pmid: "18850206"
title: "Técnicas para quantificar os efeitos de antioxidantes dietéticos na translocação de fatores de transcrição e na produção de óxido nítrico em células cultivadas."
authors: "Ewins BA, Vassiliadou M, Minihane AM, Rimbach GH, Weinberg PD"
journal: "Genes & nutrition"
pubdate: "2006 Jun"
doi: "10.1007/BF02829954"
source: "PubMed Abstract"
Técnicas para quantificar os efeitos de antioxidantes dietéticos na translocação de fatores de transcrição e na produção de óxido nítrico em células cultivadas.
Autores
Ewins BA, Vassiliadou M, Minihane AM, Rimbach GH, Weinberg PD
Periodico
Genes & nutrition (2006 Jun)
Conteudo
Antioxidantes dietéticos podem afetar processos celulares relevantes para doenças inflamatórias crônicas, como a aterosclerose. Utilizamos técnicas não padronizadas para quantificar os efeitos dos isoflavonoides de soja antioxidantes genisteína e daidzeína na translocação do Fator Nuclear-KB (NF-KB) e na produção de óxido nítrico (NO), que são importantes nessas doenças. A translocação foi quantificada usando microscopia de imunofluorescência confocal e análise de imagem rationétrica. O NO foi quantificado por um método eletroquímico após redução de seus produtos de oxidação em sobrenadantes de cultura celular. A ativação da linhagem celular de macrófagos/monócitos murinos RAW 264.7 aumentou a razão da imunomarcação nuclear para citoplasmática do NF-kappaB. O aumento foi exacerbado pelo pré-tratamento com genisteína ou daidzeína. Para demonstrar que diminuições também poderiam ser detectadas, o pré-tratamento com o extrato de casca de pinho Pycnogenol(R) foi examinado e constatou-se que reduzia a translocação. A produção de NO também foi aumentada pela ativação, mas foi reduzida pelo pré-tratamento com genisteína ou daidzeína. Na linhagem celular endotelial humana EA.hy926, a produção constitutiva foi detectável e aumentada pela trombina. Os métodos confocal e eletroquímico forneceram dados que concordaram com os resultados obtidos usando os ensaios estabelecidos de eletromobilidade e Griess, mas foram mais sensíveis, mais convenientes, forneceram informações mais detalhadas e evitaram o uso de radioisótopos.