pmid: "32860770"
title: "Melhora da microcirculação conjuntival em pacientes com retinopatia diabética com polimorfismos do MTHFR após administração de Ocufolin™."
authors: "Liu Z, Jiang H, Townsend JH, Wang J"
journal: "Microvascular research"
pubdate: "2020 Nov"
doi: "10.1016/j.mvr.2020.104066"
source: "PMC Full Text"
Melhora da microcirculação conjuntival em pacientes com retinopatia diabética com polimorfismos do MTHFR após administração de Ocufolin™.
Autores
Liu Z, Jiang H, Townsend JH, Wang J
Periodico
Microvascular research (2020 Nov)
Conteudo
Melhora da microcirculação conjuntival em pacientes com retinopatia diabética e polimorfismos do MTHFR após administração de Ocufolin™
Objetivo:
Investigar as respostas microvasculares conjuntivais em pacientes com retinopatia diabética leve (RDL) e polimorfismos da metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR) (D+PM) após administração de Ocufolin™, um alimento médico contendo 900 μg de L-metilfolato (levomefolato de cálcio ou ácido [6S]-5-metiltetra-hidrofólico, sal de cálcio), metilcobalamina e outros ingredientes.
Métodos:
Oito pacientes D+PM receberam Ocufolin™ por seis meses (6M). A microvasculatura conjuntival bulbar e as métricas da microcirculação, incluindo diâmetro do vaso (D), velocidade axial do fluxo sanguíneo (Va), velocidade do fluxo sanguíneo em secção transversal (Vs), taxa de fluxo (Q) e densidade vascular (DV, Dbox), foram medidas no início, 4M e 6M.
Resultados:
A idade média foi de 54 ± 7 anos. Nenhuma diferença demográfica significativa foi encontrada. A microcirculação conjuntival, medida como Va, Vs e Q, aumentou significativamente aos 4M e 6M, em comparação com o início.Va foi 0,44 ± 0,10 mm/s, 0,58 ± 0,13 mm/s, 0,59 ± 0,13 mm/s no início, 4M e 6M, respectivamente (P < 0,01). Da mesma forma, Vs foi 0,31 ± 0,07 mm/s, 0,40 ± 0,09 mm/s, 0,41 ± 0,09 mm/s no início, 4M e 6M, respectivamente (P < 0,05). Q foi 107,8 ± 49,4 pl/s, 178,0 ± 125,8 pl/s, 163,3 ± 85,8 mm/s no início, 4M e 6M, respectivamente (P < 0,05). A DV aos 6M foi significativamente maior do que a do início (P = 0,017). As alterações de D foram positivamente correlacionadas com as alterações de Va, Q e DV. Foram encontrados efeitos dos polimorfismos do MTHFR e da haptoglobina nas melhorias da microcirculação e microvasculatura conjuntival.
Conclusões:
A suplementação com Ocufolin™ melhora a microcirculação conjuntival em pacientes com retinopatia diabética e polimorfismos comuns do folato.
Introdução
A conjuntiva bulbar é uma membrana mucosa vascularizada que cobre a superfície externa do olho. A microvasculatura conjuntival inclui arteríolas, vênulas e capilares ramificados. A microvasculatura conjuntival bulbar pode ser facilmente acessada e é adequada para imagens in vivo sob várias condições fisiológicas e patológicas, incluindo doenças oculares, sistêmicas e cerebrais, como olho seco (;), diabetes (;), doença de Alzheimer e anemia falciforme.
Complicações microvasculares levam a danos em órgãos-alvo em pacientes com diabetes mellitus (DM). Alterações na integridade e morfologia dos vasos, juntamente com a perda capilar, são sinais clássicos de retinopatia diabética (;;;;;). Além das anormalidades da vasculatura retiniana, anormalidades microvasculares conjuntivais devido ao diabetes também foram relatadas (;;). Dilatações de grandes vasos e perda de capilares conjuntivais foram relatadas em DM (;). Usando microscopia intravital assistida por computador, Cheung et al. relataram diâmetros aumentados e distribuições desiguais dos vasos conjuntivais em pacientes com DM. To et al. descobriram que alterações morfométricas nos vasos se apresentavam mais precocemente na conjuntiva bulbar do que na retina.
Anormalidades microvasculares em DM (ou seja, nefropatia diabética, retinopatia e edema macular) têm sido associadas à hiper-homocisteinemia (Hhcy). Anormalidades vasculares associadas à Hhcy incluem disfunção endotelial, malformações da parede vascular, perda de colágeno da matriz extracelular e ruptura da barreira hematoencefálica (BHE), encontradas em roedores e humanos (;). A homocisteína plasmática elevada (Hcy) ocorre frequentemente em portadores de polimorfismos da metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR) (;;) A MTHFR é uma enzima envolvida na remetilação da Hcy no ciclo da metionina e catalisa a reação de redução do 5,10-metilenotetrahidrofolato para 5-metilenotetrahidrofolato. A mutação da MTHFR no nucleotídeo 677 (C677T) resulta na substituição de valina por alanina, enquanto uma mutação no nucleotídeo 1298 (A1298C) leva à substituição de alanina por glutamina. Esses polimorfismos disfuncionais são relatados como associados à atividade enzimática reduzida, resultando em uma deficiência no processo de remetilação e levando ao aumento da Hcy plasmática (;).
Ocufolin™ é um alimento médico projetado para reduzir a isquemia em pacientes com polimorfismos comuns do MTHFR, que contém vários nutrientes para otimizar vias metabólicas críticas com vitaminas e cofatores para metilação, reduzindo a Hcy, aumentando o fluxo sanguíneo, reduzindo a isquemia e diminuindo o estresse oxidativo nas mitocôndrias. Cada cápsula de Ocufolin™ contém L-metilfolato 900 mcg, vitamina C (ácido ascórbico) 33,3 mg, vitamina D (como colecalciferol) 1500 UI, complexo natural de vitamina E (como alfa, beta, gama e delta tocoferóis) 7,5 UI, vitamina B1 (como cloridrato de tiamina) 1,5 mg, vitamina B2 (riboflavina) 10 mg, vitamina B6 (como piridoxal 5’-fosfato) 3 mg, vitamina B12 (como metilcobalamina) 500 mcg, ácido pantotênico (como pantotenato de cálcio) 5 mg, zinco (como óxido de zinco) 26,6 mg, selênio (como L-selenometionina) 20 mcg, cobre (como óxido cúprico) 0,667 mcg, n-acetil cisteína 180 mg, luteína 3,35 mg e zeaxantina 700 mcg. Nossas observações anteriores em uma série de casos de pacientes com retinopatia diabética tratados com Ocufolin™ ou uma formulação similar (Eyefolate™) demonstraram melhora na retinopatia, mesmo em casos de longa duração. No entanto, os efeitos do Ocufolin™ na microvasculatura conjuntival bulbar e nas métricas da microcirculação em pacientes com retinopatia diabética leve e polimorfismos do MTHFR (D+PM) correlacionados com a acuidade visual não foram explorados.
A microvasculatura e a microcirculação podem ser imageadas com métodos como microscopia assistida por computador e biomicroscopia funcional com lâmpada de fenda (FSLB)(;;;;;;). A FSLB é uma modalidade rápida, facilmente acessível e não invasiva para avaliar a estrutura microvascular conjuntival e o fluxo sob condições fisiológicas e patológicas (;;;;;;). A FSLB é uma lâmpada de fenda montada com uma câmera digital de alta velocidade, capaz de imagear pequenos vasos em alta ampliação e medir seus parâmetros de fluxo sanguíneo. Ela mede o diâmetro do vaso, a velocidade do fluxo sanguíneo (BFV) e a taxa de fluxo sanguíneo (BFR) em tempo real. Em nossos estudos anteriores, a FSLB foi validada para análise das mudanças na hemodinâmica e na complexidade de ramificação em vasos conjuntivais em indivíduos saudáveis (;), pacientes com olho seco (;) e usuários de lentes de contato (;).
O objetivo do presente estudo foi caracterizar marcadores da microvasculatura conjuntival e da microcirculação usando FSLB em pacientes com D+PM em resposta à ingestão de Ocufolin™ por seis meses.
Métodos
Desenho do estudo, local e população
O desenho do estudo, recrutamento, triagem, testes, administração do alimento médico e protocolo de imageamento foram revisados e aprovados pelo conselho de revisão institucional (IRB) da Universidade de Miami. Vinte e sete pacientes diabéticos foram recrutados para triagem de polimorfismos do MTHFR e genótipos de haptoglobina (HP) no Bascom Palmer Eye Institute, da Universidade de Miami, de agosto de 2017 a janeiro de 2020.
Excluindo indivíduos não elegíveis, oito pacientes com retinopatia diabética leve e polimorfismos do MTHFR (D+PM) entraram na coorte de alimentos médicos. A RMD foi diagnosticada por um especialista em retina (JT). Os diagnósticos foram feitos de acordo com os critérios da Academia Americana de Oftalmologia (Painel de Retina/Vítreo) e da Associação Americana de Diabetes (ADA).
Os pacientes receberam Ocufolin™ por seis meses. As dosagens foram: 1) na primeira semana, uma cápsula por via oral com o café da manhã por dia; 2) na segunda semana, duas cápsulas com o café da manhã por dia; 3) a partir de então, três cápsulas com o café da manhã por dia até a consulta final. Os pacientes com D+PM foram submetidos a exames de imagem no início do estudo, ao final do 4º mês (4M) e ao final do 6º mês (6M). A janela de consulta foi de ±7 dias. Nesses momentos, foram medidos a pressão arterial sistólica (PAS), a pressão arterial diastólica (PAD) e a pressão arterial média (PAM).
Imagem conjuntival usando FSLB
O FSLB foi bem descrito anteriormente(;;;). Resumidamente, a modalidade de imagem foi modificada a partir de uma lâmpada de fenda tradicional, montando-se uma câmera digital de alta velocidade com capacidade especial de ampliação, Função de Corte de Filme (MCF). A MCF permite a adição de uma ampliação de 7×, que, combinada com a ampliação da lâmpada de fenda de 30×, produz alta ampliação ideal para imagear o movimento de aglomerados de eritrócitos a 60 quadros por segundo (fps). Além disso, o sistema de imagem pode ser configurado para baixa ampliação (15x) para imagear a microvasculatura da conjuntiva bulbar no lado temporal do olho. O campo de visão (FOV) calibrado desta configuração foi de 15,74 × 10,50 mm na conjuntiva.
Para medir a VFS e a FSR médias, seis locais diferentes da conjuntiva bulbar, aproximadamente a 1 mm do limbo, foram escolhidos e registrados. O FOV foi de 0,9 × 0,7 mm. A medição foi feita apenas em vênulas conjuntivais, uma vez que a maioria dos vasos conjuntivais são vênulas. A repetição da imagem dos mesmos vasos ao longo do tempo é desafiadora. Seguimos um protocolo otimizado que desenvolvemos e publicamos anteriormente. Na consulta inicial, uma foto com um grande campo de visão de 15,74 x 10,50 mm² foi adquirida na conjuntiva temporal. Seis pequenos campos contendo vasos-alvo foram marcados. O limbo temporal foi usado como referência para relocalizar os campos marcados para exames de imagem de acompanhamento. Essa estratégia permitiu a obtenção de imagens dos mesmos vasos ou de vasos semelhantes nos mesmos locais de consulta para consulta, resultando em boa repetibilidade das medições, conforme documentado anteriormente. Um software personalizado foi desenvolvido e validado para processar os clipes de vídeo e medir a VFS e a FSR (Fig. 1) (;). Os procedimentos detalhados de processamento de imagem foram relatados anteriormente (;).
Para medir a densidade vascular da microvasculatura conjuntival, um software personalizado (Mathworks, Inc., Natick, MA) também foi desenvolvido para extrair os vasos usando uma série de procedimentos de processamento de imagem, conforme descrito em publicações anteriores (Fig. 2) (;). A densidade vascular (DV) foi quantificada como Dbox usando análise fractal com contagem de caixas (;). As métricas vasculares incluíram diâmetro do vaso (D), velocidade axial do fluxo sanguíneo (Va), velocidade do fluxo sanguíneo em corte transversal (Vs), taxa de fluxo (Q) e DV.
Análise Estatística
O pacote IBM SPSS Statistics para Windows (Versão 25.0, IBM Corp., Armonk, NY, EUA) foi utilizado para analisar os dados. Modelos de equações de estimação generalizadas (GEE) foram conduzidos para avaliar as variações em D+PM em diferentes momentos: Linha de base, 4M e 6M, e comparados com NC. Os olhos (esquerdo ou direito) e as visitas foram definidos como variáveis intra-sujeito nos modelos GEE. As medidas vasculares foram definidas como variáveis dependentes, enquanto idade, sexo e olho foram definidos como covariáveis. Coeficientes de correlação de Pearson foram utilizados para avaliar as correlações lineares entre as mudanças dessas variáveis, incluindo AVCC e durações do DM. A diferença estatística foi considerada como P < 0,05.
Resultados
População do estudo e características clínicas basais
As características basais detalhadas foram relatadas na Tabela 1. Dezesseis olhos de 8 pacientes com D+PM foram imageados. A maioria era do sexo masculino (75,0%), e 62,5% dos pacientes apresentavam hipertensão. A duração média do diabetes e HbA1c foi de 14,5 ± 7,3 anos e 7,6 ± 0,9%, respectivamente. Todos os pacientes apresentavam uma ou duas mutações no MTHFR, C677T ou A1298C. Quatro pacientes apresentavam genótipos HP1-1/1-2, e dois pacientes apresentavam genótipos FIP2-2. Dois pacientes não tiveram resultados de genótipo HP devido à má qualidade da amostra.
Efeito do Ocufolin™ em pacientes com MDR
A microcirculação conjuntival, medida como Va, Vs e Q, aumentou significativamente em 4M e 6M, em comparação com a linha de base (Fig. 3, P < 0,05). Va foi 0,44 ± 0,10 mm/s, 0,58 ± 0,13 mm/s, 0,59 ± 0,13 mm/s na linha de base, 4M e 6M, respectivamente (P < 0,01). Da mesma forma, Vs foi 0,31 ± 0,07 mm/s, 0,40 ± 0,09 mm/s, 0,41 ± 0,09 mm/s na linha de base, 4M e 6M, respectivamente (P < 0,05). Q foi 107,8 ± 49,4 pl/s, 178,0 ± 125,8 pl/s, 163,3 ± 85,8 mm/s na linha de base, 4M e 6M, respectivamente (P < 0,05).
Nenhuma mudança significativa na PAS, PAD, PAM ou FC foi observada nas visitas durante o período de ingestão de Ocufolin™ (Tabela 2).
Não houve diferenças significativas no diâmetro vascular, D, entre as visitas (Fig. 3, P > 0,05). A DV em 6M (1,638 ± 0,042 Dbox) foi significativamente maior do que na linha de base (1,618 ± 0,053 Dbox) (P = 0,017).
Efeitos dos polimorfismos do MTHFR e da haptoglobina (HP) nas melhorias da microcirculação e microvasculatura conjuntivais foram observados durante a administração do Ocufolin™ (Fig.4). Va e Vs em 6M aumentaram significativamente ao longo do tempo em todos os subgrupos de genótipos (todos P < 0,05). D e Q em 6M em pacientes com genótipo HP2-2 diminuíram quando comparados ao basal. D, Q e VD em 6M em pacientes com A1298C, C677T e A1298C, e HP1-1/1-2 aumentaram significativamente ao longo do tempo (todos P < 0,05).
Correlações entre métricas vasculares e BCVA em pacientes com D+PM
As mudanças de Va e Q em 6M foram positivamente relacionadas à mudança de D (Fig. 5, P < 0,05). No entanto, as mudanças de Vs e VD em 6M não foram relacionadas às mudanças em D (P > 0,05). Também não houve correlações significativas entre a duração do DM e as mudanças nas métricas vasculares medidas. Não houve correlações significativas entre a duração do DM e as mudanças das métricas vasculares medidas (variação de r de −0,595 a −0,063, P > 0,05).
Discussão
Este estudo representa uma primeira tentativa de quantificar objetivamente as alterações da microvasculatura e microcirculação conjuntivais bulbares em resposta à ingestão de Ocufolin™, um alimento médico para pacientes com retinopatia diabética não proliferativa leve (RDNPL) e polimorfismos do MTHFR (D+PM). Os principais achados são a melhora dos marcadores de microvasculatura e microcirculação conjuntivais (aumento de Vs, Va, Q e VD). Devido às suas características de acesso não invasivo, a conjuntiva bulbar fornece um local único para avaliar alterações de microangiopatia em doenças vasculares (;). Os vasos conjuntivais são facilmente reconhecíveis, e as medições das respostas vasculares (ou seja, alterações na microvasculatura e microcirculação) podem ser facilmente realizadas, como no presente estudo e em estudos anteriores (;;;;;;). As anormalidades microvasculares típicas podem ser facilmente distinguidas. Assim, o uso do FSLB para obter medições quantitativas da microcirculação e microvasculatura conjuntivais pode servir como uma abordagem importante, objetiva e complementar para avaliar os efeitos do tratamento em diabéticos, especialmente para os tratamentos direcionados ao sistema vascular, como o Ocufolin™.
O diabetes e o metabolismo da homocisteína são impactados por deficiências nutricionais e polimorfismos genéticos comuns do MTHFR que afetam a absorção e o metabolismo de vitaminas e minerais, o que pode resultar em perda capilar, grandes alterações morfométricas vasculares e isquemia. A suplementação alimentar com vitaminas, minerais e nutracêuticos é uma forma segura, barata e simples de abordar os fatores de risco e impulsionadores dos distúrbios vasculares visuais, incluindo a RD (;).
Ocufolin™ é um alimento médico complexo de vitaminas, rico em antioxidantes, projetado para tratar as consequências isquêmicas dos polimorfismos de função reduzida do estado homozigoto MTHFR C677TT e do estado heterozigoto composto MTHFR C677T/A1298C. No presente estudo, observou-se melhora na densidade vascular e aumento da microcirculação após a administração de Ocufolin™, mesmo aos 4M. Isso pode ser devido à otimização das vias metabólicas críticas, fornecendo vitaminas e outros componentes para a metilação. Embora o nível de homocisteína não tenha sido medido nas consultas de acompanhamento, a redução da homocisteína também pode desempenhar um papel nas respostas vasculares.
Existem alguns componentes importantes no Ocufolin™ que podem contribuir para a reversão do fluxo sanguíneo conjuntival. As vitaminas do complexo B convertem a Hcy em metionina, reduzem a pressão arterial e melhoram a resistência à insulina. Ao remover o ácido fólico e aumentar a ingestão de L-metilfolato, o Ocufolin™ aumenta a absorção de L-metilfolato no sistema nervoso central (SNC), reduz a homocisteína e diminui o estresse oxidativo, revertendo assim os efeitos metabólicos a jusante dos polimorfismos do MTHFR. A vitamina D melhora ainda mais a absorção de folato. A tiamina e o zinco protegem as células dos danos causados pelos produtos finais de glicação avançada, AGEs. A N-acetilcisteína aumenta a glutationa, o principal antioxidante mitocondrial, que melhora o metabolismo da glicose ao reduzir o estresse oxidativo (;;Laura). Antioxidantes como as vitaminas C e E reduzem ainda mais o estresse oxidativo.
Os polimorfismos da haptoglobina (HP) têm sido implicados como fator de risco para doença cardiovascular (DCV) em pacientes com diabetes mellitus (DM). A haptoglobina é uma proteína de fase aguda que se liga à hemoglobina circulante livre, existindo em duas formas distintas, HP1 e HP2. A HP1 possui baixo peso molecular, o que lhe permite entrar no espaço extravascular. O tamanho aumentado da HP2 impede sua entrada no espaço extravascular e prolonga a depuração dos complexos HP2. O genótipo HP2-2 prevê o maior risco de DCV no diabetes, o HP1-2 prevê risco intermediário e o HP1-1 prevê o menor risco. Pacientes diabéticos com genótipo HP2-2 apresentam cinco vezes mais probabilidade de ter DCV do que pacientes com HP1-1. Pacientes diabéticos com HP1-2 apresentam três vezes mais probabilidade de ter DCV do que pacientes com HP1-1. No presente estudo, ambos os pacientes com genótipo HP2-2 apresentaram DCV. As métricas vasculares (VDs, VDd, VDr) aos 6M diminuíram ligeiramente em pacientes com HP2-2, o que pode indicar disfunção de reperfusão capilar devido a DCV em pacientes com D+PM.
Esta foi a primeira tentativa de determinar as respostas vasculares da conjuntiva ao alimento médico em pacientes selecionados com D+PM. Embora os achados deste estudo prospectivo sejam intrigantes e inovadores, eles precisam ser considerados à luz das limitações. Primeiro, o estudo foi conduzido com uma amostra pequena. Apesar de incluir apenas oito pacientes, diferenças significativas na microvasculatura e microcirculação foram documentadas, sugerindo que a resposta pôde ser capturada de forma suficiente nesses pacientes.
Segundo, não incluímos alterações sintomáticas (ou seja, conforto ocular) ou marcadores do filme lacrimal (ou seja, tempo de ruptura e teste de Schirmer), que podem ser marcadores importantes para avaliar o impacto na superfície ocular após a administração do alimento médico. Estudos longitudinais futuros são necessários para avaliar a estabilidade do filme lacrimal e o conforto da superfície ocular, a fim de abordar a relação da melhora no fluxo sanguíneo conjuntival com a melhora da superfície ocular.
Terceiro, não acompanhamos as alterações na Hcy aos 4M e 6M. É necessário avaliar as relações entre as alterações da Hcy e o fluxo sanguíneo conjuntival, o que pode fornecer uma diretriz clínica para o momento e a dosagem da administração de Ocufolin™ em D+PM. Apesar dessas limitações, este estudo é o primeiro a caracterizar as alterações vasculares da conjuntiva bulbar em resposta à administração de Ocufolin™ em pacientes com D+PM.
Quarto, não incluímos um desenho de estudo com duas doses para testar o efeito da dose na microvasculatura conjuntival. O ácido fólico tem um efeito dependente da dose na redução das concentrações sanguíneas de homocisteína, conforme revelado por uma meta-análise de ensaios randomizados. Além disso, o Ocufolin™ contendo 900 μg de L-metilfolato foi testado com uma dose mais baixa (uma cápsula diária) por um período mais curto (3 meses), e o estudo encontrou uma tendência de aumento do fluxo sanguíneo retiniano. Com base nas informações disponíveis sobre o efeito da dose, desenhamos este estudo com 3 cápsulas diárias e um período de acompanhamento de 6 meses, na tentativa de mostrar o efeito na vasculatura conjuntival pela primeira vez. Estudos futuros com pelo menos duas doses são necessários para determinar se o efeito da dose ocorre na vasculatura conjuntival. Além disso, não incluímos uma abordagem de desafio e re-desafio neste estudo, pois este estudo piloto teve como objetivo revelar se havia uma resposta conjuntival perceptível. Além disso, acreditamos que pode levar meses ou anos para mostrar deterioração visível após a interrupção do produto, o que torna isso impraticável para este estudo piloto. Pode-se especular que, uma vez que o endotélio cicatrize, a deterioração pode ser lenta para recorrer, assim como a deterioração diabética é lenta para se desenvolver. Portanto, tal abordagem de desafio e re-desafio levaria alguns anos e correria um risco real de comorbidades e perda de acompanhamento.
Por fim, Koutsiaris et al. relataram que a velocidade axial média era uma função dos diâmetros dos vasos ao estudar capilares e arteríolas pré-capilares (não vênulas). Vale ressaltar que os diâmetros dos microvasos mencionados não eram as alterações nos diâmetros dos mesmos vasos, mas sim os diâmetros de diferentes vasos no sistema vascular da conjuntiva. Portanto, a dilatação dos vasos das vênulas pode não levar necessariamente a um aumento da velocidade axial. No presente estudo, não houve diferenças nos diâmetros dos vasos, embora uma relação fraca tenha sido encontrada entre as alterações de Va e as alterações de D nos indivíduos. A relação positiva pode indicar que o aumento de Va coexiste com as alterações de D. No entanto, permaneceu desconhecido se as alterações de D tiveram um efeito causal no aumento de Va.
Em resumo, este estudo prospectivo caracterizou a microvasculatura e a microcirculação da conjuntiva em pacientes com D+PM em resposta à ingestão de Ocufolin™, um alimento médico. Foram encontradas melhorias nos marcadores de microvasculatura e microcirculação da conjuntiva após 4 e 6 meses de ingestão. Estudos adicionais com amostras maiores são necessários para validar ainda mais se as medidas vasculares da conjuntiva podem ser marcadores para monitorar o efeito de alimentos médicos em pacientes com várias doenças vasculares.
LZ, JH, JT e JW coletaram e analisaram os dados. LZ, JH, JT e JW interpretaram os dados. ZL e JW foram os principais contribuidores na redação do manuscrito. Todos os autores leram e aprovaram o manuscrito final. Todos os autores declaram não haver conflitos de interesse.
JW teve acesso total a todos os dados do estudo e assume a responsabilidade pela integridade dos dados e pela precisão da análise dos dados.
Declarações Financeiras: Todos os autores não têm interesses concorrentes.
Este é um arquivo PDF de um manuscrito não editado que foi aceito para publicação. Como serviço aos nossos clientes, estamos fornecendo esta versão inicial do manuscrito. O manuscrito passará por revisão de texto, diagramação e revisão da prova final antes de ser publicado em sua forma final. Observe que durante o processo de produção podem ser descobertos erros que possam afetar o conteúdo, e todas as isenções de responsabilidade legais aplicáveis ao periódico se aplicam.
Referências
Regulação positiva do transportador de folato reduzido pela vitamina D aumenta a captação de folato cerebral em camundongos sem receptor alfa de folato
N-Acetilcisteína - um antídoto seguro para deficiência de cisteína/glutationa
Preservação da estrutura e função retinal após oclusão da artéria cilioretiniana: um relato de caso
Diagnóstico e Manejo do Diabetes: Sinopse dos Padrões de Cuidado Médico em Diabetes da American Diabetes Association de 2016
Dimensão Fractal Vascular Macular na Camada Capilar Profunda como Indicador Precoce de Perda Microvascular para Retinopatia em Pacientes Diabéticos Tipo 2
Respostas microvasculares da conjuntiva bulbar no olho seco
Anormalidades microvasculares em pacientes com olho seco
Comparação de anormalidades microvasculares em tempo real em pacientes pediátricos e adultos com anemia falciforme
Anormalidades microvasculares na conjuntiva bulbar de pacientes com diabetes mellitus tipo 2
Correlação de anormalidades microvasculares e disfunção endotelial no Diabetes Mellitus Tipo 1 (DM1): um estudo de microscopia intravital em tempo real
Respostas microvasculares do limpador palpebral como indicador de desconforto com lentes de contato
Evidência de aumento da inflamação e anormalidades microcirculatórias em pacientes com diabetes tipo 1 e seu papel nas complicações microvasculares
Polimorfismos da Metilenotetra-hidrofolato Redutase (MTHFR) (C677T e A1298C) e Complicações Vasculares em Pacientes com Diabetes Tipo 2
Um fator de risco genético candidato para doença vascular: uma mutação comum na metilenotetra-hidrofolato redutase
Efeitos dose-dependentes do ácido fólico nas concentrações sanguíneas de homocisteína: uma metanálise dos ensaios randomizados
Fatores que Afetam as Respostas Microvasculares na Conjuntiva Bulbar em Usuários Habituais de Lentes de Contato
Biomicroscopia funcional com lâmpada de fenda para imageamento da microvasculatura conjuntival bulbar em usuários de lentes de contato
Métricas de biomicroscopia funcional com lâmpada de fenda correlacionam-se com risco cardiovascular
Variabilidade entre visitas das medidas hemodinâmicas microvasculares conjuntivais em indivíduos saudáveis e com retinopatia diabética
Quantificação da Densidade e Morfologia Microvascular na Retinopatia Diabética Usando Angiografia por Tomografia de Coerência Óptica de Domínio Espectral
A relação do calibre dos vasos retinianos com a incidência e progressão da retinopatia diabética: XIX: o Estudo Epidemiológico de Wisconsin sobre Retinopatia Diabética
Estimativa do fluxo volumétrico na microvasculatura mesentérica pré-capilar in vivo e o princípio do gradiente de pressão constante
Estresse oxidativo e retinopatia diabética
Dilatação e alongamento dos vasos retinianos precedem o edema macular diabético
O metabolismo e a importância da homocisteína na nutrição e saúde
Os perigos da ingestão excessiva de ácido fólico em portadores de mutação no gene MTHFR: Uma perspectiva obstétrica e ginecológica
Análise quantitativa da microvasculatura conjuntival imageada usando angiografia por tomografia de coerência óptica
Hipermetilação: Causas e Consequências na Miopatia do Músculo Esquelético
A morte celular apoptótica na camada de células ganglionares da retina de camundongos é induzida in vivo pelo aminoácido excitatório homocisteína
Quantificação de Anormalidades Microvasculares com o Aumento da Gravidade da Retinopatia Diabética Usando Angiografia por Tomografia de Coerência Óptica
Diabetes e a tortuosidade dos vasos da conjuntiva bulbar
Resposta vascular da conjuntiva bulbar ao diabetes e à pressão arterial elevada
O padrão de hipermetilação do promotor do MTHFR associado ao polimorfismo A1298C influencia os parâmetros lipídicos e o controle glicêmico em pacientes diabéticos
Um estudo piloto para avaliar o efeito de uma suplementação vitamínica de três meses contendo L-metilfolato nas concentrações plasmáticas de homocisteína sistêmica e no fluxo sanguíneo da retina em pacientes com diabetes
Microcirculação na conjuntiva e retina em indivíduos saudáveis
Perda de células ganglionares da retina no diabetes associada à homocisteína elevada
Uma revisão da biomicroscopia funcional com lâmpada de fenda
Viscosidade sanguínea total e anormalidades microvasculares na Doença de Alzheimer
Nutrição de folato e disfunção da barreira hematoencefálica
Homocisteína: Um Potencial Biomarcador para Retinopatia Diabética
Correlação entre microangiopatia conjuntival e retinopatia em pacientes com diabetes mellitus tipo 2 (DM2)
Melhorando a retinopatia diabética e hipertensiva com um alimento médico contendo L-metilfolato: um relato preliminar
Melhorando a retinopatia diabética e hipertensiva com um alimento médico contendo L-metilfolato: um relato preliminar
Variabilidade de medição entre visitas da vasculatura e circulação conjuntival em usuários habituais de lentes de contato e não usuários
Amostragem de Vasos e Distribuição da Velocidade do Fluxo Sanguíneo com Diâmetro do Vaso para Caracterização da Microvasculatura Conjuntival Bulbar Humana
Um segundo polimorfismo genético na metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR) associado à diminuição da atividade enzimática
Cálculo do diâmetro vascular conjuntival bulbar e da velocidade do fluxo sanguíneo.
Clipes de vídeo do fluxo sanguíneo da conjuntiva bulbar foram capturados usando FSLB e processados para medir a velocidade do fluxo sanguíneo. (A) O primeiro quadro do clipe de vídeo foi utilizado para registrar todos os quadros para compensar o movimento dos olhos. (B) Usando software personalizado, as paredes vasculares foram delineadas e marcadas com linhas verdes e amarelas para medir o diâmetro do vaso. (C) Medindo a intensidade da imagem dentro das localizações definidas pelas paredes vasculares, um perfil de intensidade ao longo da linha central (linha vermelha na imagem B) entre essas paredes foi gerado para cada quadro no clipe de vídeo. Usando todos os perfis de intensidade (eixo Y) de todos os quadros ao longo do tempo (eixo X) nos clipes de vídeo, uma imagem espaço-tempo foi obtida e usada para calcular o movimento do aglomerado de eritrócitos ao longo do tempo (ou seja, velocidade do fluxo sanguíneo). As inclinações das bandas (ou seja, distância de movimento ao longo do tempo) foram delineadas manualmente (marcadas com linhas vermelhas na Imagem C) e calculadas como velocidade axial do fluxo sanguíneo.
Processamento de imagem para extrair a rede microvascular.
(A) A imagem bruta com tamanho de 5.184 × 3.456 pixels foi redimensionada para 1.024 × 683 pixels. (B) Mapa microvascular após uma série de operações de abertura morfológica. (C) Vasos segmentados usando um processo binário. (D) Imagem esqueletizada obtida a partir das imagens recortadas de 512 × 512 pixels com campo de visão de 7,87 × 7,87 mm, que foi para análise fractal para obter densidade vascular (VD) usando contagem de caixas.
As alterações da microvasculatura e microcirculação conjuntival após a ingestão de Ocufolin™ em pacientes D+PM.
As medições foram realizadas no início, aos 4M e aos 6M após a ingestão do alimento médico. A microcirculação conjuntival medida como Va (A), Vs (B) e Q (C) em pacientes com D+PM aumentou significativamente aos 4M e 6M, em comparação com o início (P < 0,05). Não houve diferenças significativas no D (D) no grupo D+PM entre as visitas (P > 0,05). A VD (E) aos 6M no grupo D+PM foi significativamente maior do que no início (P = 0,017). D+PM, pacientes com retinopatia diabética leve e polimorfismos da metilenotetrahidrofolato redutase; Va, velocidade axial; Vs, velocidade transversal; Q, taxa de fluxo; VD, densidade vascular.
O efeito dos polimorfismos da MTHFR e dos genótipos de HP nas melhorias da microcirculação conjuntival e da microvasculatura em pacientes com D+PM durante a administração de Ocufolin™.
Va e Vs aos 6M aumentaram significativamente ao longo do tempo em todos os subgrupos de genótipos (todos P < 0,05). D e Q aos 6M em pacientes com genótipo HP2-2 diminuíram em comparação com o início. D, Q e VD aos 6M em pacientes com A1298C, C677T e A1298C, e HP1-1/1-2 aumentaram significativamente ao longo do tempo (todos P < 0,05). MTHFR, metilenotetrahidrofolato redutase; HP, haptoglobina; D+PM, pacientes com retinopatia diabética leve e polimorfismos da metilenotetrahidrofolato redutase; Va, velocidade axial do fluxo sanguíneo; Vs, velocidade transversal do fluxo sanguíneo; D, diâmetro do vaso; Q, taxa de fluxo; VD, densidade vascular.
Correlações entre as alterações aos 6M após a ingestão do alimento médico Ocufolin™.
Em pacientes com D+PM, as alterações de Va e Q aos 6M foram positivamente relacionadas à alteração de D (P < 0,05). No entanto, as alterações de Vs e VD aos 6M não foram relacionadas às alterações em D (P > 0,05). D+PM, pacientes com retinopatia diabética leve e polimorfismos da metilenotetrahidrofolato redutase; D, diâmetro do vaso; Va, velocidade axial do fluxo sanguíneo; Vs, velocidade transversal do fluxo sanguíneo; Q, taxa de fluxo; VD, densidade vascular.
Dados Demográficos dos Pacientes com RDM no Início e Indivíduos Normais
D+PM Indivíduos 8 Olhos 16 Sexo (Masculino/Feminino) 6:2 Idade (Anos) 58 ± 7 Duração do Diabetes (Anos) 15 ± 7 Hipertensão (n, %) 5 (62,5%) HbA1C (%) 6,9 ± 0,8 Hcy (μmol/L) 12,2 ± 4,2 Mutação da MTHFR C677T/ A1298C Genótipo HP HP1-1/1-2/2-2
D+PM, pacientes com retinopatia diabética leve e polimorfismos da metilenotetrahidrofolato redutase; PAS, pressão arterial sistólica; PAD, pressão arterial diastólica; PAM, pressão arterial média; FC, frequência cardíaca; bpm, batimentos por minuto; HbA1c, hemoglobina glicada; Hcy, homocisteína; MTHFR, metilenotetrahidrofolato redutase; HP, haptoglobina.
Efeito do Ocufolin™ na pressão arterial e na FC
Variáveis Início 4M 6M Valor de P PAS, mmHg 138,3 ± 15,8 141,3 ± 26,5 134,6 ± 21,2 > 0,05 PAD, mmHg 81,8 ± 7,3 83,0 ± 12,5 81,4 ± 9,1 > 0,05 PAM, mmHg 100,6 ± 9,1 102,4 ± 16,8 99,1 ± 12 > 0,05 FC, batimentos/min 68,1 ± 13,2 73,3 ± 10,6 69 ± 13 > 0,05
PAS, pressão arterial sistólica; PAD, pressão arterial diastólica; PAM, pressão arterial média; FC, frequência cardíaca.
Destaques
Ocufolin™ melhorou a microcirculação conjuntival e a microvasculatura em D+PM.
Va, Vs e Q em 6M foram significativamente aumentados.
O VD em 6M foi significativamente maior do que o basal.
As mudanças de D foram positivamente correlacionadas com as mudanças de Va, Q e VD.
Foram encontrados efeitos dos polimorfismos do MTHFR e dos genótipos da haptoglobina.