pmid: "38706945"
title: "Efeitos cutâneos vasodilatadores e termossensoriais de curto prazo do salicilato de metila tópico."
authors: "Versteeg N, Wellauer V, Wittenwiler S, Aerenhouts D, Clarys P, Clijsen R"
journal: "Frontiers in physiology"
pubdate: "2024"
doi: "10.3389/fphys.2024.1347196"
source: "PMC Full Text"

Efeitos cutâneos vasodilatadores e termossensoriais de curto prazo do salicilato de metila tópico.

Autores

Versteeg N, Wellauer V, Wittenwiler S, Aerenhouts D, Clarys P, Clijsen R

Periodico

Frontiers in physiology (2024)

Conteudo

Efeitos vasodilatatórios cutâneos e termossensoriais de curto prazo do salicilato de metila tópico
Introdução:
O salicilato de metila, principal composto do óleo de gaultéria, é amplamente utilizado em aplicações tópicas. No entanto, seus efeitos vasculares e termossensoriais não são totalmente compreendidos. O objetivo primário foi investigar os efeitos do salicilato de metila tópico na temperatura da pele (Tpele), na microcirculação da pele (MCpele) e na saturação de oxigênio muscular (SmO2) em comparação com um gel placebo. O objetivo secundário foi avaliar as respostas termossensoriais (sensação térmica, conforto térmico) e explorar em que medida essas sensações correspondem às respostas fisiológicas ao longo do tempo.
Métodos:
21 mulheres saudáveis (22,2 ± 2,9 anos) participaram deste ensaio clínico randomizado, controlado e simples-cego. Um gel de óleo natural de gaultéria (12,9%) contendo salicilato de metila (>99%) e um gel placebo, 1 g cada, foram aplicados simultaneamente em duas áreas cutâneas paravertebrais (5 cm × 10 cm, Th4-Th7). Tpele (imagem térmica infravermelha), MCpele (imagem por contraste de speckle a laser) e SmO2 (monitoramento da oxigenação tecidual profunda) e termossensação (escalas de Likert) foram avaliados no início (BL) e em intervalos de 5 min durante um período de 45 min pós-aplicação (T0-T45).
Resultados:
Ambos os géis causaram uma diminuição inicial na Tpele, com Tpele(mín) em T5 tanto para salicilato de metila (BL-T5: Δ-3,36°C) quanto para placebo (BL-T5: Δ-3,90°C), seguida por um aumento gradual (p < 0,001). O gel de salicilato de metila resultou em Tpele significativamente maior do que o placebo entre T5 e T40 (p < 0,05). Para o salicilato de metila, a MCpele aumentou, com MCpele(máx) em T5 (BL-T5: Δ88,7%). Para o placebo, a MCpele diminuiu (BL-T5: Δ-17,5%), com valores significativamente menores em comparação com o salicilato de metila entre T0 e T45 (p < 0,05). Ambos os géis tiveram efeitos mínimos na SmO2, sem diferenças significativas entre salicilato de metila e placebo (p > 0,05). As respostas de sensação térmica ao salicilato de metila tópico variaram de "fresco" a "quente", com sensações mais intensas relatadas em T5.
Discussão:
Os achados indicam que o salicilato de metila tópico induz vasodilatação cutânea de curto prazo, mas pode não aumentar o fluxo sanguíneo muscular esquelético. Este estudo destaca as respostas sensoriais complexas à sua aplicação, que podem ser baseadas na modulação de curto prazo dos canais de receptor potencial transitório termossensíveis.
1 Introdução
O salicilato de metila, principal composto orgânico do óleo natural de gaultéria, é extraído das folhas da planta de gaultéria (lat. Gaultheriae Aetheroleum). É comumente utilizado em aplicações tópicas como géis, cremes ou adesivos. Formulações tópicas contendo salicilato de metila demonstraram ser eficazes no tratamento de distensão muscular, dor na articulação temporomandibular e no músculo masseter. Com base no princípio da contrairritação, sugere-se que o salicilato de metila tenha efeitos terapêuticos ao desencadear irritação ou dor cutânea para mitigar a dor de origem subdérmica. No entanto, os mecanismos fisiológicos subjacentes precisos não são totalmente compreendidos.

Após a aplicação, o salicilato de metila penetra rapidamente na pele. Na epiderme e derme, o salicilato de metila sofre hidrólise, levando à formação de ácido salicílico ativo. Os salicilatos tópicos são considerados como atuando principalmente como rubefacientes. Consequentemente, vários estudos reconheceram o salicilato de metila como um composto vasoativo que aumenta o fluxo sanguíneo local e eleva a temperatura da pele ou do tecido. Produtos de salicilato de metila disponíveis comercialmente indicados para fins anti-inflamatórios ou analgésicos geralmente contêm outros compostos ativos, como mentol ou cânfora. Dada a frequente coformulação do salicilato de metila com outros ingredientes, permanece incerto se os supostos efeitos vasodilatadores atribuídos ao salicilato de metila se devem aos seus efeitos individuais ou se são mediados principalmente por outros compostos ativos. Investigar os efeitos vasculares do salicilato de metila isoladamente pode fornecer informações sobre seus potenciais mecanismos de ação. Além disso, foi demonstrado que a penetração direta do ácido salicílico é dominante apenas até uma profundidade de 3–4 mm e apenas pequenas quantidades são absorvidas sistemicamente. Isso sugere que o salicilato de metila tópico pode atuar como vasodilatador na pele, mas não no tecido muscular esquelético.

O salicilato de metila tópico induz um perfil termossensorial característico. Enquanto produtos de salicilato de metila como Perskindol® Dolo Gel prometem simplesmente uma sensação confortável de aquecimento, o salicilato de metila também induz sensações de queimação, formigamento/picada e até frio, em oposição apenas ao calor. Além disso, o salicilato de metila aumenta a percepção de aquecimento e produz hiperalgesia ao aquecimento. As respostas termossensoriais distintas ao salicilato de metila tópico podem ser devidas à manipulação farmacológica de canais de potencial receptor transitório (TRP) catiônicos não seletivos termossensíveis específicos. No entanto, permanece incerto como as respostas vasculares e termossensoriais ao salicilato de metila tópico se relacionam ao longo do tempo.
Considerando que (1) a permeação cutânea de agentes químicos é influenciada pela idade, tipo de pele e hormônios sexuais devido a pequenas diferenças na composição química do estrato córneo, e (2) uma vez que este é o primeiro estudo a investigar os efeitos vasculares do salicilato de metila isoladamente, o objetivo foi examinar os efeitos em uma população relativamente homogênea. Portanto, o objetivo primário foi investigar os efeitos do salicilato de metila tópico na temperatura da pele (Tskin), microcirculação cutânea (MCskin) e saturação de oxigênio muscular (SmO2) em comparação com um gel placebo em mulheres saudáveis. O objetivo secundário foi avaliar as respostas termossensoriais (sensação térmica, conforto térmico) e explorar até que ponto essas sensações correspondem às respostas fisiológicas ao longo do tempo. Foi hipotetizado que (1) o salicilato de metila tópico atuaria como um composto vasoativo cutâneo, resultando em aumento da MCskin, mas não da SmO2; (2) as sensações térmicas corresponderiam a mudanças na Tskin e seguiriam um curso temporal semelhante às mudanças observadas na MCskin e (3) o conforto térmico seria predominantemente classificado como confortável.
2 Materiais e métodos
2.1 Desenho do estudo
Este estudo é baseado em um ensaio clínico randomizado simples-cego. Devido às potenciais variações interindividuais nas características da pele que podem influenciar a permeação cutânea de agentes aplicados topicamente, foi escolhido um delineamento intra-sujeito. Até onde sabemos, apenas dados de estudos que investigam o salicilato de metila tópico em combinação com outros compostos ativos estão disponíveis. O cálculo a priori do tamanho amostral para ANOVA de medidas repetidas, interação dentro-entre (G*power, versão 3.1.9.6, Franz Faul, Alemanha) com um tamanho de efeito estimado de 0,2, α ≤ 0,05 e poder de 0,8 resultou em um tamanho amostral de n = 20. Considerando potenciais desistências, um total de n = 25 mulheres foram recrutadas de uma população universitária. Houve uma desistência devido a doença no dia do teste. Três participantes tiveram que ser excluídas devido a problemas técnicos (ver abaixo), resultando em um tamanho amostral total de n = 21. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética Suíço de Zurique (KEK-ZH: 2016-01541).
2.2 Participantes
21 mulheres saudáveis (idade: 22,2 ± 2,9 anos, altura: 164,9 ± 4,8 cm, massa corporal: 62,3 ± 8,7 kg, índice de massa corporal: 22,9 ± 2,6 kg/m², percentual estimado de gordura corporal inferior: 31,8 ± 5,5%, camada de tecido adiposo subcutâneo nas áreas cutâneas paravertebrais investigadas: 3,47 ± 0,58 mm) foram incluídas. Para serem elegíveis para participação, os indivíduos deveriam ter entre 18 e 40 anos e apresentar condições cutâneas saudáveis. Os critérios de exclusão foram qualquer lesão, cirurgia ou sintomas em repouso ou sob esforço (ou seja, inchaço, dor, mobilidade restrita) do tronco (área entre C7 e sacro, incluindo quadril em ambos os lados) no último ano, cicatrizes ou feridas abertas nas costas e uso de medicamentos (incluindo medicamentos de venda livre, mas excluindo contraceptivos). As participantes foram excluídas se estivessem grávidas ou amamentando. Foram excluídas se apresentassem polineuropatia, asma brônquica, insuficiência renal, diabetes mellitus ou alergias conhecidas a produtos que contenham óleo de gaultéria, mentol ou álcool. As participantes também foram excluídas se apresentassem sensação cutânea alterada na área das costas e/ou antebraço (por exemplo, dormência, difusa, formigamento, sensação perturbada de calor/frio) ou expressassem medo da aplicação ou reação a determinados géis, como Perskindol® Classic Gel, Dolo Gel, Cool Gel, Axanova® Hot Gel/Activ Gel, Dolo-X Classic Gel). As participantes foram informadas de que seria utilizada uma aplicação tópica.

2.3 Formulação do gel
Os géis utilizados foram fabricados sob encomenda por uma farmácia (Apotheke BENU, Landquart, Suíça). O gel de salicilato de metila consistia em óleo natural de gaultéria (12,9%), hidroxietilcelulose (5%), água, metilparabeno, propilparabeno, propilenoglicol. A concentração de óleo natural de gaultéria (12,9%) é baseada na formulação encontrada no Perskindol® Dolo Gel. O óleo natural de gaultéria contém pelo menos 99% de salicilato de metila. Dependendo da localização geográfica, o óleo natural de gaultéria pode conter também outros compostos naturais como eugenol (<0,06%) e linalol (<0,03%). Devido à sua baixa concentração, qualquer impacto potencial foi considerado desprezível. O gel placebo, contendo os mesmos compostos, exceto o óleo natural de gaultéria, foi utilizado como controle para isolar os efeitos específicos do salicilato de metila.

2.4 Triagem
Após a assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido, os participantes foram triados quanto à elegibilidade. A triagem consistiu em (1) um teste de gravidez, (2) um questionário para avaliar a elegibilidade com base nos critérios de inclusão e exclusão, (3) um teste de tolerância cutânea ao produto e (4) um teste de discriminação cutânea. Para o teste de tolerância cutânea ao produto, o gel de salicilato de metila foi aplicado no antebraço volar. Essa área do corpo foi escolhida por ser muito sensível e ter relativamente pouco pelo. Após a aplicação, a reação cutânea foi observada por 15 minutos. Em caso de reação alérgica, o participante foi considerado não elegível. A área da pele na coluna torácica (T4-T7) foi escolhida como área experimental porque os participantes poderiam ser cegados quanto à aplicação dos géis. Para controlar a disfunção sensorial nessa área, testes de discriminação cutânea epicrítica e protopática foram realizados na pele da coluna torácica média (T4-L1). A discriminação quente-frio foi realizada usando tubos de ensaio preenchidos com água quente e fria. A área da pele em cada lado paravertebral foi tocada alternadamente, e os participantes foram solicitados a responder com "quente" ou "frio", respectivamente. A percepção de dor (discriminação agudo-rombo) foi testada usando um lápis, com a ponta afiada e a ponta romba sendo aplicadas aleatoriamente na pele. Os participantes foram solicitados a indicar "agudo" ou "rombo". A sensação vibratória foi testada aplicando um diapasão oscilante (128 Hz) no topo da articulação metatarsofalângica. Todos os participantes atenderam aos requisitos de elegibilidade.
2.5 Protocolo experimental
Os participantes foram instruídos a não ingerir alimentos ou bebidas (exceto água) e a evitar atividade física moderada a vigorosa até 2 horas antes das medições, a fim de minimizar possíveis efeitos de confusão sobre os desfechos investigados. Foi recomendado não tomar banho nem usar loção corporal nas costas pela manhã antes da medição para evitar interferência com outros agentes aplicados topicamente. A altura corporal (GPM Stadiometer, Zurique, Suíça) e o peso corporal foram avaliados utilizando a balança de gordura corporal Tanita (TBF-611, Tóquio, Japão), e o índice de massa corporal (kg/m²) foi calculado. O percentual de gordura corporal inferior foi estimado usando a balança de gordura corporal Tanita (TBF-611, Tóquio, Japão). Os participantes foram solicitados a deitar em posição prona de cueca. Esta posição deveria ser a mais confortável possível e não deveria ser alterada. A área da pele da coluna torácica foi enxaguada com água destilada (temperatura ambiente), utilizando um pano de algodão macio. Duas áreas de pele (5 cm × 10 cm) foram marcadas em cada lado da coluna torácica (Th4-Th7) com tiras elásticas (Leukotape K BSN medical, Hamburgo, Alemanha). A camada de tecido adiposo subcutâneo nas áreas paravertebrais da pele investigadas foi determinada por ultrassom (MyLab Class C, Esaote, Gênova, Itália) e analisada com o software OsiriX Lite (Pixmeo SARL, Osirix V.8.0.2. Bernex, Suíça). A alocação das aplicações de gel de salicilato de metila e placebo no lado esquerdo ou direito da coluna torácica foi randomizada pelo pesquisador por sorteio (simples-cego). Os participantes foram solicitados a permanecer imóveis e a limitar sua fala apenas ao necessário. Para evitar quaisquer efeitos de resfriamento pela circulação de ar, todas as janelas e portas foram fechadas e os investigadores minimizaram seus movimentos. As condições ambientais no laboratório foram controladas (multímetro digital Voltcraft MT52, Hirschau, Alemanha) e mantidas constantes durante todos os experimentos (temperatura ambiente: 23,3 ± 0,9°C; umidade relativa: 39,2 ± 0,8%). Durante um período de aclimatação de 20 min, os participantes se adaptaram ao ambiente do laboratório, para obter medições de desfecho estáveis e precisas. Para garantir condições experimentais consistentes, o gel de salicilato de metila e o gel placebo foram aplicados simultaneamente. O salicilato de metila e o gel placebo foram pesados (balança de precisão Kern 770, Balingen, Alemanha), 1 g cada, e aplicados simultaneamente por via paravertebral por dois investigadores usando luvas cirúrgicas estéreis com movimento circular do dedo indicador.
Condições de aplicação consistentes em ambos os lados foram mantidas ao solicitar que os participantes avaliassem subjetivamente a pressão aplicada em cada lado. Além disso, os dois investigadores monitoraram visualmente a execução de movimentos circulares semelhantes com os dedos indicadores. Esperava-se que a aplicação tópica de salicilato de metila tivesse efeitos principalmente locais no local de aplicação. T0 foi considerado o momento em que ambos os géis foram completamente friccionados na pele. Medições subsequentes foram realizadas em intervalos de 5 minutos durante um período de 45 minutos (T5 a T45). A mesma sequência de avaliações foi realizada em cada ponto de tempo de medição: (1) MCskin, (2) Tskin, (3) termossensação e (4) SmO2. Devido a problemas técnicos durante a coleta de dados, três participantes tiveram que ser excluídos da análise. Durante a análise dos dados de SmO2, um outlier foi identificado com valores consistentemente mais baixos (>1,5 x IQR) tanto no placebo quanto no salicilato de metila e foi excluído do conjunto de dados de SmO2. O protocolo experimental foi, de outra forma, realizado sem qualquer desvio.
2.6 Desfechos
2.6.1 Tskin
A Tskin foi registrada por meio de termografia infravermelha (série FLIR A615, Emitec Industrial, Rotkreuz, Suíça) e o software de análise de dados (FLIR ResearchIR Max) foi utilizado para avaliar a Tskin. O nível de emissão da câmera infravermelha foi ajustado para 0,954. As áreas da pele (5 cm × 10 cm) foram marcadas manualmente no software e definidas como duas regiões de interesse separadas.
2.6.2 MCskin
A imagem por contraste de speckle a laser (LSCI) foi utilizada para determinar a MCskin (Moor Instruments, Millwey, Reino Unido), medindo até uma profundidade máxima de aproximadamente 1 mm na pele. Este dispositivo macroscópico sem contato, com alta resolução espacial e temporal, demonstrou ser sensível para avaliar a MCskin. O procedimento de calibração foi realizado de acordo com as recomendações do fabricante no dia anterior às medições. Para minimizar o risco de variáveis de confusão, a luz do dia e outras fontes de luz, bem como qualquer movimento do dispositivo LSCI, foram reduzidos. A função de mira a laser foi utilizada para obter a distância ideal entre o sistema LSCI e as áreas da pele investigadas. Imagens de LSCI de alta resolução (576 × 768 pixels) foram registradas durante um intervalo de 5s (1s/quadro, a uma taxa de quadros de 25 Hz). As duas áreas da pele investigadas (5 cm × 10 cm) foram marcadas manualmente no software e definidas como duas regiões de interesse separadas. O sistema LSCI utiliza unidades arbitrárias para expressar o fluxo médio nas regiões de interesse especificadas, que está relacionado à concentração de eritrócitos circulantes no volume da amostra de tecido, variando de azul (baixa perfusão) a vermelho (alta perfusão). As imagens foram analisadas utilizando o software associado (MoorFLPI-2 Review V, Moor Instruments, Millwey, Reino Unido). O fluxo médio obtido das cinco imagens consecutivas de LSCI foi calculado e normalizado aos valores basais (BL) para análises posteriores.
2.6.3 SmO2
O monitor de oxigenação tecidual profunda (moorVMS-NIRS, Moor Instruments, Millwey, Reino Unido) foi utilizado para avaliar SmO2. A tecnologia de espectroscopia no infravermelho próximo (NIRS) tem se mostrado uma ferramenta não invasiva, válida e confiável para avaliar a oxigenação muscular esquelética superficial. A SmO2 medida por NIRS é considerada uma medida indireta do fluxo sanguíneo muscular esquelético. Duas sondas separadas foram colocadas em cada área da pele. Cada sonda consistindo de uma cabeça detectora (contendo dois fotodiodos) e uma cabeça emissora (contendo dois LEDs de infravermelho próximo emitindo luz a 750–850 nm) foram separadas por um suporte de sonda padronizado de 30 mm (NPH1-30). A profundidade máxima de medição do NIRS é considerada aproximadamente metade da distância entre emissor e detector, o que corresponderia a uma profundidade de 15 mm. Dado que o tecido adiposo medido foi de 3,47 ± 0,58 mm, o sinal do NIRS reflete, portanto, as alterações metabólicas e hemodinâmicas do tecido muscular superficial. Fita adesiva (Hypafix, BSNmedical GmbH, Hamburgo, Alemanha) foi usada para fixar as sondas à pele. A hemoglobina oxigenada (oxyHb) e a hemoglobina desoxigenada (deoxyHb) foram avaliadas em unidades arbitrárias e a SmO2 foi calculada automaticamente como oxyHb/(oxyHb + deoxyHb) x 100 (%). A taxa de amostragem foi de 5 Hz.
2.6.4 Termossensação
Os participantes foram solicitados a classificar a sensação térmica e o conforto térmico em cada área da pele de acordo com a norma ISO 10551, utilizando escalas Likert. Dessa forma, o investigador tocou levemente fora da área da pele onde os géis foram aplicados. A sensação térmica (“Como isso parece?”) foi avaliada usando a seguinte escala Likert de 9 pontos: 4 = muito quente, 3 = quente, 2 = morno, 1 = ligeiramente morno, 0 = neutro, −1 = ligeiramente fresco, −2 = fresco, −3 = frio, −4 = muito frio. Esta pergunta foi ligeiramente adaptada da pergunta padronizada recomendada (“Como você está se sentindo agora?”) para perguntar especificamente sobre a sensação térmica na área específica da pele. O conforto térmico foi avaliado (“Você acha isso…?”) usando uma escala Likert de 5 pontos com 0 = confortável, 1 = ligeiramente desconfortável, 2 = desconfortável, 3 = muito desconfortável, 4 = extremamente desconfortável.
2.7 Análise estatística
A análise estatística foi realizada utilizando o IBM SPSS Statistics V.27 (IBM Corp, Armonk, Estados Unidos), com um nível de significância em p < 0,05. A suposição de normalidade foi testada usando o teste de Shapiro-Wilk. As características dos participantes foram relatadas descritivamente (média ± DP). Frequências cumulativas foram avaliadas para sensação térmica e conforto térmico. A ANOVA de medidas repetidas com tempo (11 pontos temporais: BL, T0-T45) e aplicação (salicilato de metila vs. placebo) como variáveis intra-sujeitos foi utilizada para: (1) Tskin, (2) MCskin e (3) SmO2. Caso o teste de Mauchly indicasse que a suposição de esfericidade havia sido violada, a correção de Greenhouse-Geisser foi utilizada. Os tamanhos de efeito estimados foram calculados usando o eta quadrado parcial (ηp 2), com 0,01, 0,06 e 0,14 considerados pequenos, médios e grandes, respectivamente. Efeitos significativos foram acompanhados usando testes t pareados ajustados por Bonferroni. As figuras foram criadas usando o Prism (9, Graphpad Software, Boston, Massachusetts, Estados Unidos).
3 Resultados
Os resultados de Tskin, MCskin e SmO2 são mostrados na Figura 1. Os resultados completos da ANOVA de medidas repetidas e as comparações pareadas post hoc são apresentados nas Tabelas Suplementares S1-S3.

(A) Temperatura da pele (Tskin), (B) microcirculação cutânea (MCskin) e (C) saturação de oxigênio muscular (SmO2) para salicilato de metila e placebo no início do estudo (BL) e durante os 45 min subsequentes ao período de aplicação (T0-T45). Os valores de MCskin são normalizados para BL (% média ± DP). As linhas horizontais indicam diferenças significativas entre salicilato de metila e placebo para os pontos temporais indicados (***p < 0,001; **p < 0,01; *p < 0,05, ajustado por Bonferroni).
3.1 Tskin
Um efeito principal significativo do tempo [F(2,9, 57,9) = 191,1, p < 0,001, ηp 2 = 0,905], da aplicação [F(1, 20) = 8,22, p = 0,010, ηp 2 = 0,291] e da interação [F(2,3, 46,1) = 5,507, p = 0,005, ηp 2 = 0,216] foi encontrado para Tskin. As comparações pareadas post hoc mostraram Tskin significativamente maior para o salicilato de metila em comparação ao placebo entre T5 e T40 (T5, T15-T25, T35-T40: p < 0,05; T10, T30: p < 0,01). A Tskin foi significativamente menor do que o BL entre T0 e T45 para salicilato de metila (T0: Δ-3,26°C; T5: Δ-3,36°C; T10: Δ-2,86°C; T15: Δ-2,17°C; T20: Δ-1,79°C; T25: Δ-1,53°C; T30: Δ-1,35°C; T35: Δ-1,22°C; T40: Δ-1,16°C; T45: Δ-1,13°C, todos p < 0,001) e placebo (T0: Δ-3,17°C; T5: Δ-3,90°C; T10: Δ-3,77°C; T15: Δ-3,21°C; T20: Δ-2,65°C; T25: Δ-2,24°C; T30: Δ-1,93°C; T35: Δ-1,61°C; T40: Δ-1,44°C; T45: Δ-1,31°C, todos p < 0,001). Para ambos os géis, a Tskin(mín) foi medida em T5, e a Tskin(máx) em T45.
3.2 MCskin
Para MCskin, foi encontrado um efeito principal significativo do tempo (F[4,2, 84,4] = 29,389, p < 0,001, η2 p = 0,595), da aplicação [F(1, 20) = 111,745, p < 0,001, η2 p = 0,848] e da interação [F(2,6, 52,0) = 74,292, p < 0,001, η2 p = 0,788]. Comparações post-hoc pareadas mostraram MCskin significativamente maior para o salicilato de metila em comparação ao placebo entre T0 e T45 (T0: p < 0,05, T5-T40: p < 0,001, T45: p < 0,01). Para o salicilato de metila, a MCskin aumentou significativamente em comparação ao BL entre T5 e T25 (T5: Δ88,7%, p < 0,001; T10: Δ87,6%, p < 0,001; T15: Δ58,0%, p < 0,001; T20: Δ38,3%, p < 0,001; T25: Δ23,4%, p = 0,045). Para o placebo, a MCskin foi significativamente menor em comparação ao BL entre T5 e T45 (T5: Δ-17,5%, p < 0,001; T10: Δ-17,6%, p < 0,001; T15: Δ-19,0%, p < 0,001; T20: Δ-21,2%, p < 0,001; T25: Δ-20,2%, p < 0,001; T30: Δ-21,7%, p < 0,001; T35: Δ-15,4%, p < 0,05; T40: Δ-16,6%, p < 0,001; T45: Δ-14,7%, p < 0,001). A MCskin (máx) foi medida em T0 para o placebo e em T5 para o salicilato de metila.
3.3 SmO2
Para SmO2, foi encontrado um efeito principal significativo do tempo [F(3,3, 63,4) = 6,51, p < 0,001, η2 p = 0,255], mas nenhum efeito de aplicação [F(1, 19) = 1,35, p = 0,26, η2 p = 0,066] ou de interação [F(4,7, 89,4) = 1,26, p = 0,29, η2 p = 0,062]. Para o salicilato de metila, a SmO2 foi significativamente maior em T5 (Δ1,83%, p = 0,028) e T10 (Δ1,62%, p = 0,007) em comparação ao BL. Para o placebo, a SmO2 não mudou significativamente em comparação ao BL (p > 0,05).
3.4 Termossensação
Os resultados completos das classificações de sensação térmica e conforto térmico são apresentados nas Figuras 2 e 3, respectivamente.
As respostas de sensação térmica são apresentadas como porcentagens do total de respostas para o placebo (A) e salicilato de metila (B) no basal (BL) e durante o período subsequente de 45 minutos pós-aplicação (T0-T45).
As respostas de conforto térmico são apresentadas como porcentagens do total de respostas para o placebo (A) e salicilato de metila (B) no basal (BL) e durante o período subsequente de 45 minutos pós-aplicação (T0-T45).
4 Discussão
Este estudo teve como objetivo investigar os efeitos do salicilato de metila tópico sobre Tskin, MCskin e SmO2, ao mesmo tempo em que explorou seus efeitos na termossensação. Os achados demonstram um aumento imediato e não persistente na MCskin, mas não na SmO2. As respostas de sensação térmica ao salicilato de metila tópico variaram de “frio” a “quente”, com sensações mais intensas relatadas aos 5 minutos pós-aplicação.
Após a aplicação, ambos os géis causaram uma redução significativa na Tpele, com temperaturas mínimas após 5 min (salicilato de metila: Δ-3,36°C, placebo: Δ-3,90°C). Esses resultados são consistentes com estudos anteriores que demonstraram um efeito de resfriamento imediato da pele de géis tópicos em geral, com reduções médias/medianas da Tpele variando de −2,1°C a −6,2°C. Para aplicações tópicas de mentol, verificou-se que o efeito de resfriamento não dependia de sua concentração e era comparável ao de um gel placebo. Portanto, o efeito de resfriamento imediato na temperatura do tecido/órgão não foi atribuído principalmente à ação do próprio composto ativo, mas sim à evaporação de água e/ou álcool da superfície da pele, semelhante ao mecanismo de transpiração. A extensão do efeito de resfriamento pode variar dependendo das propriedades evaporativas da substância veículo, que diferem entre os estudos (8,0% e 35–40% de etanol, ou isopropil/propileno glicol). No presente estudo, a substância veículo que incluía propileno glicol provavelmente resultou em uma redução menos pronunciada na Tpele.

O salicilato de metila induziu um aumento imediato no FSCpele, atingindo o pico aos 5 min e permanecendo elevado aos 10 min após a aplicação, seguido por um declínio gradual posteriormente. Em contraste, o gel placebo resultou em níveis de FSCpele consistentemente reduzidos durante todo o período de medição, com níveis significativamente mais baixos em comparação ao salicilato de metila. As alterações significativas observadas no FSCpele sugerem um efeito vasodilatador cutâneo de curto prazo do salicilato de metila e fornecem evidências para os efeitos reivindicados de um rubefaciente. Muitos estudos reconheceram o salicilato de metila como um ingrediente vasoativo em formulações tópicas. No entanto, dada a co-formulação comum do salicilato de metila com outros ingredientes, até o momento, não havia evidências disponíveis para confirmar o efeito vasodilatador de formulações tópicas contendo apenas esse ingrediente ativo.

Após a queda inicial na Tpele, ambos os géis resultaram em uma recuperação gradual da Tpele ao longo do tempo, com o salicilato de metila apresentando temperaturas significativamente mais altas do que o gel placebo entre 5–40 min após a aplicação. A regulação do fluxo sanguíneo cutâneo local é um mecanismo termorregulador essencial: um aumento no FSCpele por meio da vasodilatação cutânea geralmente resulta em dissipação de calor. Portanto, o efeito vasodilatador imediato do salicilato de metila pode ter evitado uma diminuição adicional da Tpele e, subsequentemente, acelerado o aumento da Tpele. No entanto, considerando que após 45 min da aplicação, a Tpele ainda estava mais baixa do que os níveis basais para ambos os géis, isso indica um efeito de resfriamento cutâneo sustentado da evaporação do gel.
Embora o salicilato de metila tenha demonstrado um aumento transitório na MCpele, refletindo alteração no fluxo sanguíneo cutâneo a uma profundidade máxima de 1 mm, ele não induziu um aumento concomitante ou tardio no fluxo sanguíneo dentro do músculo esquelético superficial (a aproximadamente 15 mm de profundidade). As alterações nos níveis de SmO2 ao longo do tempo foram mínimas para ambos os géis, e nenhuma diferença significativa foi encontrada entre os géis. Esse achado sugere que o salicilato de metila tópico não aumenta o fluxo sanguíneo muscular esquelético. Produtos tópicos são amplamente utilizados para o tratamento de lesões agudas e condições musculoesqueléticas crônicas. Muitos produtos de venda livre são baseados em ingredientes naturais, incluindo óleo de gaultéria, mentol, alecrim, capsaicina ou cânfora. Até o momento, apesar do uso generalizado de compostos naturais e do interesse em seus efeitos terapêuticos para condições musculoesqueléticas, há conhecimento limitado sobre seus efeitos no fluxo sanguíneo muscular esquelético ou na SmO2. Um estudo relatou que o mentol tópico induziu fluxo sanguíneo no músculo quadríceps. No entanto, o período total de medição (120 min) e as durações dos intervalos selecionados (15 min) podem ter sido muito longos, considerando que o mentol já é eliminado após 60 min da aplicação. Quando medido ao longo de um período de medição de 50 min, o mentol e a cânfora aumentaram separadamente a SmO2 no antebraço, indicando perfusão local aumentada na pele e no músculo superficial. O salicilato de metila, o mentol e a cânfora sofrem difusão passiva através da epiderme, alcançam as redes microvasculares dérmicas e são absorvidos sistemicamente em doses detectáveis, mas baixas. Dadas essas doses baixas, permanece questionável se, ou em que medida, esses produtos químicos tópicos têm efeitos vasodilatadores nos tecidos mais profundos em geral.
As respostas subjetivas de sensação térmica não se alinharam totalmente com a Tskin medida objetivamente. Após a aplicação, a diminuição inicial da Tskin não foi claramente percebida com nenhum dos géis. Para o salicilato de metila, no Tskin(mín) medido após 5 min da aplicação, os participantes tenderam a experimentar sensações de frio ou calor, com uma porcentagem menor relatando sensação neutra (4,8% vs. 57,1%). Embora o conforto térmico tenha sido predominantemente relatado como confortável para ambos os géis, uma proporção notável experimentou leve desconforto térmico (42,9%) ou desconforto (4,8%) após 5 min da aplicação com salicilato de metila. Ao longo do período de medição subsequente, atingindo Tskin(máx) aos 45 min, a intensidade dessas sensações mais extremas diminuiu gradualmente, com uma porcentagem crescente de participantes relatando uma sensação neutra semelhante ao placebo. Esses achados indicam que o salicilato de metila tópico (12,9%) induziu uma resposta termossensorial geralmente mais pronunciada e variada nos primeiros 5 min, o que se alinha bem com o pico de MCskin observado no mesmo momento. Consistentes com essas observações, foi demonstrado anteriormente que o salicilato de metila tópico é detectável de forma confiável em concentrações entre 3-12%, com um pico de intensidade de sensação percebida entre 5-9 min após a aplicação.

Produtos com salicilato de metila, como Perskindol Dolo®, são comumente chamados de "géis quentes" e são comercializados com a promessa implícita ou explícita de induzir uma sensação confortável e de aquecimento. No entanto, as respostas reais de sensação térmica entre os participantes foram mais variadas e não evocaram claramente uma sensação nítida de frio ou calor. Essa discrepância apoia descobertas anteriores de que o salicilato de metila não induz principalmente uma sensação de aquecimento e destaca a complexidade das respostas sensoriais individuais ao salicilato de metila tópico. Curiosamente, foi demonstrado que o salicilato de metila elicia qualidades de sensação independentes da temperatura, como queimação e formigamento/picada. Os participantes foram especificamente solicitados a avaliar a sensação térmica usando uma escala de escolha forçada, que exigia que fornecessem uma resposta mesmo que a sensação experimentada não fosse principalmente de natureza térmica. Isso pode ter introduzido um viés de resposta, pois a sensação de queimação evocada pelo salicilato de metila pode ter sido interpretada como sinônimo de uma sensação de calor ou quente. Portanto, é importante considerar a possibilidade de que a interpretação das sensações experimentadas pelos participantes possa ter sido influenciada pela presença de sensações de queimação associadas à aplicação do gel.
Os efeitos vasodilatadores cutâneos de curto prazo e termossensoriais distintos do salicilato de metila observados neste estudo podem ser baseados na ativação ou inibição de curto prazo de receptores TRP termossensíveis específicos, como é sugerido para o mentol ou a cânfora. Especificamente, o salicilato de metila demonstrou ter efeitos estimulatórios e inibitórios sobre o TRPV1 (vaniloide), que responde a estímulos dolorosos e calor (>42°C), e ativar os canais TRPM8 (melastatina) e TRPA1 (anquirina), que são sensíveis a temperaturas frias (<25°C e <17°C, respectivamente). Neste estudo, ambos os géis foram armazenados à temperatura ambiente (23,3 ± 0,9 °C), o que implica que a aplicação dos géis provavelmente ativou inicialmente o TRPM8. Além disso, para o gel de salicilato de metila, a modulação distinta do TRPV1, TRPM8 e TRPA1 pode ter contribuído para a resposta variada de sensação térmica. Ressalta-se que o salicilato de metila induziu um pico transitório de MCskin e as alterações na termossensação ocorreram principalmente após 5 min da aplicação. Em contraste, os efeitos vasculares e termossensoriais do mentol e da cânfora parecem durar notavelmente mais tempo (mentol: MCskin elevado entre 15–45 min, sensações de resfriamento 5–60 min após a aplicação; cânfora: MCskin elevado por 50 min e sensações térmicas por 30 min, respectivamente). Isso sugere que a ação presumida do salicilato de metila, mentol e cânfora sobre os canais TRP termossensíveis pode diferir em tempo e intensidade.
Este estudo teve como objetivo criar um ambiente terapêutico realista, mantendo ao mesmo tempo um experimento padronizado controlado por placebo. Dessa forma, os resultados são apresentados considerando várias limitações e devem ser interpretados com cautela. O protocolo garantiu o uso consistente da mesma quantidade de gel, empregando uma técnica de aplicação uniforme e verificação subjetiva da pressão e movimento da aplicação. No entanto, as condições não foram completamente idênticas. A (1) variabilidade no ponto final de penetração cutânea (T0), bem como (2) possíveis variações na umidade da pele e na absorção química podem ter introduzido pequenas variações entre os participantes. (3) Além disso, não podem ser excluídos possíveis efeitos de interação entre a percepção termossensorial induzida por cada gel nos lados esquerdo e direito da coluna vertebral. No entanto, é provável que o delineamento intrasujeito supere essas variações. (4) A termossensação foi determinada usando classificações subjetivas padronizadas ligeiramente adaptadas para sensação térmica e conforto térmico. (5) A tecnologia NIRS exigiu a cobertura das áreas da pele em cada ponto temporal de medição, o que pode ter tido um efeito oclusivo de alguns segundos na pele. Diante dessas limitações metodológicas, estudos semelhantes podem se beneficiar de uma maior padronização e refinamento dos pontos temporais específicos relacionados à aplicação do gel (por exemplo, saída do gel do tubo, início da aplicação do gel, conclusão da distribuição do gel e determinação subjetiva do ponto final de penetração cutânea). Além disso, estudos futuros poderiam considerar a medição da temperatura de cada gel e das pontas dos dedos dos avaliadores que aplicam o gel antes da aplicação. Essas informações adicionais poderiam aprimorar a interpretação dos resultados de Tskin.
Pesquisas adicionais são necessárias para melhorar nossa compreensão dos efeitos de produtos tópicos naturais sobre os tecidos mais profundos. Além disso, seria valioso comparar os efeitos do óleo de gaultéria natural e do salicilato de metila sintético. Adicionalmente, formas alternativas de administração do salicilato de metila (por exemplo, adesivos, sprays), por meio da aplicação durante exercício e/ou exposição ao calor e/ou concentrações mais elevadas de salicilato de metila poderiam ser investigadas para otimizar a permeação cutânea e melhorar sua eficácia. Especificamente para o salicilato de metila tópico, este estudo recomenda a avaliação de qualidades de sensação independentes de temperatura (por exemplo, ardência, picada e pontada). Estudos metodologicamente robustos são incentivados a investigar minuciosamente os efeitos individuais e combinados de compostos naturais, como mentol e cânfora, que atuam em canais TRP termosensíveis. Isso contribuiria para uma melhor compreensão de seus mecanismos subjacentes e potenciais efeitos sinérgicos ou aditivos. Dado o baixo custo do salicilato de metila tópico, valeria a pena explorar seus efeitos fisiológicos, subjetivos e presumidos analgésicos em condições musculoesqueléticas. Esta pesquisa poderia fornecer insights valiosos sobre seu potencial terapêutico.

Para concluir, este estudo utilizou técnicas avançadas não invasivas para investigar os efeitos vasculares do salicilato de metila tópico. Ao incluir avaliações de termosensação, foi possível explorar como as respostas vasculares e termosensoriais se relacionam ao longo do tempo. Os achados indicam que o salicilato de metila tópico induz vasodilatação cutânea de curta duração, mas pode não aumentar o fluxo sanguíneo muscular esquelético. Além disso, este estudo destaca as respostas sensoriais complexas à sua aplicação, que podem ser baseadas na modulação de curta duração dos canais TRP termosensíveis. Este estudo fornece insights para formuladores que buscam desenvolver aplicações tópicas eficazes com respostas vasculares e termosensoriais específicas, bem como para profissionais de saúde que aconselham sobre seu uso.

Declaração de disponibilidade de dados
As contribuições originais apresentadas no estudo estão incluídas no artigo/Material Suplementar; dúvidas adicionais podem ser direcionadas ao autor correspondente.

Declaração de ética
Os estudos envolvendo seres humanos foram aprovados pelo Comitê de Ética Suíço de Zurique. Os estudos foram conduzidos de acordo com a legislação local e os requisitos institucionais. Os participantes forneceram seu consentimento livre e esclarecido por escrito para participar deste estudo.

Contribuições dos autores
NV: Análise Formal, Visualização, Redação–rascunho original, Redação–revisão e edição. VW: Análise Formal, Visualização, Redação–rascunho original, Redação–revisão e edição. SW: Redação–revisão e edição, Curadoria de dados, Metodologia. DA: Redação–revisão e edição, Conceituação, Metodologia. PC: Redação–revisão e edição, Conceituação, Metodologia. RC: Conceituação, Aquisição de financiamento, Investigação, Metodologia, Administração de projeto, Recursos, Supervisão, Redação–revisão e edição, Curadoria de dados.
Conflito de interesses
Os autores declaram que a pesquisa foi conduzida na ausência de quaisquer relações comerciais ou financeiras que pudessem ser interpretadas como um potencial conflito de interesses.
Nota do editor
Todas as alegações expressas neste artigo são exclusivamente dos autores e não representam necessariamente aquelas de suas organizações afiliadas, nem as do editor, dos editores ou dos revisores. Qualquer produto que possa ser avaliado neste artigo, ou alegação que possa ser feita por seu fabricante, não é garantido ou endossado pelo editor.
Material suplementar
O Material Suplementar para este artigo pode ser encontrado online em: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fphys.2024.1347196/full#supplementary-material
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