pmid: "34732330"
title: "Sinalização Nrf2/Keap1/ARE: Rumo à regulação específica."
authors: "Ulasov AV, Rosenkranz AA, Georgiev GP, Sobolev AS"
journal: "Life sciences"
pubdate: "2022 Feb 15"
doi: "10.1016/j.lfs.2021.120111"
source: "PMC Full Text"
Sinalização Nrf2/Keap1/ARE: Rumo à regulação específica.
Autores
Ulasov AV, Rosenkranz AA, Georgiev GP, Sobolev AS
Periodico
Life sciences (2022 Feb 15)
Conteudo
Sinalização Nrf2/Keap1/ARE: Rumo à regulação específica
O fator de transcrição Nrf2 governa a expressão de centenas de genes envolvidos na defesa celular contra o estresse oxidativo, a marca registrada de inúmeras doenças, como neurodegenerativas, cardiovasculares, algumas patologias virais, diabetes e outras. A principal via de regulação da atividade do Nrf2 é por meio de interações com a proteína Keap1. Sob normoxia, a Keap1 se liga ao Nrf2 e o direciona para a degradação proteassomal, enquanto a Keap1 é regenerada. Sob estresse oxidativo, as interações entre Nrf2 e Keap1 são interrompidas e o Nrf2 ativa a transcrição dos genes protetores. Atualmente, a ativação do sistema Nrf2 é considerada uma poderosa estratégia citoprotetora para o tratamento de diferentes patologias cuja patogênese depende do estresse oxidativo, incluindo doenças virais de importância fundamental, como a COVID-19. A implementação dessa estratégia é realizada principalmente através da inativação da função "guardiã" da Keap1. Duas abordagens estão sendo desenvolvidas: a modificação da Keap1 por meio de agentes eletrofílicos, que leva à liberação do Nrf2, e a interrupção direta das interações proteína-proteína (IPP) Nrf2:Keap1. Devido à sua estrutura química, os indutores eletrofílicos do Nrf2 podem interagir de forma inespecífica com outras proteínas celulares, levando a efeitos indesejados. Enquanto os inibidores não eletrofílicos da IPP Nrf2:Keap1 podem ser mais específicos, ampliando assim a janela terapêutica.
Resumo gráfico
Introdução
O estresse oxidativo é um dos principais fatores que afetam nossas células devido às espécies reativas de oxigênio (ERO) e radicais livres, constantemente produzidos a partir de fontes internas (metabolismo celular) bem como da exposição externa (luz UV, radiação ionizante, ozônio, toxicantes como fumaça de cigarro, metais pesados, inseticidas e pesticidas, vírus e bactérias, alterando o equilíbrio celular). As mitocôndrias são a principal fonte de ERO endógenas, gerando-as durante a respiração celular. Algumas enzimas citosólicas, como citocromo P450, lipoxigenases e NADPH oxidase, também geram ERO, assim como as oxidases peroxissomais. As ERO participam de processos celulares e organismais normais, atuando como moléculas de sinalização redox com a capacidade de controle rigoroso da localização subcelular e mudanças rápidas nos níveis de oxidantes. Quando a geração de ERO excede seu catabolismo, a oxidação de proteínas intracelulares, lipídios e DNA aumenta, levando ao dano oxidativo de suas funções, formação de moléculas tóxicas e possível transformação dos processos celulares normais em patológicos. Além das ERO, nossas células são expostas a outros toxicantes, como poluentes ambientais, toxinas bacterianas e virais. Para resistir ao amplo espectro de estresses oxidativos e químicos onipresentes, nossas células desenvolveram um sistema de defesa adaptativo, composto por dezenas de genes citoprotetores, cujos produtos fornecem adaptação a diferentes estressores. Esses genes são componentes de diferentes sistemas, como detoxificação de xenobióticos, vias metabólicas antioxidantes baseadas em glutationa e tiorredoxina, transportadores de proteínas de resistência a medicamentos, degradação proteassomal, autofagia, metabolismo de ferro e lipídios, regeneração de NADPH, necessário como cofator para alguns dos sistemas mencionados acima.
A maioria desses genes citoprotetores contém elemento responsivo a antioxidantes, ARE, uma sequência atuante em cis na região reguladora upstream 5′, através da qual a modulação da transcrição ocorre via ligação de fatores de transcrição (FTs) de domínio básico e zíper de leucina (bZIP), o mais proeminente dos quais é o Nrf2 (fator 2 relacionado ao NF-E2 p45). A existência do sistema celular comum, responsável pela quimioproteção, havia sido prevista uma década antes de tal sistema ser descoberto. No artigo de Talalay et al. de 1988, foi proposto que a capacidade da célula de expressar um conjunto de enzimas quimioprotetoras pode ser induzida por uma variedade de moléculas pequenas diferentes, mas com uma propriedade química semelhante. Isso implica a existência de um sistema celular que regula a quimioproteção, e que o sistema deve ter elemento(s)-chave que possam ser ativados durante o estresse. Em 1994, o Nrf2 foi isolado, agora referido como um regulador mestre da defesa antioxidante celular. Quatro anos depois, a proteína celular Keap1 (proteína 1 associada a ECH semelhante a Kelch) foi identificada como um supressor da atividade do Nrf2 e, subsequentemente, demonstrada como um sensor, cujo grupo tiol de resíduos de cisteína reage com moléculas indutoras. O conhecimento convencional sugere que Keap1 é um regulador negativo sensível a redox/eletrófilos da via de sinalização Nrf2/ARE, que, por sua vez, medeia a expressão de centenas de genes envolvidos nos sistemas citoprotetores. Após a descoberta da sinalização Nrf2/ARE, o campo rapidamente explodiu e ainda é uma área de pesquisa em andamento e foco de interesse de numerosos artigos. Como várias revisões aprofundadas podem ser encontradas, mencionamos apenas alguns pontos-chave e nos concentramos principalmente nos dados recentes sobre o papel do Nrf2 em doenças virais emergentes e formas de modular a atividade do Nrf2 de forma mais específica por meio de regulação competitiva.
Nrf2
Estrutura dos domínios proteicos de Nrf2 (A) e Keap1 (B). Os limites dos domínios de Nrf2 e Keap1 são fornecidos de acordo com os artigos de Canning et al., 2015 e Jung et al., 2018.
Fig. 1
Do ponto de vista evolutivo, o sistema Nrf2 é um mecanismo de defesa contra oxidantes e xenobióticos, amplamente conservado em um amplo espectro de organismos, com os primeiros ortólogos de Nrf2 surgindo, segundo algumas estimativas, em fungos há mais de um bilhão de anos. A biologia da interação Nrf2:Keap1 é relativamente bem elucidada. O Nrf2 é uma proteína de 66 kDa, consistindo em 7 regiões funcionais conservadas (Fig. 1a), denominadas domínios de homologia Nrf2-ECH (Neh). O domínio Neh1 contém um motivo básico de zíper de leucina e é responsável pela heterodimerização com seu parceiro transcricional Maf TF e pela ligação ao DNA. O domínio Neh2 interage com Keap1 por meio de dois motivos: ETGE de alta afinidade (Kd ~ 5 nM) e DLG de baixa afinidade (Kd ~ 1 μM). Ambos os motivos são indispensáveis para a regulação por Keap1. Um estudo recente mostrou que Keap1 utiliza vários mecanismos para ativar Nrf2 em resposta a uma ampla gama de estresses ambientais. Um modelo para os mecanismos moleculares que levam à ativação de Nrf2 é o modelo Hinge-Latch, onde o motivo de ligação DLGex do Nrf2 se dissocia do Keap1 como uma trava, enquanto o motivo ETGE permanece ligado ao Keap1 como uma dobradiça. A dissociação da trava DLG é desencadeada por inibidores da interação Keap1-Nrf2 e ocorre durante a ativação de Nrf2 mediada pela proteína p62 induzível por estresse, mas não por indutores eletrofílicos de Nrf2. O domínio Neh2 também contém resíduos de lisina, que são substratos para ubiquitinação e participam da degradação proteassomal de Nrf2 dependente de Keap1. Neh3, Neh4 e Neh5 são domínios transativadores, interagindo com moléculas coativadoras intracelulares. A deleção de Neh3 abole a capacidade do Nrf2 de ativar a expressão gênica mediada por ARE, mantendo intactas a capacidade de dimerização e ligação ao DNA, bem como a localização subcelular. Neh4 e Neh5 agem sinergicamente e recrutam de forma cooperativa a molécula coativadora CBP, que acetila Nrf2, aumentando assim sua atividade. Neh6 permite a regulação independente de Keap1, desencadeada pela fosforilação por GSK3β dos motivos DSGIS e DSAPGS, criando um fosfodegron para a ubiquitinação de Nrf2 pelo complexo Cul1-β-TrCP. O domínio Neh7 também regula a atividade de Nrf2, ligando-se ao receptor α do ácido retinoico, um receptor nuclear, que reprime a atividade de Nrf2.
A via de sinalização Nrf2.
Fig. 2
Em condições não estressadas, o Nrf2 é localizado no citoplasma (Fig. 2 ), e uma fração do Nrf2 citoplasmático está ancorada à membrana mitocondrial externa através da proteína fosfatase mitocondrial serina/treonina PGAM5, formando um complexo ternário com a Keap1 e o Nrf2. A localização nuclear do Nrf2 é regulada pelo equilíbrio de importação/exportação. O Nrf2 contém três sequências de localização nuclear (nos domínios Neh1, Neh2 e Neh3) e duas sequências de exportação nuclear (NES) (NESzip na região bZIP do domínio Neh1 e NESTA no domínio de transativação Neh5). NESTA é um sinal redox-sensível: a oxidação da cisteína 183 em sua estrutura promove a acumulação nuclear do Nrf2, possivelmente impedindo o acesso da exportina nuclear CRM1 à NESTA. A retenção nuclear do Nrf2 é aumentada após a heterodimerização com Maf no núcleo, talvez devido ao mascaramento da NESzip. Em condição não estressada, o fator de transcrição Bach1 compete com o Nrf2 pela ligação ao Maf, reprimindo a transcrição de genes regulados por ARE, sendo que o Nrf2 ativa a expressão de Bach1. O aumento do nível intracelular de heme inibe a regulação negativa de Bach1 sobre o Nrf2, permitindo que o Nrf2 ative genes-alvo, incluindo a heme oxigenase-1 (HO-1), a enzima-chave que regula o catabolismo do heme. Outro regulador negativo do Nrf2 é o c-Myc, que compete pelo ARE e aumenta a degradação do Nrf2. Mecanismos celulares adicionais para o controle do Nrf2, incluindo regulação epigenética, transcricional e pós-transcricional, são revisados em detalhes em outro local.
A Keap1 humana é uma proteína de 69 kDa contendo 27 resíduos de cisteína, a maioria deles acessível para oxidação redox ou conjugação com eletrófilos. A reatividade dos tióis de cisteína da Keap1 depende da concentração e varia para diferentes indutores (o chamado “código da cisteína”), fornecendo uma base para ajuste fino e diferenciação do padrão de resposta para diferentes estressores. Além dos domínios N- e C-terminal, três grandes domínios funcionais da Keap1 (Fig. 1b) foram descritos: BTB, domínio de homodimerização; domínio IVR com as cisteínas mais reativas, atuando como sensores; domínio de repetição Kelch, que se liga ao Nrf2. O BTB e o IVR também participam da ligação à ubiquitina ligase Cul3, realizando a ubiquitinação do Nrf2. Até o momento, o mecanismo de regulação dependente de Keap1 é considerado da seguinte forma. Duas moléculas de Keap1 se ligam ao sítio de alta afinidade ETGE e ao sítio de baixa afinidade DLG do Nrf2, resultando em uma razão estequiométrica de 2:1. Após a homodimerização, a Keap1 faz a ponte entre o Nrf2 e o complexo Cul3/RING-box, que ubiquitina os resíduos de lisina do Nrf2, localizados no domínio Neh2. O Nrf2 ubiquitinado é extraído do complexo com Keap1-Cul3 pela proteína p97 e direcionado para degradação proteassômica, enquanto a Keap1 é regenerada. Assim, sob condições basais sem estresse, a Keap1 se liga ao Nrf2, sequestrando-o da translocação para o núcleo. Durante o estresse, oxidantes ou moléculas eletrofílicas modificam os resíduos de cisteína da Keap1, o que leva a alterações conformacionais e ao desligamento da regulação negativa do Nrf2 dependente de Keap1. A concentração de Keap1 no núcleo é várias vezes menor do que no citoplasma, resultando em um baixo nível de atividade basal do Nrf2. A importação nuclear da Keap1 é independente do Nrf2 e é mediada pela importina α7. Semelhante ao Nrf2, a Keap1 contém NES, garantindo um mecanismo para encerrar a atividade do Nrf2 através de sua exportação para o citoplasma após a recuperação da homeostase redox celular. Outro mecanismo provável para desligar a ativação do Nrf2 é a ubiquitinação e degradação do Nrf2 dentro do núcleo via translocação nuclear do complexo Keap1/Cul3. Um mecanismo adicional de repressão nuclear do Nrf2 foi descoberto durante a investigação da síndrome de Hutchinson-Gilford (HGPS), uma síndrome de envelhecimento prematuro, na qual o Nrf2 é desligado devido à captura na periferia nuclear pela proteína laminina A (progerina) mutada, resultando em estresse oxidativo crônico e efeitos do envelhecimento. A reativação da via do Nrf2 em células de pacientes com HGPS reverteu o estresse oxidativo e os efeitos celulares da HGPS.
Durante o envelhecimento, a atividade do Nrf2 diminui, enquanto o nível de seus inibidores aumenta. Lewis et al. encontraram uma correlação positiva entre a atividade de sinalização constitutiva do Nrf2 e o potencial máximo de longevidade, estudando ratos-toupeira-pelados de vida longa e outras espécies de roedores. Notavelmente, a atividade elevada do Nrf2 correlacionou-se significativamente com o nível dos reguladores negativos do Nrf2, Keap1 e β-TrCP, mas não com a expressão do próprio Nrf2. Em conjunto, esses dados sugerem que, se a teoria dos radicais livres do envelhecimento for válida, o Nrf2 pode ser um regulador chave desse processo.
A quantidade absoluta de Nrf2, Keap1 e Cul3 foi determinada no artigo de Iso et al. usando análises imunoblots quantitativas de cinco linhagens celulares murinas em estados basal e induzido. Surpreendentemente, Nrf2 e Keap1 tendem a ser proteínas celulares muito abundantes, com níveis totais variando, em estado basal, de 50.000 a 300.000 moléculas de Keap1 por célula e de 49.000 a 190.000 moléculas de Nrf2 por célula, excedendo a quantidade de muitos outros fatores de transcrição. Nas células Raw264.7, sob estímulos eletrofílicos, o nível de Keap1 e Cul3 não se altera, enquanto o nível de Nrf2 aumenta quatro vezes no citoplasma/organelas e dez vezes no núcleo, atingindo concentrações de 0,6 µM e 2,7 µM, respectivamente. O controle rigoroso do Nrf2 por diferentes mecanismos resulta em uma rápida renovação do Nrf2: em estado basal, a meia-vida do Nrf2 em diferentes células é de 7–18 min, e diferentes indutores prolongam sua meia-vida em várias vezes. A meia-vida do Keap1 é de 12,7 h e, ao contrário do Nrf2, é encurtada após reagir com estressores. Além do Nrf2, o Keap1 também regula Bcl-2 e IKKβ, promovendo sua degradação.
Proteínas celulares que competem com o Nrf2 pelo Keap1.
Tabela 1
Proteína Motivo de interação Descrição
p62 349DPSTGEL355 proteína de autofagia, direcionando proteínas alvo, incluindo Keap1, para degradação.
prothymosin α 42EENGE46 proteína antiapoptótica, envolvida na proliferação celular.
DPP3 480ETGE483 metalopeptidase dependente de zinco que hidrolisa dipeptídeos no sítio N-terminal e contribui para a renovação de proteínas.
WTX 286SPETGE291 supressor tumoral que medeia a degradação de β-catenina, inibindo assim a via de sinalização WNT/β-catenina.
PALB2 91ETGE94 principal parceiro de ligação do BRCA2, controlando sua localização nuclear, reparo de DNA e função de ponto de verificação.
iASPP 239DLT241 parceiro de ligação e inibidor da transatividade do NF-kB e p53.
CDK20 25ETGE28 proteína quinase que promove a proliferação celular e a radioquimiorresistência.
gankyrin 21ELKE24 e 201ENKE204 oncoproteína que facilita a degradação de p53 e Rb.
HBXIP 110GLNLG114 oncoproteína, transativadora de vários oncogenes, reguladora da apoptose e divisão celular.
MCM3 387ETGE390 subunidade da helicase replicativa do DNA.
IKKβ 36ETGE39 parte do complexo IKK, que ativa o NF-κB após estímulos pró-inflamatórios.
FAM129B 708DLG710 e 718ETGE721 proteína antioxidante
RMP 215EELERQE221 e 246EEKE249 oncogene cujo produto atua como inibidor da PP1γ (proteína serina/treonina fosfatase gama)
Keap1 tem sido relatado como interagindo com mais de uma dúzia de proteínas celulares com um motivo, semelhante ao ETGE do Nrf2. Além disso, análises recentes de bancos de dados identificaram 40 possíveis proteínas celulares que interagem com Keap1 com um motivo semelhante. Essas interações são consideradas um mecanismo de ativação não canônico do Nrf2, uma vez que outros parceiros celulares competem com o Nrf2 pelo Keap1 e o aumento em sua concentração poderia ativar o Nrf2 através do deslocamento direto dele do complexo com o Keap1. O IKKβ, ativador intracelular do NF-κB, contém tanto os motivos ETGE quanto DLG, semelhante ao Nrf2, e o ETGE é essencial para a interação com Keap1. A p62, proteína induzível por estresse, captura o Keap1 com o motivo 349DPSTGEL355 e é o exemplo bem estudado de tais proteínas celulares, interrompendo as interações Nrf2:Keap1. A p62, regulada positivamente pelo Nrf2, participa da autofagia, transportando proteínas para degradação autofágica. A fosforilação do S351 no motivo de interação da p62 pelo mTORC1 melhora significativamente (30 vezes) a afinidade pelo Keap1, mas ainda é várias vezes mais fraca do que o motivo ETGE do Nrf2. Além do deslocamento do Nrf2, a ligação da p62 desencadeia a degradação autofágica do Keap1, resultando em uma inativação mais sustentada do Keap1. A Tabela 1 lista várias proteínas celulares com um motivo, semelhante ao ETGE, que demonstraram competir pelo Keap1. Ao contrário dos exemplos mencionados, a p21, inibidor de quinase dependente de ciclina, liga-se ao Nrf2, tanto aos motivos DLG quanto ETGE, através da sequência 154KRR156, mas compete com o Keap1 apenas por um sítio DLG mais fraco. p21 tem muitas funções, incluindo aquelas envolvidas na regulação do ciclo celular, reparo do DNA, apoptose. O dano ao DNA ativa p21, que bloqueia a progressão do ciclo celular e simultaneamente induz uma resposta celular protetora através da interação com a via do Nrf2.
A rede de genes regulados pelo Nrf2 consiste em centenas de genes, alguns modulados diretamente e outros indiretamente/secundariamente através de fatores de transcrição regulados pelo Nrf2, como Notch1, MafG, C/EBPβ, receptor X retinóide α, receptor de hidrocarboneto arílico. Além disso, a regulação de uma vasta gama de genes poderia ser parcialmente realizada através de comunicação cruzada com outras vias de sinalização, como Notch1, proteínas de choque térmico, Nf-kB, p53, PI3K-AKT e mTOR. Análise em escala genômica usando imunoprecipitação da cromatina com sequenciamento paralelo revelou 645 e 654 genes, que são alvos diretos para a atividade basal do Nrf2 e ativação induzida do Nrf2, respectivamente, dos quais apenas 244 genes são intersecionados.
Significância clínica
A maioria dos genes regulados pelo Nrf2 está associada a vias de defesa celular, como proteção contra o estresse oxidativo. O estresse oxidativo é uma característica comum de muitas doenças, como neurodegenerativas (doença de Alzheimer (DA), doença de Parkinson (DP), esclerose lateral amiotrófica (ELA), esclerose múltipla (EM), demência frontotemporal, ataxia de Friedreich, doença de Huntington), cardiovasculares, doenças inflamatórias (aterosclerose, artrite reumatoide, doença inflamatória intestinal), doenças das vias aéreas (asma, doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC)) e uma série de infecções virais. Uma vez que a geração excessiva de ROS leva à desregulação do equilíbrio redox celular durante essas patologias, a estimulação da sinalização do Nrf2 poderia ser benéfica, oferecendo uma estratégia terapêutica. Múltiplas evidências da literatura apoiam o potencial dessa abordagem para diferentes indicações. Uma meta-análise de 9 conjuntos de dados de microarranjo de DP e 7 de DA revelou várias dezenas de genes comuns contendo ARE regulados negativamente. Variações no gene Nrf2 estão associadas à alteração do risco de DP e da idade de início, afetam a progressão da DA, alteram o risco de ELA e colite ulcerativa. O efeito neuroprotetor da ativação do Nrf2 foi demonstrado em vários estudos com modelos murinos de DP. Em neurônios de DA, o Nrf2 se localiza predominantemente no pool citoplasmático inativo, em contraste com neurônios normais do hipocampo, que apresentam localização principalmente nuclear do Nrf2. A administração intracraniana de lentivírus expressando Nrf2 no hipocampo resultou em melhora significativa do aprendizado espacial em modelo murino de DA, em comparação com o vetor controle. Em outro estudo, a inibição de GSK3β, repressor do Nrf2, aumentou o nível nuclear do Nrf2, sua atividade transcricional, diminuiu o estresse oxidativo e melhorou o aprendizado e a memória. Durante a DPOC, causada por poluentes atmosféricos, incluindo fumaça de cigarro, a atividade da via do Nrf2 é diminuída e a gravidade da doença está correlacionada negativamente com a expressão do Nrf2. A ativação do Nrf2 aumenta a depuração bacteriana pulmonar pelos macrófagos alveolares e melhora a proteção contra infecções bacterianas oportunistas. O Tecfidera (BG-12, dimetilfumarato) é um tratamento de primeira linha aprovado pela FDA para EM surto-remissão, com o mecanismo amplamente aceito envolvendo a ativação do Nrf2 (possivelmente, através do bloqueio de sua degradação). O tratamento com ativadores do Nrf2 também mostrou resultados encorajadores em modelo murino de ELA. Informações adicionais sobre o papel do Nrf2 nos processos neurodegenerativos são fornecidas em revisões recentes.
Nrf2 e seu papel nas infecções por influenza e SARS-CoV-2.
Esta figura foi criada usando imagens do Servier Medical Art da Servier sob uma Licença Creative Commons Atribuição 3.0 Não Adaptada.
Fig. 3
O estresse oxidativo contribui para a patogênese de uma ampla gama de doenças virais e a expressão de diferentes genes regulados por Nrf2 mostrou-se alterada durante infecções virais. O papel do Nrf2 em doenças virais pode ser de sinal oposto, dependendo do tipo de vírus, tipo celular ou estágio da infecção: diferentes proteínas virais durante a replicação promovem estresse oxidativo, que deve ser controlado pelo vírus para garantir condições ideais de replicação. Como o Nrf2 exerce múltiplos efeitos, a maioria dos vírus estudados (por exemplo, o vírus influenza) o induz para facilitar sua replicação por meio da proteção contra efeitos citopáticos induzidos pelo vírus, aumentando a expressão de genes antioxidantes (por exemplo, o vírus influenza (Fig. 3 )). Para o vírus influenza, foi observado em nível de célula única que a expressão de genes regulados por Nrf2 estava associada a uma maior expressão de transcritos virais. Outro exemplo de vírus ativador de Nrf2 é o vírus da dengue, que ativa o Nrf2 por meio da translocação nuclear e, após estresse reticular endoplasmático, essa sinalização leva à produção de TNF-α mediada por Nrf2, que, por sua vez, contribui para a gravidade da doença em pacientes com infecção por DENV. Recentemente, Ferrari et al. demonstraram que durante as primeiras 24 h da infecção por DENV, o Nrf2 é ativado com aumento da expressão de genes antioxidantes, resposta restrita de IFN tipo I, diminuição da produção de ROS e inflamação, limitando assim a resposta antiviral. Mais tarde (24 h–48 h após a infecção), a protease viral NS2B3 cliva o Nrf2, resultando em acúmulo de ROS e aumento da inflamação, criando condições favoráveis à replicação viral. Ao contrário, a estratégia de replicação do vírus sincicial respiratório é promover a degradação proteassomal do Nrf2, suprimindo assim sua atividade antioxidante. Camundongos deficientes em Nrf2 apresentaram gravidade de infecção por RSV significativamente maior em comparação com camundongos do tipo selvagem, e o pré-tratamento com indutor de Nrf2 limita a replicação viral e a inflamação em camundongos com Nrf2 funcional. De forma semelhante, a ativação de Nrf2 inibiu a replicação e a citotoxicidade induzida pelo vírus de várias cepas de rotavírus. Da mesma forma, os agonistas de Nrf2 prejudicaram a replicação do vírus herpes simplex 1, enquanto células infectadas com alta atividade de Nrf2 demonstraram menor nível de replicação do HSV-1. Para algumas infecções virais, os dados são conflitantes e mistos. Bender e Hildt, em sua revisão recente, resumiram relatos sobre o papel do Nrf2 em infecções por hepatite viral.
Os autores levantaram a hipótese de que os resultados contraditórios em relação ao HCV e Nrf2 poderiam ser explicados pela indução de diferentes respostas ao estresse celular em modelos virais agudos e crônicos de HCV (alta produção de ROS e depleção de GSH na fase aguda, e níveis mais baixos de ROS e aumento de GSH na infecção crônica). Uma enxurrada de artigos no último ano sobre a infecção por SARS-CoV-2 demonstra um papel importante do estresse oxidativo e da resposta inflamatória excessiva na patogênese da COVID-19. Além do estresse oxidativo, o Nrf2 também modula a inflamação ao reduzir a expressão das citocinas pró-inflamatórias IL-6 e IL-1β, suprimir a resposta do IFN tipo I e atuar como antagonista da sinalização do NF-kB. Vale ressaltar que o bloqueio de IL-6 tem sido considerado um tratamento contra a COVID-19 e, em algumas condições, a utilização de antagonistas de IL-6 pode ser benéfica. Olagnier et al. demonstraram que a via NRF2 é suprimida em biópsias pulmonares obtidas de pacientes com COVID-19, enquanto ativadores de Nrf2, como 4-octil-itaconato e fumarato de dimetila, desencadeiam a resposta antiviral celular, resultando na inibição da replicação do SARS-CoV-2. Além disso, foi demonstrado que a supressão da atividade do Nrf2 aumentou a expressão de ACE2, receptor do SARS-CoV-2, enquanto a ativação do Nrf2 reduziu o nível de ACE2, o que poderia levar a uma menor internalização do vírus (Fig. 3). Ademais, a ACE2 é uma enzima que cliva angiotensina II (Ang II), um vasoconstritor, em angiotensina 1-7, um vasodilatador. A Ang II produz ROS ao estimular a NADPH oxidase ligada à membrana. A degradação de Ang II pela ACE2 reduz o estresse oxidativo, pois inibe a NADPH oxidase e, portanto, a produção de ROS induzida por Ang II. Se a ACE2 estiver ligada à proteína S, o nível de Ang II aumentará, levando a uma maior presença de espécies superóxido e subsequente dano celular, criando inevitavelmente um ciclo de estresse oxidativo e, em última análise, aumentando o risco de curso grave da COVID-19. Esses achados são consistentes com relatos anteriores, que descrevem a atividade antiviral da heme oxigenase 1, um alvo bem conhecido da indução de Nrf2, contra uma série de vírus, incluindo HIV, HCV, HBV, vírus influenza, vírus Ebola e outros. Ao mesmo tempo, a ativação da via NRF2 por ROS não é linear. Doses baixas de um agente oxidante, como ozônio, podem ter um efeito terapêutico por meio da ativação de NRF2 em doenças virais. Em particular, a ozonioterapia é considerada um método promissor de tratamento para a COVID-19.
Esses esforços, investigando o papel do Nrf2, estabelecem a base para estudos adicionais que podem determinar os efeitos da modulação da via Nrf2 em diferentes doenças virais.
O lado sombrio do Nrf2, a outra faceta desse sistema, é seu papel na promoção do câncer, onde o Nrf2 geralmente é regulado positivamente, proporcionando às células malignas benefícios de sobrevivência e crescimento. Enquanto a ativação de curto prazo do Nrf2 neutraliza o estresse oxidativo, o que pode levar a benefícios clínicos e até suprimir (através da neutralização de ROS e carcinógenos químicos) o início do câncer, especialmente em seus estágios iniciais, a ativação de longo prazo pode promover o desenvolvimento da carcinogênese e ajudar as células cancerígenas a evadir a quimio e radioterapia. A ativação constitutiva da via do Nrf2 é uma característica de diferentes cânceres e frequentemente está associada a um prognóstico ruim. A metanálise do valor prognóstico do Nrf2 em pacientes com tumores sólidos mostrou que o alto nível de expressão do Nrf2 teve impacto negativo na sobrevida. A regulação positiva do Nrf2 pode ser realizada através de oncogenes (KRAS, BRAF, MYC), via mutações no domínio Neh2 do Nrf2 ou via Keap1, incluindo silenciamento epigenético do Keap1, inativação do Keap1 por oncometabólitos, estresse e sinalização hormonal, acúmulo de proteínas celulares que desorganizam Keap1:Nrf2. O papel duplo do Nrf2 no câncer sugere que, para terapia, a estratégia de ativação ou inibição do Nrf2 deve ser escolhida dependendo do contexto. Para malignidades, a inibição da via do Nrf2 pode ser benéfica. Por outro lado, levando em conta que a atividade do Nrf2 em muitos processos degenerativos geralmente desempenha um papel protetor, parece direto aumentá-la através de ativadores adicionais.
Indutores eletrofílicos do Nrf2.
Até o momento, duas principais abordagens foram desenvolvidas para a ativação da via Nrf2: ativadores eletrofílicos e inibidores das interações Nrf2:Keap1. Vários ativadores eletrofílicos estão em estágios clínicos avançados, com uma molécula (Tecfidera) aprovada pela FDA. O mecanismo de sua ação é imitar a ativação natural do Nrf2 induzida por estresse, formando adutos covalentes com os grupos sulfidrila das cisteínas da Keap1. Magesh et al. revisaram uma dúzia de classes de agentes químicos indutores da atividade do Nrf2: aceptores de Michael (ácido 2-ciano-3,12-dioxooleana-1,9(11)-dien-28-oico, CDDO, e fumarato de dimetila), difenóis e quinonas oxidáveis (terc-butil-hidroquinona, tBHQ), isotiocianatos e sulfoxitiocarbamatos (sulforafano), ditioletionas e dialil sulfetos (oltipraz), dimercaptanos vizinhos (ácido lipoico), arsenicais trivalentes, compostos à base de selênio, polienos (licopeno), hidroperóxidos (terc-butil-hidroperóxido), metais pesados e complexos metálicos. A reatividade das diferentes cisteínas da Keap1 em relação a diferentes indutores varia, sendo que alguns resíduos (Cys151, Cys273, Cys288) mostraram-se críticos para a função da Keap1. O mecanismo aparente da indução do Nrf2 induzida por estresse são as alterações conformacionais da Keap1, seguidas pela liberação do Nrf2 do complexo com ela. Os compostos mais estudados induzidos por Nrf2 são o fumarato de dimetila (Tecfidera), o sulforafano, um isotiocianato natural isolado de vegetais crucíferos, como brócolis e couve-flor, e o CDDO-Me, também originado de um produto natural isolado de plantas farmaceuticamente ativas. A atividade de indução do Nrf2 de todos os três agentes é altamente dependente da modificação da Cys151 da Keap1. Embora o mecanismo exato do fumarato de dimetila permaneça desconhecido, sua atividade de indução do Nrf2 foi demonstrada tanto in vitro quanto in vivo. Estudos estruturais do CDDO-Me revelaram a formação do aduto com a Cys151 da Keap1, inibindo a ligação ao Cul3. O bloqueio das interações Keap1:Cul3 também foi proposto como um possível mecanismo mediado pelo sulforafano. A importância da ativação da via Nrf2 como uma abordagem antiviral foi reforçada por vários compostos eletrofílicos. Assim, o fumarato de dimetila e o sulforafano mostraram inibir a replicação do HIV em macrófagos. Além do HIV, a atividade antiviral mediada pelo sulforafano foi demonstrada contra o vírus influenza, vírus sincicial respiratório, vírus da hepatite C e vírus herpes.
O calcanhar de Aquiles dos agentes eletrofílicos é sua reatividade não discriminatória dependente de concentração em relação a uma variedade de moléculas nucleofílicas celulares, estabelecendo a base para efeitos fora do alvo. Algumas moléculas eletrofílicas indutoras de Nrf2 demonstraram reagir com outros alvos celulares, levantando questões sobre a seletividade de tais agentes para a sinalização de Nrf2, o mecanismo complicado de sua ação e a possível influência em outras vias. Mesmo o fumarato de dimetila e o sulforafano, dois dos indutores de Nrf2 mais populares, têm possíveis efeitos independentes de Nrf2. Além disso, o fumarato de dimetila demonstrou efeitos terapêuticos equivalentes em modelo murino de esclerose múltipla em camundongos Nrf2−/− e tipo selvagem, levantando preocupações sobre o mecanismo de sua ação. Por essas razões, recomenda-se minimizar moléculas reativas inespecíficas no processo de desenvolvimento de fármacos, embora não haja uma ligação clara entre toxicidade e formação de adutos fármaco-proteína. Além disso, a similaridade dos indutores de Nrf2 com compostos de interferência em ensaios pan (PAINS, moléculas que mostram bioatividade falsa em muitos ensaios) foi observada por vários autores. Por exemplo, um dos PAINS mais insidiosos, a curcumina, é frequentemente reconhecida como um potente ativador de Nrf2. Além da questão da especificidade, a eficiência de tal indução eletrofílica é desafiada devido ao ambiente citoplasmático desfavorável. Assim, enzimas do sistema de metabolismo de xenobióticos celular conjugam moléculas eletrofílicas reativas com compostos polares abundantes, com subsequente excreção para fora das células. Dessa forma, sendo capazes de afetar todo o tiol proteoma, provocando efeitos independentes de Nrf2, os indutores eletrofílicos possuem uma janela terapêutica estreita.
Por esse motivo, pesquisadores estão progredindo em direção a indutores de Nrf2 mais específicos com toxicidade reduzida, através do desenvolvimento de novos possíveis ativadores de Nrf2 ou do “ajuste” químico de indutores previamente estudados. Assim, Copple et al. compararam a potência de ativação de Nrf2 do sulforafano, DMF e algumas moléculas estruturalmente relacionadas. Usando linhagem celular com expressão estável do repórter ARE de luciferase, eles descobriram que, para vários indutores eletrofílicos, o aumento na capacidade de ativação de Nrf2 está associado a um aumento muito menor na toxicidade e a um melhor índice terapêutico in vitro do que para indutores de Nrf2 bem conhecidos e estudados clinicamente. Outro trabalho recente também demonstrou que a química medicinal oferece uma oportunidade para modificar ativadores de Nrf2 previamente descritos em moléculas menos citotóxicas, preservando a atividade de ativação de Nrf2. Autores de outro estudo apontaram para indutores de Nrf2 pró-eletrofílicos, que se tornam ativados apenas por forte oxidação em células lesionadas. Tal mecanismo explica a preservação do nível de GSH em células não lesionadas, enquanto indutores eletrofílicos, por exemplo DMF, depletam GSH de maneira dependente da concentração através de reação inespecífica com seu grupo tiol, restringindo a capacidade de proteção celular normal. Derivados mais específicos, como o fumarato de monoetila (MEF), reativos apenas à única Cys151 na KEAP1, em vez de DMF, poderiam ser ativadores de Nrf2 mais seguros.
Outra forma de ativação de Nrf2 é a inibição concomitante de sua interação com Keap1. É importante notar que tal abordagem permite um impacto regulatório mais específico. Além disso, levando em conta os efeitos colaterais da ativação constante de Nrf2 e o longo tempo durante o qual a patogênese das doenças neurodegenerativas ocorre, a criação de fármacos para ativação celular ou tecido-específica dessa via é de grande interesse.
Inibidores diretos das interações Nrf2:Keap1
Uma abordagem alternativa amplamente utilizada para a ativação da sinalização de Nrf2 são os ativadores não eletrofílicos do sistema Nrf2, baseados na interrupção direta das interações Nrf2:Keap1. As IPP (interações proteína-proteína) Nrf2:Keap1 são bem descritas para os complexos do domínio Kelch de Keap1 com os motivos ETGE e DLG de Nrf2. O domínio Kelch de Keap1 constitui uma estrutura de seis pás β-hélice, enquanto o domínio Neh2 é intrinsecamente desordenado. O Protein Data Bank (PDB) divulga várias dezenas de estruturas de Keap1, em estados ligado e não ligado. Para os motivos ETGE e DLG, as áreas das superfícies de interface são de aproximadamente 529 Ų e 820 Ų, respectivamente. As áreas de interação relativamente pequenas tornam possível o desenvolvimento de inibidores diretos da IPP Nrf2:Keap1, tanto peptídeos quanto moléculas pequenas.
Um número de ligantes peptídicos foi triado, capazes de deslocar o Nrf2 endógeno do complexo com o Keap1. O comprimento mínimo dos peptídeos do motivo ETGE foi estimado por vários grupos por truncamento do domínio Neh2 do Nrf2. O grupo de Hu investigou por ressonância plasmônica de superfície uma dúzia de peptídeos ETGE de 7mer a 16mer. O peptídeo 7mer (H-EETGEFL-OH) e o peptídeo 8mer (H-DEETGEFL-OH) tiveram afinidade pelo Keap1 muito maior que 1 μM. O peptídeo 9mer Nrf2 (H-LDEETGEFL-OH) foi mais ativo com um Kd de 352 nM. Um aumento de uma ordem na potência foi demonstrado com o peptídeo 10mer (H-QLDEETGEFL-OH), enquanto o alongamento consistente adicional dos peptídeos Nrf2 até 16mer não melhorou a afinidade. O ensaio de polarização de fluorescência (FP) confirmou a classificação semelhante dos mesmos peptídeos com um salto significativo na atividade para os peptídeos maiores que 10mer, enquanto o peptídeo Nrf2 16mer foi significativamente melhor do que as variantes mais curtas. O grupo de Well com o auxílio do ensaio FP também investigou uma série de peptídeos DLG e ETGE. Peptídeos de vários comprimentos foram examinados e os Kd dos peptídeos Nrf2 7mer, 9mer e 10mer foram 96 nM, 54 nM e 51 nM, respectivamente. Em um estudo adicional, os autores aumentaram a lipofilicidade de vários peptídeos Nrf2 7mer através da inclusão do grupo estearoil no N-terminal. Tal modificação aumentou significativamente a afinidade, sendo que a molécula mais potente (St-DPETGEL-OH) foi quase 4 vezes mais eficaz do que o domínio Neh2 do Nrf2.
Alguns promissores inibidores peptídicos de Nrf2:Keap1.
Tabela 2
Composto Afinidade para Keap1 Link H-QLDEETGEFL-OH 27 nM FITC-AFFAQLQLDEETGEFL-OH 29 nM FITC-β-DEETGEF-OH 96 nM FITC-β-LDEETGEFL-OH 54 nM FAM-LDEETGEFLP-OH 51 nM St-DPETGEL-OH 22 nM Ac-c[CLDPETGEYLC]-OH 3 nM Ac-LDPETGEYL-OH 42 nM monobody R1 300 pM GQLDPETGEFL 87 nM c[GQLDPETGEFL] 18 nM
Outras modificações químicas peptídicas não proteinogênicas, como a acetilação N-terminal, melhoram a ligação de algumas variantes de peptídeos ao Keap1, possivelmente através da diminuição de cargas elétricas desfavoráveis do grupo amino livre N-terminal. A inserção de resíduos de cisteína terminal para posterior ciclização cabeça-cauda fortaleceu a ligação ao Keap1. A variante mais forte (Ac-c[CLDPETGEYLC]-OH) demonstrou afinidade de 2,8 nM para Keap1 e IC50 de 9,4 nM no ensaio de atividade FP. Um artigo recente do mesmo laboratório avaliou o potencial do forte ligante linear de Keap1 (Ac-LDPETGEYL-OH, Kd = 42 nM) como uma porção para recrutar Keap1 in vivo, a fim de regular negativamente a proteína alvo celular, Tau. O peptídeo artificial consistia em três partes funcionais: módulos de reconhecimento de Keap1 e Tau, bem como sequência de penetração celular. Os resultados confirmaram a viabilidade de tal abordagem para a degradação intracelular de alvo mediada por Keap1 e dependente de proteassoma. Inibidores peptídicos representativos de Nrf2:Keap1 com Kd avaliado menor que 100 nM estão listados na Tabela 2.
A busca intensiva por potenciais inibidores peptídicos da interação NRF2-Keap1 continua. Muitos peptídeos lineares e cíclicos mostram resultados promissores in vitro. No entanto, nem a ciclização nem a conjugação com peptídeos penetrantes celulares (CPP) conseguiram gerar peptídeos ativos em células em muitos casos. Assim, o desenvolvimento de métodos para a liberação intracelular eficaz de anticorpos, seus fragmentos ou moléculas semelhantes a anticorpos é extremamente importante. Várias estratégias para o direcionamento intracelular de anticorpos por meio de domínios de transdução de proteínas ou seus miméticos, lipossomos, vesículas poliméricas e envelopes virais estão agora sob escrutínio dos desenvolvedores.
Uma estratégia atraente para projetar ligantes de Keap1 com afinidade melhor que a do Nrf2 do tipo selvagem é o uso de um arcabouço proteico alternativo semelhante a anticorpos. Até o momento, o único exemplo dessa estratégia é o artigo publicado por Guntas et al., que desenvolveram uma proteína artificial com afinidade subnanomolar ao domínio Kelch de Keap1. Como arcabouço, os autores usaram um monobody, o 10º tipo de domínio III da fibronectina humana, que forma três alças flexíveis não estruturadas, semelhantes às regiões determinantes de complementaridade dos anticorpos tradicionais, e é bem tolerado à mutagênese. O melhor ligante, clone R1, apresentou a sequência RDEETGEFHWP em uma das alças e demonstrou afinidade por Keap1 15 vezes mais forte (Kd = 300 pM) que o Nrf2 de tamanho completo. Enquanto isso, apesar da excelente afinidade relatada, os efeitos celulares após a transfecção do gene do monobody R1 foram bastante limitados.
Apesar da atividade in vitro promissora em concentrações nanomolares baixas, o efeito celular dos peptídeos derivados de NRF foi exibido na faixa micromolar, sugerindo uma entrada celular bastante baixa. O acesso ineficaz dos inibidores peptídicos ao Keap1 citoplasmático exigiu esforços para o desenvolvimento de abordagens de entrega. A estratégia mais popular para a entrega de peptídeos é o uso de CPP, peptídeos de penetração celular. Steel et al. geraram uma série de peptídeos Nrf2 (10mer, 14mer e 16mer), fundidos ao peptídeo TAT, derivado da proteína Transativadora da Transcrição do HIV-1. O indutor mais potente da expressão de HO-1 (alvo de ativação do Nrf2) foi o peptídeo Nrf2 14mer (LQLDEETGEFLPIQ), conjugado com TAT. A expressão de HO-1 foi regulada positivamente de maneira tempo- e dose-dependente e atingiu o máximo após 6 h e 12 h, medida como mRNA e proteína, respectivamente. Uma abordagem semelhante foi descrita no artigo de Zhao et al., que também sintetizaram o peptídeo TAT-Nrf2. Diferentemente dos estudos anteriores, eles usaram um peptídeo Nrf2 mais curto (DEETGE) e o projetaram para a ativação de Nrf2 no cérebro lesionado. A infusão intracerebroventricular de TAT-DEETGE em camundongos com modelo de lesão cerebral traumática não teve efeitos positivos na regulação do Nrf2. O peptídeo modificado com sítio de clivagem por calpaína entre TAT e DEETGE (TAT-CAL-DEETGE) aumentou a expressão de genes alvo do Nrf2 no cérebro de camundongos lesionados, em comparação com controles saudáveis. Em um estudo adicional, o peptídeo TAT-CAL-DEETGE foi testado como um potencial neuroprotetor contra isquemia cerebral global. Em nível celular, ele diminuiu as interações Keap1:Nrf2 no citoplasma e aumentou a translocação nuclear do Nrf2. Tanto o pré-tratamento intracerebroventricular quanto a administração periférica pós-tratamento deste peptídeo exerceram neuroproteção e preservaram as funções cognitivas em ratos após a indução de isquemia.
A abordagem de pequenas moléculas é uma alternativa aos inibidores peptídicos devido à melhor estabilidade e biodisponibilidade oral. Diferentes técnicas de triagem identificaram dezenas de pequenas moléculas inibidoras das interações Nrf2:Keap1, com vários compostos exibindo atividade na faixa nanomolar. Mimetizando as interações naturais Nrf2:Keap1, Jiang et al. descobriram um composto com alta afinidade pelo Keap1 (Kd – 3.6 nM) e IC50 de 28.6 nM no ensaio FP. Este composto demonstrou atividade celular dose-dependente na indução de Nrf2 e aumentou a expressão de genes regulados por Nrf2. A modificação adicional desta molécula aumentou em duas vezes a atividade celular (IC50 foi determinado como 14.4 nM), induziu genes a jusante do Nrf2 e exibiu efeitos anti-inflamatórios em camundongos. Davies et al. desenvolveram outro potencial inibidor de pequena molécula com alta afinidade pelo Keap1 (Kd = 1.3 nM) e demonstraram sua capacidade de ativar Nrf2 tanto em ensaio celular quanto in vivo em modelo respiratório de rato.
Estes resultados demonstraram o potencial de pequenas moléculas e peptídeos derivados do Nrf2 para inibir as interações Nrf2:Keap1 e, assim, ativar a via Nrf2/ARE. A alta afinidade medida in vitro de tais inibidores poderia ser traduzida em uma atividade clinicamente relevante no caso de levar em conta a enorme concentração intracelular de Keap1 e questões de entrega.
Espaço para regulação competitiva do Nrf2 por fármacos
A modulação de PPI depende das quantidades relativas e da força de interação das proteínas interagentes (incluindo competidores endógenos intracelulares), o que determina a quantidade de inibidor dentro das células para uma inibição eficaz.
Portanto, a entrega eficiente de inibidores de PPI dentro das células é uma questão crítica. Para pequenas moléculas, é relativamente simples alterar sua estrutura para difusão transmembrana, no entanto isso pode diminuir a afinidade pelo alvo. A entrega de peptídeos ao citosol ou núcleo requer o uso de vetores, dos quais o mais popular são os CPPs, um grupo de peptídeos curtos com alta proporção de aminoácidos básicos. A translocação de CPP para o citoplasma ocorre por uma via independente de receptor, cujo mecanismo ainda é questionável. Os CPPs entregam várias cargas dentro das células, mas tipicamente requerem alta concentração para sua atividade, portanto, sem um transporte ativo, a concentração intracelular das cargas entregues é menor do que seu ambiente. Além disso, a inespecificidade inerente da penetração dificulta enormemente o uso in vivo da tecnologia de CPP, restringindo-a principalmente a aplicações in vitro/ex vivo. Assim, há uma necessidade desesperada do desenvolvimento de tecnologias capazes de entregar peptídeos derivados do Nrf2 para a inibição eficiente das interações Nrf2:Keap1 em células-alvo.
Nrf2, um dos TFs sensíveis a estímulos, está no centro da rede complexa, regulando as vias de defesa celular, incluindo a proteção antioxidante. O envolvimento do estresse oxidativo na patogênese de inúmeras patologias apresenta a ativação de curto prazo do Nrf2 em células-alvo como uma estratégia terapêutica citoprotetora viável para o tratamento de algumas doenças neurodegenerativas, cardiovasculares, inflamatórias e possivelmente algumas doenças virais. Vários indutores de Nrf2 de pequenas moléculas estão em ensaios clínicos, com um composto aprovado como terapia oral de primeira linha para EM. Para contornar as desvantagens dos ativadores inespecíficos de Nrf2 que modificam cisteínas, foram desenvolvidos inibidores diretos da PPI Nrf2:Keap1. No entanto, a concentração citoplasmática de Keap1 de até 1 μmol estabeleceu um alto padrão para essa abordagem, estimulando a busca pela estimativa do limiar da concentração mínima do composto disruptor, capaz de competir com o Nrf2 endógeno pela ligação ao Keap1. O surgimento de arcabouços semelhantes a anticorpos oferece enormes oportunidades para o desenvolvimento de pequenos inibidores de PPI de alta afinidade para praticamente qualquer proteína intracelular. A preocupação com a alta concentração intracelular de alvos como Keap1 pode ser aliviada pelo emprego de tecnologias de degradação proteica direcionada, que demonstraram alcançar inibição subestequiométrica do alvo. Um desafio significativo é a criação de sistemas multifuncionais que possam fornecer administração específica in vivo de ativadores eficazes de Nrf2 em células que necessitam de proteção, afetando minimamente outros órgãos e tecidos. Uma possível solução para esse problema poderiam ser novos medicamentos baseados no desenvolvimento de nanotransportadores modulares polipeptídicos ou nanopartículas multifuncionais.
Este trabalho foi apoiado pelas Bolsas 17-14-01304 e 21-14-00130.
Declaração de contribuição de autoria CRediT
Alexey V. Ulasov: Redação – rascunho original. Andrey A. Rosenkranz: Redação – revisão e edição. Georgii P. Georgiev: Aquisição de financiamento. Alexander S. Sobolev: Redação – revisão e edição, Supervisão.
Declaração de interesses concorrentes
Os autores declaram que não possuem interesses financeiros concorrentes conhecidos ou relacionamentos pessoais que possam ter influenciado o trabalho relatado neste artigo.
Referências
Radicais livres e outras espécies reativas em doenças
Oxidantes, estresse oxidativo e a biologia do envelhecimento
Sinais oxidantes e estresse oxidativo
ROS como moléculas sinalizadoras: mecanismos que geram especificidade na homeostase de ROS
Doenças neurodegenerativas e estresse oxidativo
A rede regulatória Nrf2 fornece uma interface entre o metabolismo redox e intermediário
Identificação de um sinal químico comum que regula a indução de enzimas que protegem contra a carcinogênese química
Isolamento do fator 2 relacionado ao NF-E2 (Nrf2), um ativador transcricional de zíper de leucina básico semelhante ao NF-E2 que se liga à repetição tandem NF-E2/AP1 da região de controle do locus da beta-globina
Base molecular do sistema Keap1-Nrf2
Keap1 reprime a ativação nuclear de elementos responsivos a antioxidantes por Nrf2 através da ligação ao domínio amino-terminal Neh2
Evidência direta de que grupos sulfidrila de Keap1 são os sensores que regulam a indução de enzimas de fase 2 que protegem contra carcinógenos e oxidantes
Os mecanismos moleculares que regulam a via KEAP1-NRF2
Direcionamento terapêutico da parceria NRF2 e KEAP1 em doenças crônicas
Modulando NRF2 na doença: o timing é tudo
Conservação do sistema Keap1-Nrf2: uma jornada evolutiva através do espaço e tempo estressantes
Níveis crescentes de oxigênio atmosférico e evolução do Nrf2
Regulação transcricional por Nrf2
Labirintos da regulação do Nrf2
Modificar cisteínas específicas da proteína Keap1 humana sensora de eletrófilos é insuficiente para interromper a ligação ao domínio Nrf2 Neh2
Caracterizações cinéticas, termodinâmicas e estruturais da associação entre o degron Nrf2-DLGex e Keap1
A estrutura da interface Keap1:Nrf2 fornece insights mecanísticos sobre a sinalização Nrf2
A dimerização de adaptadores de substrato pode facilitar a ubiquitinação de proteínas mediada por cullin por um mecanismo de "ancoragem": um modelo de interação de dois sítios para o complexo Nrf2-Keap1
Base molecular para a interrupção da interação Keap1-Nrf2 via mecanismo de Dobradiça & Trava
Keap1 é uma proteína adaptadora de substrato regulada por redox para um complexo de ubiquitina ligase dependente de Cul3
O domínio carboxi-terminal Neh3 de Nrf2 é necessário para a ativação transcricional
Dois domínios de Nrf2 se ligam cooperativamente a CBP, uma proteína de ligação a CREB, e ativam sinergicamente a transcrição
A acetilação de Nrf2 por p300/CBP aumenta a ligação ao DNA específica do promotor de Nrf2 durante a resposta antioxidante
Caracterização estrutural e funcional da degradação de Nrf2 pela glicogênio sintase quinase 3/beta-TrCP
RXRalpha inibe a via de sinalização NRF2-ARE através de uma interação direta com o domínio Neh7 de NRF2
Base estrutural das interações de Keap1 com Nrf2
Desregulação de NRF2 no câncer: de mecanismos moleculares a oportunidades terapêuticas
PGAM5 ancora um complexo ternário contendo Keap1 e Nrf2 às mitocôndrias
Múltiplos sinais de localização nuclear funcionam na importação nuclear do fator de transcrição Nrf2
Nrf2 possui um sinal de exportação nuclear insensível a redox sobreposto ao motivo zíper de leucina
Nrf2 possui um sinal de exportação nuclear sensível a redox no domínio de transativação Neh5
A heterodimerização com pequenas proteínas maf aumenta a retenção nuclear de Nrf2 através do mascaramento do motivo NESzip
BACH1, o gene mestre regulador: um novo alvo candidato para terapia do câncer
Bach1 compete com Nrf2 levando à regulação negativa da expressão do gene NAD(P)H:quinona oxidoredutase 1 mediada pelo elemento de resposta antioxidante (ARE) e indução em resposta a antioxidantes
Novos insights sobre a regulação da expressão gênica mediada por elemento de resposta antioxidante por eletrófilos: indução do repressor transcricional BACH1 por Nrf2
C-myc é uma proteína que interage com Nrf2 e regula negativamente os genes de fase II através de seus elementos responsivos a eletrófilos
Regulação epigenética da sinalização Keap1-Nrf2
Regulação dupla do fator de transcrição Nrf2 por Keap1 e pelas ações combinadas de beta-TrCP e GSK-3
A via de sinalização Nrf2-ARE: uma atualização sobre sua regulação e possível papel na prevenção e tratamento do câncer
NRF2 e as características do câncer
O sistema de defesa antioxidante Keap1-Nrf2 compreende um mecanismo de detecção múltipla para responder a uma ampla gama de compostos químicos
Significado fisiológico dos resíduos de cisteína reativos de Keap1 na determinação da atividade de Nrf2
p97 regula negativamente o NRF2 ao extrair NRF2 ubiquitilado do complexo KEAP1-CUL3 E3
O papel emergente de Nrf2 na função mitocondrial
A flexibilidade regulatória na resposta ao estresse mediada por Nrf2 é conferida pelo ciclo conformacional do complexo proteico Keap1-Nrf2
Monitoramento das interações Keap1-Nrf2 em células vivas individuais
Quantidades absolutas e estado do complexo Nrf2-Keap1-Cul3 dentro das células
A importação nuclear de Keap1 mediada por KPNA6 (Importina {alfa}7) reprime a resposta antioxidante dependente de Nrf2
Keap1 controla a repressão pós-indução da resposta antioxidante mediada por Nrf2 ao escoltar a exportação nuclear de Nrf2
Keap1 regula o transporte sensível à oxidação de Nrf2 para dentro e para fora do núcleo através de um mecanismo de exportação nuclear dependente de Crm1
A oncoproteína nuclear protimosina alfa é um parceiro de Keap1: implicações para a expressão de genes de proteção contra estresse oxidativo
Sinalização Nrf2:INrf2 (Keap1) no estresse oxidativo
Progeria: um paradigma para a medicina translacional
Sulforafano aumenta a eliminação de progerina em fibroblastos de progeria de Hutchinson-Gilford
Repressão da via antioxidante NRF2 no envelhecimento prematuro
Nrf2: regulação molecular e epigenética durante o envelhecimento
O sistema Keap1-Nrf2: um mediador entre estresse oxidativo e envelhecimento
Regulação da sinalização de Nrf2 e longevidade em roedores naturalmente longevos
Redes de transcrição animal como contínuos quantitativos altamente conectados
Keap1 regula tanto o transporte citoplasmático-nuclear quanto a degradação de Nrf2 em resposta a eletrófilos
O sensor de estresse oxidativo Keap1 funciona como um adaptador para a E3 ligase baseada em Cul3 para regular a degradação proteassomal de Nrf2
Aumento da estabilidade proteica como um mecanismo que potencializa a ativação transcricional mediada por Nrf2 do elemento de resposta antioxidante. Degradação de Nrf2 pelo proteassomo 26 S
Degradação do fator de transcrição Nrf2 via via ubiquitina-proteassomo e estabilização por cádmio
Degradação de Keap1 por autofagia para a manutenção da homeostase redox
INrf2 (Keap1) tem como alvo a degradação de Bcl-2 e controla a apoptose celular
Supressão da sinalização de NF-kappaB pela regulação de KEAP1 da atividade de IKKbeta através da degradação autofágica e inibição da fosforilação
Mecanismos canônicos e não canônicos de ativação de Nrf2
Além da repressão de Nrf2: uma atualização sobre Keap1
Predição da energia de ligação de motivos de interação com Keap1 na via antioxidante Nrf2 e design de peptídeos potenciais de alta afinidade
Ativação não canônica do NRF2: novos insights e sua relevância para doenças
A fosforilação de p62 ativa a via Keap1-Nrf2 durante a autofagia seletiva
O substrato da autofagia seletiva p62 ativa o fator de transcrição responsivo ao estresse Nrf2 através da inativação de Keap1
A interação direta entre Nrf2 e p21(Cip1/WAF1) regula positivamente a resposta antioxidante mediada por Nrf2
p21(WAF1) medeia a inibição do ciclo celular, relevante para a supressão do câncer e terapia
Múltiplas funções de p21 no ciclo celular, apoptose e regulação transcricional após dano ao DNA
Um mecanismo não canônico de ativação de Nrf2 pela deficiência de autofagia: interação direta entre Keap1 e p62
Análise estrutural do complexo de Keap1 com um peptídeo de protimosina alfa
Análise proteômica da ubiquitina ligase KEAP1 revela proteínas associadas que inibem a ubiquitinação do NRF2
A indução de NRF2 que suporta a sobrevivência de células de câncer de mama é possibilitada pela interação DPP3-KEAP1 induzida por estresse oxidativo
O gene do tumor de Wilms no cromossomo X (WTX) inibe a degradação da proteína NRF2 através da ligação competitiva à proteína KEAP1
PALB2 interage com KEAP1 para promover a acumulação nuclear e função do NRF2
iASPP é um fator antioxidante e impulsiona o crescimento tumoral e a resistência a medicamentos ao competir com Nrf2 pela ligação a Keap1
CDK20 interage com KEAP1 para ativar NRF2 e promove radiochemorresistência em células de câncer de pulmão
Gankyrin tem um papel antioxidante através da regulação por feedback de Nrf2 no carcinoma hepatocelular
A oncoproteína HBXIP liga-se competitivamente a KEAP1 para ativar NRF2 e aumentar o crescimento e metástase de células de câncer de mama
Identificação e caracterização de MCM3 como um substrato da proteína 1 associada ao ECH tipo kelch (KEAP1)
FAM129B, uma proteína antioxidante, reduz a quimiossensibilidade ao competir com Nrf2 pela ligação a Keap1
A proteína mediadora de RPB5 promove a tumorigênese do colangiocarcinoma e a resistência a medicamentos ao competir com NRF2 pela ligação a KEAP1
Heterodímeros Nrf2-MafG contribuem globalmente para redes antioxidantes e metabólicas
Identificação de novos genes regulados por NRF2 por ChIP-seq: influência no receptor X de retinoide alfa
O fator nuclear derivado de eritróide 2 relacionado ao fator 2 regula a transcrição da proteína beta de ligação ao intensificador CCAAT durante a adipogênese
NRF2 modula a sinalização do receptor de hidrocarboneto arílico: influência na adipogênese
Mapeamento global de sítios de ligação para Nrf2 identifica novos alvos na resposta de sobrevivência celular através de perfilagem por ChIP-seq e análise de redes
Regulação da sinalização de notch1 por nrf2: implicações para a regeneração tecidual
A interação de Hsp90 com INrf2(Keap1) medeia a ativação de Nrf2 induzida por estresse
Regulação negativa da sinalização de NF-kappaB mediada pela E3 ligase KEAP1 através do direcionamento de IKKbeta
O fator de transcrição Nrf2 mantém a expressão basal de Mdm2: uma implicação da regulação da sinalização de p53 por Nrf2
Nrf2 – um alvo terapêutico para o tratamento de doenças neurodegenerativas
O papel do sistema antioxidante Nrf2/ARE na prevenção de doenças cardiovasculares
Visando a via de defesa antioxidante Nrf2-Keap1 para proteção neurovascular no acidente vascular cerebral
Nrf2 no centro do estresse oxidativo e da proteção cardíaca
Nrf2 como alvo terapêutico para doenças reumáticas
Fator de transcrição NRF2 como alvo terapêutico para doenças crônicas: uma abordagem de medicina de sistemas
Estresse oxidativo e vírus da hepatite C
Estresse oxidativo durante a infecção pelo HIV: mecanismos e consequências
Estresse oxidativo como um agente chave na infecção pelo coronavírus da síndrome respiratória aguda grave (SARS-CoV)
Meta-análise da doença de Parkinson e doença de Alzheimer revelou vias comumente prejudicadas e desregulação de genes dependentes de NRF2
Associação de haplótipos do NFE2L2, que codifica Nrf2, com a doença de Parkinson
Variações do NFE2L2 reduzem a resposta antioxidante em pacientes com doença de Parkinson
Associações genéticas de variantes do NFE2L2, que codifica Nrf2, com a doença de Parkinson – um estudo multicêntrico
Haplótipos do NFE2L2, que codifica Nrf2, influenciam a progressão da doença, mas não o risco na doença de Alzheimer e catarata relacionada à idade
Associação de haplótipos do NFE2L2 e KEAP1 com esclerose lateral amiotrófica
Polimorfismo do promotor do gene Nrf2 está associado à colite ulcerativa em uma população japonesa
Modulação in vivo do fenótipo parkinsoniano pelo Nrf2
Neuroproteção mediada por Nrf2 no modelo de camundongo MPTP da doença de Parkinson: papel crítico do astrócito
Alvo farmacológico do fator de transcrição Nrf2 nos gânglios da base fornece terapia modificadora da doença para parkinsonismo experimental
Ativação da via Nrf2-ARE por knockdown de Keap1 com siRNA reduz o estresse oxidativo e fornece proteção parcial contra a neurotoxicidade mediada por MPTP
Expressão de Nrf2 em doenças neurodegenerativas
Injeção intra-hipocampal de um vetor lentiviral que expressa Nrf2 melhora o aprendizado espacial em um modelo de camundongo da doença de Alzheimer
Oligonucleotídeo antissenso contra GSK-3β no cérebro de camundongos SAMP8 melhora o aprendizado e a memória e diminui o estresse oxidativo: envolvimento do fator de transcrição Nrf2 e implicações para a doença de Alzheimer
Equilíbrio Nrf2/Keap1-Bach1 alterado no enfisema pulmonar
Fator 2 relacionado a NF-E2 regulado negativamente em macrófagos pulmonares de fumantes idosos e pacientes com doença pulmonar obstrutiva crônica
A via Keap1-Nrf2-ARE como um potencial alvo preventivo e terapêutico: uma atualização
Efeito neuroprotetor de ativadores de Nrf2/ARE, CDDO etilamida e CDDO trifluoroetilamida, em um modelo de camundongo de esclerose lateral amiotrófica
Via Nrf2-ARE: um alvo emergente contra o estresse oxidativo e a neuroinflamação em doenças neurodegenerativas
O papel da sinalização de Nrf2 na neutralização de doenças neurodegenerativas
A via Nrf2-ARE: um valioso alvo terapêutico para o tratamento de doenças neurodegenerativas
Nrf2 como um potencial alvo para a doença de Parkinson
Modulação terapêutica do estresse oxidativo induzido por vírus através da via antioxidante dependente de Nrf2
O papel do fator de transcrição Nrf2 na infecção viral
NRF2 na infecção viral
Nrf2 protege as células epiteliais alveolares humanas contra lesões induzidas pelo vírus influenza A
Heterogeneidade extrema da infecção pelo vírus influenza em células únicas
A ativação do Nrf2 pelo vírus da dengue causa um aumento na CLEC5A, que aumenta a produção de TNF-alfa por fagócitos mononucleares
O vírus da dengue visa o Nrf2 para degradação mediada por NS2B3, levando ao aumento do estresse oxidativo e da replicação viral
A infecção pelo vírus sincicial respiratório regula negativamente a expressão de enzimas antioxidantes ao desencadear a desacetilação e degradação proteassomal do Nrf2
O vírus sincicial respiratório induz a degradação do NRF2 através de uma via dependente da proteína da leucemia promielocítica - proteína com dedo de anel 4
Atividade antiviral do Nrf2 em um modelo murino de doença pelo vírus sincicial respiratório
RA-839, um agonista seletivo da via Nrf2/ARE, exerce potente eficácia anti-rotaviral in vitro
O sequenciamento de RNA de célula única de células infectadas pelo herpes simplex vírus 1 conecta a ativação do NRF2 a um programa antiviral
Efeito dos vírus da hepatite na via de sinalização Nrf2/Keap1 e seu impacto na replicação viral e patogênese
A patogênese da infecção por SARS-CoV-2 está relacionada ao estresse oxidativo como resposta à agressão
Papel do estresse oxidativo na infecção por SARS-CoV (SARS) e SARS-CoV-2 (COVID-19): uma revisão
O sulforafano induz genes alvo do Nrf2 e atenua a expressão de genes inflamatórios em microglia do cérebro de camundongos adultos jovens e idosos
A ativação da sinalização do Nrf2 aumenta a oncolise do vírus da estomatite vesicular através da supressão da imunidade antiviral mediada por autofagia
Nrf2 suprime a resposta inflamatória dos macrófagos ao bloquear a transcrição de citocinas pró-inflamatórias
A IL-6 é um alvo citocina chave para terapia na COVID-19?
A supressão mediada por SARS-CoV2 da sinalização do NRF2 revela potente atividade antiviral e anti-inflamatória do 4-octil-itaconato e dimetil fumarato
A deficiência de Nrf2 regula positivamente a expressão da enzima conversora de angiotensina 2 intra-renal e do receptor de angiotensina 1–7 e atenua a hipertensão e a nefropatia em camundongos diabéticos
A angiotensina II estimula a atividade da NADH e NADPH oxidase em células musculares lisas vasculares cultivadas
Modulação da imunidade antiviral pela heme oxigenase-1
Potencial atividade citoprotetora da ozonioterapia na SARS-CoV-2/COVID-19
NRF2 e câncer: o bom, o mau e a importância do contexto
O sistema KEAP1-NRF2 no câncer
Nrf2: amigo ou inimigo para a quimioprevenção?
Mecanismos de quimioprevenção do câncer mediados pela via Keap1-Nrf2
Regulação da sinalização do fator 2 relacionado ao NF-E2 para quimioprevenção do câncer: antioxidante acoplado ao anti-inflamatório
O valor prognóstico do NRF2 em pacientes com tumores sólidos: uma meta-análise
A transcrição de Nrf2 induzida por oncogenes promove a desintoxicação de ROS e a tumorigênese
Mutações oncogênicas do NRF2 em carcinomas de células escamosas do esôfago e da pele
Base estrutural para defeitos da atividade de Keap1 provocados por suas mutações pontuais no câncer de pulmão
Interação disfuncional KEAP1-NRF2 no câncer de pulmão de células não pequenas
Hipermetilação do gene Keap1 em linhagens celulares de câncer de pulmão humano e tecidos de câncer de pulmão
Formação de cistos renais em camundongos deficientes em Fh1 é independente da via Hif/Phd: papéis do fumarato na succinação de KEAP1 e sinalização de Nrf2
Segunda droga oral para EM recebe aprovação do FDA
Moduladores de moléculas pequenas da via de resposta antioxidante
Moduladores de moléculas pequenas da via Keap1-Nrf2-ARE como agentes potenciais preventivos e terapêuticos
Keap1 percebe estresse através de três sensores para as moléculas de sinalização endógenas óxido nítrico, zinco e alquenais
Keap calm, and carry on covalently (Keap calmo, e continue covalentemente)
Efeitos do fumarato de dimetila na neuroproteção e imunomodulação
Fumarato de dimetila (Tecfidera): um novo agente oral para esclerose múltipla
Fumarato de dimetila, um imunomodulador e indutor da resposta antioxidante, suprime a replicação do HIV e a neurotoxicidade mediada por macrófagos: um novo candidato para neuroproteção do HIV
Sulforafano inibe a infecção de macrófagos pelo HIV através do Nrf2
A expressão de Nrf2 modifica a entrada e replicação do influenza A em células epiteliais nasais
Sulforafano suprime a replicação do vírus da hepatite C regulando positivamente a expressão de Heme Oxigenase-1 através da via PI3K/Nrf2
Modulação da neurotoxicidade associada à encefalite herpética experimental através do tratamento com sulforafano
Análise proteômica mostra que o triterpenoide oleanano sintético se liga ao mTOR
Mapa proteômico químico de cisteínas sensíveis ao fumarato de dimetila em células T humanas primárias
Fumarato de dimetila: efeitos regulatórios no sistema imunológico no tratamento da esclerose múltipla
O tratamento com fumarato de dimetila induz modulação imune adaptativa e inata independente de Nrf2
Sulforafano inibe a ativação constitutiva e induzida por interleucina-6 do transdutor de sinal e ativador da transcrição 3 em células de câncer de próstata
O fator nuclear kappa B é um alvo molecular para mecanismos anti-inflamatórios mediados por sulforafano
Química: artistas químicos enganosos frustram a descoberta de fármacos
Moduladores não eletrofílicos da via canônica Keap1/Nrf2
Os papéis essenciais da química na triagem de alto rendimento
Moléculas pequenas inibindo interações proteína-proteína Keap1-Nrf2: uma nova abordagem para ativar a função de Nrf2
A curcumina ativa o gene da heme oxigenase-1 através da regulação de Nrf2 e do elemento responsivo antioxidante
A curcumina alivia o estresse oxidativo, inflamação e fibrose renal no rim remanescente através da via Nrf2-keap1
Desintoxicação de compostos eletrofílicos pela catálise da glutationa S-transferase: determinantes da resposta individual a carcinógenos químicos e fármacos quimioterápicos?
As faces mutáveis da glutationa, uma protagonista celular
O estado da glutationa nas células
Ações antioxidantes mediadas por Nrf2/ARE de drogas pró-eletrofílicas
O ajuste químico aumenta tanto a potência em relação ao nrf2 quanto o índice terapêutico in vitro de triterpenoides
Descoberta e estudos de SAR de 3-amino-4-(fenilsulfonil)tetrahidrotiofeno 1,1-dióxidos como ativadores não eletrofílicos do elemento de resposta antioxidante (ARE)
Vantagem terapêutica de fármacos pró-eletrofílicos para ativar a via Nrf2/ARE em modelos da doença de Alzheimer
Avanços recentes na compreensão do NRF2 como alvo farmacológico: desenvolvimento de ativadores pró-eletrofílicos e não covalentes do NRF2 para superar os efeitos colaterais sistêmicos de fármacos eletrofílicos como o fumarato de dimetila
Distúrbios neurodegenerativos em humanos: o papel da glutationa na morte neuronal mediada por estresse oxidativo
Keap1 recruta Neh2 através da ligação aos motivos ETGE e DLG: caracterização do modelo de reconhecimento molecular de dois sítios
Interações conservadas de solvente e cadeia lateral na estrutura de 1,35 Å do domínio kelch de Keap1
Potenciais eletrostáticos diferentes definem os motivos ETGE e DLG como dobradiça e trava na resposta ao estresse oxidativo
Descoberta e desenvolvimento de inibidores da interação proteína-proteína entre a proteína 1 associada a ECH semelhante a kelch e o fator 2 relacionado ao fator nuclear eritroide 2 (KEAP1:NRF2): conquistas, desafios e direções futuras
Análises cinéticas da interação Keap1-Nrf2 e determinação da sequência peptídica mínima de Nrf2 necessária para a ligação a Keap1 usando ressonância de plasmon de superfície
Otimização de sondas peptídicas de Nrf2 marcadas fluorescentemente e desenvolvimento de um ensaio de polarização de fluorescência para a descoberta de inibidores da interação Keap1-Nrf2
Inibidores peptídicos da interação proteína-proteína Keap1-Nrf2
Inibidores peptídicos da interação proteína-proteína Keap1-Nrf2 com ligação e atividade celular melhoradas
Otimização guiada por termodinâmica e cinética de ligação de inibidores peptídicos potentes de Keap1-Nrf2
Descoberta de um PROTAC peptídico dependente de Keap1 para silenciamento de tau pela via de degradação por ubiquitinação-proteassomo
Engenharia de um inibidor competitivo codificado geneticamente da interação KEAP1-NRF2 via design baseado em estrutura e display de fagos
Descoberta de um peptídeo cíclico cabeça-cauda como inibidor da interação proteína-proteína Keap1-Nrf2 com alta potência celular
Otimização de inibidores peptídicos lineares e cíclicos da interação proteína-proteína KEAP1-NRF2
Progresso recente em inibidores da interação proteína-proteína Keap1-Nrf2
Entrega intracelular direcionada de anticorpos: o estado da arte
Monocorpos: miméticos de anticorpos baseados no arcabouço do domínio de fibronectina tipo III
Ensinando truques novos a um arcabouço antigo: monocorpos construídos usando superfícies alternativas do arcabouço FN3
Insights estruturais para engenharia de proteínas de ligação baseadas em arcabouços não anticorpos
Peptídeos penetrantes celulares
Vinte anos de peptídeos penetrantes celulares: dos mecanismos moleculares às terapêuticas
Efeito anti-inflamatório de um peptídeo penetrante celular direcionado à interação Nrf2/Keap1
Uma nova estratégia para ativar genes citoprotetores no cérebro lesionado
Peptídeo permeável celular direcionado à interação Nrf2-Keap1: uma potencial nova terapia para isquemia cerebral global
Inibidores não covalentes de pequenas moléculas da interação entre a proteína 1 associada ao ECH tipo kelch e o fator 2 relacionado ao eritroide nuclear 2 (Keap1-Nrf2) e seu potencial para atingir doenças do sistema nervoso central
A interação proteína-proteína Keap1-Nrf2: um alvo adequado para pequenas moléculas
Descoberta de um potente inibidor da interação proteína-proteína Keap1-Nrf2 baseado na análise de determinantes de ligação molecular
Relação estrutura-atividade e estrutura-propriedade e avaliação exploratória in vivo do inibidor nanomolar da interação proteína-proteína Keap1-Nrf2
Inibidores monoácidos da interação proteína-proteína entre a proteína 1 associada ao ECH tipo kelch e o fator 2 relacionado ao eritroide nuclear 2 (KEAP1:NRF2) com alta potência celular identificados por descoberta baseada em fragmentos
Permeabilidade celular além da regra dos 5
Panorama emergente de peptídeos penetrantes celulares na reprogramação e edição genética
Peptídeos penetrantes celulares: rompendo para o outro lado
Peptídeos penetrantes celulares: 20 anos depois, onde estamos?
Peptídeos penetrantes celulares: design, síntese e aplicações
Peptídeos penetrantes celulares. Uma reavaliação do mecanismo de captação celular
Desenvolvimento da terapia de transdução da proteína p53 usando peptídeos permeáveis à membrana e a aplicação em células de câncer oral
Fatores de transcrição: hora de entregar
Fator de transcrição Nrf2 como um potencial alvo terapêutico para prevenção da tempestade de citocinas em pacientes com COVID-19
A ativação do NRF2 pode ser uma estratégia contra a COVID-19?
Arcabouços proteicos projetados como terapêuticas de próxima geração
Degradação direcionada de proteínas como uma ferramenta de pesquisa poderosa em biologia básica e descoberta de alvos de medicamentos
Monitoramento e decifração de vias de degradação de proteínas dentro das células
Silenciamento proteico catalítico in vivo por PROTACs de pequenas moléculas
Nanotransportadores modulares: uma plataforma de trabalho in vivo multiuso para entrega direcionada de medicamentos
Sistemas nanoparticulados multifuncionais e sensíveis a estímulos para liberação de medicamentos