método de extração, o tipo de solvente, a temperatura e o tempo ideal de duração. Em altas temperaturas e tempos mais longos, o teor de polifenóis diminui devido à oxidação, polimerização e transformação das substâncias polifenólicas. O teor de polifenóis da mistura de extratos herbais não seguiu a soma algébrica devido às interações entre os extratos e ao aumento da probabilidade de oxidação e polimerização.
Os géis são melhores opções por seu alto teor aquoso, menor irritação dérmica, menor abrasão mecânica e aparência mais aceitável para uso nos lábios e ao redor deles em comparação com outros medicamentos tópicos. Portanto, neste estudo, decidiu-se usar polímeros hidrofílicos para a preparação de géis hidrofílicos.
Neste estudo, uma mistura igual de extratos hidroalcoólicos concentrados de Melissa, Sumagre, Alecrim e Alcaçuz foi adicionada ao gel hidrofílico na quantidade de 2,5% e essência de Gerânio na quantidade de 0,002%. Um total de 14 formulações foram preparadas usando polímeros gelificantes como carbopol 940, Na CMC e HPMC K4M. F10 e F11 foram selecionadas devido às características macroscópicas e microscópicas aceitáveis, e outros testes foram realizados nelas.
O pH do produto deve ser próximo ao pH da área local para diminuir a irritação local. Os lábios e a superfície da pele têm pH 6,2. O pH das formulações selecionadas estava na faixa do pH da área local.
O teste de centrifugação, as mudanças térmicas, o teste de resfriamento e aquecimento e o teste de congelamento e descongelamento apresentaram resultados favoráveis. Durante os testes, os produtos estavam em condições estáveis.
A viscosidade de F11 foi maior. O aumento na quantidade de carbopol 940 causou aumento da viscosidade. A viscosidade afeta a liberação do fármaco do gel, enquanto a viscosidade aumenta, a taxa de liberação do fármaco diminui.
Os resultados de mucoadesão do aparelho Santam mostraram que a mucoadesão de F11 foi medida como 8,2 ± 0,1 N/mm², mas a mucoadesão de F10 foi obtida como 5,2 ± 0,1 N/mm². A maior quantidade de carbopol 940 é responsável pela maior mucoadesão. O carbopol é um agente gelificante de alto peso molecular e com mais ligações de hidrogênio. Após intumescer em água, torna-se mil vezes maior, criando então uma superfície adesiva. O carbopol 940 é um gel mucoadesivo que aumenta o contato entre a membrana mucosa e o fármaco e melhora a permanência e a eficácia.
A liberação in vitro do fármaco foi estudada em cada uma das formulações F10 e F11 utilizando célula de difusão de Franz. A liberação do fármaco a partir de F10 foi mais lenta do que F11. O tempo necessário para 50% de liberação do fármaco foi de 70 e 80 min para F10 e F11, respectivamente. A liberação do fármaco de F11 foi maior do que F10 devido às maiores quantidades de carbômero e à maior viscosidade. Com o aumento da quantidade de polímero, o gel se torna mais espesso, e a penetração de água é limitada, resultando na redução da liberação do fármaco. Finalmente, a persistência do gel na área local retarda a taxa de liberação do fármaco. Como observado, o carbopol tem o papel principal na liberação do fármaco a partir do gel devido ao alto peso molecular e grau de reticulação. O aumento do carbopol eleva a mucoadesão, a viscosidade e diminui a taxa de liberação.
Os cálculos dos parâmetros cinéticos da liberação do fármaco de F10 e F11 estão apresentados na Tabela 4. O coeficiente de regressão (R²) da cinética de primeira ordem para F10 e F11 foi calculado em 0,969 e 0,971, respectivamente, que foi superior aos coeficientes de regressão (R²) de outros modelos. Como resultado, a cinética de liberação do fármaco segue o modelo de primeira ordem. Isso representa que a taxa de liberação do fármaco depende do tempo, e a taxa de liberação não é constante. Na verdade, a maior parte do fármaco é liberada rapidamente no início, e então, a taxa de liberação é reduzida até se tornar constante. Nesta formulação, "n" foi >0,5, o que indica que o mecanismo de liberação do fármaco segue o modelo não-Fickiano ou anômalo. A liberação não-Fickiana do fármaco significa que o método de difusão e o relaxamento das cadeias poliméricas são os mecanismos de liberação.
A maioria dos medicamentos tópicos para tratar herpes labial recorrente, como a pomada tópica de aciclovir, é aplicada nas lesões cinco vezes ao dia. Como mais de 90% do fármaco é liberado após cerca de 4 horas a partir da base de gel, é melhor usar o produto cinco vezes ao dia nas lesões, de acordo com a Figura 1.
De acordo com os resultados, F11, com a maior viscosidade e mucoadesão e a taxa de liberação mais lenta, é mais adequado do que F10 para o tratamento do herpes labial recorrente. F11 com hortelã-pimenta como agente flavorizante recebeu a maior pontuação no teste de painel com o método de quadrado latino. O próximo nível, o agente flavorizante de limão, obteve a maior pontuação.
Sugerimos um gel herbal mucoadesivo eficaz para o mercado farmacêutico, considerando resultados úteis e eficientes para prevenir, tratar e acelerar a cicatrização do herpes labial recorrente.
CONCLUSÃO
O aciclovir e outros compostos relacionados deste grupo, embora amplamente utilizados no tratamento de lesões, não têm efeitos e também não têm efeitos anti-inflamatórios, analgésicos e anti-histamínicos. No entanto, neste estudo, o alecrim e o alcaçuz são responsáveis por efeitos anti-inflamatórios, analgésicos locais, reparadores e de cicatrização de feridas.
De acordo com os resultados dos testes de avaliação, como mucoadesão, viscosidade e perfil de liberação do fármaco, a F11 contendo Na CMC 3% e carbopol 940 a 1% foi selecionada por sua mucoadesão e viscosidade aceitáveis. O estudo do perfil de liberação do fármaco na F11 indica que os extratos fitoterápicos podem ser liberados ao longo de um período de 24 horas.
Suporte financeiro e patrocínio
Este estudo foi apoiado pela Universidade de Ciências Médicas de Isfahan como um projeto de pesquisa de tese numerado 393142.
Conflitos de interesse
Os autores deste manuscrito declaram que não possuem conflitos de interesse, reais ou percebidos, financeiros ou não financeiros neste artigo.
REFERÊNCIAS
Ensaio clínico da eficácia de um remédio fitoterápico combinado no Herpes Labial
Atividade antiviral dos óleos voláteis de Melissa officinalis L. contra o vírus herpes simplex tipo 2
Levantamento dos efeitos colaterais do Aciclovir em embriões em desenvolvimento de camundongos da linhagem Balb/C
Herpes simplex recidivante resistente ao aciclovir em uma criança com síndrome de Wiskott-Aldrich
Comparação do uso de loção tópica de aciclovir no tratamento de casos de herpes
Óleos essenciais inibem a replicação do vírus herpes simplex tipo 1 e tipo 2
Fitoterapia
Farmacopeia fitoterápica iraniana
Atividade semelhante ao estrogênio da glabrena e outros constituintes isolados da raiz de alcaçuz
Monografia
Composição de ácidos graxos da semente e pericarpo do sumagre (Rhus coriaria L.) cultivado de forma silvestre em diferentes regiões da Turquia
Rhus coriaria Linn, uma planta de importância medicinal, nutricional e industrial: Uma revisão
Componentes voláteis de Pelargonium roseum R
Atividade anti-herpes vírus de extratos da planta medicinal Geranium sanguineum L
Formulação e avaliação físico-química de uma pomada fitoterápica anti-hemorroidária de Quercus, cominho preto e feno-grego para o tratamento de hemorroidas internas
Desenho, formulação e avaliação de um gel mucoadesivo de Quercus brantii L. e Coriandrum sativum L. como sistema de liberação periodontal
Efeito de diferentes carreadores na permeação in vitro de meloxicam através da pele de rato
Determinação de fenóis totais
Desenvolvimento e caracterização de comprimidos bucoadesivos de nifedipina
Preparação e avaliação clínica de creme clareador de pele contendo arbutina, dipalmitato de kojico, extrato de alcaçuz e palmitato de ascorbila
Modelagem cinética da liberação de fármacos a partir de sistemas de liberação controlada
Goma de mascar medicamentosa, um novo sistema de liberação de fármacos
Atividade antibacteriana de extratos de Salvia officinalis L. e Rosmarinus officinalis obtidos por métodos de sonicação e maceração
Estudos sobre atividade antioxidante, composto volátil e composição de ácidos graxos de diferentes partes de Glycyrrhiza echinata L
Efeitos antioxidantes e de eliminação de radicais livres do sumagre iraquiano (Rhus coriaria L)
Otimização da extração de polifenóis de frutos de sumagre sírio (Rhus coriaria L.) e sumagre chinês (Rhus typhina L.)
Sistemas semissólidos contendo própolis para o tratamento da doença periodontal: Cinética de liberação in vitro, seringabilidade, propriedades reológicas, texturais e mucoadesivas
Sistemas de liberação para administração de fármacos na bolsa periodontal
Propriedades mucoadesivas e de liberação de fármaco do gel de benzocaína