pmid: "35574070"
title: "Nanoemulsões Bioinseticidas de Óleo Essencial e Frações Lipossolúveis de"
authors: "Manjesh K, Kundu A, Dutta A, Saha S, Neelakanthaiah BS"
journal: "Frontiers in plant science"
pubdate: "2022"
doi: "10.3389/fpls.2022.874221"
source: "PMC Full Text"

Nanoemulsões Bioinseticidas de Óleo Essencial e Frações Lipossolúveis de

Autores

Manjesh K, Kundu A, Dutta A, Saha S, Neelakanthaiah BS

Periodico

Frontiers in plant science (2022)

Conteudo

Nanoemulsões Bioinseticidas de Óleo Essencial e Frações Lipossolúveis de Pogostemon cablin

O presente estudo teve como objetivo desenvolver nanoemulsões (NEs) de óleo essencial (OE) e extrato lipossolúvel (HE) de folhas de Pogostemon cablin utilizando biossurfactante, saponina. O OE hidrodestilado e o HE lipossolúvel foram analisados por GC-MS, que revelou 38,7 ± 2,7% e 37,5 ± 2,1% de patchoulol, respectivamente. OE e HE foram formulados com saponina para preparar as respectivas emulsões grosseiras (EGs); posteriormente, a homogeneização em alta velocidade por 2 min foi seguida de ultrassonicação por 3 min com frequência constante de 50 kHz das EGs, resultando nas respectivas NEs. As NEs foram caracterizadas quanto às propriedades físico-químicas, como estabilidade intrínseca da emulsão, distribuição do tamanho de partícula, índice de polidispersão (PDI) e microscopia eletrônica de transmissão (MET) para morfologia e diâmetros precisos das nanogotas. As EGs e NEs foram investigadas quanto à eficácia inseticida contra adultos de Tetranychus urticae e larvas de Spodoptera litura. NEs estáveis de OE e HE na concentração de 500 μg mL−1 exibiram tamanho de partícula médio correspondente de 51,7 e 89,9 nm, enquanto a imagem de MET revelou gotículas de formato esférico com diâmetros médios de gotícula de 15,3 e 29,4 nm, respectivamente. As NEs de OE e HE apresentaram a maior eficácia na toxicidade de contato (CL50 43,2 e 58,4 μg mL−1) após 48 h e toxicidade fumigante (CL50 9,3 e 13,6 μg mL−1) após 24 h contra T. urticae. Além disso, as NEs de OE mostraram considerável ação antialimentar e deterrente alimentar (IA 99,21 ± 0,74 e ID 99,73 ± 1,24) contra larvas de S. litura.

Introdução

O conceito atual de ferramentas de proteção de cultivos verdes enfatizou a exploração de fito-constituintes voláteis e não voláteis bioativos, que servem como fontes potenciais de novas moléculas com um mecanismo de ação complexo (Pavela e Benelli,). Apesar da enorme versatilidade dos compostos naturais, existem restrições comuns para seus sistemas de liberação, relacionadas à solubilidade e estabilidade aquosas limitadas. Intervenções nanotecnológicas são representadas como uma das soluções promissoras para o problema (Nenaah et al.,; Campolo et al.,). Além disso, interesses crescentes têm sido focados em estudos recentes sobre o desenvolvimento de NEs para encapsulamento de compostos voláteis bioativos/OEs para sua aplicação promissora na agricultura (Khot et al.,). Os OEs têm sido reconhecidos como uma ferramenta promissora de proteção de cultivos ecologicamente benigna (Kundu et al.,); assim, nanoformulações de OEs estão sendo projetadas, desenvolvidas e avaliadas para manejar muitas pragas economicamente importantes (Heydari et al.,).
NEs fornecem uma estrutura onde ingredientes bioativos são dispersos no meio aquoso e estabilizados com o auxílio de partículas tensoativas. As NEs estáveis de óleo em água geralmente são compostas por ingrediente(s) ativo(s) lipofílico(s), tensoativo e água (Noori et al.,). Aparecem com textura geralmente transparente ou levemente translúcida, com diâmetro de partícula dentro de 100 nm (Balasubramani et al.,), uma vez que Sugumar et al. consideraram NEs com tamanho de gotícula variando entre 20 e 200 nm. A homogeneização a alta pressão tem sido utilizada para preparar emulsões com diâmetro reduzido; no entanto, o processo só poderia ser sustentado com alto consumo de energia. A microfluidização é outra técnica de uso intensivo de energia, que cisalha o tamanho das gotículas da emulsão através de colisão molecular sob compartimento microfluídico (McClements,). Estudos relacionados sobre a preparação de NEs usando várias técnicas indicaram a energia ultrassônica como competitiva ou até relativamente superior, empregando dispersão rotor–estator para obter nanogotas uniformes (Kentish et al.,).
O nanodimensionamento de componentes lipofílicos, incluindo EOs, ajuda a formar emulsão cineticamente estável com melhor dispersibilidade em meio aquoso e maior grau de difusão aquosa (Hashem et al.,). Além disso, a biodisponibilidade melhorou, pois NEs com maior área superficial podem penetrar facilmente na parede celular e atingir os sítios de ligação alvo específicos; portanto, a nanoemulsificação reduziu a taxa de aplicação dos ingredientes ativos (Acevedo-Fani et al.,). No entanto, investigações abrangentes são verdadeiramente imperativas para verificar a encapsulação adequada e a estabilidade das nanogotas. Assim, os emulsionantes desempenham um papel crucial, e as concentrações micelares críticas (CMC) dos emulsionantes geralmente determinam a estabilidade cinética da emulsão (Kumar et al.,). Emulsionantes verdes de ocorrência natural, como biossurfactantes, proteínas anfifílicas e polissacarídeos, têm sido explorados para preparar nanoemulsões. Biossurfactantes como saponinas são preferidos, pois são necessários em pequenas quantidades para desenvolver nanogotas estáveis de compostos lipofílicos (McClements e Gumus,). Além disso, saponinas esteroidais foram relatadas por possuírem propriedades inseticidas (Dolma et al.,).
As espécies de Pogostemon são plantas herbáceas perenes, pertencentes à família Lamiaceae, nativas das Filipinas e amplamente distribuídas em climas tropicais quentes e úmidos de países do Sul da Ásia, incluindo a Índia (Kusuma et al.,). O OE volátil de P. cablin é constituído principalmente por sesquiterpenos, nomeadamente, patchouleno e álcool de patchouli (Sundaresan et al.,). Investigações sobre as propriedades biológicas do OE de Pogostemon e fitoquímicos revelaram funções farmacológicas multidimensionais contra um painel de alvos (Hu et al.,; Roshan et al.,). Atividade antialimentar significativa do OE também foi registrada contra pragas cosmopolitas (Huang et al.,). Além disso, o óleo foi relatado como exibindo DL50 0,2 μg/adulto contra Tribolium castaneum (Feng et al.,) e DL50 8,0 μg/inseto contra Choristoneura rosaceana (Machial et al.,). Com base nas suposições de maior eficácia do OE e extratos de Pogostemon, o álcool de patchouli apareceu como o componente-chave responsável por atividades de amplo espectro (Lima et al.,).
Portanto, a hipótese foi construída com a prova de conceito para utilizar o OE e frações lipossolúveis de P. cablin na preparação de NEs com eficácia melhorada contra ácaros e insetos. Com esses antecedentes, a presente pesquisa foi desenhada para perfilar os constituintes químicos voláteis do OE e frações lipossolúveis de P. cablin para o desenvolvimento de um sistema de liberação baseado em NE, na tentativa de obter um potencial bioinseticida.
Materiais e Métodos
Material Vegetal
Folhas frescas de P. cablin (5,0 kg) foram coletadas em campo de agricultor, na vila de Hirisave (12,9172° N e 76,4563° E), próximo ao distrito de Hassan, Karnataka, Índia, durante o mês de abril de 2019. A exsicata (PC-2019-KHV-01) foi autenticada pelo ICAR-National Bureau of Plant Genetic Resources, Nova Delhi, Índia. Folhas frescas foram limpas, suavemente lavadas com água e utilizadas para o isolamento do OE. Folhas secas à sombra foram pulverizadas e utilizadas para extração.
Destilação do OE
Folhas frescas de P. cablin (1,0 kg) foram hidrodestiladas em aparelho de Clevenger (Borosil Glass Works Ltd., Mumbai, Índia) por 12 h contínuas, de acordo com o método relatado por Kundu et al.. OE de coloração amarelo-pálido foi coletado do aparelho. Além disso, o OE foi particionado com éter dietílico (3 × 50 mL) seguido pela passagem através de sulfato de sódio anidro (20 g) usando um funil de vidro e armazenado. O rendimento de OE (%) foi calculado como 1,43% (v/p).
Extração
Folhas grosseiramente pulverizadas (1,0 kg) de P. cablin foram submersas com 2,5 L de hexano (Merck® India Ltd, Mumbai, Índia) e sonicadas por 2 h a 35°C usando sonicador de banho (PCI Analytics Ltd, Mumbai, Índia) seguindo o método relatado por Dutta et al.. A extração foi repetida três vezes com a mesma amostra, seguida por filtração e concentração até a secura sob pressão reduzida em evaporador rotatório (Heidolph, Alemanha) abaixo de 40°C para obter o HE bruto (109,7 g).
Análise por GC-MS
O EO e HE de Pogostemon foram analisados em um GC-MS 5590C (Agilent Technologies®, EUA) usando uma coluna de fase estacionária (30 m × 0,25 μm, 0,25 μm, Agilent Technologies®, EUA) acoplada a um espectrômetro de massas. Amostras (1 μL, cada) foram injetadas através de auto-injetor em modo split-less. Hélio foi usado como gás de arraste com vazão de 1 mL min−1 e pressão de 10 psi. Em seguida, a condição do forno foi programada onde a temperatura começou a 30°C mantida por 1 min., depois aumentada à taxa de 3°C min−1 até 60°C, e então mantida por 5 min. A partir daí, a temperatura foi aumentada à taxa de 2°C min−1 até 150°C com tempo de espera de 5 min. Em seguida, a temperatura foi novamente elevada à taxa de 5°C min−1 até 220°C com tempo de espera de 5 min. Por fim, a temperatura aumentou para 280°C à taxa de 10°C min−1. Ambas as amostras foram analisadas com tempo de corrida de 90 min. Os parâmetros de aquisição do EM foram programados com temperatura da fonte de íons de 170°C, ionização por elétrons de 70 eV, temperatura da linha de transferência de 280°C, atraso do solvente de 3 min., e voltagem do E.M. de 1,419 V. A energia de ionização (70 eV) foi fixada com taxa de varredura de 1 s com faixa de massa de 50–550 amu. Os constituintes voláteis aromáticos foram identificados pela correspondência de seus espectros de massa, padrão de fragmentação, padrão de referência e índice de retenção (literatura e experimental) usando as bibliotecas Adams (2007), NIST e WILEY (Kumar et al.,).
Concentração Micelar Crítica
Saponina (C36H54O11, teor de sapogenina 20–35%) obtida de Quillaja sp. (Merck® India Ltd. (Mumbai, Índia) foi usada como biossurfactante. A CMC da saponina foi determinada a partir da condutância elétrica (CE) de diferentes concentrações. Para isso, 100 a 12.000 μg mL−1 de saponina foram preparados em meio aquoso e os valores de CE foram determinados por um medidor de CE à prova d'água do tipo sonda (HI 98304, Hanna, Nova Délhi, Índia). Inicialmente, a sonda do medidor de CE foi calibrada com a solução de KCl pronta de concentração conhecida. Em seguida, as soluções aquosas de saponina preparadas foram medidas com agitação e manutenção do equilíbrio de temperatura a 25 ± 1°C. A sonda foi lavada completamente com água deionizada após cada medição, começando das concentrações mais baixas para as mais altas de saponina.
Preparação das Nanoemulsões (NEs)
Inicialmente, emulsões grosseiras primárias (CEs) de OE e HE de P. cablin foram preparadas separadamente com o dobro da concentração dos valores de CMC pré-determinados de saponina (0,5%). Para preparar as CEs, OE (0,5g) e HE (0,5g) foram misturados separadamente com o surfactante, e saponina (0,25 g) com quantidade mínima de água deionizada, e finalmente, o volume foi completado para 50 mL e vortexado por 5 min para obter CEs (1%) de OE e HE. As CEs recém-preparadas foram completamente dispersas individualmente em homogeneizador de alta velocidade (IKA Ultra-Turrax T25, Índia) por 2 min. Em seguida, a técnica de diluição de emulsão foi usada para preparar nanoemulsões (NEs) a partir das CEs (Ghosh et al.,). Ambas as CEs (1%) foram diluídas serialmente com solução aquosa de saponina a 0,5% para preparar emulsões secundárias de concentrações mais baixas (31,25–500 μg mL−1) de OE e HE. As emulsões secundárias diluídas foram então submetidas à ultrassonicação usando um ultrassonicador de sonda (MISONIX, Ultrasonic Liquid Processors, EUA) por 3 min. na amplitude de 50 kHz para obter NEs.
Estabilidade das NEs
NEs de OE e HE foram submetidas à centrifugação a 10.000 rpm por 20 min. para verificar qualquer separação de fases. Além disso, a estabilidade das emulsões preparadas foi observada em temperatura ambiente em diferentes intervalos de tempo e em condição de armazenamento acelerado (54 ± 1°C) por 14 dias.
Tamanho de Partícula das NEs
O diâmetro médio das partículas, distribuição, potencial zeta e índice de polidispersão (PDI) das NEs e CEs de OE e HE foram determinados usando um Zetasizer (Microtrac, Alemanha) seguindo os princípios de espalhamento de luz dinâmico. As amostras foram medidas com a ajuda de uma sonda acoplada ao instrumento com uma fonte de luz laser. O programa de análise de dados Microtrac FLEX foi usado para a medição do tamanho médio das gotículas. Todas as medições foram repetidas três vezes para cada concentração.
Microscopia Eletrônica de Transmissão
NEs foram visualizadas usando TEM (JEM 1011, JEOL, Japão) operado a uma voltagem de aceleração de 80 kV para determinar a morfologia e o tamanho das gotículas em todas as concentrações. A grade revestida com Cu (200 mesh) do TEM foi impregnada com cada concentração de NE e mantida por 15 min. para secagem parcial. As grades foram ainda coradas com acetato de uranila a 2% e deixadas secar novamente por 3 h, e micrografias foram adquiridas na magnificação de 80.000x a 100 nm sob TEM.
Ensaios Acaricidas
Cultura de T. urticae
Adultos de Tetranychus urticae foram coletados do ecossistema do tomateiro que não havia sido exposto a nenhum acaricida antes. Os ácaros foram criados na superfície de folhas de amoreira (Morus alba) e mantidos em esponja úmida no laboratório a 27 ± 1°C, 65 ± 5% UR, e fotoperíodo de 13:11 h (L:E) por três gerações antes de realizar o bioensaio para obter cultura pura. Os ácaros levaram de 8 a 10 dias durante o verão e de 10 a 16 dias durante o inverno para completar uma geração.
Os CEs e NEs foram testados contra adultos de T. urticae pelo método de imersão foliar. Amostras teste nas concentrações de 31,25–500 μg mL−1 foram utilizadas para o ensaio acaricida. Folhas de amoreira (Morus alba) foram limpas e tratadas separadamente com diferentes concentrações das amostras. As folhas tratadas foram deixadas secar por 2 h, e 25 adultos de T. urticae foram transferidos para as folhas tratadas. Solução de saponina foi utilizada como controle negativo. Todas as placas de Petri foram incubadas em condições ambientais de laboratório em câmara de criação de insetos mantendo 27 ± 1°C. Observações foram realizadas após exposição de 24 e 48 h. A mortalidade (%) foi calculada, e a análise de probitos e os valores de CL50 (μg mL−1) foram determinados usando software estatístico.
Ensaio de Fumigação
Os CEs e NEs foram testados quanto à toxicidade fumigante contra adultos de T. urticae. Usando um estereomicroscópio, 25 adultos foram transferidos para a folha de amoreira limpa, segurando a parte dorsal do histerssoma com um pincel de manuseio. As folhas foram mantidas dentro de frascos de vidro. Cada tratamento (2,0 mL) de cada amostra foi embebido em bolas de algodão e pendurado com a ajuda da tampa dentro do frasco. As concentrações teste de cada amostra foram mantidas entre 100–5,0 μg mL−1. Cada tratamento foi replicado cinco vezes juntamente com o controle negativo, e os adultos mortos foram contados após 24 h. Os adultos tratados foram considerados mortos se os apêndices não respondessem mesmo após toque com o pincel. A mortalidade (%) foi registrada e, adicionalmente, os valores de CL50 (μg mL−1) foram determinados.
Atividade Inseticida Contra S. litura
Cultura de Insetos
Ovos de S. litura foram coletados de plantas de tomate e incubados em condições laboratoriais com alta UR de 80 ± 5%. Quando os ovos se tornaram de cor escura, maduros (3–4 dias) e foram inoculados para eclosão, as larvas recém-eclodidas foram alimentadas com buquês de folhas de mamona (Ricinus communis) até que as larvas entrassem em pupação. Em seguida, o sexo foi identificado, separado em diferentes frascos para emergência e liberado para oviposição em frasco, que contém solução de mel a 15–20% embebida em um chumaço de algodão para alimentação e uma tira de papel dobrada em zigue-zague para postura de ovos. As culturas coletadas em campo foram criadas em laboratório por 2–3 gerações para obter cultura pura e utilizadas para teste.
Ensaio Larvicida
A atividade larvicida dos CEs e NEs baseados em EO e HE foi estudada usando pulverizador torre Potter em cinco diferentes concentrações teste (500–31,25 μg mL−1). Um disco fresco de folha de mamona foi mantido em cada placa de Petri, e cinco larvas de terceiro instar de S. litura foram liberadas. Cada concentração teste (1,0 mL) foi pulverizada sobre as larvas de terceiro instar de S. litura mantidas na placa de Petri. Cada tratamento foi replicado três vezes. As placas de Petri foram mantidas em condições ambientais de laboratório, e observações foram realizadas após 24 e 48 h. A mortalidade (%) foi calculada, e a concentração letal em termos de valores de CL50 (μg mL−1) foi determinada.
Ensaio Antialimentar
Os CEs e NEs foram avaliados usando o método de disco foliar com e sem escolha (Sengonca et al.,). Resumidamente, folhas frescas de mamona foram coletadas no campo e limpas completamente. As folhas foram cortadas uniformemente mantendo o tamanho desejado do disco (3 × 3 cm²), foram mergulhadas em várias concentrações de teste (500–31,25 μg mL⁻¹) separadamente e deixadas secar ao ar à temperatura ambiente por 3 h. Além disso, discos foliares mergulhados em solução de saponina foram usados como controle negativo. Em cada placa de Petri, uma camada de papel filtro úmido foi colocada para evitar o ressecamento dos discos foliares, se houver. Uma larva de terceiro instar foi introduzida em cada placa tratada e colocada em uma incubadora a 27 ± 1°C com 65 ± 5% de UR e um fotoperíodo de 14:10 (L: O). Cada tratamento foi replicado oito vezes. A observação das larvas foi feita após 24 h de exposição para determinar o efeito em seu comportamento alimentar. As larvas foram consideradas estéreis e não conseguiram se alimentar das folhas; no entanto, a maioria das placas tratadas, próximo ao consumo completo das folhas, foi observada no controle. A alimentação das folhas tratadas e controle foi medida após 24 h usando um Medidor de Área Foliar (ADC Bioscientific Ltd., Índia), e o índice antialimentar (IA) foi determinado pela seguinte equação IA% = [(1 – T/C) × 100], onde T é a área média da folha tratada consumida e C é a área média da folha consumida sem tratamento. O Índice de Alimentação (IF) foi calculado como [(C – T)/(C + T)] × 100.
Análise Estatística
Os dados foram medidos usando o Statistical Package for the Social Sciences (SPSS, Versão 14.0, IBM, NY, EUA). Os resultados foram expressos como média±desvio padrão (DP), e as diferenças entre as variáveis foram testadas usando ANOVA de uma via. O nível de significância estatística foi determinado em valor de p < 0,05.
Resultados
Composição Volátil do EO e HE
Os constituintes voláteis do EO das folhas de P. cablin foram identificados por GC-MS, que mostrou vários picos, correspondendo a vinte e quatro mono e sesquiterpenoides, representando 96,9% do óleo (Tabela 1). Os hidrocarbonetos sesquiterpênicos (55,5%) foram os mais abundantes, seguidos pelos sesquiterpenos oxigenados (40,6%). O álcool de patchouli (38,7 ± 2,7%) foi encontrado como o principal sesquiterpeno oxigenado, seguido por α-bulneseno (18,1 ± 1,2%) e α-guaieno (17,7 ± 1,2%). Outros sesquiterpenos principais do óleo foram trans-β-cariofileno (3,7 ± 0,5%), β-patchouleno (3,6 ± 0,5%), β-elemeno (3,3 ± 0,4%), β-guaieno (3,2%), α-patchouleno (2,6 ± 0,3%) e α-salineno (2,5 ± 0,2%). Apenas três hidrocarbonetos monoterpênicos, como α-pineno (0,2 ± 0,0%), β-pineno (0,3 ± 0,1%) e dl-limoneno (0,2 ± 0,0%), foram identificados, representando apenas 0,7% do EO.
Composição química dos componentes orgânicos voláteis do EO e do HE das folhas de P. cablin.
aCompostos bRIexp cRIlit dRA (%) eIdentificação EO HE α-Pineno 928 932 0,2 ± 0,0 – RI, MS β-Pineno 969 974 0,3 ± 0,1 – RI, MS dl-Limoneno 1.018 1.024 0,2 ± 0,0 – RI, MS Nonanal 1.103 1.105 – 3,0 ± 0,4 RI, MS Tridecano 1.302 1.308 – 0,6 ± 0,1 RI, MS trans-β-Cariofileno 1.409 1.412 3,7 ± 0,5 4,3 ± 0,5 RI, MS γ-Elemeno 1.430 1.436 3,3 ± 0,4 0,5 ± 0,1 RI, MS α-Guaieno 1.436 1.440 17,7 ± 1,2 12,4 ± 0,9 RI, MS Aromadendreno 1.438 1.439 0,5 ± 0,1 - RI, MS β-Patchouleno 1.441 1.443 3,6 ± 0,5 0,2 ± 0,0 RI, MS α-Patchouleno 1.452 1.457 2,6 ± 0,3 3,6 ± 0,5 RI, MS Seicheleno 1.458 1.460 - 2,7 ± 0,3 RI, MS α-Selineno 1.474 1.475 2,5 ± 0,2 0,1 ± 0,0 RI, MS γ-Gurjuneno 1.478 1.479 0,1 ± 0,0 - RI, MS β-Selineno 1.481 1.487 0,2 ± 0,0 - RI, MS β-Guaieno 1.482 1.490 3,2 ± 0,4 2,5 ± 0,3 RI, MS α-Bulneseno 1.509 1.505 18,1 ± 1,2 7,8 ± 0,7 RI, MS Globulol 171 1.575 0,1 ± 0,0 – RI, MS Óxido de cariofileno 1.575 1.578 0,4 ± 0,1 – RI, MS Viridiflorol 1.607 1.612 0,5 ± 0,2 – RI, MS Cubenol 1.634 1.642 0,2 ± 0,0 – RI, MS Álcool de patchouli 1.677 1.680 38,7 ± 2,7 37,5 ± 2,1 pad, RI, MS (Z,Z)-Farnesol 1.721 1.718 0,2 ± 0,0 – RI, MS Óxido de ledeno (I) 1.876 1.890 0,6 ± 0,1 – RI, MS Ácido hexadecanoico 1.958 1.964 – 2,1 ± 0,2 RI, MS Ácido octadecenoico 2.147 2.140 – 6,4 ± 0,5 RI, MS Ácido octadecanoico 2.186 2.188 – 2,4 ± 0,3 RI, MS Docosano 2.213 2.208 – 2,3 ± 0,3 RI, MS Tetracosano 2.395 2.402 – 2,1 ± 0,3 RI, MS Esqualeno 2.837 2.829 – 1,3 ± 0,2 RI, MS Nonacosano 2.891 2.900 – 0,8 ± 0,2 RI, MS Tricontano 2.989 3.000 – 0,9 ± 0,2 RI, MS Total identificado (%) 96,9 93,5 Classificado por grupos funcionais Hidrocarbonetos monoterpênicos (%) 0,7 – Hidrocarbonetos sesquiterpênicos (%) 55,5 34,1 Sesquiterpenos oxigenados (%) 40,6 38,7 Aldeídos – 3,0 Ácidos graxos de cadeia longa – 10,9 Hidrocarbonetos de cadeia longa – 5,0
Os compostos estão listados em ordem de eluição em uma coluna HP-5MS.
Índice de retenção na coluna HP-5MS, determinado experimentalmente usando séries homólogas de alcanos C8-C30.
Índice de retenção obtido de Adams (2007), NIST (2012) e bibliotecas WILEY.
Os valores de área relativa % são expressos como média ± DP.
Métodos de identificação: pad, baseado na comparação com padrão de referência; RI, baseado na comparação do RI calculado com aqueles relatados em Adams e NIST; MS, baseado na comparação com as bases de dados MS WILEY e NIST 12.
O espectro de massas do álcool de patchouli mostrou pico do íon molecular [M]+ em m/z 222, que foi posteriormente fragmentado para fornecer picos de íons-filhos em m/z 207, 179 e 161 após perda sequencial de grupos metila e hidroxila. Outros picos em m/z 138, 125, 98, 81 e 69 também se originaram devido à clivagem subsequente de hidrocarbonetos (Figura 1). Da mesma forma, o α-bulneseno foi caracterizado por seu pico [M]+ característico em m/z 204 e posteriormente fragmentado em picos de íons-filhos em m/z 189, 175, 161, 147, 135, 121, 107, 93 e 79 com remoção de grupos metileno e metila (Figura 1).
Padrão de fragmentação por GC-MS do álcool de patchouli mais abundante caracterizado no EO e HE de P. cablin.

Dezenove composições aromáticas, representando 93,5% do HE lipossolúvel não polar, foram identificadas por GC-MS e mencionadas de acordo com sua eluição na fase estacionária HP-5MS (Tabela 1). No entanto, o teor total de hidrocarbonetos sesquiterpênicos da fração solúvel em hexano foi de 34,1%, enquanto os sesquiterpenos oxigenados foram de 38,7%. O álcool de patchouli mais abundante (37,5 ± 2,1%) foi identificado como o único sesquiterpeno oxigenado. Além disso, ácidos graxos de cadeia longa e hidrocarbonetos de cadeia longa foram encontrados no HE, representando 10,9% e 5,0%, respectivamente. Entre os ácidos graxos, o ácido octadecenóico (6,4 ± 0,5%) foi identificado como o composto majoritário, seguido pelo ácido octadecanóico (2,4 ± 0,3%) e pelo ácido hexadecanóico (2,1 ± 0,2%). Da mesma forma, hidrocarbonetos de cadeia longa, principalmente docosano (2,3 ± 0,3%), tetracosano (2,1 ± 0,3%), esqualeno (1,3 ± 0,2%), triacontano (0,9 ± 0,2%) e nonacosano (0,8 ± 0,2%), foram identificados.

Caracterizações e Estabilidade das NEs

Com base na condutância elétrica registrada de várias concentrações de saponina, uma mudança brusca foi observada a 0,25% (Figura 2); assim, a concentração dupla, 0,5%, foi selecionada para a preparação final das CEs e NEs. As CEs primárias com 1% de concentração de EO (m/m) e HE foram preparadas separadamente e diluídas para obter várias concentrações de teste (500–31,25 μg mL⁻¹). Posteriormente, a nanoemulsificação assistida por ultrassom das CEs de EO e HE em meio aquoso resultou na preparação das respectivas NEs (Figura 3). A formação de cavitações no líquido devido à onda ultrassônica ajudou a utilizar a energia para cisalhar as gotículas grossas na faixa de tamanho nanométrico, que foram posteriormente estabilizadas pelas partículas surfactantes. As NEs preparadas (31,25 a 125 μg mL⁻¹) mostraram-se transparentes; no entanto, leve turvação foi registrada nas concentrações de 250–500 μg mL⁻¹. Aqui, o biossurfactante não tóxico, saponina, foi efetivamente utilizado para estabilizar as NEs desenvolvidas na concentração de 0,5%.

Concentração micelar crítica (CMC) do biossurfactante, saponina, medida por condutância elétrica (EC).

Aparência visual das CEs e diferentes concentrações de NEs de (A) EO e (B) HE de P. cablin.
As propriedades das NEs diluídas em série de OE e HE são mostradas na Tabela 2. O diâmetro médio das gotículas na concentração de 500 μg mL−1 da NE de OE preparada por homogeneização seguida de ultrassonicação foi de 71,68 ± 0,84 nm com índice de polidispersão (PDI) de 0,49 ± 0,02, indicando dimensão estreita da distribuição do tamanho de partículas (Figura 4A). Da mesma forma, o diâmetro médio das gotículas na mesma concentração de NE-HE foi de 89,87 nm (Figura 4C) com PDI correspondente de 0,51 ± 0,03. Houve uma indicação clara de que, com a diminuição da concentração de OE e HE nas NEs, o tamanho médio das gotículas diminuiu. No entanto, não foi observada relação significativa entre concentração e PDI, pois um espectro estreito foi mantido para o PDI tanto no caso das NEs de OE (0,49–0,69) quanto de HE (0,51–0,67), sugerindo distribuição uniforme de tamanho das gotículas independentemente da mudança na concentração. Como a concentração de saponina a 0,5% foi mantida durante todo o estudo para todas as amostras, houve sempre menor chance de grande variação na distribuição de tamanho, pois as micelas permaneceram as mesmas. No entanto, com o aumento da carga de OE e HE, as micelas incharam pelo aprisionamento de OE e HE. Portanto, o diâmetro médio das gotículas foi maior em concentrações de carga mais altas. No presente estudo, o potencial zeta das NEs preparadas de OE e HE a 500 μg mL−1 foi de −29,21 ± 0,49 mV e −29,06 ± 0,21 mV (Figuras 4B,D) no pH nativo de 4,58 e 4,18, respectivamente. Assim, as cargas absolutas das gotículas foram muito baixas. Para todas as amostras, o potencial zeta foi superior a −20 mV, sugerindo a formação de NEs estáveis.
Caracterizações físico-químicas das NEs carregadas com OE e HE de folhas de P. cablin.
Concentrações (μg mL−1) Diâmetro médio das gotículas (Z-average) (nm)* Potencial zeta (mV) Índice de polidispersão (PDI) pH NE-EO 500 71,68 ± 0,84 −29,21 ± 0,49 0,49 ± 0,02 4,58 250 62,25 ± 0,30 −27,42 ± 0,12 0,62 ± 0,02 4,95 125 58,43 ± 076 −23,49 ± 1,52 0,55 ± 0,03 5,28 62,5 57,82 ± 0,67 −23,03 ± 0,91 0,52 ± 0,03 5,99 31,25 46,19 ± 0,75 −22,62 ± 0,12 0,69 ± 0,06 6,40 NE-HE 500 89,87 ± 0,62 −29,06 ±0,21 0,51 ± 0,03 4,18 250 67,93 ± 0,64 −29,18 ± 2,34 0,57 ± 0,05 4,59 125 61,40 ± 0,90 −27,28 ± 1,07 0,52 ± 0,02 4,84 62,5 56,67 ± 0,76 −20,55 ± 0,58 0,67 ± 0,03 5,62 31,25 49,13 ± 0,5 −26,50 ± 0,48 0,65 ± 0,03 6,01
O diâmetro médio das gotículas é expresso como média ± EP (n = 3).
(A) Distribuição do tamanho de partículas e (B) potencial zeta da concentração de 500 μg mL−1 das NEs de OE. (C) Distribuição do tamanho de partículas e (D) potencial zeta da concentração de 500 μg mL−1 das NEs de HE.
A morfologia e o tamanho das gotículas das NEs foram visualizados por MET. A Figura 5 exibiu imagens de MET das gotículas das NEs de EO e HE. Foi bastante evidente a partir das imagens de MET que exibem nanogotículas de formato esférico. O diâmetro médio das gotículas da NE de EO foi de 15,32 nm, que é relativamente três vezes menor do que o diâmetro médio determinado obtido pelo analisador de tamanho de partículas. Da mesma forma, o diâmetro médio das gotículas da NE de HE lipossolúvel foi de 29,41 nm. No entanto, o diâmetro das gotículas variou dentro da faixa de 12,78 a 38,97 nm. A variação no tamanho das gotículas pode ser atribuída ao fato de que as análises de MET das gotículas no estado seco forneceram um tamanho preciso com base na morfologia real das gotículas, enquanto o diâmetro hidrodinâmico médio das gotículas foi obtido a partir do analisador de tamanho de partículas, que era o tamanho médio das micelas hidratadas. Além disso, as NEs mostraram-se estáveis, sem separação de fases, mesmo após 14 dias de armazenamento em condição de armazenamento acelerado a 54 ± 1°C e à temperatura ambiente. Os diâmetros médios das gotículas nas concentrações de 500 μg mL−1 das NEs de EO e HE após 14 dias de armazenamento acelerado foram de 91,22 ± 1,29 nm e 99,41 ± 0,72 nm, respectivamente. Além disso, nenhuma agregação de gotículas foi observada na análise de MET, indicando estabilidade cinética das emulsões.
Imagem de MET da concentração de 500 μg mL−1 de (A) NE de EO (B) NE de HE.

Ação Acaricida sobre T. urticae
A atividade acaricida das CEs e NEs de EO e HE de P. cablin contra adultos de T. urticae revelou mortalidade significativa após 24 e 48 h do tratamento (Tabela 3). Ambas as CEs foram eficazes após 48 h com valores de LC50 <170 μg mL−1. Os espécimes de T. urticae foram encontrados mortos ao longo da nervura central das folhas tratadas. CE-EO foi comparativamente mais tóxico do que CE-HE. A magnitude da eficácia acaricida foi maior após 48 h para as emulsões. A toxicidade de contato pelo método de imersão de folhas em relação ao tempo de aplicação pode contribuir imensamente para a ação acaricida real. Como hipóteses, NE-EO e NE-HE foram muito potentes com maior eficácia, valores de LC50 <100 μg mL−1. NE-EO exibiu a maior eficácia com LC50 de 89,7 μg mL−1 e 43,2 μg mL−1 após exposição de 24 e 48 h, respectivamente. Da mesma forma, NE-HE foi relativamente altamente tóxico com seus valores correspondentes de LC50 de 97,2 μg mL−1 e 58,4 μg mL−1 após exposição de 24 e 48 h.
Toxicidade de contato das CEs e NEs contra os adultos de T. urticae após 24 e 48 h de tratamento.
Emulsões Tempo de exposição (h) CL50 (μg mL−1)a 95% Limite de confiança μg mL−1) Inclinação ± EPb Intercepto ± EPc (χ2)d gl Inferior Superior CE-EO 24 223,6 188,5 293,1 0,85 ± 0,32 −3,39 ± 1,35 29,0 25 48 134,9 105,3 154,3 1,21 ± 0,13 −1,56 ± 0,97 57,2 34 CE-HE 24 235,6 194,2 301,1 1,03 ± 0,77 −1,86 ± 1,11 25,3 18 48 168,7 113,5 224,0 0,56 ± 0,09 −3,23 ± 1,32 18,4 12 NE-EO 24 89,7 61,2 113,2 0,95 ± 0,38 −2,60 ± 0,52 32,2 27 48 43,2 29,6 75,1 0,87 ± 0,25 −4,17 ± 1,92 13,0 9 NE-HE 24 97,2 63,6 144,5 0,44 ± 0,17 −3,27 ± 1,18 39,1 28 48 58,4 24,7 72,9 1,35 ± 0,70 −1,03 ± 0,69 18,6 22
Concentração CL50 (μg mL−1) na qual 50% de mortalidade foi observada.
Inclinação na resposta da equação de regressão ± erro padrão.
Intercepto da equação de regressão ± EP.
χ2, valores de qui-quadrado em diferentes gl e nível de probabilidade (0,05).
A toxicidade fumigante das emulsões mostrou ação promissora nas concentrações subletais após 24 h de exposição (Tabela 4). Adultos foram encontrados mortos fora da borda das folhas tratadas. Entre as emulsões testadas, NE-EO (CL50 9,3 μg mL−1) apresentou ação fumigante máxima, enquanto uma tendência semelhante de ação fumigante foi observada para NE-HE (CL50 13,6 μg mL−1). As NEs da fração oleosa e apolar foram igualmente eficazes na toxicidade fumigante, sendo ainda mais potentes que o ensaio de toxicidade por contato.
Atividade fumigante de CEs e NEs contra os adultos de T. urticae após 24 h de tratamento.
Emulsões CL50 (μg mL−1)a 95% Limite de confiança μg mL−1) Inclinação ± EPb Intercepto ± EPc (χ2)d gl Inferior Superior CE-EO 35,8 21,7 47,9 2,28 ± 0,29 −2,18 ± 0,69 34,6 29 CE-HE 52,4 27,8 72,1 3,94 ± 0,35 −3,25 ± 0,68 22,2 16 NE-EO 13,7 11,6 23,5 4,12 ± 0,35 −2,28 ± 0,65 56,1 30 NE-HE 19,4 12,9 31,6 2,71 ± 0,34 −1,44 ± 0,72 28,3 23
Concentração CL50 (μg mL−1) na qual 50% de mortalidade foi observada.
Inclinação na resposta da equação de regressão ± erro padrão.
Intercepto da equação de regressão ± EP.
χ2, valores de qui-quadrado em diferentes gl e nível de probabilidade (0,05).
Ação Inseticida Contra S. litura
O ensaio larvicida das NEs de EO e HE contra larvas de terceiro instar revelou ação moderada. As CEs foram menos eficazes, com valores de CL50 >400 μg mL−1. No entanto, as NEs-EO foram eficazes, apresentando valores de CL50 de 125,8 e 145,9 μg mL−1 após 48 e 24 h, respectivamente (Tabela 5). Resultados semelhantes foram observados para as NEs-HE, que exibiram valores de CL50 de 167,5 e 190,6 μg mL−1 após 48 e 24 h de exposição, respectivamente.
Toxicidade por contato de CEs e NEs contra larvas de terceiro instar de S. litura usando ensaio de imersão de folhas após 24 e 48 h.
Emulsões Tempo de exposição (h) LC50 (μgmL−1)a 95% Limite de confiança μg mL−1) Inclinação ±EPb Intercepto ±EPc (χ2)d gl Inferior Superior CE-EO 24 413,2 395,6 449,5 3,33 ± 0,22 −4,29 ± 0,18 23,7 13 48 420,5 301,7 442,3 1,48 ± 0,13 −2,69 ± 0,29 39,4 21 CE-HE 24 569,7 423,5 599,8 2,61 ± 0,18 −3,14 ± 0,23 18,8 15 48 509,1 483,1 524,4 2,25 ± 0,23 −1,25 ± 0,27 19,2 10 NE-EO 24 145,9 137,2 159,7 2,18 ± 0,22 −2,73 ± 0,22 36,5 26 48 125,8 117,2 144,3 1,17 ± 0,19 −2,28 ± 0,25 44,8 16 NE-HE 24 190,6 172,9 205,3 1,42 ± 0,20 −1,64 ± 0,30 52,3 26 48 167,5 147,0 191,6 2,22 ± 0,16 −3,39 ± 0,27 17,2 13
Concentração LC50 (μg mL−1) na qual 50% de mortalidade foi observada.
Inclinação na equação de regressão da resposta ± erro padrão.
Intercepto da equação de regressão ± EP.
χ2, valores de qui-quadrado em diferentes gl e nível de probabilidade (0,05).
A atividade antialimentar das CEs e NEs de EO e HE demonstrou atividade antialimentar suficiente em todas as concentrações testadas, tanto nos ensaios sem escolha quanto com escolha, contra larvas de S. litura (Figura 6). Na concentração mais alta de 500 μg mL−1, CE-EO e CE-HE mostraram o valor máximo de IA de 89,75 ± 2,12 e 87,55 ± 2,45, respectivamente, enquanto NE-EO e NE-HE na mesma concentração apresentaram valor de IA de 99,21 ± 0,74 e 98,75 ± 1,02, respectivamente (Tabela 6). De fato, a atividade antialimentar das CEs foi melhorada em quase 10% nas concentrações testadas mais altas e em mais de 20% nas concentrações mais baixas. Por outro lado, NE-EO e NE-HE exibiram valores de FI de 99,73 ± 1,24 e 97,34 ± 1,0, respectivamente.
Exibição visual da ação antialimentar das NEs de (A) EO e (B) HE contra larvas de terceiro ínstar de S. litura após 24 h.
Avaliaçãoa das CEs e NEs de EO e HE de P. cablin para determinação do índice de antialimentação (IA) e índice de alimentação (FI) após 24 h.
Conc. (μgmL−1) CE-EO CE-HE NE-EO NE-HE bIA (%) cFI (%) IA (%) FI (%) IA (%) FI (%) IA (%) FI (%) 500 89,75 ± 1,12e 81,73 ± 1,04e 87,55 ± 2,45e 77,86 ± 2,38e 99,21 ± 0,14e 99,73 ± 1,24d 98,75 ± 1,02de 97,34 ± 1,05de 250 85,26 ± 2,45d 74,29 ± 3,74d 77,75 ± 1,15d 63,60 ± 2,45d 97,01 ± 1,10d 97,86 ± 1,33d 98,11 ± 1,68d 96,31 ± 2,10d 125 70,78 ± 1,39c 54,77 ± 2,22c 65,43 ± 2,50c 48,62 ± 3,57d 86,72 ± 2,21c 76,56 ± 2,88c 84,81 ± 2,30c 73,63 ± 3,48c 62,5 55,63 ± 1,08b 38,53 ± 0,89b 52,72 ± 4,22b 35,79 ± 2,10d 80,08 ± 1,62b 66,80 ± 3,06b 76,08 ± 2,45b 61,39 ± 1,15b 31,25 35,66 ± 3,06a 21,30 ± 1,33a 33,91 ± 3,56a 20,42 ± 3,16d 72,36 ± 1,74a 56,69 ± 1,22a 70,29 ± 1,10a 54,20 ± 0,74a
Os dados são apresentados como médias ± DP;
bÍndice de antialimentação (IA) é calculado como IA = (1 – T/C) × 100,
cÍndice de alimentação (FI) é calculado como FI = (C–T)/(C + T) × 100.
Informações abrangentes sobre o EO de P. cablin exibiram abundância de patchouleno ou álcool de patchouli (Sundaresan et al.,). No entanto, α-guaieno foi relatado como o constituinte majoritário do EO de Pogostemon (Tsai et al.,). Recentemente, quarenta e sete constituintes voláteis consistindo em vinte sesquiterpenos foram relatados a partir do EO, que mencionaram abundância de curzereno seguido por epi-cadinol e acetofenona (Kumar et al.,). Excepcionalmente, acifileno e acetofenona são frequentemente identificados em maior teor no EO disponível comercialmente, o que foi posteriormente autenticado como sendo encontrado como um adulterante, o constituinte majoritário de P. heyneanus (Murugan et al.,). Outro relato da literatura, de uma amostra do sul da Índia de P. cablin, sugeriu alto teor de acetofenona, β-pineno e (E)-nerolidol no EO (Anjana e Thoppil,). Tais variações nas composições químicas do EO podem ser atribuídas às técnicas de destilação, à temperatura associada na extração, aos fatores agroclimáticos juntamente com variações genéticas dos materiais de plantio, etc. (Kundu et al.,; Dutta et al.,). Um relato recente sugeriu que os aspectos de controle de qualidade e regulação do EO de patchouli são altamente dependentes da composição variável de patchoulol e outros sesquiterpenos (Pandey et al.,).
Saponina foi usada como emulsificante para desenvolver as NEs, o que certamente contribuiu de forma positiva para aumentar a eficácia das emulsões desenvolvidas. Este é o primeiro relato sobre o uso de polímero natural para a preparação de NEs de bioativos de Pogostemon, embora a maioria dos estudos anteriores tenha relatado o uso de vários surfactantes não iônicos para a fabricação de NEs de EOs (Balasubramani et al.,; Campolo et al.,). A ampla disponibilidade e o custo relativamente menor dos surfactantes não iônicos podem ser responsáveis pelo seu maior uso. Contrastantemente, goma xantana juntamente com água subcrítica tem sido usada para desenvolver NEs de óleo em água (Ahmadi e Jafarizadeh-Malmiri,). Eles também sugeriram a aplicação de gomas naturais e/ou saponina usando água subcrítica para a preparação de NEs à base de EO (Ahmadi e Jafarizadeh-Malmiri,). Assim, o uso de biopolímero verde tem vantagem sobre o uso excessivo de emulsificantes convencionais na agricultura sustentável. Além disso, emulsificantes biopoliméricos semelhantes à saponina podem melhorar as propriedades biofuncionais do componente.
No presente estudo, NEs estáveis foram desenvolvidos com saponina empregando ultrassonicação. Recentemente, foi relatado um método verde baseado em água subcrítica de baixa energia para a preparação de NEs de óleo de tomilho em água (Ahmadi e Jafarizadeh-Malmiri,). Os NEs desenvolvidos exibiram melhor estabilidade ao longo de um período de 14 dias. O potencial zeta de qualquer emulsão tem sido recomendado como o indicador chave para sua estabilidade, o qual está relacionado à repulsão eletrostática entre as nanogotículas (Zainol et al.,). A estabilidade dos NEs será mantida com a coagulação limitada ou ausente das gotículas e, portanto, o sistema coloidal deve reter seu diâmetro de gotícula na faixa nanométrica (<100 nm), resultando em melhor movimento browniano das partículas no sistema (Heydari et al.,).

Anteriormente, um método de homogeneização consistindo de múltiplos adjuvantes foi relatado para a preparação de NEs de EO de Pogostemon com surfactante não iônico, propilenoglicol como co-surfactante e lecitina como emulsificante na concentração de 5%; no entanto, dados concomitantes sobre as propriedades físico-químicas não foram gerados (Adhavan et al.,). Da mesma forma, outro estudo também relatou o uso de Tween 80 e/ou Triton X-100 para estabilizar o EO de gerânio mantendo a proporção de surfactante de óleo variando de 5:1 a 1:5, sugerindo melhor estabilidade da emulsão com maior quantidade de surfactante (Jesser et al.,). No presente contexto, os NEs foram preparados usando nano-emulsificação assistida por ultrassom de EO e HE lipossolúvel de folhas de P. cablin com apenas biossurfactante, saponina na concentração de 0,5%, sem qualquer uso de co-surfactante e/ou co-emulsificante. Além disso, melhor tamanho de gotícula e estabilidade da emulsão desses NEs foram verificados com caracterizações físico-químicas rigorosas e validações de processo.

Uma investigação preliminar sobre NEs de óleo de P. cablin (18%) com polioxietileno sugeriu excelente ação formicida sobre Atta opaciceps e Atta sexdens (Rocha et al.,). Além disso, tintura, vela e bolo de cristal à base de óleo de P. cablin mostraram-se eficazes como repelente de mosquitos (Das et al.,). Recentemente, o óleo de patchouli foi nanoencapsulado em quitosana e avaliado para maior vida útil de sementes de milho (Roshan et al.,). Recentemente, o EO tem sido relatado como muito eficaz na ação repelente e toxicidade fumigante contra T. cinnabarinus (Cheng et al.,). Além disso, melhor desempenho dos NEs tem sido relatado na literatura contra vários insetos (Badawy et al.,; Abdelgaleil et al.,). O presente estudo revelou desempenho tremendo dos NEs sobre os CEs contra T. urticae tanto em ensaios de toxicidade fumigante quanto de contato. No entanto, a concentração necessária das emulsões foi muito baixa para causar ação letal no ensaio fumigante, causando sufocamento até a morte devido à natureza volátil dos constituintes químicos. No entanto, a ação acaricida na toxicidade de contato foi considerada satisfatória.
Voláteis de plantas mostraram-se eficazes contra muitas pragas de importância agrícola (Kundu et al.,; Ahluwalia et al.,; Keerthiraj et al.,). Estudos abrangentes foram relatados sobre a atividade inseticida do óleo de P. cablin. No presente estudo, as NEs mostraram-se altamente eficazes para causar mortalidade larval. A avaliação comparativa da atividade inseticida das CEs e NEs revelou maior eficácia das NEs devido ao tamanho nano do sistema de entrega, com maior área superficial e melhor penetração através da parede celular do inseto. A forte ação antialimentar e larvicida da planta foi relatada na literatura contra insetos notuídeos (Huang et al.,). NE-EO e NE-HE apresentaram ação considerável em relação a AI e FI contra larvas de S. litura, mesmo na concentração mais baixa de 31,25 μg mL−1. O achado marcante da ação antialimentar certamente corrobora o relato da literatura que descreve mais de 80% de ação deterrente alimentar do óleo (Huang et al.,). Os principais componentes químicos, como álcool de patchouli, α-bulneseno e α-guaieno, tanto em EO quanto em HE, podem ser responsáveis pela maior eficácia. Embora não esteja claro se o constituinte mais abundante, o álcool de patchouli, é o único responsável pela ação acaricida e inseticida, mais estudos sobre o mecanismo de ação são necessários.
Conclusões
Em resumo, o álcool de patchouli foi identificado como o principal constituinte do EO e HE das folhas de P. cablin. NEs estáveis foram preparadas com apenas 0,5% de saponina, tanto para EO quanto para HE. As NEs de EO e HE permaneceram estáveis mesmo após 30 dias em temperatura ambiente, com características qualitativas satisfatórias. Os resultados das atividades acaricida e antialimentar demonstraram efeito promissor das NEs de EO e HE contra T. urticae e S. litura, seguindo uma tendência dose-dependente, embora as NEs de EO tenham apresentado desempenho ligeiramente superior ao HE. Até onde nossa pesquisa bibliográfica pôde determinar, este é o primeiro relato sobre a atividade potencial das NEs de P. cablin contra T. urticae. O resultado do estudo foi bem justificado com a geração de informações-chave para o desenvolvimento e utilização de NEs. No entanto, pesquisas futuras sobre estudos básicos e fundamentais do mecanismo de ação dos terpenoides composicionais ainda são necessárias para o desenvolvimento de bioacaricidas de próxima geração.
Declaração de Disponibilidade de Dados
Os dados brutos que suportam as conclusões deste artigo serão disponibilizados pelos autores, sem reservas indevidas.
Contribuições dos Autores
KM conduziu os experimentos. AK conceituou o trabalho de pesquisa, analisou os dados e escreveu o manuscrito. AD realizou a análise. SS supervisionou os experimentos. BN analisou os dados e editou o manuscrito. Todos os autores contribuíram para o artigo e aprovaram a versão submetida.
Financiamento
Este trabalho foi apoiado pelo Conselho Indiano de Pesquisa Agrícola (ICAR) e pelo Ministério da Agricultura e Bem-Estar dos Agricultores, Governo da Índia (Nº do Subsídio CRSCIARISIL 2014035267), Índia.
Conflito de Interesses
Os autores declaram que a pesquisa foi conduzida na ausência de quaisquer relações comerciais ou financeiras que pudessem ser interpretadas como um potencial conflito de interesses.
Nota do Editor
Todas as afirmações expressas neste artigo são exclusivamente dos autores e não representam necessariamente as de suas organizações afiliadas, nem as do editor, dos editores e dos revisores. Qualquer produto que possa ser avaliado neste artigo, ou alegação que possa ser feita por seu fabricante, não é garantido ou endossado pelo editor.
Referências
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Avaliação da toxicidade de 17 óleos essenciais contra Choristoneura rosaceana (Lepidoptera: Tortricidae) e Trichoplusia ni (Lepidoptera: Noctuidae)
Emulsificantes naturais - Biossurfactantes, fosfolipídios, biopolímeros e partículas coloidais: base molecular e físico-química do desempenho funcional
Composição do óleo volátil de Pogostemon heyneanus e comparação de sua composição com o óleo de patchouli
Composição química, atividade inseticida e persistência de três óleos essenciais de Asteraceae e suas nanoemulsões contra Callosobruchus maculatus (F.)
Eficiência antimicrobiana e antioxidante de revestimento comestível à base de nanoemulsão contendo óleo essencial de gengibre (Zingiber officinale) e seu efeito nos atributos de segurança e qualidade de filés de peito de frango
Composições de óleos essenciais, importância farmacológica e práticas agro-tecnológicas do Patchouli (Pogostemon cablin Benth.): Uma revisão
Óleos essenciais como biopesticidas ecológicos?
Efeito letal e respostas comportamentais de formigas cortadeiras ao óleo essencial de Pogostemon cablin (Lamiaceae) e sua nanoformulação
Nanoencapsulação em quitosana do óleo essencial de Pogostemon cablin (Blanco) Benth. e seu novo efeito conservante para aumentar a vida útil de grãos de milho armazenados: Avaliação de suas atividades antifúngica, antimicotoxina, antioxidante aprimoradas e possível modo de ação
Nanoemulsão de óleo de eucalipto e sua atividade larvicida contra Culex quinquefasciatus
Impacto da distribuição geográfica na diversidade genética e química da valeriana indiana (Valeria najatamansi) do noroeste do Himalaia
α-Bulneseno, um inibidor do FAP isolado do óleo essencial de Pogostemon cablin
Otimização da formulação de um sistema de nanoemulsão à base de palma contendo levodopa