pmid: "35702297"
title: "Avaliação da atividade antioxidante do alecrim nano- e microencapsulado"
authors: "Jafari SZ, Jafarian S, Hojjati M, Najafian L"
journal: "Food science & nutrition"
pubdate: "2022 Jun"
doi: "10.1002/fsn3.2827"
source: "PMC Full Text"

Avaliação da atividade antioxidante do alecrim nano- e microencapsulado

Autores

Jafari SZ, Jafarian S, Hojjati M, Najafian L

Periodico

Food science & nutrition (2022 Jun)

Conteudo

Avaliação da atividade antioxidante do extrato de folhas de alecrim (Rosmarinus officinalis L.) nano e microencapsulado em gomas de sementes de agrião (Lepidium sativum) e manjericão (Ocimum basilicum) para melhorar a estabilidade oxidativa do óleo de girassol
Resumo
Tem havido interesse no uso de extrato vegetal como agente conservante natural para melhorar a estabilidade oxidativa de óleos vegetais. No entanto, os extratos vegetais apresentam baixa estabilidade contra calor e estresse ambiental. Neste estudo, foi medido o potencial antioxidante do extrato de Rosmarinus officinalis L. (RE) nano e microencapsulado obtido pelo método de ultrassonicação. O conteúdo total de fenóis e flavonoides do extrato foi de 174,4 ± 25,9 mg de ácido gálico/g de extrato e 78,30 ± 3,2 mg de rutina/g de extrato, respectivamente. A atividade antioxidante de 50, 100, 200 e 400 ppm de RE foi medida pelos métodos de sequestro de radicais livres DPPH, ensaio de redução férrica e ensaio de β‐caroteno/ácido linoleico, e então comparada com 100 ppm de TBHQ como antioxidante sintético comum. Os resultados mostraram que a atividade antioxidante aumentou com o aumento da concentração do extrato em todos os métodos de avaliação. A atividade antioxidante de 200 ppm do extrato livre e encapsulado em gomas de sementes de agrião (Lepidium sativum) e manjericão (Ocimum basilicum) em diferentes proporções (1:0, 1:1 e 0:1) foi comparada ao óleo de girassol sem antioxidantes e ao óleo contendo TBHQ, armazenados a 60°C por 24 dias. Os índices de oxidação das amostras de óleo incluem valor de peróxido, valor de ácido tiobarbitúrico e valor de p‐anisidina, medidos em intervalos de 4 dias. Foi observada menor oxidação do óleo no óleo contendo extrato nanoencapsulado, seguido pelo extrato microencapsulado, extrato livre e TBHQ. Como a produção de RE nanoencapsulado requer maior tempo e velocidade de homogeneização e devido à ausência de diferença estatisticamente significativa entre as propriedades antioxidantes das nanocápsulas e microcápsulas no óleo, recomenda-se o uso de microcápsulas de RE em goma de semente de manjericão para aumentar a vida útil do óleo de girassol.
O extrato de folhas de alecrim (Rosmarinus officinalis L.) apresentou atividade antioxidante. As gomas de sementes de agrião (Lepidium sativum) e manjericão (Ocimum basilicum) são excelentes revestimentos para encapsular o extrato de alecrim. A estabilidade oxidativa do óleo de girassol aumentou com o uso do extrato de alecrim encapsulado.
INTRODUÇÃO
O girassol (Helianthus annuus) é uma das oleaginosas significativas do mundo. Devido ao alto rendimento de óleo e à ausência de fatores antinutricionais, a área de cultivo aumentou (Yazdan‐Bakhsh et al., ). O óleo de girassol (SFO) contém uma alta quantidade de ácido linoleico, ácidos graxos essenciais e vitamina E (Franco et al., ). Pode sofrer rancificação quando exposto a altas temperaturas e à presença de oxigênio, o que pode levar à perda de qualidade (Jia et al., ). A oxidação do óleo tem efeitos prejudiciais à saúde humana devido à formação de odores rançosos, sabores desagradáveis e descoloração (Razavi & Kenari, ).
No entanto, um antioxidante artificial como hidroxitolueno butilado (BHT), hidroxianisol butilado (BHA), terc-butil-hidroquinona (TBHQ) e galato de propila (PG) poderia inibir a oxidação do óleo e prolongar a vida útil do óleo (Farahmandfar et al., ; Jia et al., ). Devido à demanda mundial por antioxidantes mais naturais, muitos esforços têm sido dedicados a encontrar novos componentes naturais para minimizar ou substituir aditivos sintéticos.
O alecrim (Rosmarinus officinalis L.) é uma planta condimentar comumente usada em alimentos (Moczkowska et al., ). É famoso como antioxidante natural devido à sua forte capacidade antioxidante (Yang et al., ). Vários estudos relataram as atividades antioxidantes do extrato de alecrim (Saini et al., ; Wang et al., ). Foi relatado que o RE poderia ser eficaz no retardamento da oxidação do óleo (Chammem et al., ; Guo et al., ; Moczkowska et al., ; Wang et al., ; Yang et al., ). O uso direto de extratos vegetais não é aplicável devido à interação com componentes alimentares, cor, odor, sabor desagradáveis e potenciais reações de decomposição durante o processamento e armazenamento (Hosseinialhashemi et al., ). A tecnologia de nanoencapsulação que proporciona funcionalidade ao produto final inclui o controle da taxa de liberação, proteção dos ingredientes alimentares e novos sistemas de entrega de alimentos (Razavi et al., ). Ao usar a nanotecnologia, os extratos podem ser encapsulados na forma de nanoemulsões duplas ou multicamadas. As nanoemulsões são um dos sistemas coloidais mais atuais para aplicações alimentícias. A seleção do material de parede como encapsulante para fabricar nanopartículas deve ser feita cuidadosamente com todas as considerações (Razavi et al., ).
Ocimum basilicum L. (Manjericão) e Lepidium sativum L. (Agrião) são comumente cultivados em todo o Oriente Médio e regiões do Mediterrâneo. Ambas as sementes possuem quantidades razoáveis de gomas. Essas sementes comestíveis são conhecidas por terem características promotoras de saúde e são usadas para encapsulação (Mirzabe et al., ).
Embora a atividade antioxidante do RE tenha sido investigada em vários tipos de literatura, não há estudo sobre as propriedades do RE nanoencapsulado com materiais de parede de BSG e CSG e sua atividade antioxidante em óleo de girassol. Portanto, os objetivos deste estudo foram (1) determinar o teor de fenólicos totais do RE, (2) investigar a atividade antioxidante do RE com diferentes métodos, (3) encapsular o RE em gomas nativas de sementes de agrião (Lepidium sativum) e manjericão (Ocimum basilicum), (4) avaliar as propriedades do RE nanoencapsulado e (5) comparar a capacidade antioxidante do TBHQ, extrato livre e encapsulado de alecrim em óleo de girassol durante o armazenamento.
MATERIAL E MÉTODO
Materiais
A planta de alecrim foi obtida do Instituto de Pesquisa de Plantas Medicinais da Universidade de Ciências Agrárias e Recursos Naturais de Sari (Sari, Irã). A goma de semente de manjericão (BSG) e a goma de semente de agrião (CSG) foram obtidas da Reyhan Gum Parsian Co (Teerã, Irã). O óleo de girassol livre de antioxidantes foi obtido da North Agro‑Industrial Oil Company. Outros reagentes e produtos químicos foram adquiridos da Scharlau Chemie (Barcelona, Espanha) ou da Merck Company (Darmstadt, Alemanha).

Métodos
Extração da planta e compostos fenólicos totais
Cinquenta gramas de alecrim seco à sombra foram misturados com 250 ml de solvente etanol:água (80:20) a 35°C por 30 min. A extração foi realizada utilizando um banho ultrassônico (6.5l200 H, Dakshin, Índia) a 35 kHz de frequência. Após filtração em papel filtro Whatman nº 1, o solvente foi evaporado utilizando um evaporador rotativo (Rotavapor R114, Waterbath B480, Büchi, Flawil, Suíça). O extrato final foi mantido a −18°C até análises posteriores (Hammi et al., ).
O conteúdo fenólico total do RE foi determinado por meio do reagente de Folin–Ciocalteu (Razavi & Kenari, ). Resumidamente, 50 µl de RE foram adicionados ao reagente fenol de Folin–Ciocalteu (125 µl), que foi diluído com água destilada na proporção de 1:4. Após 5 min, 250 µl de solução de carbonato de sódio (25%) foram adicionados. A solução foi misturada completamente e então deixada em repouso por 30 min em banho‑maria a 40°C (Memmert, Schwabach, Alemanha). A absorbância foi medida a 760 nm contra o branco preparado que contém todos os produtos químicos e reagentes, exceto o extrato (Razavi & Kenari, ).
Atividade antioxidante do extrato
Para avaliar a atividade antioxidante e a concentração ótima do RE, foram utilizados diferentes métodos de avaliação. A atividade de sequestro do radical DPPH e o poder de redução férrica foram medidos de acordo com o método descrito por Rashidaie Abandansarie. O método descrito por Dias et al. foi utilizado para medir o sistema β‑caroteno/ácido linoleico (Dias et al., ; Rashidaie Abandansarie et al., ). As atividades foram relatadas pela porcentagem de atividade antioxidante. O antioxidante sintético TBHQ foi aplicado como controle positivo a 100 ppm, e as concentrações do extrato foram 50, 100, 200 e 400 ppm. A concentração de 200 ppm de RE, devido à ausência de diferença estatisticamente significativa com o antioxidante sintético TBHQ, foi utilizada para encapsulação do RE e adição ao óleo.
A solução a 0,05% p/v de BSG e CSG como materiais de revestimento em diferentes proporções (1:0, 1:1 e 0:1) foi preparada dispersando o pó seco em água deionizada a 40°C e, após resfriamento, misturada durante a noite para melhorar a hidratação. Para preparar uma emulsão estável, RE (10 ml) combinado com emulsificante Tween 80 (40 ml) e óleo de girassol (50 ml) sob agitação magnética por 15 min. Em seguida, as nano e microemulsões foram criadas misturando a solução em um homogeneizador Ultra-Turrax (IKA T25D, Alemanha) a 10.000 rpm por 5 min e 15.000 rpm por 10 min, respectivamente. Depois disso, as emulsões foram encapsuladas com 0,05% de materiais de revestimento na proporção de 1:5 para formar emulsão água-em-óleo em água (Mohammadi et al., ; Najafi et al., ; Razavi & Kenari, ). As nano e microemulsões foram secas utilizando um liofilizador (L101, Liotop, São Carlos, Brasil) a 0,017 mPa e −57°C por 48 h (Chranioti & Tzia, ).

Tamanho de partícula, potencial zeta, PDI e eficiência de encapsulação das cápsulas

O diâmetro médio Z, o índice de polidispersidade (PDI) e o potencial zeta das partículas foram medidos usando o Zetasizer (equipamento nano ZS90, Malvern, Reino Unido) com base no método de espalhamento de luz a laser. As amostras foram diluídas 10 vezes com água deionizada e colocadas no tubo (Joye et al., ). A concentração de compostos fenólicos na fase hexano foi quantificada, e a eficiência de encapsulação (EE) foi calculada pela Equação 1 (Kenari et al., ):

Microscopia eletrônica de varredura (MEV)

O microscópio eletrônico de varredura (S4800, Hitachi, Japão) foi utilizado para estudar a morfologia das partículas. As amostras foram revestidas com uma fina camada de ouro e transferidas para um evaporador a vácuo. Um feixe de elétrons de alta velocidade com uma voltagem acelerada de 26 kV foi aplicado às amostras, e as imagens escaneadas foram obtidas (Chatterjee & Bhattacharjee, ).

Liberação de compostos fenólicos

As partículas foram colocadas nos frascos McCartney e armazenadas a 60 ± 2°C por 24 dias, e as propriedades de liberação foram realizadas de acordo com Esmaeilzadeh Kenari et al., em intervalos de 4 dias. Assim, 5 g de partículas foram misturados com 5 g de tampão fosfato (pH 7) e centrifugados (Centurion K 2 S series, Reino Unido) a 1500 g à temperatura ambiente por 90 min. Em seguida, a fase inferior foi coletada cuidadosamente, e o teor de fenólicos totais foi determinado por meio do reagente de Folin-Ciocalteu. A quantidade de compostos fenólicos liberados foi determinada usando a seguinte fórmula: Taxa de liberação (%) = 100 − (R2 × 100/R1), onde R2 é a porcentagem de compostos encapsulados (fenólicos totais) na fase aquosa externa, e R1 é a porcentagem de compostos na fase interna (Kenari et al., ).

Testes de óleo
As amostras de óleo incluem (1) óleo sem antioxidante (CNTL), (2) óleo contendo 100 ppm de TBHQ (TBHQ), (3) óleo contendo 200 ppm de RE não encapsulado (FREE), (4) óleo contendo 200 ppm de RE nanoencapsulado (NANO), e (5) óleo contendo 200 ppm de RE microencapsulado (MICR) foram colocadas em uma incubadora a uma temperatura fixa de 60°C por 24 dias. O índice de peróxido (POV), o valor de ácido tiobarbitúrico (TBARS) e o valor de p-anisidina (pAnV) das amostras foram realizados de acordo com os métodos descritos por Chen et al. em intervalos de 4 dias (Chen et al., ).

Análise estatística
A análise estatística foi realizada utilizando o software SPSS Versão 20.0 (Inc., Chicago, IL). Os resultados das amostras de extrato e óleo são apresentados como média ± DP de três repetições. A comparação das médias foi realizada pelo teste post-hoc de Duncan a um nível de confiança de 95% e nível de significância de 5%, utilizando o teste ANOVA de uma via.

RESULTADOS E DISCUSSÃO
Atividade antioxidante, teor de fenólicos totais (TPC) e flavonoides totais (TFC) do extrato
O TPC e o TFC do RE obtido por ultrassom foram de 174,25 ± 4,9 mg de ácido gálico/g e 78,30 ± 3,2 mg de rutina/g, respectivamente. O estudo anterior de Wang et al. investigou o efeito do tempo de extração de 15, 30, 60, 120 e 150 min no teor de fenólicos totais do RE obtido com etanol 80%. Seus resultados relataram a quantidade de TPC na faixa de 10,30–160,70 mg de GA/g de extrato, que é inferior à quantidade relatada no presente estudo (Wang et al., ). Da mesma forma, Saini et al. relataram TPC e TFC para extrato de folhas de alecrim como 136,66 ± 7,41 mg de ácido gálico/g e 37,13 ± 6,04 mg de rutina/g, respectivamente (Saini et al., ). O TPC do extrato de alecrim relatado por outros pesquisadores foi de 32,42 mg de GA/gMS (Moczkowska et al., ), 112,0 mg de GAE/g (Chammem et al., ) e 162,0 mg de GAE/g de extrato (Erkan et al., ). O TFC do extrato de alecrim foi relatado como 24 mg de CE/g de extrato por Wang et al. (Wang et al., ). A razão para a diferença pode estar relacionada às condições de cultivo, época de colheita, variedade da planta, genética, condições de extração, polaridade e tipo de solvente (Erkan et al., ; Yazdan-Bakhsh et al., ).
A atividade antioxidante do RE foi avaliada pela atividade de sequestro do radical DPPH, ensaio de β‐caroteno/ácido linoleico e poder de redução férrica. Como pode ser visto nas Figuras 1, 2 e 3, ao aumentar a concentração do extrato de 50 para 400 mg/L, a atividade antioxidante em todos os métodos aumentou. Não foi observada diferença estatisticamente significativa entre TBHQ e RE nas concentrações de 200 e 400 mg/L. Chammem et al. investigaram a atividade de sequestro de radicais de diferentes concentrações (0,02%, 0,05% e 0,08%) de extrato de alecrim comparativamente a um antioxidante sintético BHT. Uma atividade antioxidante relativamente alta é observada para o extrato de alecrim (Chammem et al., ). Existe uma relação entre a concentração de compostos fenólicos do extrato e a atividade antioxidante dos compostos fenólicos depende de sua estrutura (Esmaeilzadeh Kenari & Razavi, ; Farahmandfar et al., ; Razavi & Kenari, ). O RE contém compostos que são responsáveis pela captura de radicais livres e, portanto, podem ser usados para estabilizar e retardar a oxidação do óleo.
Sequestro do radical DPPH do extrato de folhas de Rosmarinus officinalis L. Letras diferentes indicam diferença estatística significativa entre as amostras a p < .05
Atividade de branqueamento do β‐caroteno/ácido linoleico do extrato de folhas de Rosmarinus officinalis L. Letras diferentes indicam diferença estatística significativa entre as amostras a p < .05
Poder antioxidante de redução férrica do extrato de folhas de Rosmarinus officinalis L. Letras diferentes indicam diferença estatística significativa entre as amostras a p < .05
O RE tem a capacidade de reduzir Fe3+ a Fe2+. Moczkowska et al. relataram maior grau de redução de Fe3+ em maior concentração de extrato de alecrim (Moczkowska et al., ). Pires et al. indicaram que o RE apresentou valores mais baixos no ensaio FRAP em comparação com o antioxidante sintético BHA e até mesmo com o extrato de chá verde. Eles afirmaram que a atividade antioxidante de diferentes extratos estava diretamente relacionada às quantidades de componentes ativos, e que esses compostos ativos no extrato de alecrim eram muito menores do que no extrato de chá verde (Pires et al., ). Rashidaie Abandansarie et al. relataram uma tendência crescente na atividade antioxidante do RE ao aumentar a concentração de 100 para 1600 ppm e também maior atividade antioxidante do que TBHQ tanto no método FRAP quanto no método de sequestro do radical DPPH (Rashidaie Abandansarie et al., ). Os resultados do ensaio de β‐caroteno/ácido linoleico mostraram que o RE tem capacidade de prevenir a peroxidação lipídica do ácido linoleico ao evitar a descoloração do β‐caroteno (Dias et al., ).
Esses resultados são consistentes com os resultados de Saini et al., que relataram que o aumento da concentração do RE aumenta significativamente a atividade de captura de radicais e o poder antioxidante redutor de ferro. Além disso, o RE tem a capacidade de neutralizar os radicais livres DPPH por meio da capacidade de doação de hidrogênio. Eles também relataram um aumento na absorbância do RE com o aumento da concentração de 20 para 100 mg/L no ensaio FRAP (Saini et al.,). O principal antioxidante presente no alecrim é o ácido carnósico, que é responsável por mais de 90% das propriedades antioxidantes do extrato de alecrim (Chen et al.,; Moczkowska et al.,).

Características das nanocápsulas e eficiência de encapsulação

A determinação do tamanho de partícula, PDI, potencial zeta e eficiência de encapsulação das partículas são fatores muito importantes que afetam a estabilidade do sistema coloidal e as propriedades do produto final. Os resultados do tamanho de partícula, PDI, potencial zeta e eficiência de encapsulação do RE encapsulado são mostrados na Tabela 1. Todas as nanocápsulas e microcápsulas apresentaram diâmetros nanométricos (284,2–317,3 nm) e micrométricos (1002,5–1236,2 µm), respectivamente. Rashidaie Abandansarie et al. relataram o diâmetro do RE em goma de semente de manjericão de 154,69 nm, que é menor que o diâmetro das nanocápsulas preparadas no presente estudo (Rashidaie Abandansarie et al.,). O tipo de ingredientes é um parâmetro efetivo no diâmetro das partículas das cápsulas.

Tamanho Z‐médio, PDI, potencial zeta e eficiência de encapsulação de diferentes partículas

Amostra Tamanho Z‐médio (nm) PDI Potencial zeta (mv) Eficiência de encapsulação (%) NCSG 317,3a 0,284c −31,19a 50,25c NBSG 284,2c 0,300a −35,24c 56,36a NMIX 301,4b 0,298b −34,77b 54,88b MCSG 1236,2A 0,229C −31,01A 55,42C MBSG 1002,5C 0,247A −35,72C 61,17A MMIX 1111,7B 0,238B −34,96B 59,25B

Nota
Letras minúsculas diferentes indicam diferenças estatísticas significativas a p < 0,05 entre nanocápsulas. Letras maiúsculas diferentes indicam diferenças estatísticas significativas a p < 0,05 entre microcápsulas.

O PDI mostra a dispersão das partículas. Os valores de PDI variam de 0,0 a 1,0. O PDI de diferentes partículas variou de 0,229 a 0,300. Um PDI mais alto foi observado na partícula preparada com goma de semente de manjericão. Além disso, as nanocápsulas apresentaram maior PDI. Todas as partículas apresentaram índice de PDI ≤ 0,300, o que mostra distribuição monotônica. Um aumento no diâmetro das partículas causou uma diminuição no PDI. Esses resultados estão de acordo com um estudo relatado por Chaari et al. Eles relataram menor PDI em microemulsões de carotenoides em comparação com nanoemulsões e também uma ligeira diminuição no PDI das microemulsões com o aumento do diâmetro das partículas (Chaari et al.,). Um estudo afirmou que o extrato encapsulado em partículas com parede de goma de semente de shahi (Lepidium sativum) apresentou o maior tamanho de partícula do que o encapsulado (Yazdan‐Bakhsh et al.,).
O potencial zeta das partículas variou de −35,24 a −31,19 mv em nanocápsulas e de −35,72 a −31,01 mv em micropartículas. O potencial zeta negativo de todas as partículas está relacionado à presença de grupos aniônicos na goma de semente (Taheri & Jafari, ) e no RE. Os resultados de eficiência de encapsulação de todas as amostras mostraram alta eficiência de encapsulação (≥50,0%), o que indicou condições de encapsulação adequadas. Outras literaturas também relataram eficiência de encapsulação superior a 50% para partículas com materiais de parede polissacarídicos (Rashidaie Abandansarie et al., ; Razavi & Kenari, ). Uma maior viscosidade do material de parede causou um aumento na eficiência de encapsulação das partículas (Razavi et al., ). Portanto, as partículas preparadas com goma de semente de manjericão apresentaram maior eficiência de encapsulação do extrato.
Morfologia das partículas
Uma visualização microestrutural foi realizada para estudar a morfologia da superfície das partículas de goma de semente de agrião/manjericão contendo RE. Os resultados das imagens de microscopia eletrônica de varredura (MEV) das amostras são ilustrados na Figura 4. Todas as partículas eram esféricas com superfície lisa. Nenhuma diferença significativa entre as partículas foi observada. Este resultado está de acordo com a literatura publicada anteriormente, explicando que partículas produzidas pelo método de emulsificação são frequentemente esféricas (Kenari et al., ; Razavi & Kenari, ; Yazdan‐Bakhsh et al., ).
Imagens de MEV do extrato encapsulado de folhas de Rosmarinus officinalis L. em diferentes materiais de parede: MCSG, microcápsula de RE em goma de semente de agrião; MBSG, microcápsula de RE em goma de semente de manjericão; e MMIX, microcápsula de RE em goma de semente de manjericão/goma de semente de agrião; NCSG, nanocápsula de RE em goma de semente de agrião; NBSG, nanocápsula de RE em goma de semente de manjericão; e NMIX, nanocápsula de RE em goma de semente de manjericão/goma de semente de agrião
Taxa de liberação
A determinação da taxa de liberação de compostos fenólicos das partículas durante o tempo de armazenamento é muito importante. A liberação controlada de compostos fenólicos durante o período de incubação afeta a atividade antioxidante das partículas e a vida útil dos produtos. Os resultados da liberação de compostos fenólicos de diferentes partículas durante o período de incubação são mostrados na Tabela 2. Como pode ser observado, em todas as partículas, os compostos fenólicos foram liberados ao longo do tempo e diferenças estatísticas (p < 0,05) foram observadas. O tamanho das partículas é um fator crítico que afeta a taxa de liberação de compostos fenólicos, e partículas pequenas apresentaram maior quantidade de conteúdo fenólico. As amostras de NBSG e MBSG, devido à menor taxa de liberação ao final do período de incubação, foram selecionadas para adição em óleo de girassol.
A liberação de compostos fenólicos do extrato de alecrim encapsulado durante o armazenamento (%)
Amostra 0 4 8 12 16 20 24 NCSG 2,12 Ga 4,16Fa 7,88Ea 12,16 Da 17,21Ca 20,88Ba 24,16Ab NBSG 2,01 Ga 3,52Fbc 5,16Ec 9,48Dc 13,88Cc 16,65Bd 20,72Ae NMIX 2,05 Ga 3,81Fab 6,46Ebc 10,73Dbc 15,43Cb 18,73Bb 22,41Ac MCSG 2,16 Ga 3,17Fcd 4,84Ecd 8,53Dd 13,12Cc 17,43Bc 22,89Abc MBSG 2,15 Ga 3,09Fd 4,59Ed 8,06Dd 10,68Ce 14,36Bf 20,43Ab MMIX 2,19 Ga 3,12Fcd 4,63Ed 8,37Dd 11,11Cd 15,09Be 21,56Ad
Nota
Letras minúsculas diferentes indicam diferenças estatísticas significativas a p < 0,05 entre as amostras. Letras maiúsculas diferentes indicam diferenças estatísticas significativas a p < 0,05 durante o período de incubação.
Testes de óleos
Índice de peróxido
O índice de peróxido (IP) determina a concentração de peróxidos nos estágios iniciais da oxidação lipídica. Um IP mais baixo implica em maior estabilidade oxidativa (Ganji & Sayyed‐Alangi, ; Yang et al., ). As alterações no IP de diferentes amostras de óleo durante o período de incubação são mostradas na Figura 5. Pode-se observar que, em todas as amostras de óleo de girassol, o índice de peróxido aumentou ao longo do tempo (Asadi & Farahmandfar, ; Chammem et al., ; Farahmandfar & Ramezanizadeh, ) e a diferença estatística significativa foi observada em diferentes períodos de incubação, exceto nos dias 0 e 4 das amostras de óleo contendo antioxidante. A amostra controle apresentou o maior IP. Da mesma forma, Yang et al.  relataram que, durante 24 dias de armazenamento, os IPs das amostras de óleo de soja com e sem adição de antioxidantes aumentaram acentuadamente, e o óleo com extrato de alecrim apresentou menor oxidação (Yang et al., ). A queda no IP da amostra CNTL ao final do período de armazenamento deveu-se aos produtos de oxidação primária instáveis, que são sensíveis à decomposição. Esses produtos formam os compostos carbonílicos (Yang et al., ). Em todos os períodos de incubação, o óleo de girassol puro apresentou IPs significativamente (p < 0,05) maiores do que o óleo contendo antioxidantes. O menor IP do óleo com extrato vegetal em comparação com o óleo com antioxidante sintético durante o processo de fritura ou armazenamento também foi relatado por outros pesquisadores (Agregán et al., ; Farahmandfar et al., ; Razavi & Kenari, ; Yazdan‐Bakhsh et al., ). Como pode ser visto na Figura 5, o alecrim encapsulado apresentou maior atividade antioxidante do que o antioxidante sintético, o que está de acordo com os achados de um estudo recente de outros pesquisadores para o extrato de Mentha piperita (Royshanpour et al., ) e extrato de Ferula persica nanoencapsulado (Estakhr et al., ).
Mudança no índice de peróxido de diferentes amostras de OGS durante a incubação, CNTL = óleo sem antioxidante, TBHQ = óleo contendo 100 ppm de TBHQ, FREE = óleo contendo 200 ppm de extrato de RE livre, NBSG = óleo contendo 200 ppm de nanocápsulas NBSG, MSG = óleo contendo 200 ppm de microcápsulas NBSG
O conteúdo de produtos secundários de oxidação como o malondialdeído, que leva à formação de sabores estranhos no óleo, foi expresso pela substância reativa ao ácido tiobarbitúrico—TBARS (Moczkowska et al., ). Os resultados da alteração de TBARS das amostras de óleo durante o período de incubação são mostrados na Figura 6. Foi observada uma diferença nos valores de TBARS entre o dia 0 e o dia 24 em todas as amostras. A amostra de óleo sem antioxidante apresentou um TBARS significativamente maior. Esses resultados estão de acordo com Moczkowska et al. , que revelaram um TBARS mais baixo no óleo de palma contendo extrato de alecrim em comparação com o óleo sem antioxidante ou BHT (Moczkowska et al., ). As amostras com adição de RE encapsulado apresentaram um TBARS reduzido em comparação com as amostras CNTL, TBHQ e FREE. De forma semelhante, Chen et al. investigaram o efeito de RE, BHA, BHT e TBHQ sobre o TBARS do óleo de girassol a 60 ºC por 24 dias. Seus resultados mostraram que o TBARS aumentou gradualmente no óleo de girassol durante o período de armazenamento e acelerou após o 4º dia. Eles também relataram o TBARS máximo para a amostra controle (Chen et al., ), o que está em linha com os resultados do presente estudo. Estudos anteriores de outros pesquisadores também mostraram que o extrato encapsulado de Heracleum lasiopetalum (Yazdan‐Bakhsh et al., ) e Fumaria parviflora (Razavi & Kenari, ) pode retardar a oxidação do óleo em termos de TBARS e prolongar a vida útil do óleo de girassol.
Alteração no valor de ácido tiobarbitúrico de diferentes amostras de SFO durante a incubação, CNTL = óleo sem antioxidante, TBHQ = óleo contendo 100 ppm de TBHQ, FREE = óleo contendo 200 ppm de extrato de RE livre, NBSG = óleo contendo 200 ppm de nanocápsulas de NBSG, MSG = óleo contendo 200 ppm de microcápsulas de NBSG
Valor de p‐anisidina
A análise de p-anisidina é um método adequado para avaliar a oxidação lipídica secundária. À medida que a oxidação do óleo continua, os peróxidos formados não são mais analisados. As mudanças de cor que ocorreram devido à geração de ligações aldeído-carbonila durante a oxidação lipídica secundária foram medidas como valor de p-anisidina (Guo et al., ). Os resultados das mudanças no valor de p-anisidina (PAnV) de diferentes amostras de óleo durante o período de incubação são ilustrados na Figura 7. Neste estudo, como esperado, houve um aumento estatisticamente significativo (p < .05) no PAnV ao longo do período de incubação, independentemente das amostras tratadas com antioxidante. O óleo CNTL apresentou o maior PAnV, o que está de acordo com o resultado relatado por Moczkowska et al., . Um PAnV mais alto indica que um óleo mais rançoso é produzido. Guo et al. revelaram que o maior efeito inibitório na geração de produtos de oxidação secundária foi observado no óleo de palma contendo extrato natural de alecrim (Guo et al., ). Dias et al. estudaram a atividade antioxidante do extrato de alecrim em óleo de soja sob aquecimento acelerado, em comparação com o antioxidante sintético TBHQ. Os resultados deste estudo foram semelhantes aos deles, e o RE foi mais eficaz que o TBHQ na redução do PAnV do óleo (Dias et al., ). Em um estudo realizado por, foi especificado que durante a incubação, o óleo de linhaça com adição de RE apresentou os menores POV e PAnV, o que está relacionado a compostos fenólicos, especialmente carnosol e ácido rosmarínico (Chen et al., ; Wang et al., ). Como esperado, o óleo sem antioxidante foi a amostra mais facilmente oxidada. As amostras de POV, TBARS e PAnV com RE incorporado foram significativamente menores do que as do óleo com adição de antioxidante sintético TBHQ, indicando que o RE foi mais eficaz na estabilização do óleo contra a deterioração oxidativa em comparação com o antioxidante sintético. A atividade antioxidante do TBHQ deve-se ao seu composto fenólico puro. No entanto, o RE é um tipo de extrato bruto e continha uma grande quantidade de mistura de compostos fenólicos com efeito sinérgico (Guo et al., ). A atividade antioxidante dos fenóis deve-se à sua capacidade de eliminar radicais livres, quelar metais e doar elétrons ou átomos de hidrogênio (Chen et al., ).

Mudança no valor de p-anisidina de diferentes amostras de SFO durante a incubação, CNTL = óleo sem antioxidante, TBHQ = óleo contendo 100 ppm de TBHQ, FREE = óleo contendo 200 ppm de extrato de RE livre, NBSG = óleo contendo 200 ppm de nanocápsulas de NBSG, MSG = óleo contendo 200 ppm de microcápsulas de NBSG

CONCLUSÃO
O efeito de diferentes materiais de parede nas características de nano e microcápsulas de RE e o efeito do RE livre e encapsulado na estabilidade do óleo de girassol durante o período de incubação foram investigados. As maiores propriedades antioxidantes foram observadas para o extrato nanoencapsulado, seguidas pelo extrato microencapsulado e as menores para o TBHQ. A adição de antioxidantes, seja TBHQ ou RE, teve um efeito significativo na estabilidade do óleo de girassol durante o período de incubação. A partir dos resultados obtidos no presente estudo, o RE apresentou a maior atividade antioxidante na inibição do processo de oxidação do óleo de girassol, mas o RE em ambas as formas de nano e microcápsulas apresentou as maiores propriedades antioxidantes. Isso está relacionado à liberação controlada de compostos fenólicos das partículas durante o período de incubação. Considerando que a produção de nanocápsulas requer maior tempo e velocidade de homogeneização, mas seus impactos antioxidantes no óleo de girassol não foram estatisticamente significativos. Portanto, os resultados do presente estudo sugerem o uso de RE microencapsulado em goma de semente de manjericão (Ocimum basilicum) para aumentar a vida útil do óleo de girassol em vez do antioxidante sintético TBHQ.
CONTRIBUIÇÃO DOS AUTORES
Seyede Zeynab Jafari: Conceitualização (igual); Investigação (igual). Sara Jafarian: Curadoria de dados (igual); Supervisão (igual); Visualização (igual); Escrita – revisão e edição (igual). Mohammad Hojjati: Metodologia (igual); Supervisão (igual); Escrita – rascunho original (liderança); Escrita – revisão e edição (igual). Leila Najafian: Análise formal (igual); Metodologia (igual).
REFERÊNCIAS
Avaliação da atividade antioxidante do extrato aquoso de Bifurcaria bifurcata em óleo de canola. Efeito da concentração do extrato na estabilidade oxidativa e na geração de compostos voláteis durante o armazenamento do óleo
Estabilidade de fritura do óleo de canola suplementado com extração assistida por ultrassom de Teucrium polium
Encapsulação de carotenoides extraídos de Arqueias halofílicas em micro e nanoemulsões de óleo em água (O/A)
Melhoria da qualidade de óleos vegetais em condições de fritura pela adição de extrato de alecrim
Avaliação comparativa da eficácia antioxidante de extratos de cravo ricos em eugenol encapsulados e não encapsulados em óleo de soja: Vida útil e estabilidade de fritura do óleo de soja
Efeitos antioxidantes de extratos de alecrim em óleo de girassol comparados com antioxidantes sintéticos
Misturas binárias de amido modificado, maltodextrina e quitosana como agentes encapsulantes eficientes de oleorresina de funcho
Efeito de extratos de alecrim (Rosmarinus officinalis) na estabilidade oxidativa e aceitabilidade sensorial do óleo de soja
Atividades antioxidantes do extrato de alecrim (Rosmarinus officinalis L.), óleo essencial de semente preta (Nigella sativa L.), ácido carnósico, ácido rosmarínico e sesamol
Perfil fenólico e atividade antioxidante de compostos fenólicos livres/ligados de gergelim e propriedades de nanopartículas encapsuladas
Incorporação do extrato polifenólico nanoencapsulado de Ferula persica em óleo de soja: Avaliação da estabilidade oxidativa do óleo
Influência das extrações assistida por ultrassom e clássica sobre fenóis totais, taninos, flavonoides, tocoferol e características antioxidantes das partes aéreas de Teucrium polium
Comparação da atividade antioxidante do farelo de arroz Tarom Mahali extraído por diferentes métodos de extração e seu efeito na estabilização do óleo de canola
Atividade antioxidante e teor de fenólicos totais de Capsicum frutescens extraído por CO2 supercrítico, ultrassom e métodos de extração com solvente tradicional
Estabilidade oxidativa do óleo de canola por componentes bioativos de Biarum bovei durante armazenamento em temperatura ambiente
Propriedades funcionais do óleo de girassol para alimentos especiais
Encapsulação de extrato etanólico de gengibre em nanolipossoma e avaliação de sua atividade antioxidante no óleo de girassol
Eficácia antioxidante do extrato etanólico de alecrim em óleo de palma durante fritura e armazenamento acelerado
Otimização da extração assistida por ultrassom de compostos antioxidantes de frutos de Zizyphus lotus tunisianos usando metodologia de superfície de resposta
Aplicação da nanoemulsão do extrato de Pistacia khinjuk em um revestimento biopolimérico para melhorar a extensão da vida útil do óleo de girassol
Propriedades antioxidantes dos extratos de chá de videira (Ampelopsis grossedentata) com diferentes características de cor e inibição da oxidação dos óleos de canola e girassol
Encapsulação de resveratrol em partículas biopoliméricas produzidas por precipitação com antissolvente líquido. Parte 2: Estabilidade e funcionalidade
Otimização da encapsulação do extrato de golpar iraniano (Heracleum persicum) usando goma de semente de sálvia (Salvia macrosiphon): Quitosana como material de parede e seu efeito na vida útil do óleo de soja durante o armazenamento
Propriedades físicas dependentes da umidade de sementes medicinais minúsculas: Parte B: segurelha-de-verão (Satureja hortensis L.), manjericão (Ocimum basilicum L.), agrião (Lepidium sativum L.) e ajowan (Carum copticum L.)
Efeito da adição de extrato de alecrim na estabilidade oxidativa e qualidade do óleo de semente de cânhamo
Aplicação do extrato nanoencapsulado de folha de oliveira no controle da estabilidade oxidativa do óleo de soja
Efeito do processo de secagem e do material de parede nas propriedades do óleo de cardamomo encapsulado
A capacidade antioxidante dos extratos de alecrim e chá verde para substituir o antioxidante carcinogênico (BHA) em hambúrgueres de frango
Efeitos do extrato encapsulado de alecrim na estabilidade oxidativa e microbiológica da carne bovina durante armazenamento refrigerado
Avaliação antioxidante de nanocápsulas carregadas com extrato de Fumaria parviflora L. obtidas por métodos de extração verde na estabilidade oxidativa do óleo de girassol
Fabricação de sistema de liberação de zeína/alginate para modelo de nanoalimento à base de abóbora
Preparação de nanoemulsões de dupla camada com liberação controlada de glicose como prevenção de hipoglicemia em pacientes diabéticos
Melhoria do efeito antioxidante do extrato fenólico de Mentha piperita usando processo de nanoencapsulação
Avaliação da atividade antioxidante do extrato de folhas de alecrim (Rosmarinus officinalis)
Efeitos de um antioxidante natural, extrato de alecrim rico em polifenóis (Rosmarinus officinalis L.), na estabilidade lipídica de óleo rico em ácidos graxos ômega-3 de origem vegetal
O extrato de alecrim pode ser usado como antioxidante sintético para melhorar a estabilidade oxidativa de óleo vegetal
Avaliação das propriedades antioxidantes do extrato de Heracleum Lasiopetalum em nanoemulsão multicamada com revestimento de biopolímero para controlar a estabilidade oxidativa do óleo de girassol